高效液相色谱测定脱脂豆粕中嘌呤含量

为检测脱脂豆粕中嘌呤含量,利用高氯酸水解豆粕样品中的核酸,采用高效液相色谱法测定豆粕粉中嘌呤含量。测定结果表明:色谱柱为Ultimate AQ-C18(4.6 mm×250 mm,5μm);柱温25℃,进样量10μL,流速1.0mL/mim,紫外检测器波长254 nm;流动相为水、冰乙酸、四丁基氢氧化铵以997∶1.5∶1.5的比例混合,再与无水甲醇以99∶1混合。以此方法测定的腺嘌呤、鸟嘌呤、黄嘌呤、次黄嘌呤的精密度RSD分别为0.31%,0.27%,0.50%,0.41%;回收率分别为89.00%,86.90%,88.10%,81.30%。通过此方法测定脱脂豆粕粉中的嘌呤含量为253.0 mg/100g。     

反相高效液相色谱法同时测定食品中香兰素、乙基麦芽酚的含量

采用反相高效液相色谱法同时测定食品中香兰素、乙基麦芽酚。通过50%乙醇提取出来后,用热电公司GoldenC18柱(4.6i.d×250mm,5μm),甲醇∶水∶乙酸20∶80∶0.5(v/v)为流动相进行洗脱分离,流速1.0mL/min,检测波长为278nm。香兰素和乙基麦芽酚的线性范围分别为1.13～226mg/L和1.025～205mg/L,平均回收率分别为99.2%和101%,相对标准偏差分别为1.0%和1.2%。该方法具有操作简便,结果准确等优点。     

市售啤酒中嘌呤含量评价指标的研究

目的 建立市售啤酒中嘌呤含量的评价指标。方法 采用反相离子对色谱法对16种市售啤酒中嘌呤含量进行检测。结果 游离嘌呤碱基含量为5.72~26.52 mg/L,嘌呤核苷含量为40.14~135.56 mg/L,总嘌呤碱基含量为31.69~92.66 mg/L。游离嘌呤碱基和嘌呤核苷两部分之和与总嘌呤碱基含量间存在非常显著相关关系,相关系数为0.985(P＜0.01)。结论 以游离嘌呤碱基和嘌呤核苷为指标,可以满足不同啤酒间嘌呤含量的评价,检测方便快捷且能更好地反映啤酒中主体嘌呤物质。     

高效液相色谱—紫外检测法测定微生物降解体系中己烯雌酚含量

采用HPLC—UV法测定微生物降解体系中己烯雌酚(DES)的含量。根据霉菌和细菌发酵体系的不同性质选用不同的提取方法,以Sepax GP-C18柱(150 mm×4.60 mm,5.0μm)为色谱柱,甲醇:水(7:3,V/V)为流动相,流速0.7mL/min,用紫外检测器在242nm处检测。结果显示DES对照品的保留时间为7.714min,在0.5~50.0mg/L浓度范围内线性关系良好,相关系数为0.996 3。细菌发酵液中DES平均回收率为94.04%,RSD为2.33%;霉菌发酵液中DES平均回收率为95.24%,RSD为1.05%。DES的检出限不大于0.30mg/L。运用该方法测得实验室保藏的4株菌5d内对25 mg/L的DES降解率分别为62.38%,64.72%,53.38%,88.34%。该方法检测微生物降解体系中DES简单、快速、准确、分离度好,精密度高,稳定性好。     

RP-HPLC法测定发酵液中β-苯乙醇的研究

运用反相高效液相色谱对发酵液中的β-苯乙醇进行定性定量分析确定了RP-HPLC测定发酵液中β-苯乙醇的含量的方法。色谱柱:DikmaDiamonsilC18150mm×4.6mm5μmWaters,流动相∶甲醇∶水=40∶60(v/v)流速:1.0mL/min,紫外检测波长:260nm,柱温30℃,外标法定量。结果RP-HPLC法测定浓度在4～20μL/10mL时线性关系良好,r=0.9998,平均加样回收率为97.71%,RSD为1.04%(n=5)。此方法准确,灵敏,简单,重现性好,适合于发酵液这种复杂体系中β-苯乙醇的定量分析。     

