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相似文献
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1.
目的:从红虾副产物中提取虾肽,研究其促MC3T3-E1成骨细胞增殖、分化及矿化的活性。方法:用MTT法检测不同浓度虾肽对MC3T3-E1成骨细胞存活率的影响;诱导成骨细胞分化,在3 d和7 d时,测定其碱性磷酸酶(ALP)活性,在7 d和14 d时,测定其细胞骨钙素(OCN)及Ⅰ型胶原蛋白(COL-Ⅰ)含量,21 d时茜素红染色测定细胞诱导培养矿化程度;采用qPCR和Western blot方法检测虾肽对OPG/RANKL/RANK信号通路中骨形成关键基因和蛋白OPG、RANKL以及RUNX2表达的影响。结果:虾肽质量浓度为0.02,0.05,0.1 mg/mL时,显著促进MC3T3-E1细胞的增殖;ALP、OCN及COL-Ⅰ的含量相较于对照组均增加,矿化结节面积显著增大(P <0.05);此外,虾肽上调了ALP、OCN、COL-Ⅰ基因的表达,促进OPG和RUNX2基因及蛋白表达的水平,抑制RANKL基因及蛋白表达的水平。结论:虾肽能促进MC3T3-E1成骨细胞增殖分化与矿化,激活OPG/RANKL/RANK信号通路,从而促进成骨细胞的分化及骨形成。  相似文献   

2.
以水产加工下脚料鳕鱼骨为原料,对其进行基本组成分析与组织结构观察。从鳕鱼骨中提取胶原蛋白并酶解制得不同分子量段的胶原肽。探讨不同分子量胶原肽组分对MG-63细胞碱性磷酸酶(ALP)活性及相关因子骨形态发生蛋白(BMP-2)、骨保护素(OPG)与核因子-κB受体活化因子配基(RANKL)m RNA表达水平的影响。结果表明:鳕鱼骨中蛋白质含量较高(14.5%),Van Gieson染色发现鳕鱼骨中含有大量的胶原蛋白纤维。鳕鱼骨胶原肽能够提高细胞ALP活性,同时显著上调细胞BMP-2 m RNA的表达水平;鳕鱼骨胶原肽可有效提高细胞OPG/RANKL m RNA的相对表达量,以间接对破骨细胞的成熟及活化进行调控。鳕鱼骨可作为一种优良的天然蛋白源,鳕鱼骨胶原肽能够作为一种有效的抗骨质疏松营养强化剂加以开发。  相似文献   

3.
研究珍珠贝外套膜胶原蛋白肽(pearl oyster mantle collagen peptide,POM-CP)及其锌螯合物(zincchelating pearl oyster mantle collagen peptide,POMCP-Zn)对小鼠前成骨细胞MC3T3-E1增殖分化的影响。结果表 明:噻唑蓝检测结果显示,与空白对照组相比,POMCP-Zn能够显著促进成骨细胞的增殖,而POM-CP对成骨细胞 的增殖性无显著影响;与空白对照组相比,400 μg/mL的POM-CP和10 μg/mL的POMCP-Zn将成骨细胞的碱性磷酸酶 活性分别提高到1.31 倍和1.48 倍;POMCP-Zn还可以提高成骨细胞分化阶段Ⅰ型胶原蛋白、骨钙素蛋白的分泌量, 同时促进成骨细胞矿化阶段骨结节的形成。综上所述,与POM-CP相比,POMCP-Zn对成骨细胞MC3T3-E1的增殖 和分化有较强的促进作用,POMCP-Zn有望成为预防骨质疏松症的潜在功能性食品。  相似文献   

4.
目的:研究罗非鱼鱼鳞胶原蛋白水解物(tilapia fish scale collagen hydrolysate,FH)对小鼠成骨细胞前体细胞MC3T3-E1的增殖和分化的影响。方法:采用噻唑蓝法测定MC3T3-E1细胞的增殖率,用p-nitrophenyl phosphate(p-NPP)法测碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)的活性,Elisa酶联免疫法检测Ⅰ型胶原蛋白(Collagen type Ⅰ,Col Ⅰ)和骨钙素(Osteocalcin,OCN)的分泌量,茜素红染色法测定细胞外基质矿化结节的数量。结果:与空白对照组相比,FH对细胞的增殖性没有显著的促进作用,但是可以显著提高细胞ALP活性,促进Col Ⅰ和OCN的分泌。此外,FH可以促进细胞矿化结节的生成。结论:FH通过促进成骨细胞MC3T3-E1分化和矿化来提高骨的形成,对开发抗骨质疏松症和骨关节炎等疾病的功能性食品有重要的意义。  相似文献   

