直接竞争酶联免疫吸附法检测食品中三聚氰胺残留

采用酶标抗原建立了高效、高灵敏的三聚氰胺直接竞争的ELISA（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测方法。方法 以三聚氰胺单克隆抗体包被作为固相抗体,辣根过氧化酶（Horseradish Peroxidase,HRP）标记的抗原与标准品（或样品）中三聚氰胺竞争结合抗体,建立了直接竞争酶联免疫检测体系。结果 以三聚氰胺为标准品建立标准曲线,得到方法的IC50为8.84μg/L,灵敏度为0.65μg/L,线性范围0.9-35μg/L;检测样品的回收率为70.0%-127.9%,与三聚氰酸交叉反应率为60%,其他结构类似物基本无交叉反应。结论 本方法灵敏度高、特异性强、检测快速, 可以满足实际样品的检测需求。     

酶联免疫吸附法快速检测饲料中赭曲霉毒素A

目的建立一种酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)快速检测饲料中赭曲霉毒素A快速的方法。方法样品采用60%的甲醇溶液提取,提取液经过离心、快速滤纸过滤后,用稀释缓冲溶液按10倍的比例对提取液进行稀释即为试样液,采用酶联免疫吸附方法进行检测。结果在加标浓度为25、50和100μg/kg的加标水平下,赭曲霉毒素A在饲料中的加标回收率为88.4%~134.6%,变异系数为3.5%~6.9%。抽取10份样品进行检测,赫曲霉毒素A含量在14.1~38.2μg/kg。符合国家的标准GB 13078-2017对饲料中赫曲霉毒素A含量的规定。结论本方法灵敏度高、快速简便,适用于饲料中赭曲霉毒素A的快速批量检测。     

酶联免疫吸附法直接测定乳制品中雌二醇残留

建立了测定乳制品中雌二醇残留的酶联免疫吸附分析(ELISA)竞争法,其重现性好、特异性强,测定线性范围0.01mg/L～1000.0mg/L,最低检出浓度为9.714mg/L,乳制品的加标实验回收率为87.2%～120.8%。     

恩诺沙星快速酶联免疫吸附法检测试剂盒的研制

目的：研制恩诺沙星酶联免疫吸附法检测试剂盒。方法：采用EDC-NHS 法制备ENR-M-BSA 免疫原和ENR-OVA 检测抗原,用ENR-M-BSA 免疫BALB/C 小鼠,采用甲基纤维素半固体培养基法筛选单克隆抗体并采用间接竞争ELISA 对其进行分析。结果：通过公式计算ENR-M-BSA 摩尔偶联比为15:1,ENR-OVA 摩尔偶联比为7.2:1。筛选出1 株特异性分泌株3E9,其腹水纯化后间接竞争ELISA 测其效价为107,分型试剂盒测试显示此抗体属于IgG1 型;检测限为1ng/mL,线性范围在1～100ng/mL 之间,半量抑制浓度(IC50 值)为10ng/mL,与4 种结构类似物交叉反应均小于1%。结论：此株单克隆抗体可以用来建立恩诺沙星ELISA 检测试剂盒。     

酶联免疫吸附法直接测定乳制品中催乳素残留

建立了测定乳制品中催乳素残留的酶联免疫吸附分析(ELISA)竞争法,它重现性好,特异性强,测定线性范围为0.35ng/mL～200.0ng/mL,最低检出浓度为9.714ng/L,乳制品的加标实验回收率≥80.3%。     

酶联免疫吸附法快速检测储存粮食中的污染曲霉

以曲霉属特异性抗体为材料,运用酶联免疫吸附法对稻谷、小麦、玉米等几种储存粮食中 胞外多糖含量进行了检测,并和平板计数法的曲霉菌落数进行比较,结果表明,两者间有很好的线性相关性。因此酶联免疫吸附法可用于储存粮食中污染曲霉的快速检测。     

酶联免疫吸附法快速检测婴儿配方奶粉中乳铁蛋白含量

目的采用乳铁蛋白快速检测试剂盒,通过酶联免疫吸附法定量测定婴儿配方奶粉中的乳铁蛋白含量,并验证该方法的准确性、稳定性和可靠性。方法按照试剂盒操作说明制作标准曲线,选取乳铁蛋白阴性样品进行添加回收实验,验证方法的准确性;选取一个乳铁蛋白阳性样品,重复检测6次,计算结果偏差,验证方法的稳定性;选取12个乳铁蛋白阳性样品,分别采用试剂盒方法和高效液相色谱法进行检测,对比2种方法的检测结果,验证试剂盒方法的可靠性。结果试剂盒检出限为2 mg/100 g;试剂盒检测方法回收率在101.6%~109%;相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为5.34%;试剂盒方法检测结果与标签值的偏差为-6.90%~6.45%,和高效液相色谱法检测结果的偏差为-6.45%~6.9%,说明试剂盒方法具有很好的可靠性。结论乳铁蛋白试剂盒检测方法灵敏度高、操作简单,能快速准确地测定婴儿配方奶粉中的乳铁蛋白含量。     

烟草内源激素的酶联免疫吸附法(ELISA)测定

ELISA法测定植物内源激素,具有专一、快捷等特点.介绍了ELISA法的基本原理及其在测定烟草激素上的应用.     

