抗菌肽的提取分离及抑菌机理研究进展

传统杀菌剂和抗生素的长期大量使用不但导致部分病原微生物和环境害虫产生耐药性,同时也存在着严重的环境和健康风险。因此继续寻找和开发不易产生耐药性的新型抗菌物质显得非常迫切,也具有重要意义,天然抗菌肽是一类小分子阳离子肽,是机体天然防御系统的重要组成部分。它们具有较宽的抗菌活性和不同于传统抗生素的作用机制。部分抗菌肽对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌、真菌、寄生虫、包膜病毒和癌细胞均不同程度的抑制和杀伤作用。抗菌肽在抑制病原微生物方面的特性使其有望成为传统杀菌剂和抗生素的替代物,在医疗工业和食品添加剂行业具有很好的应用前景。抗菌肽的分离纯化本文对抗菌肽研究进行了概述,其中重点分析了抗菌肽在提取分离及抑菌机理领域的研究进展。     

生物抗菌肽抑菌机理及其在饮料工业中的应用

生物抗菌肽作为新兴的食品防腐剂,有其独特的特点和广泛的应用前景。本文对生物抗菌肽的分类、优点及其作用机理进行了介绍,对其在饮料工业中的应用进行了分析,并对其应用前景进行了展望。     

抗菌肽多靶点作用抑菌机理研究进展

病原微生物引起的感染性疾病严重威胁人类公共安全,特别是多重耐药性细菌。抗菌肽可使细菌不产生耐药性或降低耐药性,而且具有热稳定性好、抑菌活性高、特异性强、对哺乳动物细胞毒副作用少等优势,具有主动防御和免疫等生理功能,有望成为抗菌药物最理想替代品。抗菌肽对细胞具有多靶点单独或协同抑菌作用,因此研究抗菌肽多作用靶点抑菌机制对抗菌肽应用研究具有重要指导意义。作者从细胞壁损伤机制、细胞膜损伤机制、胞内生物大分子合成影响机制、物质与能量代谢关键酶活性影响机制、线粒体损伤机制和免疫调节机制等多作用抑菌靶点视角对抗菌肽抑菌机理进行了系统综述,并对抗菌肽抑菌机理研究进行了展望,以期为抗菌肽抑菌机理研究提供参考。     

壳聚糖的抑菌机理及抑菌特性研究进展

本文介绍了壳聚糖的抑菌作用及其在食品防腐保鲜方面的应用，还对壳聚糖的抑菌机理及其影响因素进行了较为全面的讨论。     

桑叶中抑菌有效成分的提取及分离

对桑叶提取物的提取工艺、提取物抑菌活性进行研究,以金黄色葡萄球菌和大肠杆菌为指示菌,以抑菌圈直径为考察指标,优化提取工艺条件,并对桑叶提取物水溶液进行初步分离,分析最佳萃取相。结果表明,桑叶抑菌有效成分提取工艺为：乙醇浓度70%vol,提取温度70℃,提取时间4 h,固液比为1∶30。     

林蛙抗菌肽的制备及抑菌活性研究

目的超声波方法提取林蛙表皮多肽,对其氨基酸组成和抑菌活性进行分析。方法以p H 4.5醋酸-醋酸钠缓冲液为提取溶剂,超声波方法提取林蛙表皮多肽,超高效液相色谱(UPLC)方法分析其氨基酸组成,同时采用活菌计数和滤纸片方法测定其抑菌活性。结果超声波方法提取林蛙多肽,提取率为19.81%,多肽分子量在3000~5000 Da,该活性多肽作用2 min对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、铜绿假单胞菌抑菌率均可达85%以上,作用5 min抑菌率可达100%;其对4株菌抑菌圈直径均可达10 mm以上。结论采用超声波方法可以从中国林蛙皮中提取抗菌肽物质,该抗菌肽为碱性多肽,对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌均具有很强的抑菌活性。     

抗菌肽抗菌机理的研究现状及趋势

抗菌肽广泛存在于从原核生物到人类的各个物种有机体和机体组织中，一般都具有广谱抗菌活性，其抗菌机理近年来成为国内外研究的热点。本文综述了抗菌肽及其抗菌机理研究的最新进展，阐述了先天免疫在哺乳动物来源抗菌肽发挥抗菌活性时的重要作用，并对抗菌肽的开发应用前景进行了展望。     

