γ-干扰素对肝纤维化大鼠I、III 型胶原表达的影响

目的:探讨γ-干扰素抗肝纤维化的治疗机制。方法:17 只正常雄性Wistar 大鼠分成3 组, 除正常对照组外, 余2 组大鼠肝纤维化造模均采用腹腔注射猪血清(每周2 次, 每次0.5 ml) 。γ-干扰素治疗组在造模第9 周每天皮下注射10 万单位的干扰素。模型组和正常对照组给等量的生理盐水灌胃。12 周处死大鼠, HE 和Masson 染色观察肝纤维化的形成, RT-PCR 检测肝组织中I、III 型胶原mRNA 的表达, 免疫组化法观察I、III 型胶原蛋白的表达。结果:γ-干扰素显著逆转了猪血清诱导的肝纤维化, 与模型组比较, γ-干扰素治疗组能明显降解纤维化大鼠肝中的胶原(P<0.05) 。PT-PCR 分析可见I、III型胶原mRNA 的表达在γ-干扰素治疗组均明显减少。I、III 型胶原蛋白的表达在γ-干扰素治疗组均明显减少。结论:γ-干扰素能逆转免疫引起的肝纤维化, 这是由于其能促进肝脏胶原的降解作用, 最终导致肝纤维化的逆转。     

姜黄素衍生物对四氯化碳诱导肝纤维化的治疗作用

目的: 探讨姜黄素衍生物(Curc-OEG)对四氯化碳诱导肝纤维化的治疗效果。方法: 以四氯化碳诱导形成大鼠肝实质损伤性肝纤维化模型。大鼠分为正常对照组(A组)、模型组(B组)、低剂量组(C组)、中剂量组(D组)、高剂量组(E组)、秋水仙碱组(F组)。除A组外,各组给予四氯化碳和橄榄油混合液皮下注射,2次/周,4周后B组给予生理盐水尾静脉注射,C、D、E组分别给予25、50、100 mg·kg^-1·d^-1的Curc-OEG尾静脉注射,F组给予0.1 mg·kg^-1·d^-1秋水仙碱灌胃。10周后测定肝功能及肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量;做肝脏HE和天狼星红染色;定量PCR法测金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)、金属蛋白酶-13(MMP-13)基因的表达,Western Blot法测CollagenⅠ蛋白的表达。结果: 与模型组比较,中、高剂量组ALT、AST明显降低(P<0.05),羟脯氨酸及CollagenⅠ蛋白表达明显降低(P<0.05),MMP-13 mRNA明显上调(P<0.05),以及TIMP-1 mRNA明显下调(P<0.05),并且HE及天狼星红染色结果也观察到肝脏炎症及纤维化程度明显减轻。结论: Curc-OEG能减轻四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化。     

乙酰半胱氨酸对大鼠酒精性肝损伤的保护作用

目的:探讨乙酰半胱氨酸对大鼠酒精性肝损伤的保护作用。方法:SD 大鼠70 只, 随机分成6 组:正常组(n =10, 等渗盐水灌胃和腹腔注射)、模型组(n =12, 酒精8. 8 g·kg^-1·d^-1 灌胃)、治疗组(n =12, 酒精8. 8 g·kg^-1·d^-1灌胃, 造模同时腹腔注射0.156、 0. 312、 0. 625 g/kg 乙酰半胱氨酸)、阳性对照组(n =12, 酒精8. 8 g·kg^-1·d^-1 灌胃, 造模同时腹腔注射硫普罗宁16. 5 mg/kg^-1·d^-1)。10 周末处死大鼠, 检测血清ALT、 AST 活性和肝组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量, 观察肝组织病理变化。结果:模型组大鼠血清ALT、 AST 活性、肝组织MDA 水平较正常组升高, 肝组织GSH-PX、 SOD较正常组降低, 差异有统计学意义(P <0. 05);治疗组、阳性对照组与模型组相比,ALT、 AST、 MDA有明显的降低, 肝组织GSH-PX、 SOD 水平有明显的升高, 差异有统计学意义(P <0. 05)。HE 染色显示模型组大鼠肝细胞浆出现不同程度脂肪变性, 肝小叶可见肝细胞点状坏死, 治疗组和阳性对照组脂肪变性和炎症程度轻于模型组。结论:乙酰半胱氨酸对大鼠酒精性肝损伤具有一定的保护作用。     

