薰衣草提取物对Ⅰ型及Ⅱ型5α-还原酶的抑制活性研究

从SD大鼠中提取Ⅰ型、Ⅱ型5α-还原酶,以薰衣草正丁醇组分的50个提取物作为抑制剂,以睾酮为底物,以非那雄胺为阳性对照,利用超高效液相色谱法测定反应前后睾酮浓度的变化,计算抑制率,进行体外5α-还原酶抑制活性研究。结果表明:大部分薰衣草提取物对Ⅰ型及Ⅱ型5α-还原酶表现出了抑制作用,其中20、43、44、50号提物对Ⅰ型5α-还原酶抑制活性较为显著(抑制率分别为54.02%、58.79%、57.74%、53.73%);其中43号提物对Ⅱ型5α-还原酶抑制活性较为显著(抑制率为59.94%);薰衣草提取物对Ⅰ型5α-还原酶的抑制作用明显高于对Ⅱ型5α-还原酶的抑制作用,可能为治疗前雄激素依赖型疾病提供参考。     

青刺尖叶中改善大鼠良性前列腺增生的活性组分筛选

筛选青刺尖叶提取物改善大鼠良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)的活性组分并探讨其作用机制。采用丙酸睾酮诱导的去势大鼠模型,以非那雄胺和普乐安为阳性对照,评价青刺尖叶提取物(QCJ)及其大孔树脂各洗脱物低、高剂量组(1.8g生药/kg/d,5.4g生药/kg/d)的抗BPH活性。结果显示,QCJ及各组分均能改善大鼠BPH病理状况,其中,大孔树脂5%乙醇洗脱物(Fr.A)可使BPH大鼠血清前列腺酸性磷酸酶(prostatic acid phosphatase,PACP)含量降低22.78%(p0.01),双氢睾酮(dihydrotestosterone,DHT)含量降低28.01%(p0.01);40%乙醇洗脱物(Fr.B)可减轻BPH病理组织形态改变,使BPH大鼠前列腺指数降低7.69%(p0.01),血清PACP含量降低32.91%(p0.01),DHT含量降低56.59%(p0.01)。各组分中Fr.B效果最好,能够改善BPH大鼠的前列腺指数增加、上皮细胞增厚等病理症状,其机制可能与抑制PACP和DHT的生成有关。     

聚酰胺色谱法分离油茶蒲提取物中抑制5α-还原酶的活性部位

采用聚酰胺色谱法研究油茶蒲提取物(oiltea camellia extracts,OCE)中抑制5α-还原酶的活性部位的分离方法。以体积比为3∶2∶2∶1的正丁醇-甲醇-水-冰醋酸为展开剂,0.5 g/100 mL FeCl3乙醇溶液为显色剂,采用聚酰胺色谱法将OCE清晰地分成Rf为0.85~0.037 5的7个分离部位Fr1~Fr7。5α-还原酶抑制活性的检测结果显示,Fr4和Fr5抑制活性最强,抑制率分别为(73.01±2.93)%和(76.28±1.37)%,较OCE纯化前的抑制率(57.79±1.67)%显著增加,其中Fr5得率为2.10%,且HPLC图谱中峰型较为单一,活性成分得到富集。结果表明,聚酰胺色谱法能够有效分离OCE中抑制5α-还原酶的活性部位,可为进一步制备OCE中抑制5α-还原酶的关键化合物奠定基础,同时也为强极性酚酸类混合物体系的分离提供了一种简便、高效的方法。     

马尾松花粉提取物对小鼠前列腺肥大的预防作用

目的探究马尾松花粉提取物对小鼠前列腺肥大(benign prostatic hyperplasia,BPH)的影响。方法雄性昆明小鼠随机分为6组,分别为空白对照组、BPH模型组、20 mg/kg·d低剂量、40 mg/kg·d中剂量、80 mg/kg·d高剂量马尾松花粉提取物组和非那雄胺(0.8 mg/kg·d)组。预先灌胃松花粉提取物2周之后,在腹腔注射丙酸睾酮建模的同时连续灌胃3种剂量的马尾松花粉提取物或非那雄胺4周。实验结束后,用试剂盒测定IL-1?、IL-6、TNF-?、DHT、NO、NOS以及PACP的水平;另外剖取前列腺和脾脏,测定前列腺指数和脾脏指数。结果 3种剂量的松花粉处理均降低了BPH小鼠的前列腺指数、炎性细胞因子、DHT浓度及PACP、NOS的活性,并减少了NO的生成。结论马尾松花粉提取物可以明显降低BPH病理症状及相关生化指标,对BPH起到一定的保护作用,其作用机制可能与其抗炎抗氧化活性有关。     

