简单灵敏的HPLC法测定人血浆中头孢丙烯浓度

目的: 建立血浆中头孢丙烯的HPLC检测方法。方法: 采用高效液相色谱检测法,分析柱为Hypersil BDS C₁₈ (200 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为 20 mmol/L 乙酸铵/10%乙酸(pH=3.7)∶乙腈=92∶8(V/V),流速 1.0 mL/min,柱温 30 ℃,检测波长 282 nm,进样量 20 μL。血浆样品用三氟醋酸直接沉淀后,取上清进样分析。结果: 头孢丙烯在 0.10~10.01 μg/mL 范围内线性关系良好(r=1.0000),最低定量浓度为 0.10 μg/mL,日内日间RSD均<15%(n=15)。结论: 研究建立的HPLC法快速、简便、高效,精密度和准确度高,适合血样中头孢丙烯浓度的检测。     

HPLC-MS/MS法测定人体血浆中格列美脲及其活性代谢物

目的: 建立同时测定格列美脲(Glimepiride,G)及其活性代谢物羟基格列美脲(Hydroxyl-glimepiride,M₁)血浆浓度的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法。方法: 血浆样品酸化后,经乙酸乙酯萃取后浓集进样,色谱柱为Phenomenex Gemini C₁₈ (50 mm×3.0 mm,5 μm),甲醇∶水∶甲酸(80∶20∶0.1)为流动相,流速为 0.2 mL/min,柱温为室温,采用电喷雾(ESI) 离子源,多反应离子检测模式, 以格列齐特(Gliclazide,IS)为内标。G、M₁和IS的检测离子对分别为质荷比(m/z) 491.4→352.4、507. 4→352.4、324.4→127.2。结果: G和M₁的线性范围分别为 1.25～400 ng/mL 和 0.313~100 ng/mL,最低定量限分别为 1.25 和 0.313 ng/mL;批内批间精密度均小于10%,方法回收率均在 96.4% ~102.5%之间。结论: 该方法简便快速、特异性高,可用于同时测定G和M₁血药浓度及其人体药代动力学的研究。     

LC-MS/MS快速测定大鼠血浆中HHY-002浓度

目的: 建立用于测定治疗慢性心律失常药物HHY-002的大鼠血浆测定法。方法: 流动相为乙腈-0.1%甲酸(65∶35),流速 0.200 mL/min,色谱柱Phenomenex Luna C₁₈柱(150 mm×2.00 mm,5 μm,5 micron),进样量为 10 μL,柱温 35 ℃,以地西泮为内标。结果: HHY-002在 1.98~1013.50 ng/mL 的范围内呈良好的线性关系(r=0.998),最低定量限达 1.98 ng/mL,绝对回收率高于80%,日内和日间误差小于10%,方法回收率大于(81.4±4.5)%,符合生物样品分析要求。结论: 建立的LC-MS/MS方法专属性强,灵敏度高,可用于HHY-002的体内定量分析。     

左氧氟沙星与其他抗生素治疗下呼吸道感染的有效性和安全性对照研究的Meta分析

目的: 了解左氧氟沙星与他常用抗生素治疗下呼吸道感染的疗效与安全性差异。方法: 应用Meta分析方法, 对16 项研究左氧氟沙星与他常用抗生素治疗下呼吸道感染的有效性和安全性进行同质性检验和合并效应量的估计。结果: 同质性检验:有效性(χ²=15.8844) 和安全性(χ²=2.2231) P 均大于0.05, 具有同质性, 可以合并结果。合并效应量的估计:OR_合并= 2.1885, OR_合并95 % 可信区间为1.6044 ~ 2.9853, OR_合并的检验:χ² =24.4471, P <0.01 。安全性:OR_合并=0.9516, OR_合并95 %可信区间为0.5958 ~ 1.5199, OR_合并的检验:χ² =0.0431, P>0.05 。结论: 左氧氟沙星治疗下呼吸道感染的疗效总体优于对照组, 不良反应与对照组比较并无显著降低。     