还原型谷胱甘肽对2型糖尿病大鼠膈肌保护作用的研究

目的: 观察还原型谷胱甘肽(GSH)对2型糖尿病大鼠膈肌损伤的保护作用及其机制,并观察膈肌组织骨架蛋白nebulin和titin mRNA含量的变化。方法: 雄性SD大鼠随机分为正常对照组(CON组)、2型糖尿病模型组(DM组)和还原型谷胱甘肽治疗组(GSH组)。各组大鼠取离体膈肌条,测定其收缩力,测定膈肌组织中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测膈肌组织中骨架蛋白nebulin和titin的mRNA表达。结果: (1)与CON组比较,DM组大鼠膈肌单收缩力(P_t)、最大强直收缩力(P₀)、张力最大上升速率(+dT/dt_max)、张力最大下降速率(-dT/dt_max)明显降低(P<0.05);GSH组则高于DM组(P<0.05)。(2)与CON组相比,DM组大鼠膈肌组织MDA含量显著增高(P<0.05),SOD活性显著降低(P<0.01);GSH则能逆转该变化(P<0.05)。(3)DM组膈肌组织中nebulin和titin的mRNA表达显著低于CON组(P<0.01),而GSH组明显高于DM组(P<0.05)。结论: GSH通过提高膈肌组织骨架蛋白nebulin和titin的mRNA表达来增强2型糖尿病受损膈肌的收缩力,其机制可能与减轻膈肌组织氧化应激的损伤有关。     

丹皮酚干预慢性阻塞性肺疾病大鼠气道重构作用的实验研究

目的: 探讨丹皮酚(Pae)干预慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠气道重构的作用。方法: 采用内毒素气管内直接刺激的方法复制COPD气道重构模型,并以丹皮酚(75、150、300 mg/kg)灌胃治疗8周,另设假手术组、模型组、强的松对照组。以硫代巴比妥法测定丙二醛(MDA),比色法测定谷胱甘肽(GSH),分光光度法检测超氧化物歧化酶(SOD),放射免疫分析法检测血清中纤黏连蛋白(FN)、层黏连蛋白(LN)、IV型胶原(IV-C),氯胺T法检测肺组织中羟脯氨酸(Hyp)的含量。ELISA法检测血清、肺组织中TNF-α、IL-8、IL-6含量。免疫组化图片利用真彩色医学图像分析软件测量气管上皮下胶原面积。结果: 丹皮酚可降低模型动物血清和肺脏中的MDA、IL-8、TNF-α、LN、IV-C、Hyp的含量,升高GSH、SOD含量,抑制中小径支气管上皮下增生。结论: 丹皮酚通过抗炎、抗氧化、抑制中小径气道上皮下增生实现干预慢性阻塞性肺疾病大鼠气道重构。     

苦参素对实验性肝纤维化的防治作用及对MMP-2 表达的影响

目的: 观察苦参素预防及治疗大鼠肝纤维化的疗效并探讨其作用机制。方法: 采用CCl₄ 诱导大鼠肝纤维化模型, SD 大鼠28 只, 随机分为4 组:正常对照组、模型对照组、苦参素预防组、苦参素治疗组。实验10 周末, 测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT) 、天冬氨酸氨基转移酶(AST) 、总胆汁酸(TBA)及谷氨酸转移酶(GGT); 光镜、电镜观察肝细胞结构和肝纤维化程度;RT-PCR 和蛋白酶谱法检测肝组织中MMP-2 mRNA 、MMP-2 蛋白的表达。结果: 苦参素预防与治疗给药均能明显降低CCl₄ 诱导的肝纤维化大鼠血清ALT 、AST 、TBA 及GGT 水平(P<0. 05,P<0. 01) 。苦参素预防组、治疗组大鼠胶原纤维沉积明显减轻, 假小叶结构明显减少。苦参素预防组、治疗组肝细胞结构接近正常, Disse 间隙、肝细胞内胶原纤维明显减少, 且苦参素预防组肝纤维化程度轻于治疗组。苦参素预防组、治疗组肝组织中MMP-2mRNA 、MMP-2 活性蛋白的表达显著低于模型组(P<0. 05, P<0. 01) 。结论: 苦参素对CCl₄ 诱导的肝纤维化有预防及治疗作用, 其部分机制为通过减少MMP-2mRNA 、MMP-2 活性蛋白的表达, 促进细胞外基质(ECM) 的降解, 抑制ECM 沉积, 从而减轻或逆转肝纤维化。     