酶联免疫吸附法和DNA检测法在肉类鉴别中的应用

肉类食品是我国人民食品消费的主要组成部分,企业和经营单位为了追逐利润,时有将价格便宜的肉品掺入或替代高价格的肉品中进行加工和销售。为保护消费者对食品消费的知情权和规范肉类市场的秩序,食品生产、流通等监管部门应对肉类识别技术进行系统的分析和研究,进而建立相应的规范识别方法。目前用于肉类掺假鉴别的方法有组织学、化学、免疫学和基于DNA序列的检测方法等。本文主要针对ELISA检测方法和DNA检测方法在肉类识别中的应用进行阐述分析,并对我国肉类识别标准方法的缺陷进行分析。     

酶联免疫法与液相质谱联用法检测牛乳中三聚氰胺的比较

对牛乳中三聚氰胺含量的2种检测方法进行了比较,结果表明,酶免疫法灵敏度高,检测时间短,特异性强,操作方便,适合初筛。液相质谱联用法准确,回收率平均值在80％-110％之间,适合确证、定量。     

食品中三聚氰胺的快速检测方法

三聚氰胺是一种广泛用于塑料、造纸和肥料的化工原料,若添加到食品中并长期被人们摄入会严重影响到身体健康。目前,用于三聚氰胺检测的方法主要有:高效液相色谱法、液相色谱-质谱法、气相色谱-质谱法、电色谱仪检测法等,但是,这几种检测方法均需要采用氮气吹干仪,存在不能一次处理大量样品、有毒气体污染环境、消耗大量氮气的技术问题。本文创新了一种新的检测设备真空离心浓缩仪,同时优化了检测方法,能够快速检测三聚氰胺,同时具有以下优点:可同时处理多个样品而不会导致交叉污染;可以回收甲醇等有毒气体,减少环境污染;回收的甲醇经蒸馏处理后可以重复使用,降低了成本。     

进出口食品中组胺的ELISA快速测定

本文建立了一种进出口食品中组胺的酶联免疫快速测定方法。针对目前国内市场常见的Abraxis、r-Biopharm和Neogen三种试剂盒,进行比较选择最优试剂盒,并对酶联免疫分析定量检测组胺残留试剂盒进行选择性(交叉反应)测试、特异性与检测限测试以及对进出口食品样品组胺的回收率和精密度测试。结果显示,选择r-Biopharm试剂盒来检测样品中的组胺准确性较好,其对N-酰基-组胺交叉性为100%,对N-甲基-组胺、5-羟基吲哚乙酸、咪唑乙酸、L-组氨酸、N-甲基咪唑乙酸及血清素等组胺类似物交叉反应都小于1%,进出口食品中红葡萄酒的检测限(LOD)为250μg/kg,牛奶的LOD为100μg/kg,奶酪的LOD为2.5 mg/kg,鱼粉的LOD为100 mg/kg,样品的平均回收率在86.4%～95.6%,相对标准偏差2.7%～3.9%,经五个试验室的回收验证均具有较好的回收率,经HPLC确证假阳性率≤2.5%,表明酶联免疫分析定量法可快速、准确实现对食品中组胺残留量的快速筛选。     

高通量微生物显色法快速检测动物源性食品中抗生素残留

建立一种采用高通量微生物显色法对动物源性食品中抗生素残留进行筛检,再结合高效液相色谱-串联质谱(high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,HPLC-MS/MS)法对阳性样品进行复测的分析检验方法。本方法利用嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus sterothermophilus)作为指示菌,制备96微孔板,可同时对不同类别多种抗生素进行联合检测。结果表明:该微生物显色法操作简便、快捷,成本低,结果准确且易判断,选取pH 7.4磷酸盐缓冲液进行提取,以反应液150μL、菌液50μL(初始OD_(600 nm)为0.4左右)、样品提取液100μL作为检测体系,检测效果最佳,对动物源性食品中氨基糖苷类检出限为60μg/kg,β-内酰胺类检出限为20~40μg/kg,大环内酯类检出限为60~80μg/kg,四环素类检出限为40~60μg/kg,符合国内外对抗生素残留限量的要求。对60份动物源性样品进行检测,其结果与HPLC-MS/MS复测结果一致,说明该微生物法稳定性良好,可用于动物源性食品中抗生素残留的初筛检测。     

