酸性蛋白酶和纤维素酶联合水解蘑菇柄蛋白的研究

对蘑菇柄蛋白采用纤维素酶与酸性蛋白酶双酶联合水解处理,探索出最适工艺条件为先加纤维素酶,温度50℃,pH 4.5,固液比1∶9,酶用量9.0%,水解时间4 h;后加酸性蛋白酶:温度42℃,pH 3.2,酶用量9.0%,水解时间3 h。双酶联合水解后蘑菇蛋白水解率可达51%。     

小龙虾虾壳蛋白酶解条件的研究

文章主要介绍了以单酶、双酶协同分步酶解虾壳、虾头,以脱蛋白率(PR,%)为试验的衡量指标,对pH值、酶解温度、酶解时间、酶加量等试验条件进行考察。结果表明:胃蛋白酶的最优水解条件为pH值3.0,温度40℃,酶加量0.2%,水解时间4h,酶解液中蛋白质含量为4.243mg/mL,脱蛋白率最高达53.9%;碱性蛋白酶的最优水解条件为pH值7.5,温度55℃,酶加量0.3%,水解时间4h,酶解液中蛋白质含量为4.855mg/mL,脱蛋白率最高达61.9%;双酶协同分步酶解最优条件为碱性蛋白酶酶解3h(pH 7.5、温度40℃、酶加量0.3%),胃蛋白酶酶解1h(pH 3.0、温度40℃、酶加量0.2%),脱蛋白率为86.1%,酶解液中蛋白质含量为6.715mg/mL。     

酶法水解小麦蛋白技术的研究

本文研究了小麦蛋白的酶法水解工艺,分析了水解时间、酶用量、底物浓度、水解温度及pH值等因素对小麦蛋白水解度的影响,得出酶法水解小麦蛋白的最佳反应条件为:底物浓度5%,酶用量50LAPU/g,水解时间6h,水解温度50℃,pH值6.0。     

牡蛎鲜肉双酶酶解工艺研究

考察牡蛎鲜肉的双酶酶解工艺方法。采用单因素试验法考察影响酶解效果的主要因素,采用正交试验法对酶解时间、酶解温度、加酶量和酶解pH值进行优选,确定牡蛎鲜肉双酶酶解的最佳工艺条件。结果表明：牡蛎鲜肉双酶酶解最佳工艺条件为在底物浓度为20%,采用2.0%的胰蛋白酶和2.0%的碱性蛋白酶,酶解温度为45℃,酶解pH值为8.0,酶解时间为3h,牡蛎鲜肉的水解度可达40%。结论：优选出的牡蛎鲜肉双酶酶解工艺条件合理、可行,提取效率高。     

牡蛎蛋白的纯化及酶解条件的研究

本文利用(NH4)2SO4分级沉淀,透析脱盐,DEAE52纤维素柱层析对牡蛎蛋白质进行分离纯化,通过SDS凝胶电泳可知,55%饱和度的(NH4)2SO4沉淀可获得以牡蛎特征蛋白为主的纯化蛋白,其分子量约为55kD.在酶解实验分别采用胃蛋白酶、胰蛋白酶来进行,考察不同条件对水解度的影响.结果是胃蛋白酶酶解的最适酶用量为3%,pH2,温度40℃,水解时间5h,料水比为1:4;而胰蛋白酶的最适酶用量为2%,pH8,温度45℃,水解时间6h,料水比为1:3.     

