单宁酸与胰α-淀粉酶作用特性研究

本文考察了单宁酸对胰α-淀粉酶（PPA）的抑制作用,并通过紫外和荧光光谱法研究了二者的作用特性。研究发现单宁酸可明显抑制胰α-淀粉酶的活性,其作用类型为非竞争性抑制。单宁酸与胰α-淀粉酶的结合能自发进行,作用位点靠近PPA的色氨酸残基区域。二者结合后,可导致PPA在270nm附近的紫外吸收发生明显改变,并产生红移,同时可引起PPA荧光猝灭。      

青柿子提取物抑制消化酶活性与降血糖效应

为探究青柿子提取物对人唾液α-淀粉酶(HSA)、猪胰腺α-淀粉酶(PPA)、α-葡萄糖苷酶(α-Glu)的抑制作用及餐后血糖变化,以青柿子为原料,采用超声辅助丙酮萃取和大孔树脂纯化法制备青柿子提取物,通过酶活性抑制率分析、酶动力学分析和酶荧光猝灭试验研究青柿子提取物体外抑制酶的效果及机制;通过小鼠实验验证青柿子提取物对餐后血糖水平的控制作用。结果表明:青柿子提取物抑制HSA、PPA、α-Glu活性,抑制类型均为混合性抑制,半抑制浓度值(IC50)分别为(16.18±0.17),(13.57±0.30),(3.22±0.03)μg/mL;HSA、PPA、α-Glu酶与青柿子提取物均有1个结合位点,说明青柿子提取物作用于HSA、PPA、α-Glu酶的荧光发色基团,自发形成复合物,引起HSA、PPA、α-Glu酶发色基团周围微环境的改变和酶内源性荧光淬灭,从而抑制酶活性。动物实验表明青柿子提取物可明显降低小鼠餐后血糖水平,提示青柿子提取物通过抑制淀粉酶和葡萄糖苷酶活性来降低餐后血糖水平。     

银耳多糖对淀粉消化酶的抑制作用及其机理研究

目的:研究银耳多糖对胰α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制作用及机制。方法:以干银耳为原料,分别采用碱法提取、酶法脱蛋白和柱层析分离,得到总糖含量为92.45%的银耳多糖（Tremella fuciformis polysaccharide,TP）,采用可见光分光光度法分析了TP对胰α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制作用,采用荧光光谱法和圆二色谱法表征了TP对该两种酶结构的影响。结果:TP能抑制该两种酶的活性,其对胰α-淀粉酶的抑制作用明显高于α-葡萄糖苷酶,对该两种酶的半抑制浓度（IC₅₀）分别为7.6835和16.9306 mg/mL。TP通过与该两种淀粉消化酶发生相互作用抑制其活性。TP与胰α-淀粉酶相互作用明显,可静态猝灭此酶,改变其二级结构;TP与α-葡萄糖苷酶相互作用微弱,不能改变其二级结构。结论:TP通过与淀粉消化酶发生相互作用抑制其活性。     

茶多酚对胰α-淀粉酶的抑制动力学研究

研究了绿茶茶多酚对胰α-淀粉酶活性的抑制作用。采用非连续测定和作图法研究,结果表明:茶多酚对胰α-淀粉酶具有明显的抑制作用,其半抑制浓度为0.82mg/mL;抑制类型为可逆性非竞争性抑制,其抑制常数Ki为1.08mg/mL。     

乙烯对α-淀粉酶活力、动力学和微环境的影响

用乙烯利释放出乙烯,研究其对α-淀粉酶活力、动力学及微环境的影响。结果表明:与对照组比较,低浓度乙烯提高α-淀粉酶活力,而高浓度乙烯抑制α-淀粉酶活力;乙烯对α-淀粉酶的最适pH值(pH 6.0)几乎没有影响,但对其最适温度改变,向高温方向偏移5℃。用高浓度和低浓度的乙烯处理α-淀粉酶,探讨乙烯对α-淀粉酶的反应机理,其水解动力学符合一级动力学方程(Michaelis-Menten),其对应的双倒数曲线(Lineweaver-Burk)拟合度较好。紫外、荧光光谱分析表明:随着乙烯浓度增加,α-淀粉酶紫外吸光度和荧光发射强度明显增强。与对照组相比,紫外吸收光谱在波长229 nm红移1 nm。α-淀粉酶溶液的黏度随着乙烯浓度的增加而下降,导致酶的微环境改变。目前,乙烯利已广泛应用于各种蔬菜、水果,本研究对乙烯的食品安全有非常重要的意义。     