双抗夹心ELISA方法检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌

采用0.5% 福尔马林灭活的单核细胞增生李斯特氏菌作为免疫原免疫日本大耳兔,获得抗单核细胞增生李斯特氏菌多克隆抗体,并以此多克隆抗体作为捕获抗体,以抗单核细胞增生李斯特氏菌Internalin A(InlA)单克隆抗体作为检测抗体,建立快速、特异的检测该菌的双抗夹心ELISA 方法。结果表明：该方法对单核细胞增生李斯特氏菌纯培养液的最低检测量为1.7 × 105CFU/mL。在检测食品样品的实验中,食品样本对本方法干扰较小,运用选择性增菌液进行前增菌可提高该方法的准确性。     

纳米增强拉曼光谱技术：现场快速检测食品中的三聚氰胺

食品在到达消费者餐桌之前要经过食品生产、加工,流通和进出口等诸多环节．在现有的管理体系中．产品质量安全检测实验室起着重要的作用。检测实验室里常用的大型仪器具有很多优点,如精度高、可以定量和定性分析等i但同时它也存在如设备昂贵、检测成本高．检测耗时长,无法进行现场检测以及对操作人员技能要求较高等局限：一台色一质联用仪需要几十万甚至上百万元,     

应用PCR快速检测食品中沙门氏杆菌方法的研究

本研究利用沙门氏杆菌属特异的inv A基因序列，设计一对特异性的引物，通过PCR反应来检测多种样品中的沙门氏杆菌；反应的特异性和敏感性以及反应的最适条件等试验的结果显示：此PCR方法检测沙门氏菌属的特异性为100％：样品中活菌的检测限为1．43CFU／10g：反应的最佳退火温度是65℃；最适模板浓度范围在10^4～10^8copies／ml。本方法与传统的沙门氏杆菌检测方法以及最近报道的相关方法比较，具有简单、快速、特异性好和敏感性高、经济等特点，并可满足大批样品沙门氏杆菌筛选检测的要求。     

牛奶中三聚氰胺的ELISA检测研究

戊二醛法将三聚氰胺(Melamine)与载体蛋白进行偶联制备免疫抗原Melamine-BSA及包被抗原Melamine-OVA.对人工合成抗原进行紫外扫描,其紫外扫描谱图与载体蛋白及三聚氰胺的图谱有明显的差异,初步显示载体蛋白与三聚氰胺偶联成功.进一步分析Melamine-BSA中Melamine与BSA的摩尔比,复合物中三聚氰胺与BSA的摩尔比为8.56 ∶ 1.用免疫抗原Melamine-BSA腹腔免疫BALB/c小白鼠,获得抗三聚氰胺的多克隆抗体,间接非竞争ELISA分析所得抗血清的效价达10000以上.间接竞争ELISA显示所制备的抗血清能有效识别三聚氰胺,与氰脲酸、三聚氰酸酰胺、三聚氰酸二酰胺无交叉反应.利用自制抗体建立牛奶中三聚氰胺的间接竞争ELISA检测方法,对奶样作0.1μg/mL,1μg/mL,10μg/mL,100μg/mL,500μg/mL和1000μg/mL六个加标浓度的回收率在70.30%113.59%.     

乳品中三聚氰胺快速检测解决方案

自2008年三聚氰胺事件爆发以来,乳品安全一直备受关注。为了加大对乳品行业的监管力度．使中国乳品行业迅速恢复元气．相关职能部门出台了多项措施：在质量控制方面．要求对奶源做到严格把关．有效提高乳品质量安全系数。因此．在奶站收奶环节,企业对原料奶的检测把关显得尤为重要．同时为保证牛奶不发生腐败变质的现象．必须在最短的时间内对其进行检测并立即入罐冷藏,     

酶联免疫吸附试验在食品检测中的应用

本文简要介绍了ELISA 的基本原理和类型,详述了国内外使用ELISA 方法在食品过敏源、农药残留、致病微生物、转基因等方面检测的最新研究进展,列出了部分目前市售用于食品检测的试剂盒,并对该检测技术的发展趋势及其在食品安全检测中的应用前景进行了展望。     

食品中三聚氰胺的检测技术现状与展望

本文论述了三聚氰胺的理化性质,用途、代谢、危害以及现有的食品中三聚氰胺的各种检测技术和研究进展.