柳蘑菌丝体高产多糖发酵条件优化及其多糖组分分析

目的:优化柳蘑菌丝体高产多糖发酵条件并对其多糖组分进行分析。方法:通过单因素实验,研究碳源、氮源、生长因子对柳蘑菌丝体和多糖含量的影响,并采用正交试验优化其培养基配方。进一步通过单因素实验研究温度、接种量、pH和发酵时间对柳蘑菌丝体的影响,结合正交试验确定最佳发酵条件,并通过气相色谱法分析其多糖的组成成分。结果表明,柳蘑菌丝体发酵最优培养条件为葡萄糖2.5%,蛋白胨1%,VB₂0.006%,硫酸镁0.1%,温度25℃,接种量15%,pH4,发酵时间10 d,在此条件下,柳蘑菌丝得率为(11.50±0.29)g/L,多糖含量达到(1.330±0.035)g/L。气相色谱分析结果表明,柳蘑菌丝体分别由L-鼠李糖、L-阿拉伯糖和D-半乳糖组成。结论:本研究条件能够提高菌丝体多糖产量,可作为柳蘑菌丝体高产多糖的发酵条件。     

黄蘑多糖提取工艺及纯化研究

采用单因素实验和L9(33)正交实验设计,考察了浸提溶剂、料液比、浸提时间、浸提温度和浸提次数对黄蘑多糖提取率的影响,确定最佳提取工艺。采用Sevage法除蛋白,乙醇反复沉淀,AB-8大孔吸附树脂纯化黄蘑多糖。结果表明:影响多糖提取率的主次因素为浸提时间、浸提温度及料液比;黄蘑多糖最佳提取工艺条件:料液比1∶25,浸提温度90℃,浸提时间3h。在此工艺条件下,黄蘑多糖提取率为30.48%。纯化后的多糖含量为91%,分子量约为104356。     

复合酶法提取红蘑多糖工艺

以野生红蘑为原料,复合酶法浸提红蘑中真菌多糖。在单因素试验的基础上,采用正交试验设计获得最佳多糖提取工艺,即酶解温度60℃、纤维素酶和木瓜蛋白酶的比例为3:1(m/m)、pH5.0、酶解3h,此条件下提取多糖得率为12.0%。与传统方法相比,该工艺具有提取条件温和,提取时间较短,对多糖损伤小等特点。     

超声波法提取苇蘑多糖的工艺研究

采用超声波辅助热水提取法研究了苇蘑子实体多糖的提取工艺。正交试验所得苇蘑子实体多糖最佳超声提取条件为:提取温度30℃,提取时间15min,料液比1∶30(g/mL),超声功率200W。苇蘑子实体多糖含量采用传统的苯酚-硫酸法检测。在精密度试验中,RSD为0.283%,表明精密度较好。在稳定性试验中,RSD为0.374%,表明在0h～8h之间的稳定性较好。实验结果显示,该方法适用于苇蘑子实体多糖的提取及含量测定。该方法简便、准确、稳定、灵敏度高。测得苇蘑中多糖含量为21%。     

元蘑多糖水提工艺研究

以水作溶剂,研究不同提取条件对元蘑多糖含量的影响,同时通过正交试验得出最佳的提取条件为浸提温度90℃、浸提时间4 h、料液比3:100(g/mL),得到的多糖含量为22.82%.     

响应面法优化元蘑多糖提取工艺及其饮料的制备

以元蘑为实验原料,采用酶提取法提取多糖,以元蘑多糖提取液为原料加入适当蔗糖,柠檬酸配制成一种元蘑多糖饮料.通过单因素实验和Box-Be hnken得到最佳工艺条件为:酶添加量3％,酶解温度60℃,酶解时间3h,多糖提取率为3.29％.通过感官评价得出,元蘑多糖饮料最佳配方为:元蘑多糖提取液添加量为70％,蔗糖添加量为8...     