仿刺参体壁中抗菌肽的分离及抑菌活性

从仿刺参体壁中分离纯化出抗菌肽并研究其抑菌活性。以鲜活仿刺参体壁为原料,采用5%乙酸浸提法进行粗提,以抑菌活性为指标进行分离。经超滤系统超滤,大孔吸附树脂柱层析分离纯化,采用酶标仪比浊法检测各组分对大肠埃希氏菌（Escherichia coli）、肠炎沙门氏菌（Salmonella eternitidis）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）和枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）的抑菌活性。采用Tricine-十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（Tricine-sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,Tricine-SDS-PAGE）检测抗菌肽分子质量。结果表明：通过超滤分离,分别得到分子质量＜1、1～5 kD和5～10 kD组分,其中分子质量＜1 kD组分的抑菌活性最高,选用该组分继续进行大孔吸附树脂柱层析分离,得抑菌活性最高的组分,其Tricine-SDS-PAGE结果表现为单一条带,分子质量约为4.35 kD。     

核桃谷蛋白抗菌肽的分离纯化及抑菌稳定性分析

目的：以核桃粕谷蛋白为原料生产抗菌肽,研发一种新型抗生素的替代品。方法：通过菌酶协同固态发酵法（枯草芽孢杆菌和碱性蛋白酶协同）从核桃粕谷蛋白中制备抗菌肽,通过超滤、凝胶层析过滤、液相色谱-串联质谱（liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS）和分子对接对核桃粕谷蛋白抗菌肽（walnut glutelin antimicrobialpeptide,WGP）进行分离、纯化和筛选。以对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌性保持率为指标,研究抗菌肽的抑菌稳定性。结果：经超滤、凝胶层析分离后,WGP-ⅢA和WGP-ⅢC组分均具有较强抗菌活性;LC-MS/MS结合虚拟筛选,从2种组分中共鉴定得到6条多肽,分子对接筛选得到3个肽段,分别为WGP-ⅢA组分的LAEAYNIPDTIARRL和WGP-ⅢC组分的SHSVIYVIR、APQLLYIVK;分子对接结果显示,WGP-ⅢC组分的抑菌活性更强;抑菌稳定性分析表明,核桃谷蛋白抗菌肽在高温热处理、紫外线、不同pH值下和不同蛋白酶处理后均表现出较好的稳定性。结论：核桃粕谷蛋白抗菌肽在食品抑菌防腐...     

辣椒籽抗菌肽提取条件优化及分离纯化

以黄曲霉为指示菌,抑菌圈直径为考察指标,比较不同辣椒籽蛋白提取物的抑菌效果。结果显示,6 种辣椒籽均对黄曲霉生长有抑制作用,其中贵州灯笼椒的抑菌效果最好。以该品种辣椒籽为后续实验原料,对其提取条件进行优化。获得最佳提取条件为：浸提液为乙二胺四乙酸缓冲液,料液比1∶5.05（g/mL）、浸提时间16.13 h、硫酸铵饱和度81.15%。在此优化条件下,辣椒籽抗菌肽抑菌圈直径可达23.89 mm,比优化前（12.34 mm）提高了93.06%。结合透析袋脱盐、10 kDa超滤管超滤以及葡聚糖凝胶层析,对辣椒籽抗菌肽进行分离纯化,纯化后的抗菌肽经Tricine-十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测已达到电泳纯,分子质量在7.8 kDa左右。     

新型鲶鱼体表黏液抗菌肽抑菌活性验证及抑菌机理

采用牛津杯法验证一段体外合成的来源于鲶鱼黏液抗菌肽的抑菌活性,并以腐败希瓦氏菌和大肠杆菌为试验对象,研究了抑菌作用及其机制。结果表明:所合成的抗菌肽对腐败希瓦氏菌和大肠杆菌均有明显的抑菌活性,最小抑菌浓度分别为0.063%和0.032%。扫描电镜结果表明:抗菌肽对腐败希瓦氏菌和大肠杆菌的细胞膜、细胞壁造成明显的损伤,并严重破坏微生物的细胞形态、结构。此外,抗菌肽还导致细菌细胞外膜通透性明显增强,使得胞内物质发生泄漏。用圆二色谱鉴定该抗菌肽在2.5%SDS溶液中呈现典型的α-螺旋结构。结论:鲶鱼体表黏液抗菌肽以桶板模型机制发挥抑菌作用的。     