茶多酚对α-淀粉酶的抑制作用及分子机理

探究茶多酚对α-淀粉酶的抑制特性并分析其分子作用机制.采用抑制动力学的方法评价茶多酚对α-淀粉酶的抑制作用;通过荧光色谱法及圆二色谱法观察荼多酚对α-淀粉酶空间结构和稳定性的影响;利用分子对接技术,探究茶多酚与α-淀粉酶之间的分子相互作用.结果 表明,茶多酚对于α-淀粉酶的活性具有明显的抑制作用,竞争类型为非竞争性抑制...     

乳苣不同溶剂提取物对α-淀粉酶的抑制作用及光谱研究

利用3,5-二硝基水杨酸(DNS)和8-苯胺-1-萘磺酸(aNs)荧光探针法,研究乳苣不同溶剂提取物对α-淀粉酶的抑制作用和类型、紫外光谱和表面疏水性的影响。结果表明:水、正丁醇、石油醚、氯仿和乙酸乙酯提取物对α-淀粉酶的半抑制浓度(IC₅₀)分别为2.002、4.086、1.248、4.299和6.904mg/mL。水提取物对α-淀粉酶为可逆非竞争性抑制,抑制常数(K_i)为1.653mg/mL。正丁醇提取物对α-淀粉酶为可逆混合性抑制,K-和酶-底物络合物抑制常数(K_is)分别为0.795和0.435mg/mL。石油醚提取物对α-淀粉酶为不可逆竞争性抑制,K_i为2.893mg/mL。水、正丁醇和石油醚提取物可增强Ot一淀粉酶紫外吸收,但均不改变吸收峰。水提取物增强ANS荧光强度,低浓度正丁醇提取物增强了荧光强度,高浓度则降低了荧光强度,石油醚提取物则与此相反。另外,各提取物均使ANS发生蓝移。该研究可为进一步开发天然淀粉酶抑制剂提供理论依据。     

鼠尾草酸对α-淀粉酶的抑制作用

抑制α-淀粉酶的活性可以有效降低餐后血糖浓度升高,故本实验从抑制率、抑制类型、荧光猝灭效应及分子模拟几个方面出发研究鼠尾草酸对α-淀粉酶的抑制作用。结果显示,鼠尾草酸对α-淀粉酶有较为显著的抑制作用,半数抑制浓度为1.12 mg/mL,以可逆的竞争性方式抑制α-淀粉酶的活性。荧光猝灭实验结果表明,鼠尾草酸与α-淀粉酶结合后使α-淀粉酶的荧光特性发生静态猝灭。分子对接结果显示鼠尾草酸与α-淀粉酶作用后没有催化底物生成新的产物,而是形成可逆的酶-抑制剂复合物,引起变构调节,从而扰乱了α-淀粉酶的构象动力学,最终导致酶催化活性降低。     

3种黄酮类化合物对α-淀粉酶的抑制机制

黄酮类化合物可以通过抑制α-淀粉酶的活性来调节血糖水平,然而,黄酮类化合物对α-淀粉酶的抑制机制和二者构效关系的研究十分有限,特别是B环上的羟基化和C环上的糖基化对黄酮类化合物抑制α-淀粉酶的影响尚不清楚。为探究黄酮类化合物对α-淀粉酶的抑制机制和构效关系,分析了芦丁、槲皮素、山奈酚3种黄酮类化合物对α-淀粉酶的抑制类型、荧光淬灭特性、构象变化、结合力和结合位点。结果表明,山奈酚对α-淀粉酶的抑制能力最强,芦丁最弱。C环C3处的糖基化和B环C3’处的羟基化均削弱了黄酮类化合物对α-淀粉酶的抑制作用。淬灭亲和力被C环C3处的糖基增强,被B环C3’处的羟基削弱。3种黄酮类化合物主要通过氢键和疏水作用与α-淀粉酶自发结合,导致酶的结构和疏水微环境被改变,进而有效抑制α-淀粉酶的活性。研究旨在为富含黄酮类化合物的降血糖食品的开发和应用提供理论参考。     