花脸蘑多糖对小鼠急性肝损伤的保护作用

目的:研究花脸蘑多糖对四氯化碳(CCl4)诱发的急性肝损伤的保护作用。方法:用CCl4建立小鼠急性化学性肝损伤模型,检测花脸蘑多糖对血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性及白蛋白(Alb)含量、肝组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、还原型谷胱甘肽(GSH)及丙二醛(MDA)的含量的影响。结果:花脸蘑多糖明显降低急性肝损伤小鼠血清ALT及AST活性,提高Alb含量及肝组织SOD、GSH-Px活力和GSH含量,并显著降低MDA含量。结论:花脸蘑多糖具有一定的肝保护作用,其机制可能与抗氧化作用有关。     

鸡腿蘑多糖免疫功能的初步研究

对鸡腿蘑发酵液胞外多糖和胞内多糖进行分别提取,做其对小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬活性和过氧化物酶活性的影响的研究,发现具有一定的刺激作用。其中各不同剂量组的胞外多糖对小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬活性有明显的增强作用,并且在实验剂量范围内呈随剂量增加而上升的趋势。另外,胞内多糖也有增强作用,但效果不明显,其中16mg/kg•d剂量组效果最好。胞内、外多糖对小鼠腹腔巨噬细胞过氧化物物酶活性也都有增强作用,并且效果与剂量关系呈倒“U”型,其中胞内多糖8mg/kg•d剂量组的增强作用最明显,胞外多糖16mg/kg•d剂量组最明显。     

黄秋葵多糖组分对人体肿瘤细胞增殖的抑制作用

近年来多糖的抗肿瘤生物活性日益受到关注,本研究探讨黄秋葵多糖对人体卵巢癌细胞(OVCAR-3)、乳腺癌细胞(MCF-7)、宫颈癌细胞(Hela)、胃腺癌细胞(MCG-803)增殖的抑制作用。通过水提醇沉提取黄秋葵粗多糖(raw polysaccharide,RPS),经DEAE- 纤维素阴离子交换层析柱分离得到3 种多糖洗脱组分E1、E2 和E3;不同质量浓度黄秋葵多糖作用于人体肿瘤细胞72h,采用MTT 法对其抗癌活性进行分析。结果显示：RPS 和E1 组分可抑制OVCAR-3 细胞的生长,随质量浓度的增加细胞存活率降低,呈剂量依赖关系,最低可分别降至72.30% 和52.31%;E3 组分可抑制MCF-7、Hela 和MCG-803 细胞的生长,抑制作用呈剂量依赖关系,细胞的存活率最低可分别降至63.90%、63.51% 和67.71%。故而黄秋葵多糖组分可抑制多种肿瘤细胞生长,有开发成抗癌功能食品的前景。     

红蘑多糖的纤维柱层析分离纯化

选择野生红蘑作为提取多糖的原料,采用预处理后的DEAE-52纤维素粉末制成OH-型柱对红蘑中的多糖进行分离纯化,结果表明:在上样量为200mg、洗脱速度为0.5mL/min的条件下洗脱,得到4个主峰,依次为GRPⅠ、GRPⅡ、GRPⅢ和GRPⅣ,其中GRPⅠ出现在水洗脱部分,GRPⅡ、GRPⅢ和GRPⅣ分别出现在0.1mol/LNaCl、0.3mol/LNaCl、1.0mol/LNaCl洗脱部分。经计算,GRPⅠ、GRPⅡ、GRPⅢ和GRPⅣ分别占12.6%、8.7%、22.3%和27.6%。     

黄伞菌丝体多糖的分离鉴定及其抗氧化性研究

黄伞菌丝体烘干后经热水提取,乙醇沉淀得粗多糖。粗多糖经Sevag 法除蛋白后DEAE- 纤维素柱层析,分离得到两种多糖组分PAMP Ⅰ和PAMP Ⅱ。红外光谱分析表明PAMP Ⅰ和PAMP Ⅱ均为含有葡萄糖醛酸的β-D-吡喃葡聚糖。采用化学比色法测定黄伞菌丝体多糖在体外的总抗氧化能力、抑制活性超氧阴离子自由基的能力、清除羟自由基的能力及对小鼠肝组织中脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量的的影响。结果表明：一定浓度范围内不同纯度的黄伞菌丝体多糖均有总抗氧化能力,能清除O2·和·OH 及抑制MDA 的生成,且呈现一定剂量关系。表明黄伞菌丝体多糖在一定浓度范围内具有抗氧化作用。     