不同种类鲜菌、干菌食品中嘌呤含量的比较研究

目的:运用高效液相色谱法检测常见菌类食品中的嘌呤含量,比较鲜菌与干菌中嘌呤含量的差别。方法:样品处理采用高氯酸溶液100℃水解60min。色谱柱为Waters Atlantis T3(4.6mm×250mm×5μm)柱,以10.0mmol/L甲酸铵(pH3.6)和甲醇体积比99∶1作为流动相对嘌呤进行分离,流速1.0mL/min,柱温30℃,检测波长254nm。结果:鲜菌类食品中嘌呤含量在213.8—730.3mg/kg,滑子蘑较高;干菌类食品中嘌呤含量在681.0—4 049.2mg/kg,香菇较高。含水量校正后,干菌类嘌呤含量在0.7—4.5mg/g,鲜菌类嘌呤含量在1.6—5.5mg/g。结论:菌类食品中嘌呤含量较高;干菌类食品中嘌呤含量显著高于鲜菌类;经过含水量校正后,大部分干菌类食品嘌呤含量要低于鲜菌类。     

HPLC法测定熟肉制品中苯甲酸、山梨酸和脱氢乙酸的含量

建立HPLC法测定熟肉制品中苯甲酸、山梨酸和脱氢乙酸含量的方法。色谱柱为Thermo Acclaim TM C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-0.02 mol/L乙酸铵溶液(7:93,v/v);流速:1.0m L/min;检测波长:230 nm;柱温:35℃。结果表明,该方法具有良好的精密度与稳定性,苯甲酸、山梨酸和脱氢乙酸分别在1.17~27.96、1.11~26.63、1.08~25.89μg/m L范围内线性良好,其平均回收率分别为90.4%、94.4%、86.8%。实验结果表明该方法简便、结果准确、重现性好,适用于熟肉制品中苯甲酸、山梨酸及脱氢乙酸的含量测定,为熟肉制品中添加剂的检测奠定了基础。     

不同菌种对豆粕中水苏糖、棉子糖的发酵降解与检测技术研究

建立豆粕中水苏糖、棉子糖的快速检测的方法,在此基础上分析不同菌种对豆粕中水苏糖和棉子糖的降解效果。采用高效液相色谱法检测豆粕中的水苏糖和棉子糖含量。采用单一菌种和混合菌种固态发酵法进行豆粕中水苏糖和棉子糖的降解。水苏糖和棉子糖的最佳检测条件为:示差折光检测器,NH2柱,色谱柱温度35℃,流动相为乙腈∶水=65∶35,流速1.0 m L/min,进样量10μL。在上述条件下水苏糖和棉籽糖的检测限分别为4.00~40.00 mg/m L和2.00~10.00 mg/m L,平均加样回收率分别为95.68%和95.08%。单一菌种和混和菌种固态发酵结果表明,将豆粕∶玉米粉∶麸皮为9∶0.5∶0.5的比例进行混合,按15%的接种量,30℃下发酵48 h,可部分或者完全降解豆粕中的水苏糖和棉子糖。所建方法能够准确快速的检测豆粕和发酵豆粕(FSM)中水苏糖和棉子糖的含量。发酵结果表明,在很好的降解水苏糖和棉子糖的基础上,由于混合菌种发酵能提供更全面的菌体蛋白和营养物质,因此更适合用于新型发酵豆粕产品的开发和应用。     

HPLC法测定面制品中的姜黄色素

建立高效液相色谱法测定面制品中姜黄色素添加剂含量的方法,用甲醇∶水(7∶3,v/v)稀释并提取面饼样品中的三种姜黄素,采用Kinetex PFP五氟苯基柱(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以0.1%甲酸水溶液和0.1%甲酸乙腈溶液为流动相,流速为1.0 m L/min,检测波长为420 nm,进样量为4μL。结果表明,三种姜黄素分别在1.0~100μg/m L范围内具有良好的线性关系,方法的定量限为10 mg/kg。实际样品检测发现,袋装方便面和咖喱味点心面的面饼中均检出姜黄素,总姜黄素含量均在50 mg/kg以内,符合GB 2760–2014的限量规定。     

