Ⅰ型Ⅲ型脊髓灰质炎减毒活疫苗（人二倍体细胞）实际储运中的稳定性

目的考察口服Ⅰ型Ⅲ型脊髓灰质炎减毒活疫苗(bOPV液体疫苗)和Ⅰ型Ⅲ型脊髓灰质炎减毒活疫苗糖丸(bOPV糖丸)的运输、冻融及不同温度下的稳定性。方法将3批bOPV液体疫苗分别按陆路运输(途中模拟10次开门卸货入库)和航空运输要求进行运输稳定性试验和反复冻融5次稳定性试验,3批bOPV糖丸按陆路运输要求(途中模拟10次开门卸货入库)进行运输稳定性试验后,均于-20℃入库储存,分别于入库后第6、12、18个月取样检测病毒滴度,第24个月进行全检。同时将6批bOPV液体疫苗和6批bOPV糖丸分别于-20℃保存36个月、2～8℃保存12个月、25℃放置4周、37℃放置8 d,于不同时间点取样检测病毒滴度。采用细胞培养半数感染量(cell culture infective does 50%,CCID50)法检测上述样品病毒综合滴度及Ⅰ型、Ⅲ型分型滴度,按企业注册制造及检定规程评价疫苗效价稳定性。结果 bOPV液体疫苗及bOPV糖丸2～8℃运输及bOPV液体疫苗反复冻融5次后,于-20℃保存24个月,疫苗各项质量指标检测结果均符合质量标准要求;-20℃保存36个月、2～8℃保存9个月、25℃放置1周、37℃放置2 d后,病毒滴度均符合企业注册制造及检定规程。结论 bOPV在常规储运条件下具有良好的稳定性,反复冻融对bOPV液体疫苗稳定性影响有限,但储存温度和时间会对bOPV的稳定性产生不同程度的影响,在实际储运过程中应避免将其长期暴露于温度偏移情况下。     

口服Ⅰ型Ⅲ型脊髓灰质炎减毒活疫苗的稳定性

目的考察口服Ⅰ型Ⅲ型脊髓灰质炎减毒活疫苗在不同温度和pH环境下的稳定性。方法将6批疫苗分别于2～8℃放置6个月、22～25℃放置7 d、37℃放置7 d、-20℃放置27、30、33个月,或反复冻融5次;将疫苗pH调至3. 0～10. 0。采用细胞培养半数感染量(cell culture infective dose 50%,CCID50)法检测病毒总滴度及分型滴度。结果口服二价脊髓灰质炎减毒活疫苗在2～8℃保存6个月,22～25℃保存5 d,37℃保存2 d,反复冻融5次,-20℃保存27个月,pH 3. 0～10. 0环境下,疫苗效力均符合质量标准。结论疫苗的保存温度及时间对其稳定性均有影响。     

关于病毒类减毒活疫苗去除明胶的思考及建议

正对于大多数的生物制品而言,特别是减毒类活疫苗产品,冻干是提升疫苗稳定性极为重要的制剂手段。为提高冻干产品的稳定性和复水性,制品中加入保护剂是常用的方法。使用保护剂可改变疫苗在冻干过程中由于环境改变造成的损害,能较好地保持生物样品原有的结构和生物活性,同时可提升产品贮藏期内蛋白质的稳定性~([1])。在众多功能各异的冻干保护剂中,明胶是常用的疫苗保护剂之一,用量一般为0. 5%～1%。明胶     

改进抽提工艺后冻干甲型肝炎减毒活疫苗的稳定性

目的评价改进抽提工艺制备的冻干甲型肝炎减毒活疫苗的稳定性。方法采用改进抽提工艺及原抽提工艺分别制备3批冻干甲型肝炎减毒活疫苗,将疫苗于(5±3)和(25±2)℃放置不同时间,对疫苗的外观、水分、滴度及pH等指标进行检定。结果两组疫苗在(5±3)和(25±2)℃保存不同时间后,外观均为白色疏松体,复溶后无异物;水分、滴度及pH差异均无统计学意义(P 0. 05)。结论改进抽提工艺对该疫苗的稳定性无影响。     

