基于乳清蛋白粉水解产物抗氧化活性优化酶解工艺

通过提高乳清蛋白粉水解产物(Whey protein powder hydrolysate,WPPH)的抗氧化活性,对乳清蛋白粉的酶解工艺进行优化。首先以WPPH水解度及抗氧化活性(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率、羟自由基清除率、总抗氧化能力)为指标,从4种蛋白酶中筛选得到酶解效果较好的胰蛋白酶和菠萝蛋白酶。然后通过单因素与正交试验确定双酶协同水解乳清蛋白粉的最适酶解条件。结果表明:复合酶最优酶解条件为菠萝蛋白酶和胰蛋白酶以1:1的比例同时添加,pH6.0、温度50℃、酶底比0.3%、底物浓度3 g/100 mL、酶解时间2.5 h,在此条件下WPPH水解度达到34.24%,分子量低于1000 Da的肽段占比在50%以上,DPPH自由基清除率91.42%±0.51%、羟自由基清除率80.85%±0.47%、总抗氧化能力(46±0.65)μmol/L。在本研究确定的酶解工艺条件下,乳清蛋白粉水解产物具有较强的抗氧化活性,在天然抗氧化剂和保健食品领域有一定的开发利用价值。     

花生蛋白酶水解产物抗氧化活性研究

利用蛋白酶水解花生蛋白并对水解产物的抗氧化活性进行研究.采用中性蛋白酶AS1.398和低温高碱性蛋白酶水解花生蛋白,AS1.398的水解条件为:温度55℃,pH6.5,底物浓度5.0%,酶用量1.0%,水解时间6 h;碱性蛋白酶的水解条件为:温度40℃,pH7.5,底物浓度5.0%,酶用量2.0%,水解时间6 h.在此条件下进行水解、灭酶、离心除去不溶性的成分,水解产物冷冻干燥.酶水解产物的抗氧化活性用油脂的过氧化值进行评价.产物添加到猪油中,65℃恒温保存30 d,每隔一定时间取样测定其过氧化值.Rancimat也用于评价花生蛋白酶水解产物的抗氧化活性,添加不同的酶水解产物后测定样品的氧化诱导期,用诱导期作为花生蛋白酶水解产物的抗氧化活性的评价指标.研究结果表明,花生蛋白酶水解产物具有一定的抗氧化性能.     

乳清蛋白酶解物的抗氧化活性研究

研究在不同的酶种类、[E/S]、酶解时间下,乳清蛋白酶解物的抗氧化活性。结果表明,在胃蛋白酶37℃,[E/S]为0.15%,水解温度水解时间2 h;胰蛋白酶[E/S]为0.4%,水解温度50℃,水解时间2 h的条件下,乳清蛋白的酶解物有较强的抗氧化活性。     

乳清蛋白抗氧化肽的制备及体外抗氧化活性研究

采用酶解法制备乳清蛋白抗氧化肽并研究其体外抗氧化活性。结果表明:以羟自由基清除率和多肽含量为指标,筛选出中性蛋白酶为最优酶;在单因素试验的基础上,通过响应面试验确定最佳酶解条件为pH 5. 50、酶解温度65℃、酶解时间1. 65 h、底物质量分数5%、加酶量5 000 U/g,此条件下乳清蛋白抗氧化肽对羟自由基清除率为74. 54%;乳清蛋白抗氧化肽对羟自由基、ABTS+自由基、DPPH自由基和超氧阴离子自由基都具有较好的清除能力,IC50值分别为2. 174、0. 709、2. 813mg/m L和4. 579 mg/m L。表明乳清蛋白抗氧化肽具有较强的体外抗氧化活性,具有一定的开发利用价值。     

乳清蛋白水解物抗氧化活性的研究

本实验主要研究了乳清蛋白的碱性蛋白酶水解产物在不同体系中的抗氧化活性。通过测定水解物对卵磷脂脂质氧化体系的硫代巴比妥酸值(TBARS)抑制作用、过氧化值(PV)的抑制作用、亚铁还原能力、金属离子螯合能力、DPPH 自由基清除能力,研究乳清多肽的抗氧化活性。结果表明,底物浓度为5%、蛋白酶量的添加量为2%、水解时间为5h 时乳清蛋白的水解物具有最强的抗氧化能力;碱性蛋白酶制备的乳清蛋白水解物的抗氧化能力与底物浓度、水解时间、溶解度等有关。     

乳杆菌A-2的乳清分离蛋白水解产物的抗氧化活性评价

为了评价以乳清分离蛋白为底物制备的乳杆菌A-2静息细胞水解产物的抗氧化活性.采用单因素实验优化乳杆菌A-2静息细胞水解非热处理的乳清蛋白的条件、ORAC(Oxygen Radical Absorption Capacity)法评价不同水解产物的抗氧化活性.结果表明,乳杆菌A-2静息细胞在pH7.0、培养温度在39℃的条...     