绿茶和红茶浸提液对α-淀粉酶的抑制作用研究

研究绿茶和红茶浸提液对猪胰α-淀粉酶的抑制作用。对绿茶和红茶进行浸泡提取得到茶浸提液,采用非连续测定和Dixon作图法研究其对猪胰α-淀粉酶的半抑制浓度和抑制机理。发现绿茶和红茶对猪胰α-淀粉酶的半抑制浓度分别为8.99mg/mL和10.01mg/mL(以干茶叶含量计),二者的抑制类型都为可逆非竞争型抑制,绿茶和红茶的抑制常数分别为9.42mg/mL和11.51mg/mL(以干茶叶含量计)。茶浸提液与猪胰α-淀粉酶相互作用后的紫外差谱显示茶浸提物导致了猪胰α-淀粉酶紫外吸收的增强和峰的移动。     

山奈酚抑制α-淀粉酶作用的研究

采用酶动力学方法和荧光光谱法研究山奈酚对α-淀粉酶的抑制作用。在pH6.8、37℃条件下反应20min,山奈酚（1mg/mL,0.05mL）对α-淀粉酶（0.328U/mL,0.2mL）催化活性的抑制率达到24.39%。该抑制过程是以非竞争性方式进行。同时,山奈酚对α-淀粉酶的内源荧光产生有规律的猝灭作用,以静态猝灭方式为主。二者自发结合形成复合物,其主要作用力为疏水作用,有1个结合位点。      

红松松球鳞片多酚对α淀粉酶和α葡萄糖苷酶的抑制作用

本文研究了红松松球鳞片多酚对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制作用,并采用Lineweaver-Burk双倒数法分析了其动力学性质。结果表明,红松松球鳞片多酚对α-葡萄糖苷酶的抑制作用略弱于阳性对照阿卡波糖,二者的半数抑制浓度分别为713.94μg/m L和623.73μg/m L;对α-淀粉酶的抑制作用明显不及阳性对照阿卡波糖,二者的半数抑制浓度分别为1902.91μg/m L和865.96μg/m L。动力学分析结果显示红松松球鳞片多酚对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制作用均为非竞争性抑制类型。      

红松松球鳞片多酚对α淀粉酶和α葡萄糖苷酶的抑制作用

本文研究了红松松球鳞片多酚对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制作用,并采用Lineweaver-Burk双倒数法分析了其动力学性质。结果表明,红松松球鳞片多酚对α-葡萄糖苷酶的抑制作用略弱于阳性对照阿卡波糖,二者的半数抑制浓度分别为713.94μg/m L和623.73μg/m L;对α-淀粉酶的抑制作用明显不及阳性对照阿卡波糖,二者的半数抑制浓度分别为1902.91μg/m L和865.96μg/m L。动力学分析结果显示红松松球鳞片多酚对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制作用均为非竞争性抑制类型。     

大豆多肽中α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶抑制剂的虚拟筛选及体外活性验证

目的:通过抑制碳水化合物消化酶的活性延缓碳水化合物的消化,来预防和控制糖尿病的作用已经成为多领域的研究热点。β-伴大豆球蛋白是大豆蛋白中含量最高的功能性蛋白,但其胃肠道消化后产生的多肽是否具有抑制碳水化合物消化酶的活性还不得而知。方法:将β-伴大豆球蛋白进行胃肠道模拟消化,通过虚拟筛选和ADMET预测选出α-葡萄糖苷酶抑制肽和α-淀粉酶抑制肽,检测多肽对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的抑制作用。结果:通过胃酶、胰酶和糜蛋白酶将β-伴大豆球蛋白虚拟酶解成95个小分子多肽;筛选出8个α-葡萄糖苷酶抑制肽和α-淀粉酶抑制肽;发现氢键和静电相互作用在多肽与α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶结合中起重要作用;体外验证发现四肽EASY具有较强α-葡萄糖苷酶抑制效果,其IC50值为208.6 μg/mL,未发现明显α-淀粉酶抑制效果。结论:α-葡萄糖苷酶抑制肽EASY具有抑制碳水化合物消化酶的活性,可能成为控制糖尿病的潜在抑制剂。     

麦谷蛋白和麦醇溶蛋白抑制α-淀粉酶活性的动力学研究

为了探讨麦谷蛋白和麦醇溶蛋白对猪胰α-淀粉酶(PPA)的抑制动力学特征.通过测定半抑制浓度(IC50),结合Dixon方程和Cornish-Bowden方程,探究麦谷蛋白和麦醇溶蛋白对PPA的抑制类型及抑制机理.结果表明,麦谷蛋白对PPA的抑制作用属于混合型竞争性抑制,麦醇溶蛋白对PPA的抑制作用属于竞争性抑制.麦谷蛋...     