产抗菌肽乳酸菌筛选及抗菌肽的分离纯化与特性研究

目的筛选得到产抗菌肽菌株,对抗菌肽进行分离纯化及理化性质研究。方法利用琼脂扩散法筛选产抗菌肽的菌株,运用细胞吸附解吸和阳离子交换层析法纯化抗菌肽,从热稳定性、酸碱稳定性和蛋白酶敏感性3方面研究抗菌肽的理化特性。结果筛选得到7株产抗菌肽的菌株,其中菌株4121具有较广的抑菌谱,命名为鼠李糖乳杆菌4121。对抑菌物质进行分离纯化和理化性质测定,电泳结果显示抗菌肽的分子量约为11 kDa,最终获得的抗菌肽比活力为12379.11 AU/mg,最终纯化倍数为91.99倍。该抗菌肽的抑菌能力在20~80℃及偏酸条件下具有很好的稳定性。同时该抗菌肽对蛋白酶K和α-胰凝乳蛋白酶敏感。结论筛选出的鼠李糖乳杆菌4121所产生的抗菌肽热稳定性及酸稳定性良好,具有广谱抑菌能力,并建立了有效的抗菌肽分离纯化法—细胞吸附解吸-阳离子交换层析法。     

抗菌肽的研究进展

抗菌肽是指具有抵制外界微生物侵害、消除体内突变细胞的一类小分子多肽。研究表明它除了具有抗菌作用以外,还具有抗肿瘤,抗病毒和抗真菌的作用。文章对抗菌肽的分类、生物活性、作用机理、分离提取等进行了系统的分析,并阐述了抗菌肽的应用及存在的问题,为抗菌肽更深层次的研究提供参考。     

中国林蛙皮抗菌肽的提取纯化及抑菌活性检测

采用酸化甲醇法提取中国林蛙皮肤中的抗菌肽,并采用凝胶色谱的方法对提取物进行纯化。结果表明：采用Sephadex G-50 和Sephadex G-25 串联凝胶层析法获取的F2 组分,即纯化后的抗菌肽的抑菌率可达90% 以上。抗菌肽对革兰氏阴性菌和阳性菌以及真菌均有一定抑制效果。对各受试菌株的最小抑菌浓度(MIC)分别为：金黄色葡萄球菌和链球菌为0.2mg/mL;枯草芽孢杆菌和大肠杆菌为0.4mg/mL;蜡样芽孢杆菌为0.8mg/mL;白色念珠菌为1.2mg/mL;酿酒酵母和毛霉为1.5mg/mL;根霉为2.0mg/mL。     

抗菌肽brevilaterin与ε-聚赖氨酸对金黄色葡萄球菌的协同抑菌机理

金黄色葡萄球菌是食品中常见的致病菌,控制食品中金黄色葡萄球菌的生长繁殖对提高食品安全性至关重要。本研究以金黄色葡萄球菌作为指示菌,考察了抗菌肽brevilaterin与ε-聚赖氨酸的协同抑菌机理。抑菌动力学结果表明抗菌肽与ε-聚赖氨酸对金黄色葡萄球菌具有协同抑菌效果;细胞膜质子动力势研究结果显示,抗菌肽对跨膜pH值梯度无明显影响,ε-聚赖氨酸会破坏跨膜pH值梯度,1/4最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)抗菌肽+1/4 MICε-聚赖氨酸(联用组)对跨膜pH值梯度产生了协同破坏作用;采用流式细胞术结合荧光显微镜考察细胞膜的完整性,发现抗菌肽对细胞膜完整性具有较强的破坏作用,1/4 MIC抗菌肽即可导致36.3%的膜破损,而ε-聚赖氨酸对膜完整性损伤较小,1/4 MICε-聚赖氨酸仅破坏10.4%的细胞膜完整性,两者联用可对细胞膜完整性产生协同破坏作用,导致51.3%细胞膜完整性发生损伤;采用透射电子显微镜观察了细胞超微结构,发现抗菌肽和ε-聚赖氨酸联用较单独使用对细胞形态和细胞内容物的泄漏产生了协同破坏作用;十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺...     

