烟草大田生育前期根际几种酶活性初探

采用根袋法研究了烤烟大田生育前期根际几种酶活性。结果初步表明：烤烟ＮＣ８９根际土的脲酶、磷酸酶的活性显著高于非根际土，多酚氧化酶活性根际土与非根际土无差异，而根际土过氧化氢酶活性低于非根际土。     

不同肥力条件下烟草根际微生物的初步研究

对不同肥力条件下烟草根际细菌、真菌、放线菌进行分离,研究了其数量变化,对根际土壤中7类细菌生理群进行了数量和多样性分析.结果表明,根际细菌和放线菌数量以高肥土壤中最多,中肥土壤次之,低肥土壤最少;根际真菌数量以低肥土壤中数量最多,高肥土壤次之,中肥土壤最少;好气性固氮菌、氨化细菌、纤维素分解菌、硝化细菌和硫化细菌的数量以高肥土壤最大,中肥土壤次之,低肥土壤最少;反硝化细菌和反硫化细菌数量呈现低肥大于中肥大于高肥的变化趋势.不同肥力条件下,烟草根际细菌、真菌、放线菌及8类细菌生理群的Shannon-Wiener指数和均匀度均以低肥土壤的最大.     

复合菌剂对二氯喹啉酸胁迫下烟草根际土壤微生物及酶活性的影响

盆栽试验结果表明,在受二氯喹啉酸胁迫的土壤中施入复合菌剂后,烟草根际土壤中微生物（细菌、真菌、放线菌）数量,土壤微生物量C和N均较健康土和受害土明显增多;蔗糖酶及脲酶活性均高于受害土而低于健康土,表明复合菌剂能修复受二氯喹啉酸污染的土壤,有助于改善土壤健康质量。      

防治烟草黑胫病的根际细菌分离与筛选

从云南昆明、玉溪、曲靖、楚雄、大理等地13份烟田根际土样中,经分离纯化得到753株根际细菌.通过对黑胫病病原(Phytophthora parasitica.var.nicotiana)的平板拮抗筛选,共得到有抑制病原菌生长的根际细菌97株,用细菌悬液浸泡烟草种子,通过测定烟草种子发芽率和对烟草苗期的促生作用,选出有较好促生作用的细菌19株,再进行温室盆栽测定,选出对烟草黑胫病有防病促生作用的根际细菌6株,分别编号为RB-1、R4、RB-42、RB-59、RB-78、RB-89.在研究过程中发现,从明胶、几丁质培养基和从根表上分离到的细菌,其防病促生作用的机率较高.在防治苗期黑胫病的温室试验中,RB-42和RB-89菌株的相对防治效果分别达到42.22%和37.78%.通过形态学与生理生化初步的鉴定,RB-42、RB-78、RB-89鉴定为假单胞杆菌(Pseudomonas spp.),R4鉴定为芽孢杆菌(Bacillus sp.).     

火土灰对烟草苗期根系生长及根际养分的影响

为明确火土灰对烟草根系生长的影响,采用盆栽试验研究了火土灰不同施用量（CK：不施火土灰,T1：2%火土灰,T2：4%火土灰,T3：8%火土灰）对烟草苗期根际土壤pH、土壤养分、根系形态及烟苗氮磷钾养分吸收的影响。结果表明：（1）与CK相比,不同火土灰处理均能显著提高根际土壤速效钾和有效磷含量,而降低根际pH 0.37~0.59个单位;（2）与CK相比,T1、T2与T3处理烟株地上部干物质量分别增加21.94%、38.76%和80.24%,根系干物质量分别增加67.50%、92.50%和87.50%;施用火土灰处理能显著增加植株根系总根长、根系表面积和根系体积;（3）与CK相比,不同火土灰处理能显著增加烟株地上部氮磷钾积累37.88%~88.05%、48.95%~55.77%和34.16%~109.33%;显著增加根系氮磷钾元素积累量71.17%~97.75%、45.34%~66.91%和87.27%~128.99%。综上,施用8%火土灰在改善土壤养分、增加烟株苗期生物量以及提升烟株养分积累方面均具有显著效果。     