5.
为研究乳铁蛋白(lactoferrin,Lf)对三唑酮所致的骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)损伤的影响,通过构建三唑酮诱导BMSCs损伤模型,采用CCK-8法检测Lf对BMSCs损伤的修复作用;酶联免疫吸附测定法分析成骨过程中碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、骨钙素(osteocalcin,OCN)的表达情况;同时使用茜素红染色进行成骨分化能力检测,使用油红O染色进行成脂分化能力的检测;反转录实时荧光定量聚合酶链式反应分析成骨和成脂基因表达变化情况。结果表明,与空白对照组相比,不同质量浓度的Lf均可显著促进细胞增殖(P0.05)。与损伤模型组相比,Lf能提高损伤BMSCs的细胞存活率,增加细胞ALP、OCN质量浓度,增加细胞矿化结节的生成,减少脂滴的生成,上调成骨分化相关基因的相对表达,下调成脂分化相关基因的相对表达。Lf对三唑酮所致损伤的BMSCs有促进增殖作用,能够使BMSCs向成骨方向进行分化,更好地促进新骨形成,从而修复损伤。  相似文献   

6.
为了探究磷酸化大豆多肽螯合钙(PSPCC)的生理活性,提高磷酸化大豆多肽螯合钙的钙螯合量,本研究通过单因素实验和响应面试验相结合的方式优化磷酸化大豆多肽螯合钙的制备工艺,并通过体外实验评价了磷酸化大豆多肽螯合钙对成骨细胞的活性影响。结果表明,制备磷酸化大豆多肽螯合钙的最佳工艺条件为:三聚磷酸钠与大豆多肽的质量比1:2,磷酸化反应温度52 ℃,磷酸化反应pH7.0,磷酸化反应时间9.7 h,磷酸化大豆多肽与氯化钙的质量比2:1,螯合反应pH8.0,螯合反应温度50 ℃,螯合反应时间1.5 h,钙螯合量最大为107.25±0.10 mg/g;MTT法结果显示,磷酸化大豆多肽螯合钙组(D组)成骨细胞相对增殖率是大豆多肽组(A组)的1.6倍(第3 d);ALP染色实验表明,D组染色阳性率是空白组的33.6倍。采用ALP试剂盒对各样品第7 d的ALP活性进行检测,结果显示D组ALP活力是空白组的6.2倍。通过茜素红染色实验发现,D组钙结节数量是空白组的94倍。本研究使用响应面法对磷酸化大豆多肽螯合钙的制备工艺优化合理,并初步证明了磷酸化大豆多肽螯合钙对成骨细胞具有显著的促增殖、分化作用(P<0.05),且作用效果高于其它样品,为后续磷酸化大豆多肽螯合钙的进一步开发利用提供了一定的理论基础。  相似文献   

7.
目的:探讨铁结合蛋白对镉损伤的骨髓间充质干细胞(MSCs)向成骨细胞分化的保护作用。方法:试验被分成对照组、模型组和蛋白干预组。分组处理后,经成骨诱导培养,透射电镜观察细胞外基质形成及超微结构,茜素红染色观察钙结节形成能力,定量PCR法检测波形蛋白(Vimentin)、Run转录因子2(Runx2)、I型胶原蛋白(Col-1)基因m RNA表达水平。结果:MSCs经铁结合蛋白保护,成骨诱导培养21d后进行茜素红染色,细胞钙结节大小、颜色均显著性高于模型组。透射电镜观察MSCs超微结构损害明显得到缓解。Vimentin基因的表达水平先升高后降低(P0.05),而模型组随时间的延长,表达水平显著性减少(P0.01)。培养3d和6d的Runx2基因,培养6 d和12 d的Col-1基因都显著性高于模型组(P0.05),与对照组一致。结论:铁结合蛋白能提高镉损伤的保护作用,促进MSCs向成骨细胞分化的能力,其作用可能是通过上调波形蛋白、Run转录因子2、Col-1基因的表达。  相似文献   