反相高效液相色谱法测定硬糖和橙汁中固黄、坚牢绿、丽春红2R、丽春红SX和丽春红3R

目的建立硬糖果和橙汁中合成色素固黄、坚牢绿、丽春红2R、丽春红SX和丽春红3R的高效液相色谱检测方法。方法样品中的合成色素用聚酰胺小柱进行吸附,用乙醇-氨水-水(7:2:1,v/v/v)的解析液解吸附、提取,在吹氮浓缩仪上吹至近干,用蒸馏水溶解定容,经0.45μm滤膜过滤,取10μL注入高效液相色谱仪,以甲醇与0.02 mol/L乙酸铵溶液为流动相,色谱柱C18柱(250 mm×4.6 mm i.d.,5μm)梯度洗脱15 min分离,流速为1.0 mL/min,利用二极管阵列检测器在检测波长分别为420、630、520 nm处定量分析。结果固黄、坚牢绿分别在5.0~50.0 mg/L,0.2~50.0 mg/L范围内,丽春红2R、丽春红SX、丽春红3R在1.0~50.0 mg/L范围内峰面积与进样量呈良好的线性关系,线性相关系数大于0.999,回收率在82.5%~96.8%,相对标准偏差在2.8%~8.9%。固黄、坚牢绿、丽春红2R、丽春红SX和丽春红3R的检出限分别达到0.42、0.017、0.098、0.12mg/kg和0.082 mg/kg。结论该方法准确度高,分离效能好,结果稳定可靠。     

高效液相色谱法测定发酵液中聚苹果酸方法的建立

采用高效液相法在Prevail C18色谱柱(4.6mm×250mm,4μm)上定量测定发酵生产的聚苹果酸,流动相为乙腈和0.025mol/L磷酸二氢钾混合溶液(用磷酸调pH2.5)(v∶v=5∶95),流速为1.0mL/min,检测波长为210nm,柱温为25℃。发酵液经离心、水解处理后进样,4min可以将其中的L-苹果酸完全分离定量。方法的回收率为98.84%～101.47%,RSD为1.35%～1.72%。实验结果表明,该法是测定发酵液中聚苹果酸的快速、有效的定量分析方法。     

HPLC标准曲线法测定酵母中谷胱甘肽

通过HPLC标准曲线法进行酵母中还原型和氧化型谷胱甘肽含量测定的研究,利用Intersil ODS-3 C_(18)柱,以庚烷磺酸钠-磷酸盐缓冲溶液(pH3.0)和甲醇(v∶v=90∶10)为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长为210 nm,得到氧化型和还原型谷胱甘肽的相关系数均为0.9999,检测限分别为2.40 mg/L、2.27 mg/L,定量限分别为9.0 mg/L、8.5 mg/L,精密度分别为2.00%、0.94%,回收率分别为100.12%~103.43%和95.23%~96.44%之间。     

RP-HPLC同时检测发酵液中7-脱氢胆固醇与胆固醇的研究

7-脱氢胆固醇是维生素D3的直接前体,试验研究了RP-HPLC同时检测发酵液中7-脱氢胆固醇及其前体胆固醇的方法和条件.应用Waters sunfire C18(φ416×150 mm,5μm)色谱柱,乙腈异丙醇=80:20(v:v)为流动相,1.0mL/min流速,38℃柱温,于波长210 nm紫外检测器检测.在此条件下,7-脱氢胆固醇和胆固醇呈现较好的分离和重现性,其保留时间分别为8.248min和9.598min左右,最低检测浓度分别为8mg/L和10 mg/L,平均回收率分别为99.53%和97.67%.     

高效液相色谱法测定蒜头果油分离出的神经酸含量

建立了高效液相色谱法测定从蒜头果油中分离出的神经酸含量的方法。采用的色谱柱为Hypersil ODS2(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-甲醇-0.4%乙酸水溶液-四氢呋喃(体积比80∶12∶5∶3),柱温26℃,检测波长205 nm,流速1.0 m L/min,进样量5μL。结果表明:神经酸在1.0~20.0 mg/m L范围内呈良好线性关系,精密度和稳定性的相对标准偏差(RSD)分别为1.52%、1.61%;回收率为97.41%~104.89%,RSD为0.72%~3.22%;测得样品的RSD为0.90%~2.36%。实验方法简便、快速、准确、重复性好,可作为蒜头果油分离脂肪酸过程中神经酸含量的分析方法。     

正相高效液相色谱法同时测定腌腊肉制品中13-HODE和9-HODE含量

采用高效液相色谱对腌腊肉制品中的13-羟基十八碳二烯酸(13-HODE)和9-羟基十八碳二烯酸(9-HODE)进行检测。腌腊肉制品中的13-HODE和9-HODE用甲醇提取,经C18固相萃取柱净化,以正己烷/异丙醇/乙酸(98∶2∶0.5,v/v/v)为流动相,在Lichrosorb Si 60(250×4.0 mm,5μm)色谱柱上分离,选用二极管阵列检测器在234 nm进行检测。结果表明:13-HODE和9-HODE分别在0.5~20和1.0~12.5μg/m L范围内线性良好(R~2分别为0.9994和0.9990),检测限分别为0.075、0.15μg/g,定量限分别为0.25、0.5μg/g。不同添加水平的平均回收率分别为88.2%和86.0%。对14种腌腊肉制品的分析结果显示,所有样本均含有13-HODE和9-HODE,范围分别为:1.2~167.54和0.63~139.20μg/g。本实验建立的检测方法操作简单、易于普及,具有良好的灵敏度和准确性,可以满足腌腊肉制品中13-HODE和9-HODE含量的同时分析。     

