抗NO生成的JAK3抑制剂的合成及其抗炎活性研究

为了探索抗一氧化氮(NO)生成的两面神激酶3(JAK3)抑制剂的抗炎效果,采用药效团拼接原理设计并合成5个7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶衍生物。体外活性评价表明,化合物N-(3-((5-(苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)苯基)丙烯酰胺(D3)和N-(3-((5-(苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)苯基)乙酰胺(D4)不仅能有效地抑制NO的合成(5.13±0.48)μmol/L,D4:IC₅₀=(4.67±0.98)μmol/L),对RAW264.7细胞毒性较低(IC₅₀>60μmol/L),而且可以微弱抑制JAK3激酶活性(D3:IC₅₀=272 nmol/L,D4:IC₅₀=849 nmol/L)。其中,化合物D4对角叉菜胶诱导小鼠模型的急性抗炎能力优于D3,可作为抗NO生成的JAK3抑制剂的先导化合物继续研发。     

脂肪胺基吲哚-2,3-二腈类DNA嵌入剂合成及抗肿瘤活性

以研究含有吲哚-二腈结构的良好抗肿瘤效果的DNA嵌入剂为目标,采用苯胺为原料经过肟化、取代、缩合反应合成了6个新结构脂肪胺基吲哚-2,3-二腈类DNA嵌入剂。目标化合物经过¹HNMR,¹³CNMR和HRMS确认结构。通过紫外-可见吸收光谱、荧光光谱、圆二色光谱、黏度测试评价了化合物与小牛胸腺DNA的相互作用。由结果可知,所有目标化合物对DNA均有明显的嵌入作用,其中化合物Ⅳc和Ⅳf的嵌入能力最好。体外抗肿瘤活性测试表明目标化合物对小鼠乳腺癌细胞4T1、小鼠结肠癌细胞CT26、小鼠黑色素瘤细胞B16F10均有明显的抑制活性,其半数抑制浓度(IC₅₀)最低可达到8.23μmol/L。对比阳性对照药5-氟尿嘧啶(IC₅₀=0.04μmol/L),化合物Ⅳc、Ⅳf对小鼠免疫细胞RAW264.7没有毒性(IC₅₀>100μmol/L),表现出更高的生物安全性。     

EGFR(T790M)抑制剂的设计、合成及活性评价

表皮生长因子受体(EGFR)的T790M突变最为频发,也是肺癌临床治疗失败的主要原因之一。鉴于先导化合物B6优良的抗H1975细胞系和异植瘤活性,对其进行了EGFR(T790M)激酶抑制活性的确认,并使用Autodock软件确认了两者的相互作用。以EGFR(T790M)为靶点对B6进行定向结构修饰,所得目标化合物经NMR和MS表征后,联合体外激酶、细胞生物活性与Autodock软件解释它们的构效关系。结果表明,3-(苯并[d][1,3]二氧杂-5-基)-1-(1-(乙烯基磺酰基)哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺的抗H1975细胞增殖活性(IC₅₀=(1.16±0.24)μmol/L)与B6(IC₅₀=(0.91±0.36)μmol/L)相似,尽管其对EGFR(T790M)的抑制活性(IC₅₀=(148.2±7.2)nmol/L)不如B6(IC₅₀=(22.0±2.6)nmol/L)。以7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺为母核,取代基分别为胡椒环基和4-取代哌啶基者可开发活性更优的EGFR(T790M)抑制剂,指导后期研究。     

