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1.
目的快速、准确地检测流感病毒裂解疫苗和亚单位疫苗中裂解剂Triton N-101的残余量。方法采用紫外吸收与Lowry蛋白测定相结合的方法。首先绘制裂解剂和蛋白标准曲线,将Lowry法测得的样品蛋白质含量代入蛋白标准曲线的回归方程中,得出样品中蛋白对应的紫外吸收值,再用蛋白样品测得紫外吸收值减去蛋白吸收值的差,代入裂解剂标准曲线,得出裂解剂浓度,并对该法进行精密度和准确度验证。结果经精密度和准确度的验证,该法符合实验要求。结论所采用的方法快速、简便,适用于疫苗生产过程中裂解剂Triton N-101残余量的检测。 相似文献
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《中国生物制品学杂志》2017,(5)
目的比较《中国药典》三部(2015版)收录的两种Lowry法测定百日咳疫苗原液蛋白定量的差异,为原液蛋白准确定量和新版药典Lowry法的适用性确认提供依据。方法 9个实验室分别按照现行药典收录的两种Lowry法,对4家15批百日咳疫苗原液蛋白含量进行测定。并与凯氏定氮法检测结果进行比较。结果方法 1(未经酸沉淀Lowry法)实验室内测定结果的变异系数(CV)均值在1.7%~8.9%之间,实验室间测定结果的CV值在3.9%~9.3%之间;方法 2(酸沉淀Lowry法)实验室内测定结果的CV均值在3.6%~7.4%之间,实验室间测定结果的CV值在3.9%~18.1%之间。同一样品两种方法测定结果差异有统计学意义(P0.001),结果呈相关性(R2=0.944 9)。在与部分样品测得的凯氏定氮法结果的比较中,方法 1差异有统计学意义(P0.001),方法 2差异无统计学意义(P0.05)。结论所有样品采用同一种Lowry方法测定时所得结果实验室内和实验室间一致性较好,采用方法 2测定结果明显低于方法 1,更接近凯氏定氮法结果真实值,表明酸沉淀对Lowry法百日咳原液蛋白定量有显著影响。与Lowry方法 1相比,Lowry方法 2更能准确反映百日咳疫苗原液的真实蛋白含量,且精密度、适用性均符合要求。 相似文献
3.
《中国生物制品学杂志》2015,(11)
目的建立测定生物制品中Triton X-114残留量的方法,并进行验证及初步应用。方法先对Triton X-114进行光谱扫描,用所得到的特异吸收峰来初步检测Triton X-114的残留量,再根据Triton X-114与苯酚发生反应并产生具有一定浊度的复合物,且浊度与Triton X-114的浓度成正比的原理,通过测定340 nm处吸光度值,建立测定Triton X-114残留量的方法,并对方法进行稳定性、准确性、精密性验证。考察核酸和蛋白对Triton X-114含量测定的影响,并分别采用紫外吸光法和建立的方法检测样品中的Triton X-114含量。结果 Triton X-114在280 nm左右有特异吸收峰,可通过测定280 nm处的吸光度值来初步测定Triton X-114的残留量;利用Triton X-114与苯酚发生反应后产物的A340值来测定Triton X-114含量的方法的线性范围为0.001%~0.007%,检测下限为0.001%;建立标准曲线后,每间隔5 min测定1次A340值,各浓度标准品A340值的变异系数(CV)均小于5%;低(0.001%)、中(0.003%)、高(0.006%)浓度Triton X-114溶液连续测定3次,每个浓度平行测定9组的CV值均<5%,回收率均>100%;核酸和蛋白对该方法测定Triton X-114的含量无影响;4份样品经两种方法检测的试验内CV值均<10%。结论可采用280 nm紫外吸收法初步测定Triton X-114的含量,但该法灵敏度低,易受干扰;而采用Triton X-114与苯酚反应后检测其产物浊度的方法来测定Triton X-114的残留量,稳定性、精密性良好,准确性高,可用于生物制品中Triton X-114残留量的检测。 相似文献
4.
