应用絮凝基因表达量分析技术评价酵母菌株的絮凝性

为筛选弱絮凝性酵母菌株YJ085,通过糖抑制实验确定酵母絮凝表型和絮凝基因型,以荧光定量PCR为技术手段,建立酵母基因表达量分析方法,对弱絮凝性酵母菌株生长过程进行转录水平的基因表达量变化评价。在下面酵母发酵过程中,絮凝基因的表达量与酵母增殖数量呈负相关。弱絮凝性酵母菌株YJ085的絮凝表型为New FLO型,通过对不同时间点的发酵液取样,提取酵母RNA,分析得出YJ085与对照菌株在生长过程中絮凝基因的表达量变化,絮凝主要受FLO絮凝基因家族中的FLO5及Lg-FLO1基因调控,FLO1、FLO11表达量在发酵过程始终维持在较低表达量,FLO10基因不表达,经絮凝基因表达量分析发现,YJ085各絮凝基因表达量均小于对照菌株,絮凝基因表达量的变化导致其凝聚性降低了63.98%,从基因层面阐述了菌株凝聚性弱的原因。     

关于啤酒酵母絮凝作用机制的研究概况

酵母絮凝是非常复杂的过程,取决于表达的絮凝基因FLO1、FLO5、FLO8和FLO11等。酵母细胞转录活性的絮凝基因会受营养状况及其他应激因素的影响,细胞壁的组成或细胞的形态也影响其絮凝作用。这意味着,在工业发酵中酵母絮凝是受许多参数如营养条件、溶解氧、酸碱度、发酵温度和酵母储存条件的影响。从理论上说,合理利用这些参数,以控制絮凝过程是可行的。然而,在实践中我们很难预测某一酵母菌种絮凝的特异性反应。此外,某些菌株的某些絮凝基因参与了其絮凝作用,造成了絮凝特性的频繁变化。因此,拥有一个科学的絮凝理论以及密切监测和控制生产条件是获得最大絮凝的必要手段。研究影响酵母絮凝的各种参数并进行甄别性讨论是一项非常有意义的工作。     

啤酒酵母絮凝机理研究进展

啤酒酵母絮凝机理的假说有絮凝共生假说、类外源凝集素假说、类外源絮凝素假说等。啤酒酵母絮凝表型可分为FLO1型和NewFLO型;对啤酒酵母絮凝基因的研究有结构基因——见O基因家族、调节基因及其他相关絮凝基因。对啤酒酵母絮凝性状的改良研究可应用于调控啤酒酵母絮凝性状,利于啤酒生产;利用酵母絮凝性状构建絮凝选择栽体;利用絮凝素蛋白构建酵母细胞表层展示体系;利用酵母絮凝蛋白对细菌的吸附,应用于医疗行业。     

絮凝酵母高浓度重复批次乙醇发酵过程中絮凝性能衰退机理的研究

前期有关高浓度乙醇重复批次发酵的研究工作中发现,随着发酵批次的增多,SPSC01菌株的絮凝特性出现退化的现象,导致发酵时间延长,细胞沉降速率变慢,发酵系统变得不稳定。对影响SPSC01絮凝性能的因素进行了研究,并评估了这些因素对絮凝退化的影响程度。实验表明,细胞表面疏水性、乙醇浓度、细胞线粒体功能的改变,这些理化因素的影响均不足以导致酵母絮凝性能下降。而在重复批次发酵结束时SPSC01的絮凝基因FLO1的转录水平较发酵初始阶段下降了76.9%,这一改变是导致絮凝性能衰退的真正原因。研究亦发现,絮凝性能衰退的SPSC01菌体经过重新摇瓶培养后,可恢复较好的絮凝特性,表明重复批次发酵过程乙醇浓度及其变化速率对FLO1的转录有负面影响。据此依据,对高浓度重复批次发酵实验进行了优化,在每批次发酵终点泵出一部分酵母菌悬液以维持生物量在适当浓度,通过降低发酵速率来刺激酵母增殖,以维持絮凝性能。在这一操作下,发酵生产强度降低至3.9g/(L·h),每批次发酵时间控制在24h左右,菌体的絮凝特性及沉降性能在12批次后趋于稳定,并持续稳定地进行了后续13个批次的发酵。     