固相萃取HPLC检测生物样品中甲苯磺丁脲和代谢产物及其人体药代动力学研究

目的: 建立固相萃取高效液相色谱测定人血浆和尿液中的甲苯磺丁脲和代谢产物浓度的方法,并用于研究甲苯磺丁脲人体代谢过程。方法: 固相萃取净化和富集样品,建立高效液相色谱法测定人血清和尿中曱苯磺丁脲和代谢产物的浓度。色谱条件:色谱柱为 Waters Spherisorb 5 μm Phenyl 色谱柱(4.6 mm×250 mm),流动相为甲醇-0.02mmol·L^-1 pH 3.3乙酸钠缓冲液(28:72),流速1 ml·min^-1,检测波长:230 nm。用该方法测定10名健康志愿者单次口服500 mg曱苯磺丁脲后血清和尿液中药物及其代谢产物浓度,应用3p97计算其的药动学参数。结果: 血浆曱苯磺丁脲线性范围为2~lOOμmol·L^-1 (r=0.999),回收率为105.1%~103.9%。尿液羧基曱苯磺丁脲、4-羟基甲苯磺丁脲和甲苯磺丁脲的线性范围为 2~50 μmol·L^-1 (r=0.999)、1~50 μmol·L^-1 (r=0.999)和 1~50 μmol·L^-1 (r=0.999),回收率为 98.8%~100.1%、95.4%~103.5%和97.7%~106.6%。各样品的日内、日间精密度均矣15%。健康志愿者单次口服500 mg甲苯磺丁脲的 AUC_0-∞ 为 2644.6±472.8 μmol·h^-1·L^-1,T_max是 1.4±0.6 h,C_max是235.8±47.3 μmol·L^-1,t_1/2为 6.9±2.1 h,MR_0-24=277.5±125.6。结论: 甲苯磺丁脲及其代谢产物的固相萃取高效液相色谱法灵敏、准确,重复性好,可用于甲笨磺丁脲的体内过程研究。甲苯磺丁脲代谢产物主要经尿液排出。     

氨氯地平治疗轻、中度高血压有效性与安全性的Meta 分析

目的:了解氨氯地平治疗轻、中度高血压有效性及不良反应(安全性) 的差异。方法:应用Meta 分析对26 篇文献28 项研究氨氯地平与其他抗高血压药物治疗轻、中度高血压的有效性、安全性进行同质性检验及合并效应量的估计。结果:(1) 同质性检验:有效性, χ²=29.13, 自由度为27;安全性, χ²=27.95, 自由度为24, 两者P 均大于0.05 。(2) 合并效应量的估计:有效性, OR_合并=1.261, OR_合并95%可信区间为1.018～1.562 。OR_合并的检验:χ²=4.51, P<0.05;安全性:OR_合并=1.013, OR_合并95%可信区间为0.801～1.282 。OR_合并的检验:χ²=0.013, P>0.05 。结论:氨氯地平治疗轻、中度高血压的疗效总体上优于目前常用药物, 且其安全性较高。     

降纤酶与其他药物治疗急性脑梗死对照研究的Meta分析

目的 了解降纤酶与其他药物治疗急性脑梗死(ACI)疗效的差异。方法 应用Meta 分析对10 项研究降纤酶与其他药物治疗ACI 的效果进行同质性检验和合并效应量的估计。结果 ①同质性检验:χ²=6.8452,自由度为9,P >0.05 。②合并效应量的估计:OR_合并=3.2353,OR_合并95%可信区间为2.21 ~4.74 。OR_合并的检验:χ²=36.2,P <0.001 。结论 降纤酶治疗ACI 的疗效显著优于目前常用药物,其在适应症、治疗剂量、给药方法及用药时限等方面与临床疗效的关系有待进一步研究。     

液相色谱串联质谱法测定人血清中匹多莫德的浓度

目的: 建立液相色谱串联质谱法测定人血清中匹多莫德的浓度。方法: 血清样品用甲醇沉淀蛋白,内标为格列吡嗪,色谱柱为Lichrospher C₁₈ (4.6 mm×150 mm,5 μm),柱温为 30 ℃,流动相为甲醇-2.5 mmol/L NH₄Ac(90∶10,V/V),流速为 0.5 mL/min。质谱采用ESI离子源负离子检测,定量分析的离子对为:m/z 242.9/153.0(匹多莫德),m/z 444.0/169.9(内标格列吡嗪)。结果: 匹多莫德在 0.1~10 mg/L 范围内线性关系良好(r=0.9995),批内批间RSD均小于15%,提取回收率为 85.52%~98.30%。结论: 该方法快速,灵敏,准确,可用于匹多莫德的临床药动学研究。     

