酵母固态发酵制备花生蛋白肽及抗氧化活性研究

研究啤酒酵母固态发酵制备花生蛋白肽,为进一步研究发酵花生粕产品提供理论基础。本研究运用单因素和正交试验方法对固态发酵制备花生蛋白肽工艺条件进行优化,其最佳制备工艺条件为:营养盐溶液添加量15 mL,啤酒酵母液添加量4 mL,30℃下发酵72 h。此工艺下制备的花生蛋白肽的可溶性氮浓度达到10.74 mg/mL,发酵液对1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH)和羟自由基清除率分别为93.57%和98.40%。分子量小于5 kDa的花生蛋白肽具有较高的抗氧化活性。     

固态发酵制备辣木叶活性肽及其抗氧化活性

为高效利用辣木叶中蛋白资源,该研究采用固态发酵方式制备辣木叶活性肽。首先以酶活力和肽含量为指标从米曲霉、黑曲霉中筛选出最优菌种,随后研究发酵时间、含水量、起始pH和接种量对肽含量的影响,再结合响应面设计优化发酵工艺,并对发酵制备辣木叶活性肽的抗氧化活性和氨基酸组成进行研究。研究发现,最佳工艺条件为：米曲霉为最优菌种,发酵温度30 ℃,发酵时间72 h,培养基含水量52.39%,接种量14.71%,pH为5。在最优发酵条件下制备的辣木叶活性肽具有很好的DPPH自由基清除率（EC50=1.0927 mg/mL）、ABTS自由基清除率（EC50=0.059 mg/mL）和Fe2+螯合率（EC50=9.76 mg/mL）。辣木叶活性肽中共检测出17种氨基酸,谷氨酸（Glutamic acid,Glu）、天冬氨酸（Aspartic acid,Asp）、酪氨酸（Tyrosine,Tyr）、组氨酸（Histidine,His）等具有抗氧化潜力的氨基酸的含量丰富。该研究为辣木叶的高值化利用和天然抗氧化功能食品的研发提供基础研究数据。     

固态发酵核桃粕制备活性肽及其抗氧化活性的研究

为高效利用核桃粕,本研究以核桃粕为原料,采用黑曲霉固态发酵制备活性肽.考察接种量、发酵时间、发酵温度和培养基含水比例对多肽得率的影响,通过响应面实验确定最优发酵工艺条件为:接种量5.5％,发酵温度33.50℃,培养基含水比例1.00mL/g,发酵时间84h.经验证实验可知,在最优发酵条件下核桃活性肽得率可达35.68％,比优化前提高了26.7％.该活性肽具有较强的体外抗氧化活性,DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基清除率的IC50分别为0.15、1.75、2.4mg/mL.由此得出核桃粕是一种良好的活性肽生产原料,且该活性肽是理想的天然抗氧化产品.     

响应面优化酶解核桃蛋白制备抗氧化肽的工艺

为优化碱性蛋白酶酶解核桃蛋白制备抗氧化活性肽的工艺条件,考察酶解条件对酶解产物的抗氧化活性的影响。以羟基自由基的清除率、超氧阴离子自由基的清除率、还原能力为考察指标,使用响应面分析法,研究温度、pH值、底物浓度和酶添加量对制备抗氧化活性肽工艺的影响。经过优化得出最优酶解条件为:温度51℃、pH值8.13、底物浓度3.16%、酶添加量3.30%,在此最优条件下核桃多肽对羟基自由基的清除率为55.93%、对超氧阴离子自由基的清除率为47.85%、还原能力为55.34%。在10mg/mL的浓度下,核桃多肽的还原能力是VC的55.3%,对羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除率分别是VC的93.8%和52.2%。     

麦糟蛋白肽发酵制备工艺优化及其生理活性评价

以麦糟为原料，采用米曲霉固态发酵制备麦糟蛋白肽，通过单因素试验和正交试验优化蛋白肽制备工艺，并分析其体外抗氧化活性和降血糖活性。结果表明：麦糟蛋白肽最佳制备工艺为发酵时间120 h、发酵温度28℃、接种量1.2 mL、pH 6.6,在此条件下蛋白肽转化率为87.58%;抗氧化活性试验显示，麦糟蛋白肽对DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟基自由基有不同程度的清除作用，其中，对DPPH自由基清除能力最强；降血糖活性试验显示，麦糟蛋白肽对α-葡萄糖苷酶有明显抑制作用，在试验蛋白肽质量浓度范围内，最大抑制率达86.96%。     