啤酒酵母育种及其应用

本文对近几年来国内外酿造酵母育种及应用的研究作了简单的介给．首先综述了啤酒酵母一些酿造特性的新发现，包括发酵过程中酸性蛋白酶的释放、糖化酵母絮凝机理、酚臭味基因的表达和呼吸缺陷型酵母对啤酒的影响．同时对如何利用优良特性，防止不良特性进行了讨论．对应用细胞融合技术和基因工程技术选育杀死野生酵母的嗜杀啤酒酵母、抑制H2S产生的啤酒酵母、能发酵糊精的啤酒酵母、可生产人血清蛋白的啤酒酵母和水解β-葡聚糖的啤酒酵母作了简单的阐述．     

应用一种新开发的方法评价麦芽对酵母过早絮凝的影响

酵母过早絮凝（PYF）是酿造工业中一个严重的问题。在酵母发酵时还存在较高糖浓度时就发生了酵母絮凝，会造成酵母细胞数的太幅下降，影响啤酒质量。了解麦芽的PYF潜力对于酿酒师来说是非常重要的。我们开发一种两天发酵的方法来评价麦芽的PYF潜力，使用酿造回收酵母或扩培Lager酵母进行50mL规模的试验。这种方法对于批次采购的麦芽以及酿造配比时的效果评价非常有效。这种新开发的方法是研究PYF很好的工具，我们总结了以下几点①长期贮存的麦芽对降低PYF潜力无作用；②对未粉碎麦芽进行清洗对降低PYF潜力有效；③PYF阳性麦芽对所有的aIe酵母影响不明显；④所有的lager酵母对PYF麦芽敏感。甚至即使是非絮凝的.     

组蛋白修饰酶Gcn5和Hda1对高浓发酵中啤酒酵母絮凝性的影响

高浓发酵中酵母的发酵性能常常受到环境因素变化的影响,使酵母性能变差,引起发酵缓慢,影响啤酒风味等。在工业化生产中,酵母FLO和MAL基因会影响酵母的发酵性能,这两个基因的表达受到Setl甲基转移酶的影响,其结果是引起酵母絮凝,而在高浓发酵前期能提高酵母利用麦芽糖的能力。本试验研究了其它组蛋白修饰酶可能具有的功能,比较了多种组蛋白,最终发现高浓发酵中的酵母絮凝是由组蛋白脱乙酰化酶Hdal或组蛋白乙酰转移酶Gcn5缺失所诱发的。Gcn5的缺失还可以改善酵母细胞对高浓度麦芽糖的利用,在高浓发酵条件下,编码沉默信     

酵母的有机酸耐性机理

各种微生物在繁殖时一般都会受到酿造物中醋酸和乳酸等各种有机酸导致的低pH值的严重影响，特别是有机酸对特定酵母具有某些影响。为了搞清酵母的有机酸耐性的基因构造，实验使用酵母的非必须基因破坏株，进行了与酵母有机酸耐性相关的基因筛选。     

运用多聚酶链式反应测定啤酒酵母的凝聚性

根据絮凝基因的特性，我们运用多聚酶链式反应测定酵母的凝聚能力。应用示踪凝聚基因对30多种储藏酵母菌株进行了凝聚特性的研究。该方法最先应用于检测个别酵母细胞非凝聚性的变异。当酵母突变不絮凝和发酵结束不沉淀时，我们也应用于遗传基因变化的原因研究。该方法不仅速度快，而且具有可靠性和再现性。     

酱油微生物遗传特性的研究进展

从酱油酿造用曲菌及酵母遗传基因上的特性,来重新认识传统的发酵菌类,完全突破了传统的微生物鉴别法.以基因片等手段快速准确地鉴定菌种,极大地提高和改善了酿造微生物的产酶和发酵性.本文从曲菌的繁殖、酶生成、耐盐性、曲菌蛋白酶产生的多样性、固态及液态培养等方面阐述了酿造微生物的遗传特性.     