目的评价BCA法检测组分百日咳疫苗中间品蛋白含量的可行性,并进行验证。方法以《中国药典》三部(2015版)Lowry法2的检测结果为对照,对干扰BCA法测定组分百日咳疫苗中间品蛋白质含量的物质进行分析,明确干扰物质的限度;对BCA法的专属性、线性范围、重复性、准确性进行验证,并与Lowry法2的检测结果进行比较。结果 30%硫酸铵对Lowry法2和BCA法测定蛋白质含量有明显干扰,其他缓冲体系均无影响;硫酸铵浓度≤25%时,对Lowry法2检测结果无干扰,低于5%的硫酸铵可通过1 mol/L的盐酸消除,不影响BCA法的测定;凯氏定氮法测定结果显示,组分百日咳疫苗中间品中硫酸铵浓度<5%。BCA法的专属性、线性范围、重复性、准确性均符合验证要求;Lowry法2与BCA法检测结果差异无统计学意义(P> 0.05)。结论 BCA法操作简便、快速、准确、高通量,可用于检测组分百日咳疫苗中间品的蛋白含量。 相似文献
5.
建立测定吡拉西坦注射液半成品含量的紫外分光光度检测方法,为生产车间提供快速的中间体含量检测方法,提高生产效率。用紫外分光光度计对吡拉西坦标准溶液进行波长扫描,确定最适吸收波长,在最适吸收波长下建立吡拉西坦标准品的吸光度-浓度曲线。根据标准曲线测定吡拉西坦样品中吡拉西坦的含量。吡拉西坦的最适吸收波长为220 nm,吸光度-浓度回归方程为:Y=0.1056X+0.2202,R2=0.9999。紫外分光光度法测定吡拉西坦注射液半成品中吡拉西坦含量操作简便、快捷、准确。 相似文献
6.
采用紫外光谱探讨了低分子有机酸、糠醛和木质纤维高温预水解液(PHL)的紫外吸收谱图特征。甲酸和乙酸在近205 nm处有显著吸收, 而糠醛在近280 nm处有显著吸收, 以205 nm或280 nm为木素特征吸收位置的传统木素测定方法不适于高温预水解液的溶解性木素测定。研究提出碱性硼氢化钠还原处理预水解液, 消除糠醛的紫外吸收, 进而定量测定溶解性木素含量的方法。结果表明, 硼氢化钠可显著降低近280 nm处吸收值, 预水解条件越高, 还原前后吸收差值降低越多, 说明糠醛类物质含量高。以提取相思木和芦苇木素为标样, 280 nm处吸光度与浓度线性相关系数均达到0.999, 满足定量测定的需要。充分还原前后280 nm吸收差值可用于糠醛的定量, 糠醛标样280 nm处吸光度与浓度线性相关性为0.998, 糠醛测定回收率为98.14%~99.88%, 相对标准偏差为0.17%~0.35%。 相似文献
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建立双波长叠加紫外分光光度法测定盐酸普萘洛尔的含量。盐酸普萘洛尔在290 nm和320 nm波长处有吸收峰,采用290 nm和320 nm作为测定波长,以两波长处吸光度值之和作为定量指标。研究发现盐酸普萘洛尔在2.04~51.0μg· mL-1浓度范围内与两峰处吸光度值之和呈良好线性关系(r=0.9999),方法检测限为0.5μg· mL-1,表观摩尔吸收系数为6.708×103 L· mol -1· cm-1,测定灵敏度较最大吸收波长处提高了32.6%。结果表明双波长叠加紫外分光光度法简便,灵敏,快速,可用于样品中盐酸普萘洛尔的含量测定。 相似文献
9.
比较了分光光度法和高效液相色谱(HPLC)法测定地表水中叶绿素a的结果。研究表明:两种方法的精密度无显著差异;叶绿素a标准样品测定结果也无显著差异;在测定地表水样品时,分光光度法测定结果高于HPLC法,差异主要由664 nm波长下有较强吸收的物质造成。分光光度法测定结果偏高但操作简单,HPLC法测定结果精准但操作复杂,分光光度法在水质监测工作中更加具有优势。 相似文献
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目的探讨Lowry法测定b型流感嗜血杆菌结合疫苗蛋白含量干扰现象的排除方法。方法分别应用《中国药典》三部(2005版)中Lowry法与第5版《欧洲药典》2.5.16法测定b型流感嗜血杆菌结合疫苗原液的蛋白含量,并以碳二亚胺(EDAC)为干扰性物质,验证两方法排除干扰的能力。结果同一批结合疫苗原液用两种方法测定的结果不一致,应用《中国药典》方法测定的结果明显高于第5版《欧洲药典》的方法。在多糖的活化衍生及多糖蛋白结合过程中加入EDAC、己二酰二肼(ADH)等,可干扰测定结果,使结果偏高。结论应用Lowry法测定多糖蛋白结合疫苗中蛋白含量时,应排除干扰性物质的影响。 相似文献
11.