8.
本实验以猪鼻骨为原料,采用盐析法提取天然Ⅱ型胶原蛋白,采用碱性蛋白酶酶解制备胶原肽,并测定胶原蛋白的纯度,分析胶原蛋白及胶原肽的理化性质。通过构建小鼠CIA动物模型,研究Ⅱ型胶原蛋白及胶原肽对类风湿性关节炎的作用效果。结果表明,提取所得蛋白的胶原蛋白含量为82.86%,在紫外波长230 nm下有最大吸收峰,280 nm处几乎无吸收峰,分子量大于300 KD,具备天然Ⅱ型胶原蛋白特征;酶解得胶原肽不含Ⅱ型胶原蛋白,分子量小于20 KD;Ⅱ型胶原蛋白能够降低小鼠关节指数、降低关节变形率,明显降低小鼠血清中IL-17、MMP-3和TNF-α水平(p0.05),并能显著提高T细胞刺激指数(P0.05),对B细胞刺激指数无明显效果(p0.05);组织病理学显示Ⅱ型胶原蛋白能够减轻关节破坏程度,抑制软骨退化;而胶原肽不具有以上作用。  相似文献   

9.
目的:探究秘鲁鱿鱼皮胶原蛋白水解肽增强MC3T3-E1细胞抗骨质疏松的作用。方法:将培养的MC3T3-E1细胞分为正常对照组、氯化镉损伤组和胶原蛋白水解肽干预组;利用MTT法确定氯化镉的半数抑制浓度,建立细胞损伤模型;根据各组细胞增殖率差异,确定最佳胶原蛋白水解肽的添加量;通过细胞周期、凋亡,碱性磷酸酶活性的测定及Alizarin red染色法分析胶原蛋白水解肽在细胞增殖、分化、钙化阶段拮抗氯化镉的抑制作用。结果:与氯化镉损伤组相比,胶原蛋白水解肽干预组细胞活性升高(P0.01);处于G1期的细胞数量减小(P0.05),S期细胞数量增大(P0.05);凋亡率降低(P0.05);9,12,15 d时AKP活性升高(P0.05,P0.01,P0.01)。结论 :摄入一定剂量的氯化镉会抑制MC3T3-E1成骨细胞增殖、分化和钙化。胶原蛋白水解肽在一定程度上可改善此类损伤对MC3T3-E1细胞的影响。  相似文献   

10.
以巴戟天为原料,通过酶辅助浸提法提取多糖,采用化学和仪器分析法研究多糖的pH、相对黏度、溶解性、光谱特征、空间构像等理化性质,采用噻唑蓝法测定MC3T3-E1细胞增殖率,酶联免疫法测定Ⅰ型胶原蛋白(collagen typeⅠ,COLⅠ)和骨钙素(osteocalcin,OCN)分泌量及碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,评价多糖提取物对成骨细胞增殖的影响。结果表明,巴戟天多糖属于酸性多糖,pH为6.15±0.13,相对黏度为1.26±0.12,具有糖的特性和三股螺旋结构,溶解性较好,不含蛋白质或多肽;巴戟天多糖提取物浓度为50 μg/mL时,MC3T3-E1细胞增殖率极显著增加(P<0.01),达149.67%,COLⅠ和OCN的分泌量极显著增加(P<0.01),分别增加44.98%和85.01%,ALP活性极显著提高(P<0.01),提高了258.95%。表明巴戟天多糖提取物能显著促进MC3T3-E1细胞增殖与分化。  相似文献   