双酶法制备低苦味大豆寡肽的研究

利用中性蛋白酶和Flavourzyme双酶法,对大豆分离蛋白进行水解制备大豆寡肽,讨论中性蛋白酶和Flavourzyme的最佳酶解条件,以及大豆寡肽的苦味值变化。大豆分离蛋白的预处理条件为温度90℃、时间10min;中性蛋白酶的最佳酶解条件为底物浓度4%、反应温度50℃、时间4h、pH8.5、酶用量6%,水解度(DH)可达21.46%;Flavourzyme的最佳酶解条件为反应温度50℃、时间6h、pH7.0、酶用量3%。采用双酶中性蛋白酶-Flavourzyme生产的大豆寡肽,苦味明显降低。     

牡蛎水解蛋白制备及脱腥技术研究

利用Alcalase碱性蛋白酶水解牡蛎制备牡蛎水解蛋白,并采用活性炭和美拉德反应对牡蛎蛋白酶解液进行脱腥。研究表明,Alcalase碱性蛋白酶水解牡蛎制备牡蛎水解蛋白的最佳酶解条件为:酶用量13.34 mkat/L,水解温度65℃,pH 8.0,水解时间2.5 h,此条件下牡蛎蛋白的水解度为40.38%;活性炭和美拉德反应对牡蛎蛋白酶解液腥味脱去均有一定效果,同比采用美拉德反应对酶解液脱星效果更好,以葡萄糖作为美拉德反应还原糖,其脱腥的最佳条件为:添加量3.0%,反应温度100℃,反应时间30 min。     

双酶复合酶解制备花生短肽研究

该试验以水解度和蛋白质提取率作为评价指标,研究了碱性蛋白酶和风味蛋白酶双酶对花生蛋白酶解特性的影响。通过单因素和正交试验确定了双酶的最佳酶解条件为:酶解时间3 h、pH 9.0、温度55℃、酶比例(碱性蛋白酶:风味蛋白酶)为2∶3,总酶浓度5.0×103 U/g、底物浓度5%,花生蛋白的水解度(DH)达12.02%,蛋白提取率71.60%,多肽得率达59.58%。同时研究了双酶酶解过程中花生蛋白水解度、pH及蛋白提取率的变化规律。     

双酶分步水解制备菜籽蛋白肽

实验选取Alcalase 2.4 L碱性蛋白酶和复合风味蛋白酶分步水解菜籽蛋白。结果表明双酶分步水解制备菜籽肽的最佳工艺为Alcalase碱性蛋白酶在pH值9.5,温度55℃,底物质量分数3%,酶活性5 500 u/g条件下酶解5.5 h,水解度为21.14%,再用复合风味酶在pH值6,温度50℃,酶活性900 u/g条件下继续酶解3 h。单因素试验和正交实验研究粗肽液用活性炭脱色的优化条件为:在活性炭质量分数1.5%,pH值4.5,温度55℃条件下脱色50 min,脱色率达32.15%,氨基酸损失率为25.15%。     

碱性蛋白酶水解脱除蛋白的橡子淀粉分离工艺条件优化

为优化碱性蛋白酶水解蛋白的橡子淀粉提取工艺条件,选择酶解时间、温度、pH值、酶用量等因素进行单因素试验和正交试验,确定了适宜的橡子淀粉提取工艺条件。结果表明,碱性蛋白酶水解去除蛋白的pH值和酶解温度对橡子淀粉中总淀粉含量的影响较大,影响程度依次为pH值〉酶解温度〉酶解时间〉酶用量;碱性蛋白酶水解去除蛋白的适宜工艺条件为pH值为11、酶解温度为45℃、酶解时间为140 min、酶用量为600 U/g。结合1%双氧水漂白处理12 h后,橡子淀粉中的蛋白未检出。     

酶法制备联合Plastein反应修饰牡蛎ACE抑制肽工艺优化

以牡蛎为原料,采用酶解联合Plastein反应修饰的方法,获得高活性血管紧张素转换酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制肽。以ACE抑制率和水解度为指标,对比胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶这5种蛋白酶对牡蛎肉的酶解效果,筛选出木瓜蛋白酶最佳。通过单因素试验和正交试验对酶解工艺进行优化,得到最佳酶解工艺为料液比1∶8(g/m L)、加酶量2.0%、温度65℃、时间1.0 h、pH6.0,此条件下酶解产物的ACE抑制率可达到63.30%,在此基础上采用Plastein反应对酶解产物进行修饰,以游离氨基酸减少量和ACE抑制率为指标,考察反应过程中酶种类、底物质量分数、加酶量、时间和温度对修饰结果产生的影响。通过该反应的修饰,得到选用中性蛋白酶、底物质量分数40%、加酶量1.0%、温度30℃、时间2.5h、pH7.0时,ACE抑制率最高可达82.31%,比修饰前提高了19%。     