简单BODIPY光动力化合物的合成及其抗胶质瘤活性

设计合成了基于BODIPY母核的简单化合物I₂-BODIPY,通过核磁共振波谱法、高分辨质谱法(HRMS)对其进行了表征。1,3-二苯基异苯并呋喃(DPBF)检测单线态氧实验表明I₂-BODIPY在溶液中有良好的活性氧(ROS)释放能力。以不同浓度的BODIPY、I₂-BODIPY(0、0.625、1.25、2.5、5、10μmol/L)处理胶质瘤U87、U251细胞。MTT法验证BODIPY、I₂-BODIPY能剂量依赖性地抑制胶质瘤细胞的增殖。在绿光(520 nm)照射下I₂-BODIPY对U87(IC₅₀=1.21μmol/L)、U251(IC₅₀=0.54μmol/L)细胞具有优异的光动力活性。JC-1法证明BODIPY、I₂-BODIPY能诱导细胞线粒体膜电位丧失进而触发U87和U251细胞早期凋亡，其机制可能是光照产生的大量ROS氧化破坏了线粒体膜，进而诱导细胞凋亡，发挥其抗胶质瘤活性。     

7-羟基黄酮的合成及活性研究

以间二苯酚为起始原料合成了8种7-羟基黄酮并进行了合成路线的探索,用1HNMR、ESI-MS对化合物进行结构表征,并采用Ellman法测试化合物对乙酰胆碱酯酶(ACh E)和丁酰胆碱酯酶(BCh E)的抑制活性。结果表明,所合成的化合物对ACh E均具有一定的抑制活性,其中,6-甲氧基萘环取代的化合物Ⅲh抑制活性最好,20μmol/L浓度下抑制率为34.71%,优于对照药物卡巴拉汀,为设计治疗阿尔茨海默症药物提供了重要模板。     

新型吲唑拼接鬼臼毒素衍生物的合成及抗肿瘤活性研究

以鬼臼毒素为原料,与N-丁二酸单取代-5-溴吲唑在DMAP/DCC催化下反应得到目标化合物。采用MTT法评价其对A549细胞、A549/DDP细胞、MCF-7细胞的体外抗肿瘤活性,Autodock评价新型吲唑拼接鬼臼毒素衍生物与微管蛋白秋水仙碱作用位点的结合能力。结果表明新型吲唑拼接鬼臼毒素衍生物对MCF-7细胞[IC₅₀ =（38.29±2.45）μM]、A549/DDP细胞[IC₅₀ =（82.43±2.35）μM]具有一定的抑制活性,且对A549/DDP耐药细胞具有较好的选择性,RF值小于1,对与微管蛋白秋水仙碱作用位点的ASN-101氨基酸残基与形成氢键（d=2.3?）,结合能（affinity）为-11.2 kcal/mol,能够较好的结合。     

新型吲唑拼接鬼臼毒素衍生物的合成及抗肿瘤活性研究

以鬼臼毒素为原料，与N-丁二酸单取代-5-溴吲唑在DMAP/DCC催化下反应得到目标化合物。采用MTT法评价其对A549细胞、A549/DDP细胞、MCF-7细胞的体外抗肿瘤活性，Autodock评价新型吲唑拼接鬼臼毒素衍生物与微管蛋白秋水仙碱作用位点的结合能力。结果表明新型吲唑拼接鬼臼毒素衍生物对MCF-7细胞[IC₅₀ =（38.29±2.45）μM]、A549/DDP细胞[IC₅₀ =（82.43±2.35）μM]具有一定的抑制活性，且对A549/DDP耐药细胞具有较好的选择性，RF值小于1,对与微管蛋白秋水仙碱作用位点的ASN-101氨基酸残基与形成氢键（d=2.3?）,结合能（affinity）为-11.2 kcal/mol,能够较好的结合。     

2-烯-甘草次酸酯及其脱氧化合物的合成与抗肿瘤活性研究

以18β-甘草次酸为起始原料,经C11位羰基还原、C30位羧基酯化、C3位羟基取代和消除等反应,合成了一系列2-烯-甘草次酸酯(Ⅳ)和2-烯-11-脱氧甘草次酸酯(Ⅷ),通过IR、¹HNMR、ESI-MS对其结构进行了表征,并采用MTT法测定了其对人宫颈癌细胞(HeLa)、人肝癌细胞(HepG2)、人胃癌细胞(BGC-823)的抑制活性。结果表明,化合物Ⅳa、Ⅳd、Ⅷa、Ⅷd对HeLa、HepG2、BGC-823细胞均有一定的抑制活性,尤其对HeLa细胞具有较强的抑制活性,IC₅₀值分别为8.13μmol·L^-1、7.87μmol·L^-1、10.7μmol·L^-1、9.43μmol·L^-1。     

