碱性蛋白酶对蛹虫草蛋白质水解的工艺技术优化研究

以蛹虫草蛋白粉为原料,利用碱性蛋白酶进行酶解处理,并对其酶解工艺进行优化研究。以水解度和酶解得率为评价指标,采用正交试验结果对蛹虫草水解工艺进行优化。当底物浓度为8%、碱性蛋白酶的加酶量为1.3%、酶解时间10 h、酶解温度为53 ℃时的水解度最高,为15.01%;当底物浓度为8%、碱性蛋白酶的加酶量为1.9%,酶解时间8 h、酶解温度为56 ℃时的酶解得率最高,为75.27%。经碱性蛋白酶酶解、过滤、干燥等工艺处理后,酶解产物的分子质量小,酶解剩余物少,酶解得率高,可以进行产业化推广应用。     

蛹虫草菌丝体酶解制备多肽的工艺研究

蛹虫草和冬虫夏草是药食兼用的真菌,具有对人体有益的多种活性作用。以液体发酵后干燥的蛹虫草菌丝体粉末为原料,分别以底物浓度、温度、pH、加酶量和时间为条件,分析单因素对菌丝体酶解效果,结果表明:当蛹虫草菌丝体酶解液多肽指数达最大时,各个条件分别为:底物浓度10%左右;温度42℃左右;pH为2.0;加酶量2.5%;时间8 h。然后通过正交试验优化菌丝体多肽,获得最佳酶解工艺,即反应温度为42℃、时间为8 h、底物浓度为10%、加酶量为2.5%。最后利用Tricine-SDS-PAGE电泳确定多肽的分子量范围,结果表明:蛋白酶酶解蛹虫草菌丝体酶解液多肽主要分布在3 160 Da~7 629 Da附近。     

酶法水解芝麻粕制备芝麻多肽

以芝麻制油后副产物芝麻粕为原料,采用蛋白酶水解法制取芝麻多肽。在水解酶筛选、单因素试验基础上,以多肽产率为指标,设计正交试验对碱性蛋白酶酶解芝麻粕制取芝麻多肽工艺进行了优化。结果表明,最佳工艺参数为:pH 9.0,料液比1∶20,加酶量11 000 U/g,酶解时间2.5 h,酶解温度65℃。在此条件下,多肽产率达到3.51%。     

羊骨多肽酶法制备工艺优化及抗氧化活性研究

以羊骨粉为原料,用碱性蛋白酶进行酶解制备具有抗氧化活性的酶解多肽液。以水解度为指标,优化了羊骨多肽酶法制备工艺条件,并对酶解液的抗氧化能力进行了测定。结果表明,碱性蛋白酶制备羊骨多肽的最佳制备工艺条件为酶解时间5 h,酶解温度45 ℃,加酶量8 200 U/g,酶解pH值10,该条件下羊骨粉的水解度为(28.36±0.02)%。羊骨粉酶解液与对照组(未被碱性蛋白酶酶解的羊骨粉溶液)的抗氧化能力均随着溶液浓度的增加而上升,当酶解液浓度达到2.5 mg/mL时对DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基清除率和还原力均达最大值,分别为(65.42±0.11)%,(82.30±0.27)%,(79.83±0.22)%,0.484±0.007,显著高于对照组(P＜0.05)。说明碱性蛋白酶水解羊骨粉得到的酶解多肽液具有体外抗氧化活性。     

酶法亚麻粕多肽的制备

以亚麻粕为主要原料,采用双酶分步水解法制备亚麻粕多肽。通过单因素试验和正交试验对亚麻粕多肽的制备工艺进行优化。最佳酶解工艺为:料液比为1∶12(g/m L)先用10%的纤维素酶、p H4.8、50℃下预处理2h;再用2%的碱性蛋白酶在p H10.0、60℃下水解3h,此时多肽得率为58.32%。     