乳酸菌抗菌肽的分离纯化方法研究进展

随着人们对天然食品的关注逐渐增多,以及抗生素耐药性问题日渐严峻,具有作为化学添加剂与抗生素替代品潜力的乳酸菌抗菌肽已成为了研究热点。为了深入探索其结构、特性及作用机制,以便应用于食品加工、农业、畜牧业与医药生产等,需要首先将抗菌肽从成分复杂的发酵液中分离纯化。同时为满足工业化生产的需要,势必要提高分离纯化效率。文章综述了乳酸菌抗菌肽的分离纯化方法,期望有助于获得更多的新型乳酸菌抗菌肽并提高纯化效率。     

檵木叶抑菌活性成分提取分离及活性检测

用乙醇作提取溶剂，采用正交试验法对檵木叶抑菌活性成分提取条件进行研究，得最佳提取条件为A2B1C2，即60％乙醇、45℃、2h；选用四种树脂对该条件提取物的抑菌活性成分进行柱层析、梯度洗脱，以大孔吸附树脂、聚酰胺对檵木叶抑菌活性物分离效果较好，其水洗脱液抑菌活性最强；化学定性检识认为檵木叶含有多种抑菌活性成分，其主要活性成分可能为香豆素类。     

中国林蛙皮抗菌肽提取条件的优化研究

本研究以林蛙干皮为原料,采用甲醇、乙酸和磷酸盐三种浸提液提取有抑菌活性的多肽,并分别以提取温度、时间、液料比、pH值四因素对每种浸提液的提取方法进行三水平正交试验, 以进一步精纯后产物的抑菌活力为指标,探索林蛙抗繭肽的最优分离纯化工艺.结果表明,三种浸提液的最优条件分别是:甲醇法为浸提时间24h、温度0℃、液料比为22.5(w/v)、pH5.4;乙酸法为24h、0℃、液料比22.5、pH3.0;磷酸盐法为24h、20℃、液料比22.5、pH6.4.其中甲醇法浸提产物的抑菌活性最佳,粗提品经G-25层析后,力活提高了5倍,对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有抑制作用.     

乳酸链球菌素抑菌机理及在食品保鲜中的研究进展

乳酸链球菌素（Nisin）是由乳酸乳球菌乳酸亚种的某些菌株代谢过程中合成的一种天然生物防腐剂,具有良好的抑菌性,可以有效地抑制革兰氏阳性菌（金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、单增李斯特菌、小球菌等）,尤其是细菌芽孢的生长。且因为摄入后可快速被人体中的蛋白酶消化分解为各种氨基酸不会对人体产生毒害作用,因此被广泛的用于食品保鲜领域。本文主要综述了乳酸链球菌素的抑菌机理及其近10年来在食品保鲜领域中的应用,其中着重讨论了在果蔬保鲜中的应用,最后分析了乳酸链球菌素未来的发展方向,以期为乳酸链球菌素在食品保鲜中的进一步研究和应用提供理论参考。     

酪蛋白酶解物中抗菌肽的抑菌性及稳定性研究

对酪蛋白胰蛋白酶酶解物中抗菌肽的抗菌性及稳定性进行研究。实验通过以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和蜡样芽胞杆菌为指示菌,验证了抗菌肽的抑菌性,并以大肠杆菌为指示菌,研究了酶解物中抗菌肽在不同温度、不同pH值、不同储藏时间条件下的抑菌稳定性。结果表明:此抗菌肽能有效抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和蜡样芽胞杆菌的生长,具有广谱抗菌活性;碱性及中性条件下,此抗菌肽对大肠杆菌抑菌活性稳定,酸性条件下,抑菌活性随pH值下降而增强;此抗菌肽冻干样品在室温下可长期储藏。