11.
酶法制备的骨胶原蛋白肽为混合肽,通常具有多种潜在的生物活性,但目前缺乏基于促成骨细胞增殖活性的靶向性研究。本实验以酶法制备的牦牛骨胶原蛋白肽为原料,采用高效液相色谱法与纳米液相色谱-串联质谱法分别测定混合肽的分子质量与序列构成,基于与表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的CDOCKER半柔性对接,靶向筛选具有潜在促成骨细胞增殖活性的骨胶原蛋白肽,并进行体外细胞增殖培养验证。结果表明,共鉴定得到78 条牦牛骨胶原蛋白肽,主要以低分子质量肽段为主(小于3 000 Da的组分占91.8%),通过与EGFR对接发现,多肽GPAGPQGPRGDKGETGEQ(GP-18,1 736.815 Da)、TPEVDDEALEKFDK(TP-14,1 634.775 Da)、GPAGPQGPRGDKGETGE(GP-17,1 608.757 Da)、GKSGDRGETGPAGPAGPIGPV(GK-21,1 875.951 Da)和GKSGDRGETGPAGPAGPIGPVG(GK-22,1 932.973 Da)具有潜在促成骨细胞增殖活性。小鼠前成骨细胞系MC3T3-E1细胞培养实验结果表明,3.0 mg/mL GK-22促成骨细胞相对增殖率达106%,显著高于空白组(P<0.05)。本研究可为促成骨细胞增殖活性肽的靶向筛选和工业化制备提供理论参考。  相似文献   

12.
刘艳双  侯焘  郭丹郡  刘维维  石文  何慧 《食品科学》2018,39(13):241-245
目的:研究胶原肽(collagen peptides,CPs)对小鼠的促钙吸收作用。方法:采用小鼠低钙膳食模型法, 以昆明雄性小鼠为实验动物,设置正常组、低钙模型组、碳酸钙组、CPs低剂量(500 mg/kg mb+CaCO3)、高剂量 (1 000 mg/kg mb+CaCO3)组、酪蛋白磷酸肽对照组,连续灌胃6 周,考察小鼠血清钙、磷、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活力、钙吸收率、各项骨指标及骨微观结构、骨小梁形态变化。结果:CPs低、高剂量组小 鼠的ALP活力显著低于低钙模型组(P<0.05),其骨长度、干质量指数、骨钙含量、骨矿物密度(bone mineral density,BMD)、骨矿物含量(bone mineral content,BMC)均显著高于低钙模型组(P<0.05),CPs低剂量 组可使喂食低钙饲料的小鼠的各项指标达到正常组小鼠的水平。CPs低剂量组小鼠的ALP活力显著低于碳酸钙组 (P<0.05),其骨钙含量、BMD、BMC均显著高于碳酸钙组(P<0.05),提示补充碳酸钙的同时补充CPs,其促钙吸 收效果更好。结论:CPs可提高小鼠钙吸收率,增加骨小梁数目及强度,促进骨骼生长,从而能有效促进钙的吸收。  相似文献   

13.
猪皮胶原多肽螯合钙增加大鼠骨密度   总被引:2,自引:0,他引:2  
许先猛  董文宾 《食品科学》2017,38(23):191-195
以实验室制备的猪皮胶原多肽(collagen polypeptide,CP)和葡萄糖酸钙为原料,采用液体反应法合成胶原多肽螯合钙(calcium-binding CP,CP-Ca),并评价CP-Ca增加SD大鼠骨密度(bone mineral density,BMD)作用。将120只断乳雌性4周龄SD大鼠随机分为10组:1)对照组(灌胃去离子水);2)低、中、高剂量CP-Ca组(139.28、278.55、557.10 mg/(100 g·d));3)低、中、高剂量CaCO_3组(25、50、100 mg/(100 g·d));4)低、中、高剂量CP+CaCO_3组(139.28 mg/(100 g·d)CP+25 mg/(100 g·d)CaCO_3、278.55 mg/(100 g·d)CP+50 mg/(100 g·d)CaCO_3、557.10 mg/(100 g·d)CP+100 mg/(100 g·d)CaCO_3)。所有实验大鼠饲喂基础饲料,自由饮用去离子水。实验过程中,每周测定大鼠的体质量和身长,灌胃第4周做3 d钙代谢实验。测定大鼠血清钙(S-Ca)、血清磷(S-P)浓度、碱性磷酸酶(alkaline phosphatese,ALP)活力、大鼠BMD和骨钙含量,并对大鼠股骨进行扫描电子显微镜(scanning electron microscope,SEM)分析。结果显示,中、高剂量CP-Ca组和高剂量CP+CaCO_3组可以显著促进大鼠体质量增加和发育(P0.05),CP-Ca效果更为明显。CP-Ca组和CP+CaCO_3组的ALP活力显著低于对照组(P0.05),而中、高剂量CP-Ca组和中、高剂量CP+CaCO_3组BMD显著高于对照组(P0.05),且高剂量CP-Ca组高于对应剂量CP+CaCO_3组,各剂量CP-Ca组和CP+CaCO_3组钙表观吸收率分别高于对应CaCO_3组,CP-Ca具有促进大鼠骨生长、发育、骨钙沉积的作用。SEM结果显示,CP-Ca和CP+CaCO_3能够预防和改善大鼠因长期钙摄入不足引起的骨质疏松症。CP-Ca溶解性高、解离性好,富含钙元素及多肽,具有预防骨质疏松症、增加骨质密度的作用。  相似文献   