介绍用原子吸收分光光度法测定PE、PP氯含量。该方法采用氧气燃烧法处理样品,用Ag~+沉淀Cl~-,经分离后用原子吸收光谱测溶液中剩余Ag~+浓度,从而得到样品中氯含量。讨论了仪器参数、操作条件对测定结果的影响,结果表明,在分离前存放4~30分钟对测试结果无影响。火焰法的测定条件为波长328.1nm、灯电流7.5mA、狭缝宽度0.4nm、C_2H_2压力0.025MPa、空气压0.16MPa、燃烧器高度7.5mm。实验采用的离心转速2000r/min、时间5分钟、HNO_3浓度1%。该法灵敏度可达0.1μg/ml、相对标准误差<2%。 相似文献
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乙肝血源疫苗蔗糖离心后样品,经日本BMM系统过滤后,对蛋白含量和乙肝表面抗原活性没有明显影响,但对去除乙肝病毒颗粒有明显效果,因此,进一步提高了乙肝疫苗的回收率和安全性。 相似文献
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采用双波长系数倍率法测定电厂废水油含量。以225 nm和254 nm为检查波长,浮油为标准油。萃取比(V石油醚∶V废水)取25∶50。双波长紫外法测得设备进、出口油的质量浓度为49.44、4.31 mg/L,测定结果比单波长紫外法偏差小,与红外法相当。双波长紫外法定量结果准确,操作简单。 相似文献
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目的建立人凝血因子Ⅷ、人凝血因子Ⅸ、人凝血酶、人抗凝血酶Ⅲ蛋白含量Lowry快速检测法,并进行验证。方法采用《中国药典》三部(2010版)Lowry法检测因子类产品的蛋白含量,通过耐用性研究降低辅料对方法的干扰,优化Lowry检测方法,并对方法的专属性、线性及范围、准确度、精密度进行验证。结果不同辅料对Lowry法的干扰程度不同,人凝血因子Ⅷ、人凝血因子Ⅸ、人凝血酶、人抗凝血酶Ⅲ样品分别稀释20、10、80、160倍,可明显降低辅料的影响;Lowry法与凯氏定氮法相关性良好,方法线性R0.99,其准确度、精密度均良好。结论 Lowry法测定人凝血因子Ⅷ、人凝血因子Ⅸ、人凝血酶、人抗凝血酶Ⅲ蛋白含量操作简便、快速、准确,可用于产品的质量控制。 相似文献
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复合掺杂的纳米二氧化锡粒子的制备与表征 总被引:3,自引:0,他引:3
分别采用微乳液法(辛基酚聚氧乙烯醚+正己醇/环己烷/水组成的微乳液体系)和柠檬酸溶胶-凝胶法制备了镁与铈、锌、锆复合掺杂的纳米二氧化锡颗粒,通过热分析(TG-DTA)、X射线衍射(XRD)、比表面积测定(BET)、红外吸收光谱(FT-IR)和紫外-可见光谱(Uv-Vis)对其结构进行表征。结果表明,两种方法制备的产物均为金红石结构,微乳液法制备的颗粒较后者具有较小的晶粒粒径、较大的比表面积和紫外吸收边;复合掺杂后,样品的粒径减小,比表面积增大,样品的紫外-可见吸收发生红移;其中,镁-铈复合掺杂的样品具有最小的晶粒粒径和最大的比表面积,分别为4.53nm和78.50m^2/g;复合掺杂能够抑制二氧化锡颗粒生长,增大其比表面积。 相似文献
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目的建立测定重组人干扰素α1b(Recombinant human interferonα1b,rhIFNα1b)蛋白质含量的HPLC检测方法,并进行验证。方法应用HPLC外标法测定IFNα1b对照品的蛋白质含量,并对方法的线性及精密度进行验证。采用建立的HPLC外标法测定3批rhIFNα1b样品的蛋白质含量,并与Lowry法的检测结果进行比较。结果蛋白质在进样量5~50μg范围内,与峰面积呈良好的线性关系(r=0.998 1);用建立的方法重复进样6次,检测rhIFNα1b对照品溶液的蛋白质含量,相对标准偏差(RSD)为0.92%,<2%;用建立的方法检测0812001、0812003、0812006批rhIFNα1b样品溶液的蛋白质含量分别为0.465、0.503和0.496 mg/ml;HPLC外标法与Lowry法测定的蛋白质浓度有一定的差异,HPLC法的RSD<2%,Lowry法的RSD>4%,HPLC法的精密度较Lowry法好。结论建立了测定rhIFNα1b蛋白质含量的HPLC外标法,该方法操作简便,精密度较好,可用于IFNα1b原液蛋白质含量的检测。 相似文献