烤烟根际和非根际土壤微生物典型相关分析

为揭示烟田土壤微生物相互关系,用典型相关分析(CCA)方法研究了烤烟全生育期根际和非根际土壤中微生物之间的相关关系。结果表明;1)在根际土壤中,细菌和氨化细菌数量呈正相关关系;在非根际土壤中,细菌数量同氨化细菌、亚硝化细菌和好气性纤维素分解菌呈正相关关系。2)根际土壤细菌、放线菌数量与非根际土壤细菌数量呈正相关,但是真菌数量在根际和非根际土壤之间相关性不强。3)根际土壤中好气性纤维素分解菌、氨化细菌数量与非根际土壤呈明显的正相关,而好气性固氮菌、亚硝化细菌、硝化细菌和钾细菌数量在根际与非根际土壤间的相关性不强。在植烟土壤3大菌和6类生理功能菌群之间、烟株根际和非根际土壤微生物之间均存在相关关系。     

烟草青枯病发病烟株根际土壤细菌群落分析

  目的  研究青枯病发生对根际土壤细菌群落组成的影响, 探明影响根际土壤细菌群落的环境因子。  方法  采用宏基因组学高通量测序技术, 比较发病烟株和健康烟株根际土壤细菌群落差异。  结果  (1) 健康烟株根际土壤细菌Ace指数、Chao指数和Shannon指数有高于发病烟株的趋势, 而Simpson指数有低于发病烟株的趋势; (2)发病烟株根际土壤中芽孢杆菌属(Bacillus)、假单胞菌属(Pseudomonas)和链霉菌属(Streptomyces)等益生菌减少, 而劳尔氏菌属(Ralstonia)和Rudaea等病原菌增加; (3)土壤pH、有效磷(AP)、交换性钙(Ca)和有效铜(Cu)含量在发病烟株根际土壤中显著减少, 而速效钾(AK)含量显著增加。  结论  与健康烟株根际土壤相比, 发病烟株根际土壤细菌多样性、有益菌丰度、土壤pH和养分含量都较低; pH、P、K、Ca、Cu是对根际土壤细菌群落影响较大的土壤环境因子。      

几种防治烟草普通花叶病药剂的田间药效

为给防治烟草普通花叶病的药剂选择提供依据 ,进行了“毒消”6 0 0倍、“病毒必克”5 0 0倍 (药剂 )和氨基酸 30 0倍、“丰农”5 0 0倍 (叶面肥 )田间防效试验。结果表明 ,烟株发病初期开始施药 ,“毒消”6 0 0倍在首次施药后防效达 73.2 4 % ,第 3次施药后各药剂防效下降并在停止施药后 30d病情发生反弹 ;烟株发病中期开始施药 ,首次施药后“病毒必克”5 0 0倍防效达 75 .90 % ,此后各药剂防效均下降 ;氨基酸30 0倍和“丰农”5 0 0倍防效较差     

烟草青枯病不同发病阶段根际土壤微生物群落变化趋势分析

通过扩增子测序技术,探究了烟草青枯病不同发病阶段根际土壤细菌和真菌群落的变化趋势,旨在为明确微生态-青枯病互作关系提供理论基础。结果表明,青枯病烟田根际土壤细菌群落Sobs、shannon指数和OTUs数量于烤烟移栽后75 d和100 d显著降低,真菌群落多样性指数无显著变化。一些致病微生物（Ralstonia、Fusarium等）和有益微生物（Sphingomonas、Gemmatimonas、Pseudomonas、Lysobacter、Streptomyces、Trichoderma、Gibberella、Chaetomium等）的相对丰度在青枯病发生阶段明显升高。与移栽前相比,属水平上根际土壤细菌群落结构于移栽后75 d和100 d,真菌群落结构于移栽后50 d和75 d发生明显改变。     

不同覆盖方式下烤烟根际土壤养分含量与酶活性的动态变化

研究了不同覆盖栽培方式对烤烟根际土壤养分含量及酶活性动态变化的影响,结果表明:覆盖处理相对裸地栽培在全生育期内都不同程度地提高了根际土壤速效氮、磷、钾和有机质的含量及根际土壤过氧化氢酶、脲酶和蔗糖酶活性;其中,烟株生长前期覆盖地膜,后期揭膜覆秸这种方式全生育期内根际土壤养分变化较为符合烤烟生长的需肥规律,并且根际土壤过氧化氢酶活性的提高减轻了大田生育期内H2O2对烤烟的毒害,脲酶和蔗糖酶活性的变化不仅有利于烤烟生长前期土壤养分的转化吸收,而且有利于烤烟后期的正常成熟采收。     