以3,5-二芳基取代吡唑为Cap的新型选择性HDAC6抑制剂:设计、合成及抑酶活性评价

为发现新型组蛋白去乙酰化酶抑制剂（Histone deacetylase inhibitors, HDACis）,基于现有代表性选择性HDAC6抑制剂的结构特征,采用构象限制型的3,5-二芳基取代吡唑为Cap单元构建目标分子,经Claisen-Schmidt反应、环合、亲核取代、水解、缩合、羟胺解反应合成了9个化合物,并通过氢谱和质谱对其进行结构确证。抑酶活性测试结果显示,化合物4-((3,5-二（4-氯苯基）-1H-吡唑-1-基)甲基)-N-羟基苯甲酰胺（5a）对HDAC6具有良好的抑制活性(IC₅₀=0.25μmol/L)和一定的亚型选择性。     

不同肟类N－甲基氨基甲酸酯的杀虫活性和离体胆碱酯酶抑制作用的研究

文中测定了一系列α－氰基甲酮肟和三氟甲基苯基甲酮肟类Ｎ－甲基氨基甲酸酯的杀虫活性和抑制胆碱酯酶活性。α－氰基烷基甲酮肟类Ｎ－甲基氨基甲酸酯具有极好的杀虫活性和抑制胆碱酯酶活性，而α－氰基苯基甲酮肟类衍生物仅仅呈现抑制胆碱酯酶活性。三氟甲基苯基甲酮肟类Ｎ－甲基氨基甲酸酯具有有力的杀虫活性和胆碱酯酶抑制活性。     

含亚胺结构片段的喹唑啉酮衍生物的合成与抗肿瘤活性研究

设计并合成了一系列含亚胺结构片段的新型喹唑啉酮衍生物,最终的15个化合物结构经¹HNMR、¹³CNMR和HR-MS确证,并评价了它们对野生型表皮生长因子受体酪氨酸激酶(EGFR^wt)和两种人癌细胞株(A549、HepG2)的体外抗肿瘤活性。结果表明,部分化合物具有良好的活性,特别是化合物(E)-2-((4-((3,4-二氟亚苄基)氨基)苯氧基)甲基)-3-甲基喹唑啉-4(3 H)-酮对EGFR^wt激酶的IC₅₀达到0.037μmol/L,对A549和HepG2两种肿瘤细胞的IC₅₀值优于吉非替尼。     

姜黄素类似物2,5-双(2,4-二羟基苯亚甲基)环戊酮的合成及酪氨酸酶抑制活性

以2,4-二羟基苯甲醛和环戊酮为原料,无水乙醇为溶剂,40%的NaOH水溶液为催化剂,经Claisen-Schmidt反应催化合成了标题化合物,其结构通过1HNMR、MS进行表征。化合物的初步生物活性测试结果表明,该化合物具有很强的酪氨酸酶抑制活性,半抑制浓度(Ic50)为0.78μmol/L,比曲酸(Ic50=28.59μmol/L)的活性强36倍多。抑制动力学研究表明,该化合物对酪氨酸酶的抑制属于竞争性抑制类型。     