亚麻籽多肽制备工艺优化及生物活性研究

该文以亚麻籽饼粕为原料,通过对8种蛋白酶的筛选,经过单因素试验研究酶添加量、酶解温度、酶解pH值、料液比、酶解时间对亚麻籽饼粕酶解液黄嘌呤氧化酶抑制活性和多肽得率的影响。采用响应面分析法对亚麻籽多肽制备工艺条件进行优化。结果表明,最佳制备工艺优化条件为碱性蛋白酶添加量4 060.17 U/g、酶解pH10.5、酶解温度49.59℃、酶解时间5.18 h、料液比1∶20（g/mL）,此条件下酶解多肽得率为67.24%,对黄嘌呤氧化酶抑制活性为60.04%,·OH清除率为90.65%,ABTS+自由基清除率为92.68%。对比常用抗氧化剂,在ABTS+自由基清除能力方面,亚麻籽多肽低于维生素C,在·OH清除能力方面,亚麻籽多肽已接近维生素C水平。通过抗氧化活性和黄嘌呤氧化酶抑制活性试验结果表明,碱性蛋白酶酶解制备的亚麻籽多肽具有较好的抗氧化活性和黄嘌呤氧化酶抑制活性。     

响应面法优化葵花籽粕蛋白酶解工艺研究

以葵花籽粕为原料,以酶解进程中酶解物氮收率和相对分子质量分布为评价指标,从碱性蛋白酶、中性蛋白酶、复合蛋白酶、风味蛋白酶和木瓜蛋白酶5种酶中筛选制备优质葵花籽多肽合适的蛋白酶。结果表明:葵花籽粕在碱性蛋白酶作用下,其氮收率最大,且酶解物相对分子质量分布较为理想。利用响应面法优化碱性蛋白酶酶解工艺,得出其最佳工艺条件为酶添加量3%,酶解时间2.10 h,p H10.0,料液比1∶16 (g/mL),在此条件下,葵花籽粕酶解物的氮收率77.11%。     

酶法亚麻粕多肽的制备

以亚麻粕为主要原料,采用双酶分步水解法制备亚麻粕多肽。通过单因素试验和正交试验对亚麻粕多肽的制备工艺进行优化。最佳酶解工艺为:料液比为1∶12(g/m L)先用10%的纤维素酶、p H4.8、50℃下预处理2h;再用2%的碱性蛋白酶在p H10.0、60℃下水解3h,此时多肽得率为58.32%。     

双酶复合水解蜂蛹蛋白工艺研究

研究了脱脂蜂蛹蛋白的酶法水解工艺。以水解度和多肽得率为指标,从中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、风味酶中选出中性蛋白酶和碱性蛋白酶进行双酶复合水解。采用单因素与响应面优化设计,得出最佳酶解工艺条件为:复合酶比例1︰1(g/g)、加酶量4.67%、p H 8.27、料液比1︰12(g/m L)、酶解温度48.44℃、酶解时间4 h。此优化试验条件下,蜂蛹蛋白理论水解度46.05%,实际水解度为45.89%。此工艺可推广应用于蜂蛹蛋白多肽产业化生产的备选工艺。     

蒙古口蘑(Tricholoma mongolicum)多肽制取技术的研究

以蒙古口蘑为原料,经过超临界CO2流体萃取纯化及可控有限改性挤出处理后,酶解制取蒙古口蘑多肽。采用两段式酶解法,一段酶解采用碱性蛋白酶对蒙古口蘑进行水解,二段采用风味蛋白酶对一段酶解物进行修饰处理,以校正酶解液风味。通过正交试验方法对影响酶解效果及产品风味的主要因素进行研究和分析,结果表明蒙古口蘑碱性蛋白酶酶解工艺最佳条件为:温度55℃,时间2.5h,底物浓度2%,酶用量1.5%(E/S);所得酶解液利用风味蛋白酶较味后,三倍体积浓度65%的乙醇溶液进行醇沉脱多糖,蒙古口蘑多肽得率为32.10%。     