汉防己甲素对硫唑嘌呤致大鼠肝损伤的保护作用

目的 研究汉防己甲素(Tet)对硫唑嘌呤(Aza)致大鼠肝损伤的保护作用。方法 大鼠分为三组:①对照组;②Aza 组;③Aza+Tet 组。给药量分别为Aza 25mg/kg·d。Tet 30mg/k g·d,测定用药1wk 和2wk 时大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(AKP)、总蛋白(TP)和白蛋白(Alb)等肝功能指标以及血清中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和全血谷胱甘肽含量(GSH), 并作病理观察。结果 用药1wk 及2wk 后, Aza 组大鼠血清A LT、AKP、MDA 含量均显著升高, TP、Alb、SOD、GSH 含量均显著降低;合用Tet 组则上述变化不明显, 与对照组比较无显著性差异。病理学检查发现合用Tet 组病理改变较轻微。结论 Tet 对Aza 致大鼠肝损伤有保护作用, 推测此作用与其抗脂质过氧化物、增加内源性解毒物质有关。     

十全大补丸对环孢菌素A肝毒性的作用

目的 观察十全大补丸对环孢菌素A(CsA)所致大鼠肝毒性的作用。方法 大鼠分为4 组:ⅠCsA 组(50 mg/kg), Ⅱ CsA +十全大补丸高剂量组(50 mg/kg +0.6 g/kg), Ⅲ CsA +大补丸低剂量组(50 mg/kg +0.3 g/kg), Ⅳ空白对照组(等量2 %羧甲基纤维素CMC)。灌胃给药, 每日1 次, 连续7 天后取血, 测定血清谷丙转氨酶(GPT)、硷性磷酸酶(AKP)及血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽s-转移酶(GST)。取肝组织作病理检查。结果 用药7天后, CsA +十全大补丸高、低剂量组, 均有明显降低血清GPT、AKP 的作用, 与单用CsA 相比, 有显著性差异。各用药组SOD 活力与对照组比都有所下降, 差异显著:但合并用药组与单用CsA 组比, 无显著性差异。各用药组GST 活力与对照组比也有所下降, 但无显著性差异;合并用药组MDA 均高于对照组, 单用CsA 组低于对照组。结论 十全大补丸对CsA 所致大鼠肝毒性有保肝降酶作用, 其抗氧化清除自由基作用不明显。     

海狗油对非酒精性脂肪肝肝细胞色素P450 2E1表达及与氧化抗氧化关系的影响

目的: 研究海狗油对非酒精性脂肪肝肝细胞色素P450 2E1表达及与氧化抗氧化关系的影响。方法: 于实验d 1 一次性皮下注射小剂量四氯化碳并长期喂食高脂饲料复制大鼠脂肪肝模型,7 周后,开始分别口服灌胃(ig)给予模型组等体积橄榄油,阳性药辛伐他汀4mg·kg^-1,海狗油各组ig 海狗油0.5、1.6和4.8g·kg^-1,每天1次,连续8周。观察肝组织病理形态的变化和肝细胞色素P450 2E1的表达;测定血清和肝内丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)以及游离脂肪酸(FFA)含量的变化。结果: 与脂肪肝模型组比较,海狗油不同给药组病理切片苏丹Ⅲ染色和HE 染色显示肝细胞的脂变程度明显减轻,脂滴减少,免疫组化证明肝细胞色素P450 2E1表达受到不同程度的抑制,同时血清及肝内MDA、FFA显著降低,SOD活性升高。在模型组和各给药组不同的肝组织内,CYP2E1的表达强度及分布的方式存在着差异。结论: 海狗油能显著抑制大鼠脂肪肝CYP2E1的表达,减轻脂质过氧化反应。动物个体间存在CYP2E1多态性。     