自动化微生物比浊法测定血清中环丙沙星浓度

目的 建立自动化微生物比浊法测定血清环丙沙星(CPLX)浓度。方法 以标准血清配制系列浓度CPLX 与10⁷ cfu/ml 标准菌ATCC 27853 反应, 在自动化微生物分析仪中测定其吸收度。结果 在8 ~ 0.0625 μg /ml 浓度范围内, 浓度与吸收度呈线性关系(r =0.9950, n =8), 回归方程为C =9.4020 -22.55 A, 最低检测浓度为0.03 μg /ml 。方法回归率为96.5 % ~ 108.0 %, 日内变异系数为2.11% ~ 9.13 %, 日间变异系数为1.99 % ~ 9.72 %。结论 该方法为一快速、方便、精确的测定CPLX 的方法。     

奥美拉唑与其他药物治疗消化性溃疡及出血对照研究Meta 分析

目的: 了解奥美拉唑(Omeprazole,Om) 与其他药物治疗消化性溃疡及出血疗效的差异。方法: 应用Meta 分析对9 项研究消化性溃疡及出血的效果进行同质性检验和合并效应量的估计。结果: (1) 同质性检验:χ² =9.84,自由度8,P>0.05 。(2) 合并效应量的估计:OR_合并95 %可信区间为2.83 ~ 6.68 。OR_合并的检验:χ² =44.4,P<0.01 。结论: 奥美拉唑治疗消化性溃疡及出血的疗效优于目前常用药物,Om 在治疗消化道溃疡及出血疗效方面较其他已上市药物都要好,且无明显不良反应,值得临床推广。     

UPLC-MS/MS同时测定血浆样品中他莫昔芬及代谢产物的浓度和应用

目的: 建立UPLC-MS/MS法测定人体血浆样品中他莫昔芬及代谢产物的浓度和应用。 方法: 采用Waters AcQuity型超高效液相色谱联用API4000型三重四级杆质谱仪,样品处理采用固相萃取的方法,采用Thermo hypurity C₁₈(150 mm×2.1 mm,5 μm)色谱分析柱, 流动相为 10 mmol/L 甲酸胺-乙腈(40∶60,V/V),流速为 0.3 mL/min,进样体积为 10 μL,柱温为 30 ℃, 样品室温度为 5 ℃,质谱应用ESI源、正离子模式、多反应监测(MRM)方式检测他莫昔芬及各代谢产物的浓度。 结果: 他莫昔芬、ND-Tam和TamNox线性范围为1~400 ng/mL,4-OH-Tam线性范围为 0.4~160 ng/mL,4-OHND-Tam线性范围为2~800 ng/mL,可以满足样本浓度定量检测的需要,方法稳定、特异性高,并成功地应用到用药后他莫昔芬及各代谢产物血浆浓度的检测。 结论: 该方法简便、准确、重复性好,可以准确地定量人体血浆他莫昔芬和代谢产物的浓度,除了为临床血药浓度监测及他莫昔芬药效学研究提供服务外,也可为遗传药理学科研提供技术方法。     

人体中伊曲康唑及其活性代谢产物羟基伊曲康唑的整合药代动力学研究

目的: 羟基伊曲康唑(OH-ITZ)为目前临床一线抗真菌药伊曲康唑(ITZ)的主要活性代谢产物,其与ITZ有着相似的抗菌活性,且血药浓度较母体药物高,因此OH-ITZ的体内过程对临床疗效的影响研究不容忽视。本文旨在建立灵敏、快速的液相色谱-串联质谱法同时测定人血浆中ITZ及OH-ITZ,并应用整合药代动力学模型进行整体评价。方法: 血浆样品经沉淀蛋白后,以乙腈(甲酸 0.1%)-水(甲酸 0.1%)为流动相梯度洗脱,Zorbax XDB C₁₈柱分离,采用电喷雾电离源,以多反应监测(MRM)方式进行正离子检测。定量分析所用的离子反应分别为m/z 705 →m/z 392(ITZ),m/z 721→m/z 408(OH-ITZ)和m/z 386→m/z 122(内标,丁螺环酮)。结果: 测定血浆中ITZ及OH-ITZ的线性范围均为 0.50~500 ng/mL,日内、日间精密度(RSD)均小于 12.4%,准确度(RE)均在±7.5%以内;整合药动学研究结果显示综合浓度药-时曲线符合口服给药药物消除规律,整合后主要药动学参数t_1/2和AUC_0-∞分别为 19.5 h,5754 ng·h·mL^-1。结论: 本方法运行时间短、选择性强、灵敏度高、操作简便、血浆用量少,适用于ITZ及OH-ITZ的临床药代动力学研究;其整合药动学模型研究所获参数能够表征ITZ和OH-ITZ的整体处置规律,符合经典药代动力学模型特征。     