14.
15.
目的:研究金枪鱼骨胶原肽对葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)诱导急性溃疡性结肠炎小鼠的预防效果。方法:将小鼠随机分为正常组、造模组、骨胶原肽组,正常组和造模组小鼠每日灌胃生理盐水,骨胶原肽组每日灌胃300 mg/kg的骨胶原肽。除正常组外,造模组和骨胶原肽组采用3.5%的DSS自由饮用8 d建立小鼠急性溃疡性结肠炎模型。记录每日小鼠体重,评价疾病活动指数(disease activity index,DAI),测定脏器指数,留取结肠组织测量长度并对其进行HE染色,观察病理变化。运用酶联免疫法(ELISA)检测血清和结肠组织中肠道黏膜屏障损伤指标内毒素(LPS)、二胺氧化酶(DAO)的含量以及抗氧化损伤指标超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力。结果:与正常组相比,造模组小鼠的体重下降,DAI评分明显升高,肝脾肿大,胸腺萎缩,同时结肠长度显著缩短并且病理损害严重。与造模组相比,骨胶原肽灌胃后小鼠血清和结肠组织中LPS和DAO水平均极显著降低(P<0.01),SOD和GSH-Px活力均极显著升高(P<0.01)。结论:金枪鱼骨胶原肽具有减轻急性溃疡性结肠炎症状的作用,推测其通过修复肠道损伤,提高机体抗氧化能力发挥结肠炎预防保护作用。  相似文献   

16.
王建军 《肉类研究》2012,26(1):27-31
以新鲜猪肉、胡萝卜和鹅骨泥为原料,制作鹅骨泥营养强化灌肠,以感官评价、剪切力和系水力为测试指标,通过 L9(34)正交试验筛选几种原料的最佳配比,并对其营养成分进行测定.结果表明:几种原料的最佳用量分别为鹅骨泥4%、瘦肥肉质量比4:1、胡萝卜10%(以猪肉质量计),在此最佳配比条件下,鹅骨泥营养灌肠产品的感官评为12分、剪切力为0.38N、系水力为96.83%;营养成分分析测定结果表明,鹅骨泥营养灌肠的蛋白质含量为20.26%,脂肪含量为21.77%,钙、磷含量分别为0.40%、0.26%,VA、β-胡萝卜素含量分别为450、48mg/kg,含有17种氨基酸,其中必需氨基酸 7种,天门冬氨酸和亮氨酸含量较高,分别为1.625、1.61g/100g.这表明鹅骨泥营养灌肠是一种高蛋白、矿物质丰富、维生素含量高、氨基酸组成齐全的肉制品  相似文献   