新型苦参碱C-14腙类衍生物的合成及抗肿瘤活性研究

以苦参碱为先导化合物,设计并合成了16个苦参碱腙类衍生物,均采用¹HNMR、¹³CNMR和HR-MS进行了结构表征。通过MTT比色法进行体外抗增殖活性实验,测试了所有目标化合物对人宫颈癌细胞HeLa、人结肠癌细胞HCT116和非小细胞肺癌细胞A549的活性,部分目标化合物表现出比苦参碱更为优越的抗增殖活性,尤其是化合物14-(((4-叔丁基苄基)-1H-吲哚-3-亚甲基)肼亚甲基)苦参碱,其对HeLa、HCT116和A549细胞的IC₅₀值分别为(11.65±0.28)、(9.14±0.81)和(14.48±0.63)μmol/L,在3种细胞中显示出卓越的抗增殖活性,尤其对HCT116细胞的抗增殖活性最强。进一步的细胞周期实验结果显示,目标化合物能够阻滞HCT116细胞在G0/G1期。分子对接结果表明,该化合物与蛋白6QJX存在氢键和π-π堆积作用等相互作用力。     

大黄酸硝酸酯衍生物的设计、合成及抗肿瘤活性

以大黄酸为原料,利用其羧基与不同碳数的二溴烷烃反应得到相应的大黄酸酸溴代烷基酯,继而与硝酸银反应得到5个大黄酸硝酸酯衍生物,其结构经红外光谱、核磁共振氢谱和质谱确证。用噻唑蓝(MTT)法评价了目标化合物对人肝癌细胞HepG2增殖的影响,结果显示,所合成的目标化合物大黄酸硝酸酯衍生物3a～3e(IC50=8.50～56.4μmol/L)均具有一定的抗增值活性,且显著高于先导化合物大黄酸(IC_(50)=376μmol/L),其中,化合物3c(IC_(50)=8.50μmol/L)的抗增值作用最强,强于阳性对照药氟尿嘧啶(5-FU,IC_(50)=16.20μmol/L)。     

变叶榕提取物不同组分总黄酮含量及抗氧化抗炎活性研究

采用NaNO₂-Al(NO₃)₃-NaOH法测定各组分总黄酮含量;DPPH、ABTS自由基清除及Fe³⁺还原能力试验测定各组分抗氧化活性;Griees试剂法评价各组分抗炎活性。研究发现,变叶榕根提取物总黄酮含量为(161.26±2.74)mg/g,乙酸乙酯组分总黄酮含量最高,为(285.75±5.99)mg/g。乙酸乙酯组分对DPPH、ABTS自由基清除和Fe³⁺还原能力的IC₅₀值分别为15.53、6.69和56.52μg/mL,对LPS诱导RAW264.7细胞释放NO的抑制活性的IC₅₀值为63.07μg/mL。结果表明,变叶榕根乙酸乙酯组分具有较明显的抗氧化抗炎活性,其化学成分及作用机制值得进一步研究。     

吗啉类衍生物的合成与HIV-1蛋白酶抑制活性的研究

为探索有效的抗HIV-1活性化合物，通过开环反应、磺酰基取代反应、还原反应、氧化反应、脱Boc保护基反应、甲氨基取代反应、酰胺缩合反应等步骤设计合成7个吗啉类目标化合物，并经¹HNMR、¹³CNMR和HR-MS进行结构确证。利用荧光共振能量转移方法进行体外HIV-1蛋白酶抑制活性评价，该类化合物显示出一定的HIV-1蛋白酶抑制活性。其中化合物（R）-N-(（2S,3R）-3-羟基-4-(（4-羟基-N-异丁基苯基）磺酰胺基)-1-苯基丁烷-2-基)吗啉-3-甲酰胺的IC₅₀为30.23 nmol/L,同时分子对接结果揭示了该化合物与HIV-1蛋白酶可能的结合模式，为该类化合物的进一步优化改造提供了依据。     