北京株(VZV84-7)水痘病毒在麻疹-腮腺炎-风疹-水痘联合减毒活疫苗中的稳定性

目的观察北京株(VZV84-7)水痘病毒在麻疹-腮腺炎-风疹-水痘(measles-mumps-rubella-varicella,MMRV)联合减毒活疫苗中的稳定性。方法将4批MMRV联合减毒活疫苗成品分别置37℃保存4周、2~8及-15~-20℃保存24个月,采用蚀斑形成单位(plaque forming unit,PFU)试验检测不同时间点疫苗中水痘病毒滴度。将水痘病毒原液于-80℃反复冻融1、2、3次后,分别与麻疹、腮腺炎、风疹各单价疫苗原液按一定比例配制成MMRV联合减毒活疫苗,进行冻干,采用PFU试验分别测定冻干前、冻干后基础水痘病毒滴度及冻干后于37℃热稳定1周的水痘病毒滴度。结果 4批MMRV联合减毒活疫苗成品于37℃保存4周后,水痘病毒滴度下降范围为0.5~0.7 lg PFU/ml;于2~8℃保存24个月,水痘病毒滴定最高达4.6 lg PFU/ml,最低为4.4 lg PFU/ml;于-15~-20℃放置24个月,水痘病毒滴度基本保持不变,均达合格标准(不低于3.6 lg PFU/ml)。水痘病毒原液经1、2、3次冻融后制备的MMRV,通过37℃热稳定1周,水痘病毒滴度分别为4.9~4.6、4.6~4.4、4.5~4.3 lg PFU/ml,均达到合格标准(不低于3.6 lg PFU/ml)。结论北京株(VZV84-7)水痘病毒在MMRV联合减毒活疫苗中稳定性良好。     

无明胶和人血白蛋白腮腺炎减毒活疫苗冻干保护剂配方的筛选

正目前已有部分冻干疫苗使用无明胶、无人血白蛋白保护剂,如水痘疫苗、甲型肝炎疫苗等,而现行的冻干腮腺炎减毒活疫苗仍以明胶和人血白蛋白作为保护剂,因此,有必要开发一种无明胶和人血白蛋白的保护剂配方。本文对3种不同保护剂配方的冻干腮腺炎减毒活疫苗的质量进行了比较,现将结果报道如下。     

冻干水痘减毒活疫苗的稳定性

目的 观察冻干水痘减毒活疫苗的稳定性。方法 将样品分别放37℃、22℃、8℃、-15℃及-70℃,不同时间取出,采用蚀斑形成单位（PFU）分别测定样品毒力滴度。结果-15℃以下保存5年或8℃保存92周,疫苗滴度仍很稳定,8℃保存100～124周滴度缓慢下降,但仍保持在规程规定的标准以上。22℃保存30周滴度不变。37℃（模拟长期老化试验）保存1周,滴度下降不超过一个对数指数。37℃保存4周,病毒滴度下降缓慢。结论 水痘 减毒活疫苗稳定性良好。     

冻干甲型肝炎腮腺炎联合疫苗的研制

目的　制备冻干甲型肝炎 腮腺炎联合疫苗。方法　采用L A 1株和S79株减毒株制备的甲型肝炎减毒活疫苗和腮腺炎活疫苗原液 ,按一定比例配比 ,加入适宜保护剂制备成冻干制剂 ,参照 2 0 0 0年版《中国生物制品规程》进行全面检定及稳定性试验。结果　两种抗原检定结果符合规程单价疫苗质量标准 ,37℃和 2～ 8℃放置不同时间稳定性良好 ,联合疫苗中两种抗原无干扰。结论　成功制备了冻干甲型肝炎 腮腺炎联合疫苗     

冻干甲乙型肝炎联合疫苗组分相容性的研究

目的研究冻干甲乙型肝炎联合疫苗组分的相容性。方法将所制备的联合疫苗与同批单价甲型肝炎减毒活疫苗及重组乙型肝炎疫苗进行甲肝病毒滴度和乙肝疫苗效力检测,同时分别以联合疫苗与甲型肝炎减毒活疫苗及重组乙型肝炎疫苗接种恒河猴,检测甲肝抗体和HBsAb阳转率。结果该联合疫苗与同批单价疫苗的甲肝病毒滴度和乙肝疫苗效力及诱导猴体的甲肝抗体和HBsAb阳转率差异均无显著意义。结论冻干甲乙型肝炎联合疫苗组分间无拮抗作用,具有相容性。     