酵母凝集性的生化原理及其测定综述

该综述针对酿造酵母凝集的作用因子，对现在掌握的和传统的评价凝集的测定方法进行讨论。尽管过去的二十年在酵母凝集方面进行了大量的研究，但仍存在不确定性和尚存异议的问题。在多数酿造菌株的多倍体或非倍数染色体的特性研究方面尚存在混乱。现在基因方面的数据存在不确定性，包括基因产物在凝集方面的作用特性和模式。另外限制凝集性研究的原因还有缺乏基础和标准的试验方法。我们将关注酵母凝集性讨论的分歧，包括凝集温度、金属离子的影响，像镁和钡离子、在酵母细胞相互作用中的羧基与磷酸基的重要性等。还有将对过去和现在使用的酿造凝集性测定方法进行讨论。     

采取工艺措施提高啤酒酵母的絮凝性

啤酒酵母按凝絮性可分为粉末型酵母、凝聚性酵母和絮凝性酵母。絮凝性酵母是目前啤酒酿造中用于快速发酵制造清爽型啤酒常采用的酵母。影响啤酒酵母絮凝性的因素有很多,本文探讨的是如何利用工艺条件来提高啤酒酵母的絮凝性。1 问题的提出我工厂在生产过程中发现有的发酵液降温储酒后,大量酵母仍悬浮在酒液中,沉降效果不好,导致酵母自溶,嫩啤酒浊度高达30EBC 以上,过滤困难,清酒回滤率高,严重影响了过滤效率和过滤清酒质量,为解决这一问题,我们从工艺方面进行了一系列     

细胞融合重组子酵母的研究

摘要：葡萄酒酵母S．C．5与克勒克柠檬形酵母Klo 10作为亲株进行属间融合，交换重组获得重组子46510。生长繁殖快，能在22h内达3亿个／mL以上，很快进入厌氧后发酵，抑制许多需氧茵生长；在25～32℃发酵15d，絮凝快，沉积紧，澄清透明，酒体醇厚圆润，酸甜适口；并可提高酒精度2％；为酿造果酒提供了一个优良菌种。     

连续接种对Lager酿造酵母质量的影响

连续接种这个词是指发酵结束后将酵母茵体回收和用于后来的发酵。尽管连续接种造成酵母质量的衰退通常是可以接受的，但酵母重复处于环境的压力对其生理状态的影响，此前未有报道。在本次研究中，我们将酵母的活性和活力作为酵母代数的一个函数，发现连续接种对酵母生理状态的影响不是普遍性的，而有一种依赖菌种特性的现象。重复处于压力环境会产生可逆和不可逆伤害的积累。而且，在酿造酵母处理期间存在综合压力(压力反应元素STRE)反应的激活现象。     

影响啤酒酵母死亡及自溶的因素

啤酒酿造中啤酒酵母是至关重要的。由于酿造过程中许多环境因素的影响,会有一部分酵母死亡,甚至产生自溶。当啤酒中有5%以上的啤酒酵母自溶时,啤酒会产生明显的酵母味、苦味和涩味,并伴随出现其它方面的质量问题。自溶酵母都是衰老的死酵母,实际酿造中不可能完全防止酵母细胞的自溶,只能控制酵母细胞自溶的限度。下面谈谈环境因素对酵母死亡及自溶的影响。     