17.
The effects and mechanisms of soybean isoflavone on osteoblast (OB) proliferation in vitro were investigated. Fifty female Wistar rats were randomly divided into five groups with 10 rats in each group. Rat OBs were separated and cultured. The first generation of OBs cultured for 48 hr at various concentrations of isoflavone were set as the experimental groups, the OBs exposed to estradiol (E2) culture were considered as positive control group. The biological characterization of OBs was investigated by phase contrast microscopy and alkaline phosphatase (ALP) histochemistry. The concentrations of interleukin (IL-1), osteoprotegerin (OPG), transforming growth factor (TGF), granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF), and vascular endothelial growth factor (VEGF) in isoflavone culture solutions were determined. Proliferation rate of OBs was increased in experimental group comparing that in the blank group. ALP activity in experimental group was higher than that in blank group. No significant differences of ALP activity were observed between E2 culture group and isoflavone group at concentrations of 10−5 and 10−7 mM (P > 0.05). Furthermore, in the experimental groups at low isoflavone concentrations, the concentrations of OPG, TGF, and VEGF were increased and positively correlated with OB proliferation. However, the concentrations of IL-1, GM-CSF were decreased at higher concentration of isoflavone and were negatively correlated with OB proliferation. Soybean isoflavone could promote the growth and proliferation of rat OB, it might act as the stimulator of OPG, TGF, and VEGF pathway, and the inhibitor of IL-1, GM-CSF pathway as well.  相似文献   

18.
目的:成熟的鲫鱼卵经提取、分离纯化得到唾液酸糖蛋白(sialyglycoproteins of Carassius auratus eggs,CA-SGP),分析其化学结构,及对前成骨细胞MC3T3-E1增殖分化的影响。方法:采用水提法从成熟鲫鱼卵中提取水溶性蛋白,经阴离子交换色谱、凝胶过滤色谱分离纯化鲫鱼卵水溶性蛋白得到CA-SGP,测定其基本组成,采用高效凝胶液相色谱和聚丙烯酰胺凝胶电泳测定其分子质量和纯度,PMP柱前衍生高效液相色谱法测定其单糖组成;采用噻唑蓝法测定MC3T3-E1细胞的增殖率,酶联免疫法测定Ⅰ型胶原蛋白(collagen type Ⅰ,COLⅠ)和骨钙素(osteocalcin,OCN)的分泌量及碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)的活性,茜素红染色法测定矿化结节的数量。结果:得到单一的组分CA-SGP,在高效凝胶过滤色谱色谱图上呈现单一的糖和蛋白的检测重叠峰,在凝胶电泳图上呈现单一弥散性条带,其蛋白质含量为14.33%,己糖含量为62.81%,N-乙酰神经氨酸(N-acetylneurainic acid,Neu5Ac)含量为19.72%。单糖组成测定结果显示:CA-SGP主要由甘露糖、葡萄糖胺、半乳糖胺组成,其物质的量比为7.61∶6.70∶1.00;MC3T3-E1细胞与CA-SGP共同孵育后,其增殖率显著增加,COLⅠ和OCN的分泌量分别增加了39.28%和83.06%,ALP活性提高了285.08%,矿化结节的数量增加了96.41%,说明CA-SGP显著促进MC3T3-E1细胞增殖、分化和矿化。结论:CA-SGP为富含Neu5Ac的糖蛋白,具有显著促进MC3T3-E1细胞增殖、分化和矿化的作用,对开发抗骨质疏松功能性食品具有重要意义。  相似文献   

19.
以三文鱼骨为原料制备三文鱼骨胶原低聚肽,与钙离子螯合为三文鱼骨胶原低聚肽钙并作为受试物,以低中高剂量作用SD大鼠,并设置空白组和碳酸钙阳性对照组,检测体重、钙吸收率与储留率、股骨干重、股骨长、骨密度等重要指标,评价三文鱼骨胶原低聚肽钙的增加骨密度功能。结果显示,螯合物的总蛋白含量为65.37%,螯合率为52.56%,螯合物得率为43.12%;各试验组体重无显著性差异(p>0.05),中、高剂量组和碳酸钙组的钙吸收率分别为39.18%、40.52%、38.38%,储留率分别为38.80%、39.27%、37.58%,显著高于空白对照组36.31%,35.91%(p<0.05),且高剂量组明显优于同等钙含量的碳酸钙组(p<0.05);另外高剂量组的股骨干重、股骨中点直径分别为0.57(g)和2.40(mm),股骨近端、远端和中点密度分别为0.19、0.22、0.17(g/cm2),均高于空白组(p<0.05),与碳酸钙组无显著性差异。表明三文鱼骨胶原低聚肽钙具有良好的促钙吸收效果和增加骨密度的功能,为相关新型功能性食品的开发利用奠定良好的理论基础。  相似文献   

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