杏鲍菇副产物免疫活性物质追踪与结构鉴定

以杏鲍菇副产物为试验材料,采用不同极性部位分段萃取、硅胶柱层析2个步骤对甲醇提取物中的活性物质进行分离纯化,并对每步中得到的提取物进行免疫活性研究,观察其对小鼠巨噬细胞的免疫刺激作用,以此对其中的免疫活性物质进行筛选、活性追踪。利用液相串联四级杆飞行时间质谱对主要活性成分进行结构表征。结论显示:对杏鲍菇甲醇提取物进行系统溶剂法分段萃取,其中正丁醇部位表现出最强的促进细胞增殖活性、吞噬活性和细胞因子分泌活性。当正丁醇部位提取物质量浓度为25μg/m L时,促进Ana-1细胞的增殖和吞噬活性作用最强,细胞因子TNF-α和IL-6均出现分泌量高峰。通过硅胶柱层析对正丁醇部位萃取物进行分离,得到7个洗脱组分,其中Fr.2表现出最强的促进细胞增殖活性、吞噬活性和细胞因子分泌活性。当Fr.2质量浓度为12.5μg/m L时,促进Ana-1细胞增殖作用,吞噬活性最强,细胞因子TNF-α和IL-6出现分泌量高峰。通过液相质谱对Fr.2中主要成分进行结构表征,确定Fr.2中主要成分为腺苷,化学分子式为C10H13N5O4。     

茶叶籽油酚类化合物分离纯化组分分析及HepG2细胞增殖活性抑制

以茶叶籽油为材料,采用60%甲醇溶液提取酚类化合物,经硅胶柱层析后,选取Sephadex LH-20柱对酚类化合物进行分离纯化,并采用反相高效液相色谱-二极管阵列检测技术分析纯化后酚类化合物的组分。以HepG2细胞为供试细胞,结合主成分分析,初步确定茶叶籽油中具有抑制癌细胞活性的酚类化合物。结果表明,Sephadex LH-20柱分离的3个组分中,Fr1组分所含5种化合物主要为儿茶素类或黄酮类,其中儿茶素类占62.60%;Fr2组分主要含酚酸类及黄酮类;Fr3组分中黄酮类占78.70%。Fr1、Fr2、Fr3组分抑制HepG2细胞增殖的IC50值分别为1.76%、16.24%及12.35%。对Fr1、Fr2、Fr3组分中酚类化合物及各组分IC50值进行主成分分析,表明茶叶籽油中儿茶素、芦丁为主要HepG2细胞增殖活性抑制成分。     

牛α-乳白蛋白-油酸复合物(BAMLET)对SGC-7901细胞的促凋亡作用及凋亡机制的研究

通过研究α-乳白蛋白-油酸复合物(BAMLET)对SGC-7901细胞的促凋亡作用及其对cAMP/PKA信号途径的影响来探讨BAMLET促进细胞凋亡作用的机制。方法:倒置显微镜下观测细胞形态学变化;MTT法检测细胞增殖抑制率;流式细胞术检测细胞的凋亡;酶联免疫试剂盒检测人胃癌细胞中cAMP和PKA的浓度变化。实验结果表明,α-乳白蛋白-油酸复合物处理细胞24、48、72h后,细胞增殖明显受到抑制,且抑制率随时间延长而增加;流式细胞仪检测药物作用细胞24、48、72h后细胞发生不同程度的凋亡且凋亡率逐渐升高。cAMP及PKA实验结果表明,cAMP的浓度在药物作用细胞20min时达到最大值且明显高于对照组、PKA的活性明显高于对照组且差异性显著。上述结果表明BAMLET能够激活cAMP/PKA信号通路,发挥其促进细胞凋亡的作用。     

