酶底物法在总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌检测的适用性研究

为探讨酶底物法在三峡库区水质检测中的适用性,用酶底物法对库区地表水、污水厂出水中的总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌进行检测,测定结果 RSD<4%,测定标准菌株结果符合要求,用酶底物法和多管发酵法对不同样品进行比对,结果无统计学意义上的显著性差异(P>0.05),满足水质监测技术要求。     

酶底物法检测粪大肠菌群

文章对检测水中粪大肠菌群的方法进行了探讨。通过采集50种地表水和污水厂水样,分别用酶底物法和多管发酵法进行比较,从检测结果发现,两种方法的数据无明显差异,相关性好。相比之下,酶底物法更加高效、简便、快速、准确、二次污染少,是取代传统方法的发展趋势。     

特定底物技术快速检测水中大肠菌群相关指标

大肠菌群(Coliforms)、耐热大肠菌群(thermotolerant coliforms)和埃希氏大肠杆菌(E.Coli)都是判断水体是否存在粪便污染的重要微生物指标。文中介绍了一种特定底物技术可在 24h之内同时检测大肠菌群和埃希氏大肠杆菌数量,如果提高培养温度至44.5±0.2℃,则可检测耐热大肠菌群数量。     

滤膜法与固定底物酶底物法测定地表水中粪大肠菌群的比较研究

通过比较滤膜法与固定底物酶底物法测定地表水中粪大肠菌群(耐热大肠菌群)的结果和方法,讨论固定底物酶底物法用于监测地表水中粪大肠菌群的可行性。     

酶底物法检测水中总大肠菌群影响因素的探讨

采用酶底物法测定水中总大肠菌群。通过正交实验从样品放置室温时间、培养温度、培养时间和稀释用水等方面探讨酶底物法测定水中总大肠菌群的各种因素的影响。实验表明样品放置室温时间对水中总大肠菌群的测定的影响因素最大,第二为培养温度,第三为培养时间,影响最低的为稀释用水。酶底物法测定水中总大肠菌群的条件为：室温放置时间在20～23 min,培养温度在35.0～38.0℃,培养时间在24～28 h,采用稀释溶液(爱德士公司)、灭菌生理盐水(自配)来稀释样品。     

大肠埃希氏菌荧光定量PCR法与酶底物法相关性分析

针对大肠埃希氏菌国标法中的酶底物法检测时间长的现状,使用荧光定量PCR法和酶底物法同步检测大肠埃希氏菌,并比较分析两种方法检测结果的相关性.结果表明:荧光定量PCR法能检出细菌数为50 CFU/(100 mL)及以上的样品,含量在50～2000 CFU/(100 mL)的大肠埃希氏菌与酶底物法相比具有较高的一致性,相关系数r=0.99,经t检验分析,两种方法的检测结果无差异.荧光定量PCR法具有操作简便和检测时间短的优势,能作为酶底物法的有效补充手段,在实际水样的应急检测中具有较强的应用价值.     

酶底物法在食品中大肠埃希氏菌MPN计数的应用研究

目的：探讨酶底物法在食品中大肠埃希氏菌MPN计数的应用,并对市售的2种酶底物试剂EC-MUG和科立得（Colilert）MMO-MUG进行比较。方法分别用两种酶底物试剂检测菌悬液和对6类食品大肠埃希氏菌MPN计数,同时用参考方法GB 4789.38—2012大肠埃希氏菌MPN计数检测,用McNemar’s检验对结果进行分析。结果 EC-MUG和科立得MMO-MUG酶底物检测菌悬液和6类食品的大肠埃希氏菌MPN计数,与参考方法比较,无统计学差异（χ2=0.01,P﹥0.05）。EC-MUG 和科立得 MMO-MUG 酶底物检测无统计学差异（χ2=0.01,P﹥0.05）;科立得 MMO-MUG酶底物检测结果易判断。结论酶底物法检测食品中大肠埃希氏菌MPN计数方便、快捷,有良好的应用前景。     

酶底物法测定水中耐热大肠菌群的方法验证

目的验证酶底物法可用于生活饮用水、地表水、地下水中耐热大肠菌群的测定。方法通过6家实验单位对生活饮用水、地表水、地下水各30组水样分别用酶底物法和多管发酵法来做比对。结论酶底物法与多管发酵法检测数据存在相关性,且相关程度很高,具有一致性和稳定性。结果酶底物法可应用于生活饮用水、地表水、地下水中耐热大肠菌群的测定。     

固定酶底物法与多管发酵法测定地表水耐热大肠菌群的综合效果比较

通过比较固定酶底物法与多管发酵法的检测效果,为监测站耐热大肠菌群的检测方法选择提供技术支持。2018年11月～2019年3月,选取广州市主要饮用水水源地和水源调查点采集的地表水为样本,用固定酶底物法与多管发酵法两种方法分别对51份水样中耐热大肠菌群进行比对试验检测。结果表明:固定酶底物法与多管发酵法相比,在检测一致性方面无统计学上的显著性差异,但固定酶底物法具有检测时间短、效率高、人力成本较低、结果更加精确、安全性较好等优势,既可作为地表水常规检测方法,又可用作应急、灾害时监测的快速筛查方法。     

滤膜法和Pseudalert酶底物法检测饮用水中铜绿假单胞菌的比较

本文用滤膜法和Pseudalert酶底物法,检测定量质控、实际水样及水样中加标铜绿假单胞菌,对检测结果进行了分析比较.结果表明,两种方法结果具有一致性,酶底物法检测时间短,无需确认实验,操作简单,结果真实可靠.     