葛根素对庆大霉素致大鼠肾毒性的保护作用

目的: 研究葛根素(Puerarin, Pue)对庆大霉素大鼠肾毒性的保护作用。方法: 雄性SD大鼠给予溶媒或葛根素(50 mg·kg^-1·d^-1)7 d 后,再联合给予 0.9%氯化钠注射液或庆大霉素 140 mg/kg (i.p.)14 d,测定大鼠体重,血清尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)含量,计算肌酐清除率(CCr),测定肾组织中丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)含量和超氧化物歧化酶(SOD)及内皮一氧化氮合酶(eNOS)活性;HE染色观察肾脏病理改变。结果: 与正常对照组比较,庆大霉素组可致大鼠体重、CCr、NO和 SOD活性下降,血清BUN和SCr及肾组织MDA含量升高,肾脏病理改变明显。给予葛根素明显减轻上述改变。结论: 葛根素有效拮抗庆大霉素所致的大鼠肾损害,可能通过其抗氧化作用及提高NO水平来发挥作用。     

大豆异黄酮对大鼠血脂的影响及其体内外抗氧化作用研究

目的 观察大豆异黄酮(SI)对高脂饮食大鼠血脂、血液及肝脏丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)及肝脏脂肪病变的影响, 以及其主要成分之一金雀异黄素对过氧化氢损伤的ECV304 内皮细胞有无保护作用。方法 根据血清总胆固醇(TC)水平, 50 只雄性Wistar 大鼠分为5 组:正常对照、高脂饮食对照组和3个SI 治疗组。3个SI治疗组分别每日灌胃给予SI 30 、60 、120 mg/kg, 对照组则给予相应的溶媒, 持续9 周。治疗第2 、4 、9周末, 测定血清TC 、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)。治疗结束时, 测定红细胞和肝匀浆SOD 活力, 血清和肝匀浆MDA含量, 并观察肝脏病理变化。以MTT 法观察与不同浓度的金雀异黄素体外孵育一定时间后的ECV304 内皮细胞对抗过氧化氢氧化损伤的能力。结果 SI 30 、60 、120 mg/kg 无改善血清TC 、LDL、TG 、HDL 的作用, 肝脏病理结果也与血脂结果相似。但是与高脂饮食对照组相比, 大鼠红细胞及肝脏的SOD 活力明显升高, 而血清及肝脏MDA含量也有一定程度降低(P<0.01, P<0.05)。对于过氧化氢引起ECV304 细胞损伤, 金雀异黄素25 、50 、100 μmol/L 有剂量依赖性保护作用。结论 大豆异黄酮不能改善高脂饮食大鼠的血脂, 不能抑制其肝脏脂肪病变。但其有一定体内外抗氧化作用。     

甘草酸二铵脂质复合物对大鼠非酒精性脂肪肝的治疗效果研究

目的: 研究甘草酸二铵脂质复合物(甘平,DGLL)对大鼠非酒精性脂肪肝(NAFLD)的治疗作用。方法: 以高脂饲料喂养方式建立大鼠非酒精性脂肪肝模型,证实造模成功后随机分为空白对照组、模型组、多烯磷脂酰胆碱组和甘平高中低(900、300、100 mg/kg)剂量组。给药4周后,处死所有动物,检测血脂、氧化应激、肝功能、胰岛素相关等指标,并观察肝脏组织病理学变化。结果: 甘平能显著降低NAFLD大鼠的转氨酶(ALT、AST)活力、丙二醛(MDA)含量、TNF-α水平、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)水平和空腹胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),升高超氧化物歧化酶(SOD)活力,改善NAFLD大鼠的总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)水平。结论: 甘平可以用来治疗大鼠NAFLD,其机制可能与抗氧化作用及改善胰岛素抵抗有关。     