纳豆杆菌固态发酵花生粕的工艺条件研究

以纳豆杆菌固态发酵花生粕产物对DPPH自由基的清除率为指标,考察底物配比、接菌量、料液比、发酵温度和发酵时间对发酵效果的影响,并通过响应面实验确定最佳发酵工艺条件。结果表明最佳发酵条件为:底物配比m(花生粕)∶m(大豆粕)∶m(麸皮)=7∶1.5∶1.5,接菌量0.3%,料液比10∶3,发酵温度37℃,发酵时间48.7 h。在最佳条件下发酵,上清液40倍稀释液对DPPH自由基清除率达到74.7%,10倍稀释液对羟自由基清除率高达85.2%,表明该条件下制备的发酵产物具有较高的抗氧化活性。     

米曲霉制备麦糟蛋白肽固态发酵培养基优化

以麦糟为原料,通过米曲霉固态发酵制备麦糟蛋白肽,研究不同培养基条件对肽转化率的影响。通过单因素实验考察碳源添加种类、碳源添加量、磷酸二氢钾添加量和料液比对肽转化率的影响,并采用响应曲面法优化培养基条件,建立肽转化率与各影响因素间的回归方程。结果表明,米曲霉发酵制备麦糟蛋白肽的最优培养基条件为:蔗糖添加量4.21%,磷酸二氢钾添加量0.51%,料液比1:3（g·mL?1）,在该条件下,发酵麦糟肽转化率可达50.73%。结果可为生物转化麦糟生产蛋白肽提供技术参考。     

枯草芽孢杆菌发酵牦牛血制备抗氧化肽工艺优化

为优化枯草芽孢杆菌液态发酵制备牦牛血抗氧化肽工艺,以酵解液的羟基自由基(·OH)清除率为主要指标,研究发酵时间、接种量、底物浓度对酵解液抗氧化效果的影响,在该基础上进行响应面优化试验。确定最佳发酵条件为:底物浓度75g/L,接种量2.5%(V/V),发酵时间69.5h。在该条件下制备出·OH清除率为74.48%的牦牛血抗氧化肽,·OH清除率理论值为75.78%,最终发酵上清液多肽含量为2.31mg/mL。     

响应面法优化黄浆水发酵液制备工艺及其抗氧化活性研究

采用植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)和清酒乳杆菌(Lactobacillus sakei)3种乳酸菌对黄浆水进行组合发酵,以发酵液DPPH自由基清除率为评价指标,研究发酵温度、发酵时间、脱脂乳粉添加量、葡萄糖添加量和接种量对发酵液的影响。在单因素试验基础上,采用响应面法优化制备高抗氧化活性黄浆水发酵液的工艺条件。结果表明最佳发酵参数为:接种量1%、发酵温度37℃、发酵时间37.50 h、脱脂乳粉添加量8%、葡萄糖添加量5%。在此条件下制备的黄浆水发酵液DPPH自由基清除率为82.36%。抗氧化活性试验表明:黄浆水发酵液提取物抗氧化能力得到显著提升,其清除DPPH自由基、羟自由基和ABTS自由基的半抑制质量浓度(IC50)分别为2.03 mg/mL、1.12 mg/mL和0.30 mg/mL。     

枯草芽孢杆菌发酵芝麻香白酒酒醅制备抗氧化活性肽

利用产酸性蛋白酶的枯草芽孢杆菌对洋河酒厂的芝麻香型酒醅进行固态发酵,使蛋白大分子转化成小分子肽。在发酵温度、发酵时间和含水量条件的单因素试验基础上,利用响应面方法优化固态发酵条件以生产小分子肽的含量,同时考察了提取得到的酒醅肽的分子质量、氨基酸组成和抗氧化活性。经响应面优化后,最优发酵条件为:发酵温度30℃、发酵时间47 h、含水量1. 2 mL/g,在此条件下提取液中小分子肽的含量为7. 04mg/mL,并多为分子质量低于2 000 Da的肽。所制备的小分子肽具有较好的抗氧化活性,在0. 4 mg/mL质量浓度下对DPPH和ABTS自由基清除率分别达到85. 5%和66. 24%。初步建立了一种基于白酒酒醅固态发酵的方法,分解酒醅中的蛋白制备抗氧化活性小分子肽,为降低产品中的高级醇,提高产品品质提供了一种参考。     