短期摄食卵黄磷脂与鱼油对高脂小鼠脂质代谢的影响

探究马尾松花粉提取物(MPPE)对前列腺肥大(BPH)小鼠的影响。雄性昆明种小鼠随机分为6组,分别为空白对照组、BPH组、20、40和80 mg/kg?d MPPE组及非那雄胺(0.8 mg/kg?d)组。预先灌胃MPPE两周之后,在腹腔注射丙酸睾酮建模的同时连续灌胃MPPE或非那雄胺四周。实验结束后观察组织形态变化,测定细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α、PACP、DHT、NO及NOS的水平。利用UPLC-QTOF-MS技术检测小鼠血清、尿液中代谢物的变化,采用PLS-DA分类,寻找潜在生物标志物。三种剂量的MPPE处理均降低了前列腺指数、炎性细胞因子、DHT浓度及PACP、NOS的活性,并减少了NO的生成。血清代谢组学鉴定了3个潜在生物标记物,分别为1-棕榈酰溶血磷脂酰胆碱、1-O-十六烷基-2-O-乙酰基-sn-甘油基-3-磷酸胆碱和(Z)-13-二十二烯酰胺。马尾松花粉提取物可以明显降低BPH病理症状及相关生化指标,调节标志性代谢物的水平。其可能的作用机制与抑制炎症及缓解脂质代谢紊乱相关。     

马尾松花粉提取物对前列腺肥大小鼠的预防作用及代谢组学研究

探究马尾松花粉提取物(MPPE)对前列腺肥大(BPH)小鼠的影响。雄性昆明种小鼠随机分为6组,分别为空白对照组、BPH组、20、40和80 mg/kg·d MPPE组及非那雄胺(0.8 mg/kg·d)组。预先灌胃MPPE两周之后,在腹腔注射丙酸睾酮建模的同时连续灌胃MPPE或非那雄胺四周。实验结束后观察组织形态变化,测定细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α、PACP、DHT、NO及NOS的水平。利用UPLC-QTOF-MS技术检测小鼠血清、尿液中代谢物的变化,采用PLS-DA分类,寻找潜在生物标志物。三种剂量的MPPE处理均降低了前列腺指数、炎性细胞因子、DHT浓度及PACP、NOS的活性,并减少了NO的生成。血清代谢组学鉴定了3个潜在生物标记物,分别为1-棕榈酰溶血磷脂酰胆碱、1-O-十六烷基-2-O-乙酰基-sn-甘油基-3-磷酸胆碱和(Z)-13-二十二烯酰胺。马尾松花粉提取物可以明显降低BPH病理症状及相关生化指标,调节标志性代谢物的水平。其可能的作用机制与抑制炎症及缓解脂质代谢紊乱相关。     

乳酸菌胞外多糖对结肠癌HT-29细胞增殖的影响

从15株大连工业大学大连市益生菌功能研究重点实验室保藏植物乳杆菌中筛选出对人结肠癌细胞HT-29抑制率最高的乳杆菌胞外多糖,对其进行分离纯化并研究多糖对HT-29细胞增殖的影响。通过苯酚硫酸法测定15种乳酸菌胞外多糖产量、3-(4,5-二甲基吡啶-2-基)-5-(3-羧基甲氧基苯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium,MTS]测定不同浓度的粗多糖对HT-29细胞的抑制率,最终筛选出高产胞外多糖、对HT-29细胞增殖抑制率高的菌株Lactobacillus plantarum12所产胞外多糖,其胞外多糖的糖含量为54%、蛋白含量为3.6%。对其胞外多糖进行DEAE-Sepharose Fast Flow离子柱和Sepharose CL-6B凝胶柱的分离纯化,得到中性多糖组分EPS12-1和酸性多糖组分EPS12-2,2个多糖组分的糖含量分别为31.82%和35.21%,通过MTS法测定L. plantarum12菌所产粗多糖、多糖组分EPS12-1和EPS12-2分别在50、100、250、500μg/mL浓度时对HT-29细胞的抑制率,发现多糖浓度为250μg/mL时,对HT-29细胞增殖达到了最佳抑制效果,抑制率分别为27.58%、7.11%、12.00%。当多糖浓度为250μg/mL时,HT-29细胞凋亡率、活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平、caspase 8活性,均处在较高水平。L. plantarum12胞外多糖通过增加ROS酶活和激活caspase 8来抑制HT-29增殖。