防治烟草花叶病的药剂试验

室内分别以TMV和CMV的枯斑寄主心叶烟和苋色黎为测试寄主，采用全叶法接种，对接种叶片分接种前和接种后半叶法涂几种病毒抑制剂，结果表明，病毒敌无论在接种前后涂施，对TMV和CMV都有较好的抑制效果，接种前在心叶烟和苋色黎上抑制率分别为69.20%和68.06%，接种后抑制率分别为67.20%和42.86%；植病灵和病毒A在接种前涂施对TMV和CMV均有较好抑制效果。达到62%（在46.74%-62.11%之间）；接种后涂施抑制效果较差，小区和大田试验选用4种病毒抑制剂，对烟草蚜传病毒进行大田防治试验，结果表明，20%病毒敌可湿性粉剂500倍液防治效果最好，能有效地抑制病毒的侵染，推迟病毒的发生时期，减慢病情的发展速度，平均防治效果为58.4%，其次为金叶宝防效为51.4%，2种药剂的防治效果差异达到极显著，介于匀极显著地高于其它几种供试药剂。     

云南省烟草根结线虫发病土壤生态因子分析

采集云南省主要植烟区24个县共106个烟草根结线虫发病土样,每个县以1个土样为代表,分别测定其真菌、细菌和放线菌的总量及类群数。结果看出,不同土样中真菌、放线菌总量相差达到2个数量级,细菌相差达到3个数量级,在不同土样的各类微生物种类组成上真菌为3~10类,细菌为2~13类,放线菌为4~10类。对这些样品土壤pH、有机质、碱解氮、有效磷、速效钾、Ca、Mg、Al等主要营养元素的测定结果表明,不同样品pH在5.03~8.64之间,有机质含量在1.50%~7.01%之间,碱解氮在63.8~314.3mg/kg之间,有效磷在11.2~221.2mg/kg之间,速效钾在74.6~1313.4mg/kg之间,Ca离子含量在0.20%~10.54%之间,Mg离子含量在0.08%~4.56%之间,Al离子含量在1.52%~12.79%之间。研究结果表明,云南省烟草根结线虫发病土壤的各种生态因子存在明显的多样性和复杂性。      

烟草花叶病毒强、弱毒株对烟草植株的影响

分别接种烟草花叶病毒强毒株（TMV-W）、诱变获得的两个弱毒株（TMV-017、TMV-152）于普通烟（品种为K326）。间接ELISA法测定了强，弱毒株在接种叶上的增殖速率，同时考察了叶绿素a、叶绿素b，叶绿素，可溶蛋白含量的变化。实验发现强毒株在接种后第2d就可检测到，而弱毒株在第3d被检测到，弱毒株在烟草植株体内的稳定浓度低于强毒株，分别受强，弱毒株侵染的烟草叶片中的叶绿素a,叶绿素b，叶绿素含量都有所下降，但强毒株引起的下降幅度最大。受强，弱毒株分别侵染的烟叶中可溶性蛋白含量均发生变化，初期都有所升高，之后，弱毒株随着侵染时间的延长而有所下降，而强毒株下降后又有所回升。     

连作烟草根际土壤化感潜力评价及化感物质鉴定

以不同植烟年限的烟草根际土壤为材料,设置6个不同浓度的土壤水浸提液处理,分别对莴苣和烟草进行生物测试,同时用2g· mL-1的正已烷、乙酸乙酯、氯仿、丙酮和甲醇5种不同极性有机溶剂根际土壤浸提液进行化感潜力评价;采用气相色谱和质谱联用技术(GC-MS)鉴定烟草根际土壤甲醇浸提液所含的有机化合物.结果表明:(1)烟草根际土壤水浸提液对莴苣和烟草胚根生长的影响表现为低促高抑的双重浓度效应,并且随着种植年限的增加抑制作用增强.(2)浓度为2g·mL-1的烟草根际土壤甲醇浸提液对莴苣和烟草胚根的生长抑制作用最强,正已烷、氯仿、乙酸乙酯土壤浸提液基本上无抑制现象.(3)鉴定了不同种植年限烟草根际土壤甲醇浸提液中所含的有机化合物,其中种植1年、种植3年的烟草根际土壤甲醇浸提液中存在烷烃、醇、酮、酸、酯、酚、萜烯类以及多环芳烃等有机化合物.     