干酪乳清酶解产物对小鼠抗氧化性的影响

研究干酪乳清酶解产物对小鼠抗氧化活性产生的影响。给小鼠灌胃干酪乳清酶解产物样品后,通过测定小鼠肝脏和血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和丙二醛(MDA)三种指标,研究其抗氧化功能。干酪乳清的木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶水解产物可以提高小鼠肝脏和血清中的SOD的含量,与假衰老组差异不显著。乳清的碱性蛋白酶水解产物提高小鼠肝脏和血清中的GSH-PX的含量,差异性显著。乳清的木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶水解产物对雄性小鼠的肝脏和血清中MDA含量影响不著性。用干酪乳清酶解产物喂养小鼠,能明显增强抗氧化活性,效果明显优于乳清。     

干酪乳清酶解产物抗氧化肽的分离和纯化

干酪乳清Alcalase 2.4L酶解的最优条件,即酶解时间为2 h、pH 9.5、酶与底物比为4%、酶解温度为50 ℃。利用超滤、葡聚糖凝胶层析和三羟甲基氨基甘氨酸-十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（tricine-sodiumdodecyl sulfate-polyacrylamide gelelectrophoresis,tricine SDS-PAGE）等方法从干酪乳清中提取抗氧化性蛋白肽。分别考察操作压力、料液温度、料液pH值、操作时间对超滤膜膜通量的影响。乳清酶解物超滤的最佳条件为：压力0.25 MPa、温度30 ℃、时间120 min、初始pH 9.0。分子质量4 000～6 000 D肽的水解液脂质过氧化抑制率最高,达到47.28%。利用Sephadex G-50型葡聚糖凝胶进行纯化,将分离的组分进行Tricine-SDS-PAGE分析和脂质过氧化抑制率的测定。第34管洗脱液的脂质过氧化抑制率最高,分子质量范围为4 000～4 100 D。     

苦荞蛋白水解过程及其水解产物抗氧化活性的初探

阐述了以多肽浓度和水解度（DH）为评价指标,采用木瓜蛋白酶将苦荞麦蛋白水解成为低分子量的苦荞麦多肽的过程。分别对加酶量、pH、固液比、温度、酶解时间五个因素对木瓜蛋白酶酶解效果的影响进行了研究,确定出其适宜工艺条件;并采用亚油酸-硫氰酸铁法确定所制得的苦荞麦多肽液在脂类中的抗氧化活性。      

苦荞蛋白水解过程及其水解产物抗氧化活性的初探

阐述了以多肽浓度和水解度(DH)为评价指标,采用木瓜蛋白酶将苦荞麦蛋白水解成为低分子量的苦荞麦多肽的过程。分别对加酶量、pH、固液比、温度、酶解时间五个因素对木瓜蛋白酶酶解效果的影响进行了研究,确定出其适宜工艺条件;并采用亚油酸-硫氰酸铁法确定所制得的苦荞麦多肽液在脂类中的抗氧化活性。     

保加利亚乳杆菌对乳清水解物抗氧化性的影响

通过测定乳清水解物及其发酵液清除羟基自由基、1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH)的能力,抑制脂类氧化和螯合金属离子的能力来评价其抗氧化活性。采用保加利亚乳杆菌对乳清水解物进行发酵可以使抗氧化性提高11.9%～37%。活细胞、细胞裂解液中的抗氧化物质、胞外代谢产物的抗氧化性是发酵液抗氧化性提高的原因。研究结果表明,与蛋白酶直接作用的乳清水解物相比,加入保加利亚乳杆菌可以改善乳清水解液的抗氧化活性,乳酸菌发酵的乳清水解液可以作为天然的抗氧化剂来改善食品的品质。     

Production of low antigenic cheese whey protein hydrolysates using mixed proteolytic enzymes

This study examined the effect of different proteolytic enzymes on the production of cheese whey protein (CWP) hydrolysates with low antigenicity. Four enzyme combinations (1:1) trypsin + papain W‐40 (TP), trypsin + neutrase 1.5 (TN), papain W‐40 + protease S (PP) and papain W‐40 + neutrase 1.5 (PN) were added at the rate of 1% of the CWP and it was incubated for 15, 30, 60, 90, 120 and 180 min at 50 °C. CWP hydrolysis and its non‐protein nitrogen concentrations were higher with TP and TN compared with PP and PN at all incubation times. The SDS‐PAGE revealed complete removal of α‐lactalbumin (α‐LA) and β‐lactoglobulin (β‐LG) from hydrolysates produced by trypsin‐containing enzyme mixtures. Reverse‐phase HPLC analysis ascertained the CWP hydrolysis and SDS‐PAGE results. The lowest antigenicity in CWP hydrolysates was observed with the use of trypsin‐containing enzyme mixtures compared with other enzyme combinations. Present results suggested that TP and TN combinations were the most effective for CWP hydrolysis for the removal of β‐LG from CWP. Further research is warranted to identify the peptides in CWP hydrolysates produced with these enzyme combinations that may help enhance the utilisation of whey protein in human food. Copyright © 2007 Society of Chemical Industry     