响应面法优化酸酶结合法水解牡蛎肽工艺

以牡蛎为原料,选用酸酶结合法对其进行深度酶解,以水解度指标,通过单因素实验考察了不同种类酸溶液、酸解pH、酸解温度、酸解时间、酶添加量、酶解pH、酶解温度和酶解时间对牡蛎深度酶解的影响,采用Box-Benhnken试验对牡蛎深度酶解工艺进行优化。结果表明:酸酶结合法水解牡蛎肽的最优工艺参数为:醋酸酸解、酸解pH4.5、酸解温度50℃、酸解5 h后,选择胰蛋白酶与风味蛋白酶(质量比为2:1)酶解、添加量0.75 g/kg、酶解pH10、酶解时间3 h、酶解温度60℃,在此条件下可得到水解度为36.25%±0.63%的牡蛎肽。     

利用牡蛎制备ACE抑制肽的工艺优化

运用正交试验和响应面法优化牡蛎血管紧张素转换酶(angiotensin-Ⅰconverting enzyme,ACE)抑制肽的分步酶解制备工艺。采用复合蛋白酶和碱性蛋白酶对牡蛎进行分步酶解,以十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)分析和ACE抑制率为考核指标优化工艺参数。结果表明,第1步复合蛋白酶最佳工艺参数为:料液比1∶4、加酶量1.2%、pH 7.0、反应温度50℃、酶解时间1 h;第2步碱性蛋白酶最佳工艺参数为:加酶量0.42%、pH 8.3、反应温度53℃、酶解时间73 min。凝胶过滤色谱法测得牡蛎酶解液分子质量在3 000 D以下小肽所占比例为99.72%,其ACE抑制活性IC50为0.8 mg/mL。同时,氨基酸组成分析表明,牡蛎肽中Glu含量最高,Cys含量最低;必需氨基酸和疏水性氨基酸含量分别占总氨基酸的36.6%和37.2%。本研究制备的低分子质量、高ACE抑制活性牡蛎肽,可为牡蛎资源的开发利用提供理论参考。     

水酶法提取榛子蛋白工艺优化

以榛子仁为原料,利用Alcalase碱性蛋白酶水解,进而提取榛子蛋白。以榛子仁总蛋白提取率为指标,对影响因素进行研究。在单因素试验的基础上采用响应面法优化工艺条件,得到最佳酶解条件：加酶量2.0%、温度55℃、酶解时间2.5h、料水比1:5(g/mL)、pH8.9。由F检验可得因素贡献率为x1＞x2＞x4＞x5＞x3,即加酶量＞酶解温度＞料液比＞酶解pH值＞酶解时间。     

复合酶法制备葛根多孔淀粉

使用α-淀粉酶与糖化酶复合制备葛根多孔淀粉。通过单因素试验,对多孔淀粉吸油率进行考察,研究其品质特性随加酶量、酶配比、pH值、酶解时间和酶解温度等变化的规律。并由正交试验得出最佳工艺条件,当加酶量0.6%、酶解时间12h、pH5.0、酶解温度50℃、酶质量比(糖化酶:α-淀粉酶)3:1时吸油率最高(60%),且成孔效果良好。     