高效液相色谱法测定香肠中亚硝酸盐含量

建立香肠中亚硝酸盐含量测定的HPLC法。色谱条件:色谱柱:ZORBAX Eclipse XDB-C18(4.6 mm×250 mm,粒径5μm);流动相:乙腈∶磷酸盐(0.03 mo L/L KH2PO4,p H3.3)=10∶90;流速1.0 m L/min;柱温25℃;检测波长220nm。结果表明:采用高效液相色谱法测定香肠中亚硝酸盐含量在0.02~20.00 mg/L范围内具有良好的线性关系,相关系数为0.999 21,检出限为0.1 mg/kg,样品的加标回收率为88.0%~101.0%,相对标准偏差1.5%~4.8%。该方法准确、灵敏、操作简便,适合于香肠样品中亚硝酸盐含量的测定。     

HPLC法测定冬虫夏草菌丝体及发酵液中核苷类成分

以百令胶囊及野生冬虫夏草作为对照品,优化了HPLC法测定冬虫夏草菌F4539指纹图谱的色谱条件,并计算其中4种核苷成分的含量。结果表明:采用YMC-Pack Pro C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,甲醇∶水(20∶80,体积比)为流动相,流速0.6 m L/min,检测波长为260 nm时,待测样品得到较好的基线分离;冬虫夏草菌F4539发酵菌丝体及发酵液中含有与野生冬虫夏草及百令胶囊相同的有效成分;4种核苷物质在2、4、6、8、10 mg/L的浓度梯度下,线性关系良好;通过定量计算,冬虫夏草菌F4539菌丝体及发酵液中的腺苷含量分别为0.094 mg/g和2.53 mg/g,百令胶囊中腺苷含量为1.45 mg/g。本研究对于冬虫夏草F4539的功效评价、发酵后处理及产业化开发提供了重要技术参数。     

高效液相色谱法测定凉皮中的脱氢乙酸

目的建立凉皮中脱氢乙酸含量的高效液相色谱测定方法。方法样品用水提取,经过0.45μm微孔过滤膜过滤后进样分析。色谱柱:CNW#174;Athena C18-WP色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:10 mmol/L乙酸铵水溶液(90%),甲醇(10%);洗脱方式:等度;检测器波长:230 nm;流速:1.0 m L/min;柱温:室温;进样量:3.0μL;采用色谱峰保留时间定性,外标法峰面积定量。结果脱氢乙酸平均回收率98.9%~100%,相对标准偏差0.730%~1.810%,在1.0~50.0μg/m L范围内线性良好,相关系数0.9994,定量限10.0 mg/kg。结论该方法具有样品预处理简单,分析速度快,灵敏度高的特点。针对厦门市流通领域中的样品实际检测,发现流动摊贩所售凉皮制品中脱氢乙酸含量多数超过1000 mg/kg的限量规定。     

微波消解—离子色谱法测定面制品中磷酸盐含量

为建立用微波消解进行样品前处理,离子色谱法测定面制品中的磷酸盐含量的检测方法。用离子色谱带电导检测器进行分离测定,色谱柱为IonPac AS19(4×250 mm),35 mmol/L氢氧化钾为淋洗液,流速为1.0 mL/min。结果表明加标回收率在97.0%~115.0%范围,相对标准偏差均小于0.5%,在1.0~50.0 mg/L范围呈现良好的线性关系,回归系数大于0.999。该法具有操作简便、分析快速、准确等优点,能满足面制品中磷酸盐含量检测要求。     

常见干豆类及豆制品中嘌呤含量研究

目的:检测常见干豆类及豆制品中的嘌呤含量,为高尿酸血症与痛风患者健康膳食提供指导。方法:采用高效液相色谱法测定嘌呤含量,色谱柱选用Waters Atlantis T3柱(4.6mm×250mm×5μm),流动相为10.0mmol/L甲酸铵(pH3.6)和甲醇(99%∶1%),流速1.0mL/min,柱温30℃,检测波长254nm。结果:不同种类干豆及豆制品中嘌呤含量具有显著差异,干豆类中嘌呤含量显著高于豆制品;干豆类中,蚕豆最高。豆制品中,豆粉最高。结论:不同种类干豆及豆制品中嘌呤含量有差别;干豆类普遍高于豆类制品。