黄伞子实体多糖PAP2的分离纯化及其结构初步鉴定

从黄伞子实体中提取出水溶性粗多糖,经DEAE Sepharose Fast Flow和SuperdexTM 200柱层析分离纯化得到一种多糖组分PAP2。采用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)检测其为均一多糖组分,平均分子质量为2.1×106u;经高效液相色谱-蒸发光散射(HPLC-ESLD)检测表明PAP2主要由葡萄糖组成;结合红外光谱、核磁共振1H NMR和13C NMR分析表明,黄伞子实体多糖PAP2是一种α-D-吡喃葡聚糖,主链为1-4糖苷键,存在1-6糖苷键的支链。     

Effects of Lycii fructus and Edible Mushroom,Pholiota adiposa,on the Quality and Angiotensin I-Converting Enzyme Inhibitory Activity of Korean Traditional Rice Wine

The goal of this study was to develop a high value Korean traditional rice wine possessing the antihypertensive functionality. The effects of the Lycii fructus and Pholiota adiposa on the alcohol fermentation and its angiotensin I-converting (ACE) inhibitory activity of Korean traditional rice wine, yakju were investigated. Optimal fermentation conditions for the preparation of yakju consisted of the koji added at 10% and a fermentation period of 10 days at 25?C. The best acceptability appeared with the Lf-1 traditional rice wine that was brewed by the addition of 1% Lycii fructus into the mash containing cooked rice, koji and antihypertensive S. cerevisiae. Its antihypertensive ACE inhibitory activity was 76%. Its ACE inhibitory activity was also increased about 8% by the addition of 0.1% of the edible mushroom Pholiota adiposa ASI 24012 fruiting bodies into the mash, showing good sensory characteristics. From these results, Lf-Pa1 yakju which was brewed by addition of 1% Lycii fructus and 0.1% Pholiota adiposa into the mash, has the potential to become a new functional Korean traditional rice wine with high antihypertensive properties.     

Effects of Lycii fructus and Edible Mushroom, Pholiota adiposa, on the Quality and Angiotensin I-Converting Enzyme Inhibitory Activity of Korean Traditional Rice Wine

The goal of this study was to develop a high value Korean traditional rice wine possessing the antihypertensive functionality. The effects of the Lycii fructus and Pholiota adiposa on the alcohol fermentation and its angiotensin I-converting (ACE) inhibitory activity of Korean traditional rice wine, yakju were investigated. Optimal fermentation conditions for the preparation of yakju consisted of the koji added at 10% and a fermentation period of 10 days at 25˚C. The best acceptability appeared with the Lf-1 traditional rice wine that was brewed by the addition of 1% Lycii fructus into the mash containing cooked rice, koji and antihypertensive S. cerevisiae. Its antihypertensive ACE inhibitory activity was 76%. Its ACE inhibitory activity was also increased about 8% by the addition of 0.1% of the edible mushroom Pholiota adiposa ASI 24012 fruiting bodies into the mash, showing good sensory characteristics. From these results, Lf-Pa1 yakju which was brewed by addition of 1% Lycii fructus and 0.1% Pholiota adiposa into the mash, has the potential to become a new functional Korean traditional rice wine with high antihypertensive properties.     