响应面优化酶解法制备岩豆抗氧化肽工艺

以岩豆为原料,分别以盐提法和水提法提取蛋白,通过比较盐溶蛋白和水溶蛋白的DPPH自由基清除能力,得出盐溶蛋白的DPPH自由基清除能力较高。以岩豆盐溶蛋白为原料,采用响应面优化酶解法制备岩豆抗氧化肽的工艺条件。结果表明,以DPPH自由基清除率为评价指标,筛选出胃蛋白酶为最优酶制剂。酶解法制备岩豆抗氧化肽最优工艺条件为底物质量浓度0. 8 mg/mL、酶解温度34℃、酶添加量1 100 U/g、酶解时间36 min、酶解pH 2. 0,此条件下岩豆抗氧化肽的DPPH自由基清除率为70. 41%,多肽得率为53. 63%。     

长白山松子抗氧化肽制备及活性研究

以长白山松子分离蛋白为原料,采用碱性蛋白酶制备抗氧化肽,通过Box-Behnken中心组合试验确定最佳水解工艺条件为:酶解温度56.5℃、加酶量7822U/g、底物质量浓度0.021g/mL、pH9.0、酶解时间240min。对该条件制备的抗氧化肽进行活性研究,结果显示随着浓度的升高,松子抗氧化肽在4mg/mL时对ABTS自由基的清除率和Fe2+螯合率达到100%,16mg/mL时对DPPH自由基清除率达到80.95%,24mg/mL时,对羟基自由基清除率达到100%。     

枯草芽孢杆菌发酵麦糟制备蛋白肽培养基研究

以麦糟为原料,对枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）固态发酵麦糟制备蛋白肽培养基条件进行研究。通过单因素试验考察碳源种类、碳源添加量、料液比、磷酸二氢钾添加量和拌料水pH值对肽得率的影响,通过Box-Behnken试验方案和响应面分析优化培养基。结果表明,枯草芽孢杆菌发酵生产麦糟蛋白肽的最优培养基为：pH 7.0,葡萄糖添加量4.2%,麦糟与水的料液比1.0∶2.1（g∶mL）,磷酸二氢钾添加量0.6%,在该条件下,发酵麦糟肽得率可达12.40%。     

五谷酸奶的研制及其清除自由基的能力

根据动植物蛋白营养平衡互补的原理,以黑芝麻、黑豆、玉米为主要原料,研制新型五谷酸奶。通过单因素和正交试验确定五谷酸奶的最佳制作工艺为黑芝麻汁添加量10mL/100mL、黑豆汁添加量13.3 mL/100 mL、玉米汁添加量13.3mL/100mL、奶粉添加量7.9g/100mL、白砂糖添加量5g/100mL、接种量3mL/100mL、发酵时间7h、发酵温度42℃。该条件下制得的五谷酸奶酸甜可口,质地细腻。通过研究五谷酸奶、五谷汁原液和市售某品牌酸奶的DPPH自由基和羟基自由基清除能力,结果表明:五谷酸奶对DPPH自由基、羟自由基的清除率均随其浓度的增加而增强。当其浓度为50mg/mL时,五谷酸奶对DPPH自由基清除率为(84.9±0.10)%,羟基自由基的清除率为(55.6±0.12)%,且在相同浓度时,五谷酸奶的自由基清除率高于市售某品牌酸奶。     

花生蛋白青枣酸奶的发酵工艺及品质特性研究

以花生蛋白、青枣和纯牛奶为主要原料制备花生蛋白青枣酸奶。在单因素的基础上，采用响应面法优化花生蛋白青枣酸奶的发酵工艺，并分析酸奶的营养品质及抗氧化活性。结果表明：花生蛋白青枣酸奶发酵制备最佳工艺条件为花生蛋白粉与水的料液比1∶10(g/mL)、纯牛奶添加量20%(以花生蛋白粉和水的总质量计，下同)、发酵温度42℃、青枣浆添加量15.00%、蔗糖添加量6.50%、发酵时间6.0 h、发酵剂接种量2.90%,在此条件下制得的花生蛋白青枣酸奶的感官评分为92.16。在花生蛋白青枣酸奶中检测出17种氨基酸，总氨基酸含量为54.08%,其中必需氨基酸含量为17.76%;花生蛋白青枣酸奶对DPPH·和·OH清除能力优于原味酸奶。     

