谷胱甘肽含量同肿瘤辐射敏感性的相关性研究

实验从细胞和动物水平研究射线对肿瘤细胞中谷胱苷肽(GSH)合成的影响,分析GSH含量同肿瘤辐射敏感性的相关性;评价GSH合成抑制剂-丁胱亚磺酰亚胺(BSO)的辐射增敏效果,探讨以外周血单核细胞中GSH含量监测肿瘤患者对射线敏感性的可行性。实验结果表明,射线可以引起肿瘤细胞中GSH含量的升高,抑制肿瘤组织中GSH的合成,可以显著增强肿瘤细胞对射线的敏感性,外周血单核细胞和肿瘤中GSH含量变化一致且与肿瘤细胞对射线的敏感性相关。     

人卵巢癌耐药细胞株的放射敏感性研究

为了研究具有耐药性的卵巢癌细胞系对放射线治疗的影响,以人卵巢癌细胞株A2780及其紫杉醇耐药株A2780/Taxol为研究对象,以MTT法检测细胞的药物敏感性并评判分析细胞放射敏感性;克隆形成实验分析细胞放射抗拒性;实时荧光定量PCR分析照射前后细胞耐药基因MDR1的变化。实验结果显示：A2780／Taxol的耐药指数为43．96;随着放射剂量增大,A2780细胞和A2780／Taxol细胞的相对存活率明显下降,以A2780细胞明显（p〈0．05）;A2780细胞及其耐药A2780／Taxol细胞仇值分别为4．90和6．06,D0越大,放射抗拒性越强,表明耐药A2780／Taxol细胞的放射抗性强于A2780细胞（p〈0．01）;照射前及不同剂量照射作用后,耐药基因MDR1在A2780／Taxol细胞中的表达均明显高于A2780细胞（p=0．000）。这些结果揭示耐药卵巢癌细胞株A2780／Taxol对辐射具有耐受性,表明卵巢癌细胞系具有放化疗交叉耐受性,并且射线和药物诱导卵巢癌细胞耐药基因MDR1的过表达,可能是引起放化疗交叉耐受性的原因之一。     

辐射增敏剂作用下SGC7901细胞内GSH含量变化与受照射剂量关系的初步研究

研究了辐射增敏剂丁胱亚磺酰亚胺（BSO）作用下胃腺癌细胞（SGC）内谷胱甘肽（GSH）含量与照射剂量间的关系。实验观察到胃癌细胞内GSH含量有呈照射剂量依赖性升高的趋势，而用BSO预处理后的细胞，GSH含量迅速降低且变化不受照射剂量的影响。     

Tat-SmacN7诱导肿瘤细胞辐射敏感性的机理研究

探讨Tat—SmacN7诱导食管癌细胞株ECl09和非小细胞肺癌细胞株NCL—H460辐射敏感性的机制。采用体外培养EC109细胞和NCL—H460细胞,实验分为对照组、单纯给药组、单纯照射组和给药联合照射组,用RT-PCR检测CAPS8、CASP9和CASP3的转录水平,Fluorogenic caspase assay试剂盒检测Caspase-3.-8、和一9的活性,ELISA方法检测Caspase活性。结果显示,两种肿瘤细胞在使用Tat—SmacN7联合Caspase的抑制剂z—VAD—fmk后,存活曲线较不使用抑制剂组均有明显上移;Caspase-3、-8、和-9的活性在Tat—SmacN7组明显提高,提示Tat—SmacN7可通过细胞凋亡线粒体途径发挥辐射增敏作用,有望成为一种新的辐射增敏剂。     

人成纤维细胞株辐射诱导凋亡与辐射敏感性相关性研究

为探讨不同放射敏感性人成纤维细胞株经辐射诱导后的凋亡情况,应用Ｔｕｎｅｌ法及流式细胞术（ＦＣＭ）检测细胞凋亡,以＾６０Ｃｏγ射线处理细胞。结果表明（１）＾６０Ｃｏγ射线照射后,集落形成实验表明,６号细胞株辐射敏感性高于８号细胞株。（２）Ｔｕｎｅｌ法和流式细胞术检测结果表明,凋亡率与辐射敏感性成正比,同样反映出６号细胞株辐射敏感性高于８号细胞株。（３）检测还发现,凋亡率与辐射剂量和辐射后时间成正比。     

BSO对视网膜母细胞瘤GSH含量的影响及放射增敏作用研究

利用体外培养的视网膜母细胞瘤细胞株及裸小鼠移植瘤模型，研究了巯基修饰剂ＢＳＯ（丁胱亚磺酰亚胺）对其ＧＳＨ（谷胱甘肽）含量的影响以及ＢＳＯ离体放射增敏作用。结果表明，无论是离体还是整体用药，ＢＳＯ均能降低视网膜母细胞瘤的谷胱甘肽含量。离体状态下，ＢＳＯ主要表现出乏氧增敏作用。     

乙双吗啉对人肺腺癌细胞系SPC-A-1的辐射增敏特性

乙双吗啉(AT_(1727))是我国自行合成的派嗪二酮类抗肿瘤药物,它的放射增敏性近年来引起了各方面的关注。本文以人肺腺癌细胞系SPC—A—1为材料,用体外细胞集落形成法研究了乙双吗啉在乏氧条件下的辐射增敏性,结果表明当药物浓度为0.15m mol/L时,增敏比为1.33。对现有资料进行分析,提出乙双吗啉可能以某种方式作用于乏氧的肿瘤细胞。     