花生多肽的制备及纯化的研究

用AS1.398 中性蛋白酶水解花生蛋白得到花生多肽粗品,对影响花生蛋白水解的各种影响因素,如酶制剂的筛选,酶解工艺参数等进行了系统研究,得到最佳工艺条件为：pH6.7、反应温度50℃、酶解时间2.5h、加酶量为6500U/g 底物。超滤截取相对分子量小于5kD 和3kD 以下的两部分,冷冻干燥后用Sephadex G-25 柱层析分别得到两个和一个活性峰。在三甲基甘氨酸SDS- 聚丙烯酰胺凝胶电泳上显示单一条带的纯品。相对分子量分别在6.5kD 和 2kD 左右。     

响应面法优化复合酶辅助超声波提取柚子皮总黄酮工艺

本研究以马家柚柚子皮为研究对象,采用复合酶法辅助超声波法优化了柚子皮中总黄酮的提取工艺。首先研究复合酶(纤维素酶:果胶酶)的配比、复合酶的用量、pH、料液比、酶解温度、酶解时间、超声功率和超声时间共8个要素因子对柚子皮中总黄酮得率的影响。在此基础上,先选用Plackett-Burnman试验设计确定了具有显著性影响的因子为:复合酶的用量、酶解温度、超声功率和超声时间,再选用Box-Behnken试验设计优化了柚子皮中的总黄酮提取条件。结果表明,酶法辅助超声波法提取柚子皮中总黄酮的提取条件为:复合酶的配比(纤维素酶:果胶酶)为3:2、复合酶的用量1.70%、pH4.5、料液比1:20 g/mL、酶解温度55.0℃、酶解时间60 min、超声功率183.00 W、超声时间41.00 min,在此条件下柚子皮中总黄酮得率为2.19%。     

Box-Behnken法优化双酶协同水解牡蛎蛋白工艺

为获得高质量的牡蛎酶解液,以氨基氮的含量为检测指标,利用Box-Behnken分析法进行了中性蛋白酶和风味蛋白酶协同水解牡蛎蛋白工艺的优化。结果表明:最优酶解条件为温度51.7 ℃、加酶量4.7%、pH7.4、中性蛋白酶和风味蛋白酶添加量之比1:1、酶解3 h、料水比1:6时,氨基氮含量为8.197 mg/g,与理论值接近,说明优化结果良好。利用HPLC法测得酶解液中丝氨酸、组氨酸、精氨酸等含量较高,还含有牛磺酸,并且酶解液中必需氨基酸的百分比含量基本符合WHO/FAO标准氨基酸模式为牡蛎的进一步开发利用提供了一定的理论依据。     

响应面法优化酶解花椒籽蛋白制备降血压肽工艺

利用响应面法优化酶解花椒籽蛋白制备降血压肽的工艺条件。采用不同蛋白酶水解花椒籽蛋白,以酶解物对血管紧张素转换酶（angiotensin converting enzyme,ACE）抑制率为指标,筛选出制备花椒籽蛋白降血压肽的最佳蛋白酶。在单因素试验基础上,根据Box-Behnken中心组合试验设计原理,考察酶解时间、加酶量、酶解温度和pH值对血管紧张素转换酶抑制率的影响。结果表明：回归模型能较好地反映各因素水平与响应值之间的关系,并获得酶解花椒籽蛋白制备降血压肽的最佳工艺条件为：底物质量浓度3 g/100 mL、酶解时间4.9 h、加酶量10 200 U/g、酶解温度37.4 ℃、pH 6.9,在此条件下,所得酶解产物的ACE抑制率为68.00%。     

响应面法优化豆豉蛋白酶解工艺

以豆豉蛋白为原料,选用木瓜蛋白酶与复合风味酶分步水解制备豆豉蛋白水解物。通过单因素试验和响应面分析,确定了木瓜蛋白酶的水解条件为:反应温度62.93℃、pH7.49、酶/底物4.91%、底物浓度5.48%,在此条件下水解5h;木瓜蛋白酶水解液再加入复合风味酶酶解,优化的水解条件为:在pH6.0,酶/底物为3%,55℃条件下反应3h,豆豉蛋白最终水解度达到28.37%。