冻干麻疹活疫苗有效期的考查

随机抽取12批冻干麻疹活疫苗,保存于4～10℃,48～50个月后其毒力滴度100％合格(2.5 LogTCID_(50))。在保存26个月的疫苗中,随机抽取4批接种22名易感儿,抗体100％阳转。未见异常反应。根据疫苗的稳定性及人体免疫效果可考虑适当延长疫苗效期。     

b型流感嗜血杆菌多糖结合疫苗的研制

［摘 要］目的 研制b型流感嗜血杆菌（Hib）结合疫苗并考察其稳定性。方法 用溴化氰活化提纯Hib荚膜多糖抗原，通过己二酰肼（ADH）与破伤风类毒素（TT）蛋白共价结合，制备b型流感嗜血杆菌结合物，并考察放置在2～8℃及室温9个月和37℃　3个月后的稳定性。结果 用本工艺提取的多糖，合成的多糖衍生物，多糖蛋白结合物的化学组成及结构特性均达到了国外同类产品的质控要求。结合物在2～8℃及室温放置9个月后基本无降解。结论 为临床评价Hib结合疫苗的安全性和保护效果及确定效期提供了实验基础。     

冻干乙脑减毒活疫苗保护剂的筛选

目的　筛选冻干乙脑活疫苗的保护剂。方法　通过优化组合筛选出A、C、D、E、F 5种保护剂配方 ,其中A为现行生产配方作为对照与其他配方进行比较。结果　使用A保护剂的疫苗在 37℃放置 7d和 2 1d ,病毒滴度分别下降 0 .98和 1.6 6LogPFU/ml;使用D、E保护剂的疫苗热稳定性最好 ,在 37℃放置 7d滴度分别下降 0 .19和 0 .0 7LogPFU/ml,2 1d分别下降 0 .42和 0 .39logPFU/ml。结论　D、E保护剂配方为最佳候选配方     

猪肾γ-谷氨酸基转移酶(GGT)的提纯及其稳定性

目的 提纯活性稳定的GGT，制备用于GGT（测定的参考品。方法 用差速离心法从猪肾皮质中分离刷状缘微绒毛膜，用 Triton X－100溶解膜结合的酶，用抗GGT亲和层析柱提纯 GGT，检测提纯品的有关特性。结果 提纯品GGT比活600IU/mg蛋白，得率45.5%，未测出临床常测的酶，在不同方法间的活性比与人血清GGT相似，在特定介质中制成冻干品，经加速变性试验，在-20℃和4℃预期年失活率分别为0．02％和0．25％。结论 本法提纯GGTT速度快，得率高，几乎不含杂酶，稳定性好，在不同方法间与人血清酶有互换性，是用于制备酶参考品提纯GGT的理想方法。     

甲型肝炎减毒活疫苗冻干保护剂的研究

目的 研究冻干甲型肝炎减毒活疫苗的保护剂。方法 甲型肝炎病毒L-A-l株经2BX二倍体细胞培养,制备成甲型肝炎减毒活疫苗,再添加不同保护剂进行冷冻干燥。结果 以山梨醇、蔗糖、脂肪酸盐等为主的保护剂,对甲型肝炎减毒活苗病毒显示了较好的保护性,疫苗冻干前后感染滴度下降在1.0Log CCID50/ml以内,符合《中国生物制品规程》要求。结论 以山梨醇、蔗糖、脂肪酸盐等为主的保护剂是一种安全性较高、疫苗冻干效果较好,适合于疫苗规模化生产的保护剂。     

甲型肝炎减毒活疫苗稳定性的研究

本文对甲型肝炎病毒L－A－1疫苗珠制备的多批减毒活疫苗放置不同温度、不同时间及反复冻融后的疫苗病毒的稳定性进行研究。结果表明,疫苗置－20℃16个月、4～8℃3个月,室温1周,35℃1天,疫苗清度仍达到≥6.5LogTCID50／ml的合格滴度。疫苗置室温3、5天后冻存一周,再放置室温3天,冻存一个月,其病毒滴度无明显改变,表明此疫苗稳定性良好,可耐受一定范围高温。     

FREEZE DRYING OF A FROZEN LIQUID IN A PHIAL

A sorption-sublimation mathematical model for a freeze dryer is presented, and is used to investigate the design and operation of a freeze dryer, in which a frozen liquid enclosed in a phial is dried.