罗格列酮对高脂血症大鼠的胰岛素抵抗作用及其机制研究

目的: 研究罗格列酮及格列齐特对高脂血症大鼠胰岛素抵抗的改善作用及其机制。方法: 建立高脂血症大鼠胰岛素抵抗模型, 并将其分为模型组、罗格列酮组和格列齐特组, 观察罗格列酮和格列齐特对其糖耐量减退、血清血糖血脂、TNF-α、Fins 含量、肝细胞TG 含量、脂质过氧化和肝肾功能等的影响。结果: 罗格列酮和格列齐特均有可能改善高脂血症致胰岛素抵抗模型病鼠的IGT 状态, 给药2 h后不同程度地降低病鼠FSG 及TNF-α浓度(P <0.05), 显著降低病鼠肝组织中TG 含量(P <0.01),明显抑制MDA 产生(P <0.01) 及增强GSH 贮量作用(P <0.01) 。罗格列酮还可降低病鼠高胰岛素水平及Fins 浓度(P <0.01), 明显降低病鼠BUN 和Cr含量(P <0.05), 提高ISI(P <0.01) 及增强SOD 活性(P <0.05) 。结论: 罗格列酮能改善高脂饲养引发的胰岛素抵抗。     

鲨鱼肝再生因子对大鼠慢性肝损伤的治疗作用

目的 探讨鲨鱼肝再生因子(sHRF) 对大鼠慢性肝损伤的治疗作用。方法 CCl₄ 致大鼠慢性肝损伤模型, 给药后取血清及肝组织测定各项肝指标。结果 当用药8 周时, 对CCl₄ 引起的肝损伤大鼠血清中AST 、ALT 活性的升高和羟脯氨酸含量的升高均有抑制作用, 且0.8 、1.6 mg/kg 剂量组的作用差异均有统计学意义。此外, sHRF 能在一定程度上增加白蛋白含量, 并使白蛋白 球蛋白比值有一定程度的升高。肝组织病理切片亦显示sHRF 能减轻CCl₄ 所致大鼠肝细胞脂肪变性及纤维组织增生。结论 sHRF 对CCl₄ 所致大鼠慢性肝损伤有一定的治疗作用。     

水飞蓟宾对抗大鼠酒精性脂肪肝作用及机制

目的: 观察水飞蓟宾(Silbinin)对大鼠酒精性脂肪肝作用及其机制。方法: 饮用10 %乙醇,加高脂高热量饲料喂饲6 周,造成大鼠酒精性脂肪肝模型;灌胃给药水飞蓟宾100mg·kg^-1,继续酒精和高脂高热量饲料处理4 周后,处死大鼠,测定血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(AKP)活性和甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)、大鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、大鼠转化生长因子-β₁(TGF-β₁)含量,测定肝细胞TG、肝匀浆丙二醛(MDA)、超氧化歧化酶(SOD)、还原性谷胱甘肽(GSH)水平以及肝组织学检查。结果: 水飞蓟宾能抑制病鼠血清AST、ALT、AKP活性(P<0.05或0.01)和降低TG、LDL-C、TNF-α、TGF-β₁ 含量(P<0.05或0.01),提高HDL-C 含量;降低肝匀浆TG 和MDA 含量(P<0.05或0.01),增强SOD 活性(P<0.01)以及改善肝细胞水变性和脂肪变性(P<0.01)。结论: 水飞蓟素阻止大鼠酒精性脂肪肝形成,其作用机制包括:抗氧化、清除自由基代谢产物,抑制脂质过氧化反应;调血脂、减少脂肪在肝脏的沉积;抗免疫性炎症和抗增殖。     

小柴胡汤对化学性肝纤维化小鼠的保护作用

目的:探讨小柴胡汤(XCHD)对四氯化碳(CCl4)诱发的肝纤维化(HF)小鼠的保护作用。方法:采用持续12周,2次/周,20%CCl4小鼠背部皮下注射的方法,复制HF小鼠模型。造模首日起,每天1次,持续12周,灌胃给予3.90、7.80、15.60 g/kg XCHD和0.1 g/kg水飞蓟宾。实验结束后,处置小鼠,检测血清中ALT、AST含量;HE、Masson、天狼猩红染色以及透射电镜观察肝脏病理组织学损伤情况,并进行HF分级评分;免疫荧光、RT-qPCR和免疫印迹技术检测肝组织中α-肌动蛋白(α-SMA)和Ι型胶原(Collagen Ι)水平。结果:XCHD(7.80,15.60 g/kg)组不仅可明显降低血清中ALT、AST水平(P<0.05),减轻肝脏病理学损伤程度,减少胶原纤维沉积,还可显著抑制α-SMA、Collagen Ι mRNA和蛋白表达水平(P<0.05)。结论:XCHD对化学性HF小鼠具有很好的保护作用。