复合蛋白酶水解玉米谷蛋白产物的抗氧化活性研究

以玉米谷蛋白为原料,利用复合蛋白酶对其进行限制水解,探讨不同水解时间所获得的谷蛋白酶解物的分子量分布和抗氧化活性。结果表明:不同水解时间获得的酶解物分子量分布差异较大。水解时间为120min的酶解物中,分子量分布为6 511.51~307.32Da的肽段占94.36%,此时获得的酶解物的抗氧化活性最高,其对DPPH自由基、O-2·、·OH的清除率分别为58.86%,82.64%,37.21%;还原力为0.236;与亚铁离子的螯合能力为29.92%。     

乳清蛋白酶解条件优化

用二次回归正交旋转组合设计对乳清蛋白酶解条件进行优化,建立酶法水解乳清蛋白的水解度与水解温度、水解时间、加酶量等三因素的正交回归模型。结果表明:在反应温度57℃、加酶量8 214U/g·蛋白条件下酶解114min,可获得中性蛋白酶水解乳清蛋白的最大水解度11.72%,与模型值基本相符。     

Antioxidant activity of hydrolysates derived from porcine plasma

BACKGROUND: In China alone, more than 400 million pigs are slaughtered each year to provide meat. Porcine blood is rich in proteins but is usually discarded, which can cause environmental contamination. Recovering porcine blood and converting it to high‐value products is therefore economically and environmentally desirable. However, very little information on antioxidant peptides from porcine blood by‐products is currently available. In this study the antioxidant properties of porcine plasma hydrolysates PPE and PPA prepared with pepsin and papain respectively were investigated. RESULTS: Both PPE and PPA showed excellent antioxidant activity in a linoleic acid system (AL) compared with α‐tocopherol (VE) at the same concentration (P < 0.01). Their activities were respectively 3.33 and 1.83 times stronger than that of VE at a concentration of 10 µg mL^?1 and 5.4 and 5.6 times stronger at 100 µg mL^?1. The 2,2‐diphenyl‐1‐picrylhydrazyl (DPPH) radical‐scavenging activity (DRSA) reached 48.4 and 43.1% for PPE and PPA respectively at 500 µg mL^?1. The ferrous ion‐chelating power (FICP) of PPE at 100 µg mL^?1 was about 1.5 times stronger than that of 10 µmol L^?1 ethylene diamine tetraacetic acid (EDTA) in a 50 µmol L^?1 Fe²⁺ system, whereas the FICP of PPA at 100 µg mL^?1 was 61% that of 10 µmol L^?1 EDTA. Furthermore, PPE was separated on Resource 15RPC and Superdex peptide 10/300GL columns, and the antioxidant activity of the peptides and its relationship to their polarity and molecular weight (MW) were analysed. The hydrolysate was divided into four groups (R1–R4) with hydrophobicities ranging from weak to strong by Resource 15RPC, while it was divided into three groups (S1, MW 7–12 kDa; S2, MW 3–7 kDa; S3, MW 1–3 kDa) by Superdex peptide 10/300GL. CONCLUSION: The results showed that AL was significantly and positively correlated with the relative amounts of R1, S2 and S3 and that DRSA was dependent on R3 and S1. The fractions of PPE were not responsible for FICP. Copyright © 2009 Society of Chemical Industry     

酶法生产乳清多肽饮料

采用碱性蛋白酶水解乳清多肽,制备具有较好热稳定性的可溶性多肽混合物,然后以其为母液,生产乳清多肽饮料。获得最优水解工艺的最适pH为9.0、最适温度为35℃,乳清中水解度高达25.4%。所研制的乳清多肽饮料无苦味,且具有良好的稳定性。     

酶解对乳清蛋白抗原性影响的研究

研究了酶解对乳清蛋白抗原性的影响。选择了7种常见蛋白酶在同一水解模式下水解乳清蛋白，用竞争ELISA法测定水解物的残留抗原性，从而间接测定其过敏性变化。结果表明，酶解能有效降低乳蛋白抗原性，但水解物仍能与特异抗体反应，保留一部分抗原性。不同酶对乳清蛋白过敏原的影响不同，酶的特异性对乳清蛋白水解物的抗原性有较大的影响，碱性蛋白酶降低乳蛋白抗原性的效果最佳，对抗β-乳球蛋白（β-LG）和抗α-乳白蛋白（α-LA）抗体的抗原性分别降低了50．02％和99．72％。