《化妆品安全技术规范》（2015年版）耐热大肠菌群检验方法中目标菌的研究

为研究《化妆品安全技术规范》（2015年版）耐热大肠菌群检验方法的目标菌,收集常见耐热大肠菌群的埃希氏菌属、柠檬酸杆菌属、肠杆菌属和克雷伯菌属等4个属的全部54株模式菌株,其中45株为国外引进,采用16S rDNA序列分析和Vitek Compact 2细菌鉴定系统复核鉴定。根据《化妆品安全技术规范》检验方法,将（44.5±0.5）℃双倍乳糖胆盐培养基发酵产酸产气、（36±1）℃伊红美兰琼脂平板培养典型菌落特征和（44.5±0.5）℃靛基质试验阳性设为3项关键判定指标,以1.0×103 CFU·mL-1的起始菌悬液按规范程序进行检验。研究发现,在54株模式菌中,共有4个属的10株菌可在高温下发酵乳糖生长,其中4株为粪源菌,但只有大肠埃希氏菌的3项关键判定指标为阳性。结果表明,在实验样本范围内,上述检验方法的目标菌为具耐热性能的大肠埃希氏菌。     

多管发酵法和酶底物法检测总大肠菌群的结果差异性

多管发酵法和酶底物法检测总大肠菌群的结果差异大小与样品的细菌种类组成有关,而多管发酵法和酶底物法检测原理的不同导致检测的目标菌有一定的差异,也是两者结果差异的根本原因。酶底物法对肠杆菌属中的桑树肠杆菌Enterobacter mori(R18-2)、路氏肠杆菌Enterobacter ludwigii(EN-119)有特异性,而多管发酵法未表现出特异性。酶底物法对阴沟肠杆菌(CICC 21539)表现出一定的迟滞效应。酶底物法可作为生产企业检测控制手段,但用作产品合格检验或仲裁检测时应慎重,统一总大肠菌群的定义是当前亟需解决的问题。     

粪大肠菌群检测方法研究进展

粪大肠菌群是水体粪便污染的指示菌。详细介绍了多管发酵法、滤膜法、纸片法、酶底物法及分子生物学方法检测粪大肠菌群的优缺点及主要应用实例。     

两种品牌大肠菌群酶底物法检测试剂性能的比较

对2种常见大肠菌群酶底物法试剂的性能进行分析比较.通过检测定量质控样品和实际水样,并对阳性结果进行16SrDNA测序分析,结果表明:KLD试剂在检测定量质控及实际水样时,结果真实可靠;而L试剂在检测质控样品时,与真值相对误差较大,检测实际水样时,有假阳性和阳性漏检的风险.通过单因素方差配对T-检测统计分析,P＜0.05...     

酶底物法检测包装饮用水中铜绿假单胞菌方法比对

滤膜法为现行包装饮用水中铜绿假单胞菌测定的国家标准方法,酶底物法测定包装饮用水中铜绿假单胞菌已通过国内外多个标准认证。采用酶底物法与滤膜法对包装饮用水中铜绿假单胞菌进行检测。通过标准菌株加标试验,酶底物法检测包装饮用水中铜绿假单胞菌的方法精密度相对标准偏差为0.8%～9.0%,定量质控样品测定的所有结果均在真值范围内,且方法的相对误差为0.8%。对两种方法检测结果进行统计学分析发现：两种方法在统计学上无显著性差异。与滤膜法相比,酶底物法具有操作简单、结果准确性高、稳定性好等特点,酶底物法可作为评价包装饮用水中铜绿假单胞菌污染的补充方法。     

两种检测水中耐热大肠菌群方法的等效性比较

用多管发酵法和酶底物法检测水源水样本中耐热大肠菌群,比较了两者检测结果的等效性.结果表明,多管发酵法与酶底物法检测水中耐热大肠菌群的结果是等效的.酶底物法可以用作评价水中粪源性微生物污染的可替代方法.     

环境水体中粪大肠菌群检测方法研究进展

粪大肠菌群作为水体粪便污染的指示菌,对地表水的水质监测评价具有重要作用。采取较为精确、快速的粪大肠菌群检测方法,对控制流行疾病的发生和传播有重要的科学意义。文章对检测粪大肠菌群发酵法、滤膜法、酶底物法、纸片法、聚合酶链式反应技术、荧光原位杂交技术等检测方法进行了综述。     

酶底物法检测水中菌落总数培养24h和48h的比较试验

酶底物法于2023年作为新型水中菌落总数检测方法被纳入《生活饮用水标准检验方法第12部分:微生物指标》(GB/T5750.12—2023)中。为便于更加科学规范地使用酶底物法检测生活饮用水中的菌落总数,文章采用酶底物法对80组生活饮用水及水源水的实际样品进行检测,并分析24h及48 h两个不同培养时间的检测结果。检测结果表明:酶底物法24 h培养结果和48 h培养结果差异较大,通过配对t检验分析可知酶底物法24 h培养结果与48 h培养结果P=0.000(<0.05),具有显著的统计学差异,对差异样品进行菌种鉴定发现,部分致病菌使用酶底物法培养24 h无法检出。故酶底物法检测生活饮用水及水源水菌落总数时,培养时间至少为48 h方可满足实验室对生活饮用水及水源水菌落总数的检测要求。