酶解罗非鱼骨提取胶原多肽的工艺优化

以罗非鱼骨为研究对象,研究其胶原蛋白酶解为胶原多肽的工艺。通过单因素和正交试验,以水解度和胶原蛋白提取率为考核指标,确定了酶解罗非鱼骨的最佳用酶为碱性蛋白酶,最佳工艺条件为:酶解4 h,加酶量4 000U/g,pH 10.5,底物浓度4.5%。在此条件下,鱼骨的水解度为28.81%,胶原多肽提取率为45.02%。试验为深入研究和开发罗非鱼骨胶原多肽及其相关产品提供了理论和技术基础。     

核桃雄花多肽酶解法制备工艺

为优化核桃雄花多肽酶解法制备工艺,该试验以响应面法对核桃雄花多肽制备工艺进行研究。对中性蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、碱性蛋白酶、菠萝蛋白酶和风味蛋白酶进行酶种类筛选及复配,以多肽得率为指标,通过单因素试验及响应面法研究复合酶添加总量、酶解时间、酶解温度、液料比对核桃雄花多肽得率的影响。结果表明,影响核桃雄花蛋白的多肽得率的因素顺序依次为酶解温度>酶解时间>复合酶添加总量>液料比。核桃雄花的最优酶解工艺为液料比8∶1(mL/g)、复合酶添加总量51 500 U/g（木瓜蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶质量比为25∶6∶20）、酶解温度45℃、酶解时间3.0 h,实际多肽得率达到30.00%。     

3种蛋白酶对鲶鱼骨肉泥中多肽得率和钙溶出率的比较研究

利用鲶鱼采肉后的鱼头、鱼骨、鱼皮等副产物为原料,将其高压处理后,去油、绞碎得到骨肉泥。分别利用胃蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶酶解骨肉泥,以多肽得率和钙溶出率为指标比较3种酶的酶解效果,以期获得最大量的钙螯合肽。试验结果表明:胃蛋白酶(酶解时间3 h,加酶量6000 U/g,液料比4:1)的最高多肽得率为44.40%,钙溶出率为77.04%;中性蛋白酶(酶解时间3 h,加酶量6000 U/g,液料比3:1)的最高多肽得率为56.12%,钙溶出率为17.45%;碱性蛋白酶(酶解时间3 h,加酶量10000 U/g,液料比4:1)的最高多肽得率为61.49%,钙溶出率为33.84%。试验说明利用3种蛋白酶酶解骨肉泥时,碱性蛋白酶的多肽得率高于胃蛋白酶和中性蛋白酶,但胃蛋白酶的钙溶出率远远大于中性蛋白酶和碱性蛋白酶,因此选定胃蛋白酶作为从骨肉泥中提取钙螯合肽的最适宜用酶。     

美拉德反应制备虫草风味调味基料的工艺研究

研究了以蛹虫草酶解液为原料进行美拉德反应制备虫草风味调味基料的工艺。选取木瓜蛋白酶,以水解度DH为指标,通过单因素和正交试验确定了酶解的最佳条件:酶解温度60℃,酶解时间6h,加酶量2%。根据正交试验和感官评定,确定了制备虫草风味调味基料的配方:在酶解液中加入0.4%L-谷氨酸,3%葡萄糖,在pH 4,105℃下反应15min。在最佳工艺条件下制得的调味基料呈深黄色,虫草香味浓郁饱满,口感纯正。     