苦荞中芦丁和槲皮素对淀粉消化酶的抑制能力

采用多种光谱技术手段研究苦荞中芦丁和槲皮素对淀粉消化酶的抑制效果和作用机制,及二者联合使用时的抑制效果。结果表明：芦丁和槲皮素对α-淀粉酶的抑制类型均为疏水相互作用力和以氢键为主要驱动力的竞争性抑制,半抑制浓度分别为0.36 mg/mL和0.22 mg/mL;对α-葡萄糖苷酶均为通过氢键结合的混合型抑制,半抑制浓度分别为1.30 mg/mL和0.362 mg/mL。同时,二者均能与α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶结合形成复合物从而抑制酶的活性,且只存在一个（或一类）作用位点;二者按照不同浓度比联合使用均可对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶产生协同抑制的作用,当二者浓度比为7∶1和3.6∶18时,对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的联合指数分别达到0.20和0.22,苦荞中黄酮对两种消化酶达到最佳协同抑制效果。本研究为进一步阐明黄酮与淀粉消化酶相互作用机制提供一定理论基础,对指导富含黄酮食药同源植物的加工利用具有较高的指导价值,有利于促进苦荞产业的良性循环。     

秋葵多糖与α-淀粉酶的相互作用及光谱学分析

研究秋葵多糖对α-淀粉酶的抑制作用,并运用紫外光谱对其相互作用的光谱进行探讨,结果表明,秋葵多糖对α-淀粉酶具有较强的抑制性,且随其浓度的增加而增强,其抑制类型属于竞争可逆型。经过紫外光谱分析表明,随着秋葵多糖浓度的不断增加其吸收峰逐渐增强且发生蓝移,证明秋葵多糖与α-淀粉酶混合时彼此之间发生了作用。     

芡种皮多酚提取物体外抑制α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶活性研究

通过体外实验研究了芡种皮多酚提取物对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶活性的影响,并考察了其对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的抑制动力学,研究结果显示:芡种皮多酚提取物在体外具有较强的抑制α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的作用（IC50分别相当于生药浓度0.08 mg/m L和0.30 mg/m L）,其抑制作用与浓度之间存在量效关系,二者的抑制类型均为可逆性的竞争性抑制剂。因此,芡种皮具有开发成辅助降糖的保健食品或药品的潜力,有很大的利用价值。      

秋葵多糖与α-淀粉酶的相互作用及光谱学分析

研究秋葵多糖对α-淀粉酶的抑制作用,并运用紫外光谱对其相互作用的光谱进行探讨,结果表明,秋葵多糖对α-淀粉酶具有较强的抑制性,且随其浓度的增加而增强,其抑制类型属于竞争可逆型。经过紫外光谱分析表明,随着秋葵多糖浓度的不断增加其吸收峰逐渐增强且发生蓝移,证明秋葵多糖与α-淀粉酶混合时彼此之间发生了作用。      

大黄酸对α-淀粉酶的抑制机理分析及分子模拟

本文应用紫外、荧光、圆二色谱和分子模拟等手段,分析测定了大黄酸对α-淀粉酶的抑制作用、抑制类型和抑制动力学常数,探讨了大黄酸对α-淀粉酶二级结构的影响,并通过分子模拟软件对大黄酸和α-淀粉酶进行分子对接。结果表明,大黄酸是一种可逆的竞争型α-淀粉酶抑制剂,其半抑制率IC50为0.43±0.02 m M,抑制常数Ki为0.35±0.03 m M;进一步的圆二色谱分析表明,大黄酸能使α-淀粉酶二级结构含量的变化(α-螺旋含量由12.22%逐渐增加到22.72%,β-折叠含量由43.24%逐渐降低到36.43%),这意味着大黄酸能够诱导α-淀粉酶的构象发生部分改变;螯合钙离子实验证实了大黄酸能够螯合活性中心的钙离子;分子模拟结果也表明,大黄酸能够优先结合到α-淀粉酶的活性中心,并与催化基团TRP59和TYR62发生相互作用,形成氢键和π-π效应,进而与淀粉竞争活性中心,从而降低了α-淀粉酶的催化活性。