用99Tcm-MIBI在体外评价肿瘤细胞多药耐药逆转剂逆转细胞多药耐药的效果

摘要 目的 通过99Tcm-MIBI细胞内摄取变化为手段探讨单独或低剂量联合应用多药耐药逆转剂逆转肿瘤细胞多药耐药的效果,期望为进一步解决临床恶性肿瘤化疗面临的问题提供实验依据。方法 人类髓系白血病K562细胞及其耐药细胞系K562/D(高度表达Pgp)各2×106个,分别加入99Tcm-MIBI 8MBq,观察不同时间不同浓度多药耐药逆转剂环孢菌素A(CsA 0.1～0.4μg/ml)和/或维拉帕米（Ver 2.5～10μg/ml）存在时,K562细胞及K562/D细胞对99Tcm-MIBI摄取变化。两种细胞系间及逆转剂前后间比较采用t检验,组间比较采用q检验。结果①不同浓度Ver或CsA存在时,K562细胞99Tcm-MIBI摄取略有增加,但差异无显著性（P＞0.05）。K562/D细胞加入不同浓度Ver及CsA后99Tcm-MIBI摄取均明显增加。但不同浓度Ver间及不同浓度CsA间,摄取增加的差异没有显著性（P＞0.05）。②2.5μg/ml Ver及0.1μg/ml CsA同时加入K562细胞系中,60min时99Tcm-MIBI摄取率为0.303±0.076,增加率为183%。接近单独应用Ver（10μg/ml）或单独应用CsA（0.4μg/ml）。结论 99Tcm-MIBI细胞内摄取变化可评价逆转剂作用下Pgp的功能变化,低剂量逆转剂联合应用能达到与单一较大剂量应用逆转剂相似的效果,为临床逆转Pgp介导的多药耐药提示新的信息。     

辐射对肝癌细胞中乏氧诱导因子-1α的影响及机制研究

研究辐射对肝癌细胞中乏氧诱导因子-1α（HIF-1α）的调控作用。采用氯化钴（CoCl2）化学模拟乏氧,诱导HepG2肝癌细胞内HIF-1α稳定表达,再进行不同剂量的γ射线照射,观察照射后细胞内HIF-1α表达的变化,同时,利用荧光显微镜和流式细胞术（flowcytometry,FCM）对细胞内的活性氧（reactive oxygen species,ROS）含量进行检测。结果显示,在乏氧条件下HepG2细胞受1—5Gyy射线照射后,细胞内HIF-1α的表达与辐照剂量呈正相关。在1—3Gyy射线照射后,细胞内活性氧的含量与HIF-1α的表达呈负相关。此研究提示,辐射可增强乏氧细胞内HIF-1α的表达水平,活性氧含量的降低可能与这一调控作用有关。     

RNAi抑制人宫颈癌细胞HSF1基因表达增强细胞辐射敏感性的实验研究

通过RNA(Ribonucleic acid)干扰技术下调人宫颈癌细胞中热休克转录因子HSFI(Heat shock tran-scriprion factor1,HSF1)基因的表达,探讨沉默HSF1基因后,对宫颈癌细胞辐射敏感性的影响.将表达siRNA的HSF1-pSilencer2.1-U6 neo质粒表达载体,采用脂质体转染法转入宫颈癌细胞,用实时荧光定量PCR(Realtime polymerase chain reaction,RT-PCR)检测HSF1mRNA表达水平,流式细胞仪检测蛋白质量,克隆法检测细胞的辐射敏感性.结果发现,与空白组细胞及阴性对照组细胞相比转染HSF1A-pSilencer2.1-U6neo质粒表达载体的细胞HSF1mRNA表达明显下降,同时Hela细胞的辐射敏感性也随着HSF1基因表达的下调而增高.表明siRNA质粒表达载体HSF1A-pSilencer2.1-U6neo转染细胞后可以降低HSF1的表达,可以增强宫颈癌细胞的辐射敏感性,具有良好的临床应用前景.     

Radiotoxicity induced by Auger electron emitters in human osteosarcoma cell line using comet assay

The comet assay (single cell gel electrophoresis assay) was used to evaluate the radiotoxicity of Auger electron emitters in the human osteosarcoma cell line (HOS-8603). After internal exposure to 67Ga-EDTMP, the sarcoma cell has been injured severely. The comet length was longer along with the increase of dose, the appearance of comet tail was different from that with respect to the 60Co r-ray irradiation. DNA damage of cell was mainly due to the radiation effect of Auger electrons. The 67Ga may be a therapeutic radionuclide with good prospect for tumor treatment and palliation of bone pain induced by metastasis.     

Imaging performance evaluation in depth-of-interaction PET with a new method of sinogram generation:A Monte Carlo simulation study

In conventional PET systems,the parallax error degrades image resolution and causes image distortion.To remedy this,a PET ring diameter has to be much larger than the required size of field of view(FOV),and therefore the cost goes up.Measurement of depth-of-interaction(DOI)information is effective to reduce the parallax error and improve the image quality.This study is aimed at developing a practical method to incorporate DOI information in PET sinogram generation and image reconstruction processes and evaluate its efficacy through Monte Carlo simulation.An animal PET system with 30-mm long LSO crystals and 2-mm DOI measurement accuracy was simulated and list-mode PET data were collected.A sinogram generation method was proposed to bin each coincidence event to the correct LOR location according to both incident crystal indices and DOI positions of the two annihilation photons.The sinograms were reconstructed with an iterative OSMAPEM(ordered subset maximum a posteriori expectation maximization)algorithm.Two phantoms(a rod source phantom and a Derenzo phantom)were simulated,and the benefits of DOI were investigated in terms of reconstructed source diameter(FWHM)and source positioning accuracy.The results demonstrate that the proposed method works well to incorporate DOI information in data processing,which not only overcomes the image distortion problem but also significantly improves image resolution and resolution uniformity and results in satisfactory image quality.