点击化学制备AChE/MAO-B双抑制剂及活性评价

通过点击化学(Click)设计、合成了22个香豆素衍生物。多数化合物在微摩尔范围内表现出良好的AChE和MAO-B双抑制活性,具有良好的生物相容性。尤其是一种名为A2B5的化合物,对AChE和MAO-B的IC₅₀分别为(0.23±0.02)、(0.31±0.03)μmol/L,是最佳的AChE/MAO-B双抑制剂。实验结果表明香豆素基团是一类有效的AChE和MAO-B双抑制活性基团,羟基取代苯环的存在能够增强抑制活性。分子对接研究发现A2B5是双位点抑制剂,苯基部分结合到AChE的CAS位点,香豆素结合到PAS位点,三氮唑环占据两个活性位点的中间峡谷。A2B5的香豆素部分结合到MAO-B的入口空腔,苯基部分结合到底物空腔,并嵌入到Tyr435、Tyr398和FAD形成的“芳香笼”。总之,香豆素C7位置取代衍生物可以被开发为AChE/MAO-B双抑制剂,为进一步开发抗阿尔茨海默病的双靶点药物提供一个新的起点。     

2-溴-4’-羟基查尔酮-苯磺酸酯衍生物的合成及抗肿瘤活性

基于药效团拼合原理设计并合成23个未见文献报道的 (E)-4-[3-(2-溴苯基)丙烯酰基]苯基-取代苯磺酸酯衍生物（产率：60.9-80.3%）,通过1HNMR、MS、13CNMR确证了产物结构,采用MTT法以5-氟尿嘧啶和伊马替尼为阳性对照药,以人宫颈癌Hela细胞、人肺癌A549细胞和人慢性粒细胞白血病K562细胞为测试细胞株评价了目标化合物的体外抗肿瘤活性。目标化合物Ⅴp表现出最强的A549细胞增殖抑制活性(半抑制浓度IC50 = 7.53 μmol/L),优于阳性对照药5-氟尿嘧啶(IC50 = 8.1 μmol/L),目标化合物Ⅴt表现出最强的K562细胞增殖抑制活性(IC50 = 4.47 μmol/L),目标化合物Ⅴd表现出最强的Hela细胞增殖抑制活性（IC50 = 4.53 μmol/L）,比阳性对照药5-氟尿嘧啶(IC50 = 13.5 μmol/L)强约3倍。目标化合物Ⅴd对A549细胞（IC50 = 8.0 μmol/L）和K562细胞（IC50 = 7.81 μmol/L）也表现出强的增殖抑制活性,值得进一步深入研究。     

新型6-巯基嘌呤衍生物的合成及其生物活性研究

以6-氯嘌呤为原料,设计合成了新型6-巯基嘌呤衍生物,通过IR、1HNMR和HPLC-MS等方法对所合成化合物的结构进行了解析,并测试了其抗菌以及抗肿瘤活性。生物活性测试结果表明,N'-(2-氨基乙基)马来酰亚胺基-6-甲巯基嘌呤-9-己酰胺具有较高的抗菌活性和抗肿瘤活性。抗菌活性测试结果显示,其对所测试的10个菌种均有较好的抗菌活性。体外抗肿瘤细胞活性测试中,对6种肿瘤细胞株的IC50值在1. 35和1. 76μmol/L之间,相比对照药物6-巯基嘌呤(IC50=1. 97～4. 53μmol/L)表现出更好的抗肿瘤活性。     

不同杀菌剂对苹果黑星病菌的毒力测定

为了筛选出能有效抑制苹果黑星病菌的杀菌剂,本研究采用菌丝生长速率法选用7种杀菌剂对苹果黑星病菌进行室内毒力测定。结果表明,7种供试杀菌剂对苹果黑星病菌菌丝的EC₅₀值按从小到大顺序依次是20%氟唑菌酰羟胺SC、25%吡唑醚菌酯SC、20%吡噻菌胺SC、10%苯醚甲环唑WG、50%啶酰菌胺WG、80%嘧霉胺WG和50%嘧菌环胺WG。抑菌效果最好的是20%氟唑菌酰羟胺SC,EC₅₀值为1.349 9×10^-5μL/mL,抑菌效果最差的是50%嘧菌环胺WG,EC₅₀值为4.316 2μg/mL。