With the material chosen, it was found that the best operating condition would correspond to minimum chamber inert gas pressure. The most desirable design of dryer appears to be one in which moderate but consistent resistances to heat transfer are incorporated, so that the heat flux program of the lower heating plate could be optimized by operating at a higher temperature, either under feedback or preprogrammed feedforward controllers.     

喷雾干燥法制备脊髓灰质炎微球减毒活疫苗

目的采用喷雾干燥法制备脊髓灰质炎微球减毒活疫苗。方法以正交试验法筛选最佳保护剂配方及最佳工艺条件,通过样品的得率、含水量、病毒滴度、微球形态、粒径大小分布和热力学性质等特性评价疫苗的稳定性。结果最佳喷雾干燥工艺为:入口风温180℃,入口风压3.9m/s,进样速度2.5ml/min,保护剂配方1.5%海藻糖+0.2%人血白蛋白(HSA)+0.2%聚乙烯吡咯烷酮(PVP)(w/v)。微球形态完整,分散性好,平均粒径为10.9μm,得率为54.25%,干粉疫苗37℃放置1周和25℃保存6个月,病毒的滴度下降不超过0.5lgCCID50/ml。结论喷雾干燥法制备的脊髓灰质炎微球减毒活疫苗稳定性好,工艺简便,易于工业化生产。     

NEW APPLICATIONS OF HEAT PUMPS IN DRYING PROCESSES

Heat pumps in combination with fluidized bed driers have been investigated extensively at The Norwegian Institute of Technology. A laboratory plant was constructed and a series of experiments on different types of temperature sensitive products were executed. By using heat pump, good temperature and humidity regulation is achieved. Drying temperatures can be regulated from -20°C to 50°C. This gives the possibility of freeze-drying at atmospheric pressure, and drying at temperatures above 0°C in the same plant. By using a temperature program, including an initial period of freeze drying, it is possible to regulate the products' physical properties. Examples are: the sinking velocity of fish fry feed, rehydration ability, colour and taste of dried fish, meat and vegetable products. Further, biotechnological products like bacterial cells and biomolecules/enzymes were dried with improved biological activity of the products compared to traditional drying methods like vacuum freeze drying or spray drying.     

FREEZE DRYING OF A FROZEN LIQUID IN A PHIAL

ABSTRACT

A sorption-sublimation mathematical model for a freeze dryer is presented, and is used to investigate the design and operation of a freeze dryer, in which a frozen liquid enclosed in a phial is dried.

With the material chosen, it was found that the best operating condition would correspond to minimum chamber inert gas pressure. The most desirable design of dryer appears to be one in which moderate but consistent resistances to heat transfer are incorporated, so that the heat flux program of the lower heating plate could be optimized by operating at a higher temperature, either under feedback or preprogrammed feedforward controllers.     

MEASUREMENT OF TRANSPORT PROPERTIES FOR THE DRIED LAYER OF COFFEE SOLUTION UNDERGOING FREEZE DRYING

A mathematical model has developed to determine the thermal conductivity and permeability for the dried layer of liquid sample undergoing sublimation dehydration. A microcomputer-based automatic measurement system has developed for the data acquisition as well as determination of these transport properties applying the drying data to the model. Aqueous solutions of 29-45 % soluble coffee solid were freeze dried under drying conditions used in commercial operations.

Thermal conductivity decreased in proportion to the porosity of the dried layer, and its temperature and pressure dependances were not appeared. The permeability increased with increasing the porosity, pressure and temperature of the dried layer. The results indicated that in commercial operations the solute concentration is one of the critical processing factors since this factor decisively governs the structure of a solute matrix formed during freezing of coffee solutions and the transport properties mainly depend upon the nature of this structure during drying.