接种PVY^N后烟草叶片SOD活性和MDA含量变化研究

对接种马铃薯Ｙ病毒脉坏死株系后烟草叶片内超氧化物岐化酶活性及其同工酶谱带和丙二醛含量进行了分析。结果表明,接种ＰＶＹＮ后烟草叶片内超氧化物岐化酶活性发生明显变化,接种后１４ｄ内其活性值均较对照增高,其中接种后第８ｄ达高峰值,约比对照增加７２．３％,１４ｄ后超氧化物岐化酶活性开始下降,至接种后１６ｄ约低于对照２８．０％。接种后ＳＯＤ同工酶谱带与对照相比差别不大,仅在接种后第８ｄ出现了一条新带。接种后烟草叶片内丙二醛含量逐渐增加。     

毛细管气相色谱法测定烟草中的亚硝胺

N-亚硝胺是烟草和卷烟烟气中一类重要的具有毒性和致癌性的化学成分。卷烟主流烟气中的N-亚硝胺一半左右直接来源于烟草,而其余则来源于抽吸过程中的热合成作用。我们研究开发了一种配备氮磷检测器的毛细管气相色谱方法来同时测定烟草中挥发性的亚硝胺(VNA)和烟草特有的亚硝胺(TSNA),主要过程包括将烟草样品在柠檬酸磷酸氢二钠缓冲液中超声波萃取,然后将萃取液在硅藻土层析柱上进行固相萃取,浓缩液用DB-5毛细管柱进行气相色谱分析。该方法具有操作简便快速,重复性好,无需专用仪器等特点,适用于各种烟草样品中亚硝胺的分析      

分光光度法测定烟草中的硝酸盐

采用醋酸溶液提取烟丝中的ＮＯ３,锌粉作还原剂,硝酸盐试剂作显色剂,建立了一种测定烟草中硝酸盐的分光光度法。该法简便、灵敏、准确、准确,线性范围为０ ．１－０．６μｇ／ｍＬ,平均回收率为９５．５％,用该方法测定了９种卷烟烟丝中的硝酸盐含量,将测定结果与相应烟气焦油中的Ｎ－亚硝胺量作比较,发现二者呈正相关。     

Identification of polyphenols in tobacco leaf and their antioxidant and antimicrobial activities

Crude polyphenols were extracted from tobacco leaf by 80% ethanol solution with ultrasonic treatment and then purified by a macroporous resin. The polyphenols from tobacco leaf (PTL) were subjected to analyses by reverse-phase high-performance liquid chromatography (RP-HPLC) and electrospray ionization mass spectrometry (ESI-MS). The dominant polyphenols in tobacco leaf were identified as chlorogenic acid and rutin. Furthermore, the antioxidant activities of PTL were investigated, including scavenging activities of 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radicals (5.02 μg/ml IC₅₀ value), hydroxyl radicals (49.6 μg/ml IC50 value) and superoxide anion radicals (44.0 μg/ml IC₅₀ value), inhibition activity of lipid peroxidation (132 μg/ml IC₅₀ value) and reducing power. The proliferation inhibition activities on Escherichia coli, Staphylococcus aureus and Bacillus subtilis were also measured for evaluating the antimicrobial activity of PTL. The diameters of inhibition zones were 20.23 ± 0.42, 17.66 ± 0.86 and 12.89 ± 0.29 mm, respectively. The results showed that PTL had great potential as antioxidant and antimicrobial agent.     

感染赤星病烟草叶际细菌的多样性分析

为揭示田间感染赤星病烟草叶际细菌属水平上的多样性,提取了感病烟叶样品DNA,PCR扩增样品的16S区,采用IonS5XL高通量测序技术对扩增片段测序,并对其细菌群落结构进行分析。结果表明,田间感赤星病烟草叶片叶际细菌群落结构较为典型。在门水平上,优势菌门为变形菌门Proteobacteria(71.59%);属水平上,优势菌为泛菌属Pantoea(31.23%)、假单胞菌属Pseudomonas(22.44%)、甲醇杆菌属Methylobacterium(6.17%)、鞘氨醇单胞菌属Sphingomonas(6.02%)、Aureimonas(2.08%)、Falsirhodobacter(1.35%)。因此,感烟草赤星病叶片叶际优势细菌属为泛菌属和假单胞菌属。     

植物激活蛋白对烟草抗病促生和品质的影响

本文研究了植物激活蛋白对烟草花叶病毒病的盆栽和田间诱抗效果以及激活蛋白对烟草生长和品质的影响。结果表明:植物激活蛋白能显著诱导烟草抑制花叶病的发生和发展,枯斑抑制率达70.18%;小区第2次和第3次处理后7d调查的诱抗效果分别达48.49%和53.7%,与菌克毒克效果相当,高于抑毒星;大田施药后20d和45d后调查的诱抗效果分别达72.87%和73.4%植物激活蛋白能明显促进烟草生长,表现为株高,留叶数和叶面积增加,其中株高增长7.42%,中上部叶面积分别增加10.35%和14.8%;激活蛋白对烟叶品质有较明显的影响,其中可溶性糖、还原性糖、蛋白质含量以及施木克值比对照高,其化学物质含量符合优质烤烟质量指标,对改善烤烟品质有明显作用。