响应面优化鲍鱼内脏抗氧化肽制备工艺及其活性

利用鲍鱼内脏结缔组织为原料,通过酶解法制备内脏多肽,研究鲍鱼内脏蛋白的抗氧化性。考察底物质量分数(1%～5%),酶添加量(3 000～15 000 U/g),酶解温度(40～60℃),酶解时间(1～5 h), pH (5.5～7.5)对鲍鱼内脏抗氧化性的影响;在单因素的基础上结合响应面法,以DPPH自由基清除率为指标,优化出抗氧化肽的最佳制备工艺,进一步研究其体外抗氧化活性。结果表明,风味蛋白酶为最适水解酶,在底物质量分数4.29%、酶添加量10 533.76 U/g、酶解时间3.87 h、酶解温度50℃、pH 6.5,抗氧化肽的酶解效果最佳;在该条件下DPPH自由基清除率达89.18%,其清除DPPH自由基、羟自由基、ABTS自由基的IC_(50)分别为4.61 mg/mL, 16.24 mg/mL和17.41 mg/mL。说明鲍鱼内脏结缔组织能够制备得到良好抗氧化性的蛋白肽。     

大豆玉米复配肽的固态发酵工艺优化

为了利用植物蛋白质资源和提高其营养价值,以豆粕和玉米蛋白粉为原料,应用枯草芽孢杆菌固态发酵制备大豆玉米复配肽。基于豆粕和玉米蛋白粉配比和发酵时间的考察与确定,研究了大豆玉米复配肽的固态发酵工艺条件,又考察了发酵温度、瓶装量、料液比及接种量对蛋白水解度和肽转化率的影响。应用4因素3水平响应面法对大豆玉米复配肽的固态发酵工艺进行优化研究,并分别建立了各因素与蛋白水解度和肽转化率的回归方程。结果表明,最佳固态发酵条件为:发酵温度40℃、瓶装量8.5 g、料液比1:1.2(g/m L)、接种量3.5%(m L/g),在此条件下,蛋白水解度为(32.73±0.17)%,肽转化率为(33.23±0.13)%,与理论预测值基本相符。因此,大豆玉米复配肽的固态发酵工艺是可行的,为大豆玉米复配肽的制备提供了科学依据。     

羊胎盘多肽的制备及其清除自由基能力的研究

利用黑曲霉、米曲霉、枯草芽孢杆菌作为发酵羊胎盘菌种,筛选出黑曲霉作为发酵羊胎盘的菌株,制备羊胎盘活性肽.通过单因素试验研究了料液pH、碳源含量、发酵时间对制备羊胎盘抗氧化肽工艺的影响,在此基础上,以DPPH自由基的清除率为指标,通过响应面法优化得到了最佳发酵工艺条件为pH值4.61、葡萄糖添加量2.79％、发酵时间76.38h,此条件下的DPPH清除率为83.78％;对发酵液进行超滤处理得到6组分,其中60％的产物分子质量均＜10 000u,不同组分的抗氧化活性大小为分子质量为3 000～10 000u的产物高于分子质量＜3 000u的产物,并得出了发酵液中不同分子质量段的多肽含量分布曲线.     

米蛋白抗氧化肽的制备及其结构分析

实验以大米为原料,在单因素的基础上以温度、酶添加量、pH为响应因子,以大米蛋白肽的DPPH自由基清除率和水解度为响应值,采用Design-Expert 8. 0. 6. 1软件对水解工艺进行优化,并通过傅里叶红外光谱对多肽结构进行分析。结果显示,制备米蛋白抗氧化肽最佳工艺为:温度61℃、酶添加量7%、pH为8.6。此条件下,DPPH自由基清除率和水解度的预测值分别为65.96%,25.12%。经验证,得到DPPH自由基清除率和水解度的实际值分别为66.36%,26.06%,与预测值相近。通过红外光谱可知,米蛋白肽的出峰位置均与蛋白肽特征峰位置相吻合。因此,以本方法制备的米蛋白抗氧化肽维持了多肽的基本结构,并非小分子氨基酸结构。     

花生粕固态发酵产纳豆激酶的工艺优化

探索纳豆菌固态发酵花生粕制备纳豆激酶的最佳工艺条件。以纳豆激酶活力为主要评价指标,在单因素实验基础上,通过正交实验优化花生粕固态发酵制备纳豆激酶的工艺条件。得出最佳发酵条件:发酵温度37℃,发酵时间24 h,接种量10%,料液比1∶0.4 g/m L。在此条件下测得发酵产物的纳豆激酶活力达到3162 U/m L,比单因素最高酶活提高了18%(2680 U/m L),可溶性氮含量为5.6 mg/m L,羟自由基清除率为74%,铁还原力的OD值为0.906。