不同碳源对黄伞菌丝生长的研究

采用平板培养和液体培养的方法研究不同碳源及其浓度对黄伞菌丝生长和胞外多糖产量的影响。结果表明：适宜黄伞菌平板培养菌丝的碳源及其浓度为：果糖 2.5%、麦芽糖3.0%、葡萄糖 3.0%、乳糖 3.0%、红糖2.5%、蔗糖2.5%;最适宜黄伞菌液体培养菌丝体的碳源为3.0% 的葡萄糖,最适宜黄伞菌产生胞外多糖的碳源为2.0% 的麦芽糖。     

黄伞子实体多糖的初步纯化及降血脂研究

目的：探讨黄伞子实体多糖的纯化方法及对高脂血症小鼠降血脂作用。方法：子实体多糖经中性蛋白酶和S e v a g 法联合除蛋白,用高脂饲料建立高脂血症模型,给药高、中、低剂量组分别为4 0 0 、2 0 0 、100mg/(kg bw·d),5 周后测定小鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)。结果：黄伞子实体多糖能显著降低TC(高、低剂量组P ＜ 0.05)、TG(中剂量组P ＜ 0.05,低、高剂量组P ＜ 0.01)、LDL-C(中、高剂量组P ＜ 0.05,低剂量组P ＜ 0.01)水平,提高HDL-C 水平(低、高剂量组P ＜ 0.05,中剂量组P ＜ 0.01)和动脉粥样硬化因子(AI)(高剂量组P ＜ 0.05)。结论：黄伞子实体多糖具有降低小鼠高血脂症、预防动脉粥样硬化的作用。     

姬松茸多糖的分离纯化及其对白血病细胞的抑制作用

姬松茸子实体经热水提取,乙醇沉淀,DEAE－纤维素和SephadexG-200柱分离纯化,得ABP-Ⅱ-α和ABP-Ⅱ-β两种纯多糖。研究了两种多糖对体外人白血病细胞的抗癌作用.结果表明,两种多糖对人白血病细胞均有不同程度的抑制作用,并与作用时间和作用剂量呈正相关.     

响应面试验优化脆江蓠多糖提取工艺及其对肿瘤细胞的抑制作用

目的：研究脆江蓠多糖（Gracilaria chouae polysaccharides,GLP）的提取方法及其对肿瘤细胞生长的影响。方法：响应面法优化GLP提取工艺条件;四甲基偶氮唑蓝（methyl thiazolyl tetrazolium,MTT）法检测GLP对体外培养的人宫颈癌（HeLa）、食道癌（EC-109）、肝癌（HepG-2）以及乳腺癌（MCF-7）细胞生长的影响。结果：GLP最佳提取条件为预热温度93.1 ℃、料液比1∶61.5（g/mL）、超声时间35 min,在此条件下GLP提取率为16.75%。GLP在质量浓度200～1 000 μg/mL范围内对实验细胞均有抑制作用,且呈剂量依赖关系。当GLP质量浓度为1 000 μg/mL时,其对HeLa、HepG-2、MCF-7和EC-109细胞的抑制率分别为49.11%、41.18%、34.98%和31.33%。对HeLa细胞形态学观察以及Annexin V-FITC/PI荧光染色检测发现,随着GLP给药剂量的增加,凋亡和坏死细胞不断增多。结论：GLP对体外培养的人HeLa、EC-109、HepG-2以及MCF-7等癌细胞增殖有抑制作用,并能诱导肿瘤细胞凋亡。     

霍山石斛多糖对人胃癌细胞生长的抑制作用

研究霍山石斛多糖对人胃癌细胞SGC-7901生长的抑制作用,探讨多糖抗肿瘤作用与肿瘤相关基因表达之间的相关性。胃癌细胞SGC-7901生长的MTT检测表明,霍山石斛总多糖(DHP)、阴离子交换色谱水洗组分(DHP-1)及0.05 mol/L盐洗组分(DHP-2)能显著抑制胃癌细胞SGC-7901的生长,并呈时间和剂量依赖性,其中以DHP-2效果最好。光学及激光共聚焦显微镜观察发现,DHP-2处理过的胃癌细胞形态固缩,凋亡显著。荧光定量RT-PCR技术检测表明,DHP-2不仅能明显下调原癌基因c-myc的表达,其表达仅为对照的42.34%,而且能显著提高抑癌基因野生型p53的表达,其表达比对照高1.04倍。结果表明:霍山石斛多糖对人胃癌细胞生长的抑制作用与其组分、浓度及作用时间相关,其可能的作用机制是多糖通过下调c-myc基因和上调p53基因的表达来发挥抑制效果。