红曲黄酒酿造用曲及传统酿造过程中酵母菌的多样性研究

目的:探讨红曲黄酒酿造用曲中酵母菌多样性以及传统酿造过程中酵母菌菌群结构变化,为我国传统红曲黄酒中酵母菌资源的利用和对传统酿酒的有效控制及现代化酿酒新工艺的建立提供基础数据。方法:收集福建各地区的红曲黄酒酿造用曲20份,从中分离纯化出300株酵母菌,通过ITS1-5.8S-ITS2的PCR-RFLP指纹图谱对酵母菌进行分型,从各个分型类群中随机选取代表菌株,利用26S rDNA基因D1/D2区域序列分析进行分类鉴定;并采用PCR-RFLP快速分型鉴定技术分析红曲黄酒传统酿造过程中酵母菌菌群结构的变化。结果:从红曲黄酒酿造用酒曲中总共分离鉴定出12种类型酵母菌,其中扣囊复膜孢酵母(Saccharomycop-sis fibuligera)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)和弗比恩毕赤酵母(Pichia fabianii)是酒曲中3种主要的酵母菌类型。红曲黄酒传统酿造过程酵母菌群的跟踪分析共鉴定出4种酵母菌,即酿酒酵母、扣囊复膜孢酵母、季也蒙毕赤酵母(Pichia guilliermondii)、粘性红圆酵母(Rhodotorula mucilaginosa)。在酿造前期扣囊复膜孢酵母是优势酵母菌,而在酿造的后期,酿酒酵母完全取代之成为优势菌。结论:红曲黄酒酿造用酒曲中的酵母菌具有丰富的生物多样性,红曲黄酒传统酿造过程酵母菌菌群结构处于动态变化,最终酿酒酵母成为酿造体系的优势酵母菌。     

高浓干啤如何提高发酵度

1高浓酿造的特殊环境 高浓酿造的优点已众所共知,它包括节能降耗、单位时间单罐能力产出量大,能满足旺季市场容量突然扩大的需求。但是,这种酿造方法的负面影响仍应值得关注。例如,高浓麦汁对酵母发酵性能,酵母和啤酒质量稳定性以及絮凝物的不良影响。160P或更高浓度麦汁的不良影响是因为渗透压的提升和乙醇的作用。高浓麦汁对酵母的影响主要有以下几点：     

高浓度酿造的酵母管理

现在，许多啤酒厂通过现用的酵母茵进行高浓度发酵或超高浓度发酵来提高啤酒产量。本文主要研宄了如何更有效的对酵母进行管理，特别是对污染、突变等更敏感的茵株。同时，对生长因素、酵母耐压力、发酵中存在的问题以及影响啤酒风味的一些因素进行重点讨论。由于高浓度酿造导致酵母的使用代数减少，本文讨论了在高浓度发酵中的酵母繁殖和贮酒过程，在不同形式的繁殖方式（如单罐／成批、双罐／半连续或连续繁殖等）中，高细胞数或加速通氧产生的酵母对发酵有不利的影响，这种现象越来越引起人们的注意。一个理想的酵母回收贮罐对防止酵母老化，提高发酵性能有利。     

高浓干啤如何提高发酵度

<正>1高浓酿造的特殊环境高浓酿造的优点已众所共知,它包括节能降耗、单位时间单罐能力产出量大,能满足旺季市场容量突然扩大的需求。但是,这种酿造方法的负面影响仍应值得关注。例如,高浓麦汁对酵母发酵性能,酵母和啤酒质量稳定性以及絮凝物的不良影响。16°P或更高浓度麦汁的不良影响是因为渗透压的提升和乙醇的作用。高浓麦汁对酵母     

高产酒精絮凝酵母SY-130菌株的选育

以絮凝性强的葡萄汁酵母SN—154和高产酒精酵母菌种NHY4—36做亲本，通过原生质体融合技术，获得1株发酵速度快、高产酒精且絮凝性强的酵母菌株SY—130，以玉米淀粉为原料，32Y发酵60—68h，可产酒精17．5％—18．5％(v／v)，耐酒精度可达20％以上，酵母絮凝性能良好。