鸡内金酶解物制备工艺优化及抗氧化活性研究

目的：研究鸡内金的最佳酶解工艺条件,并分析其酶解物的氨基酸组成、分子量分布及抗氧化活性。方法：以鸡内金多肽得率、酶解液水解度为指标,采用正交试验优化鸡内金的酶解工艺条件;采用氨基酸分析仪、高效凝胶渗透色谱法测定鸡内金酶解物的氨基酸组成和分子量分布;并考察鸡内金酶解物对DPPH自由基和ABTS+自由基的清除能力。结果：鸡内金最佳酶解工艺条件为以中性蛋白酶和碱性蛋白酶共同酶解,酶解温度60 ℃,酶解时间9 h,酶解pH值11,蒸煮时间6 h。该条件下鸡内金多肽得率为75.68%,水解度为14.43%;鸡内金酶解物的必需氨基酸与非必需氨基酸的比值为58.56%,具有较高的营养价值;鸡内金酶解物相对分子质量＜1 000 Da所占比例为90.2%,易于消化吸收;当鸡内金酶解物质量浓度为1.5 mg/mL时,其对ABTS+自由基的清除率达到94.19%。结论：最佳酶解工艺下,鸡内金多肽得率高达75.68%,具有较好的抗氧化活性。     

魔芋ACE抑制肽酶法制备工艺研究

采用酶解法对魔芋蛋白质进行酶解,研究魔芋ACE抑制肽的制备工艺。以ACE抑制肽含量、多肽得率为指标,通过单因素试验和正交试验设计,优化了碱性蛋白酶酶解魔芋蛋白制备ACE抑制肽的工艺。结果表明,碱性蛋白酶酶解魔芋蛋白制备ACE抑制肽的最佳工艺条件为:酶解pH 8.5、酶解温度55℃、酶用量3 000 U/g、酶解时间210 min,在此条件下多肽得率为11.95%;ACE抑制肽含量为35.79 mg。     

核桃多肽的制备及其体外抗氧化性研究

以核桃蛋白为原料,以水解度为指标,通过单因素和正交试验优化了碱性蛋白酶酶解核桃蛋白制备抗氧化肽的工艺参数。得到碱性蛋白酶最佳酶解条件为酶添加量5%,底物浓度3%,酶解温度55℃,酶解p H为9.0,酶解时间6 h;在各酶最佳条件下获得的核桃多肽具有一定的抗氧化性。     

葵花籽多肽的制备及其降压活性研究

试验以低温脱脂葵花籽粕为原料,进行脱脂和脱绿原酸处理后,用碱性蛋白酶制备葵花籽多肽。以水解度和ACE抑制率为评价指标,对底物浓度、加酶量、酶解温度、酶解时间和pH值进行单因素试验,在此基础上采用响应面试验优化碱性蛋白酶制备葵花籽多肽的最佳水解工艺。结果表明:底物浓度为15g/mL、加酶量为3 700U/g、酶解温度为56℃和pH值为8.2的条件下水解3h,ACE抑制率可达63.74%。     

双酶法水解辣椒粕蛋白的工艺研究

以水解度和肽得率为评价指标,研究了复合蛋白酶和风味酶双向酶解辣椒粕蛋白制备多肽的工艺条件,并在单因素试验的基础上采用正交试验对此工艺进行优化。结果表明,复合蛋白酶和风味酶双向酶解辣椒粕蛋白制备多肽的最佳工艺条件为：复合蛋白酶/风味酶质量比为2∶1,总酶用量为2%,酶解时间为6 h,酶解pH值为6.5,酶解温度为50 ℃。在此最佳条件下进行验证试验,测得酶解液的水解度为19.44%,肽得率为6.52%。     

酶法制备黑豆粕粉多肽的工艺研究

该试验以黑豆粕粉为原料,以蛋白水解度为评价指标,从风味蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶中筛选水解效果最好的蛋白酶。考察酶解pH、加酶量、酶解温度和酶解时间对黑豆粕粉蛋白质水解度的影响。在单因素试验结果基础上,采用响应面试验对黑豆粕粉多肽的酶解条件进行优化。结果表明,碱性蛋白酶最适合酶解黑豆粕粉多肽,其最佳酶解条件确定为酶解温度55 ℃、酶解pH 9、酶解时间260 min、加酶量4.3%。在此最佳条件下,蛋白水解度为35.23%,较优化前蛋白水解度提高1.93%。