硫酸氢氯吡格雷片在中国健康人体的生物等效性研究

目的: 评价受试制剂硫酸氢氯吡格雷片(爱普瑞乐)与参比制剂硫酸氢氯吡格雷片(波立维)在中国健康人体中的生物等效性。方法: 健康受试者双周期交叉空腹口服硫酸氢氯吡格雷片受试制剂和波立维片参比制剂 75 mg,用LC-MS/MS法测定氯吡格雷的羧酸代谢物氯吡格雷酸的血药浓度;用DAS 2.0 软件进行数据处理,分析氯吡格雷酸人体药代动力学特征,来间接反应氯吡格雷的药代特征及生物等效性。结果: 氯吡格雷的代谢物氯吡格雷酸的受试制剂与参比制剂的C _max分别为(1351.1±654.9)、(1184.6±607.7) ng/mL,AUC_{0-24 h}分别为(2642.0±1093.8)、(2780.6±1283.1) ng·h ·mL^-1,AUC_0-∞分别为(2867.8±1238.9)、(3003.3±1291.2) ng·h·mL^-1,t_1/2分别为(3.81±2.54)、(4.62±2.88) h,t_max分别为(0.80±0.32)、(0.95±0.63) h,受试制剂对参比制剂的相对生物利用度为(101.4±34.8)%。结论: 本检测方法具有准确、灵敏、快速、简便等特点,适合人血浆中氯吡格雷酸浓度测定。AUC和C_max经对数转换后进行多因素方差分析及双单侧t检验,t_max经非参数检验,结果显示两种制剂生物等效。     

替米沙坦片血药浓度的HPLC测定方法及其在健康人体的药动学研究

目的: 建立高效液相色谱法测定人血浆中替米沙坦的药物浓度,并研究其在健康人体内的药动学3方法: 采用高效液相色谱-焚光检测法,色谱柱为 Hypersil C₁₈柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为乙腈-磷酸盐缓冲液（45:55,pH 5.8);流速为1.0 ml·min^-1;激发波长和发射波长分别为305 nm和365 nm;进样量20 μl;内标物为α-萘酚。结果: 替米沙坦在2~1 024 μg·L^-1范围内线性良好（r=0.9999),回收率,日间、日内差均符合生物样品分析要求。10名健康受试者口服替米沙坦片80 mg后的药动学结果表明,其体内过程符合二房室开放模型,主要药动学参数如下:C_max为0.98±0.44 mg·L^-1;T_max为 0.83±0.45 h; t_1/2为 1.67±1.26 h; t_1/2β为26.00±14.43 h;t_1/2kd为 0.53±0.86h;AUC_0-l为 3.66±2.10 mg·h ^-1; AUC_0-∞为 3.98±2.40 mg·h ^-1·L ^-1。 结论: 此方法便捷,准确,灵敏,适于替米沙坦血药浓度测定和药动学研究,本试验所得药动学参数可为临床合理用药提供理论依据。     

氯沙坦钾片的生物等效性及CYP2C9*3基因多态性对氯沙坦药代动力学的影响

目的: 评价试验制剂氯沙坦钾片(杭州民生药业)与参比制剂氯沙坦钾片(杭州默沙东制药)的生物等效性及CYP2C9^*3基因多态性对氯沙坦药代动力学的影响。方法: 采用PCR测序法对健康中国汉族受试者CYP2C9^*3(rs1057910 A>C)位点进行基因分型,筛选36名受试者入组本试验,其中CYP2C9^*1/^*1(AA)基因型个体32例,CYP2C9^*1/^*3(AC)基因型个体4例。本研究为两制剂、两周期交叉设计,单次、开放口服给药的单中心试验,给药剂量为氯沙坦钾片(50 mg/片)1片。通过液相色谱-串联质谱法同时测定人血浆中氯沙坦钾及其代谢产物E-3174的浓度,采用DAS3.2.2非房室模型药动学参数计算的方法求算药动学参数。结果: 受试试剂对参比制剂的相对生物利用度分别为氯沙坦(101.5±20.2)%、E-3174(100.0±13.8)%;同CYP2C9^*3为AA基因型受试者相比,AC基因型受试者中氯沙坦的药代动力学参数AUC_0-12、AUC_inf以及C_max升高,其中AUC_0-12、AUC_inf差异有统计学意义;E-3174的药代动力学参数AUC_0-48和AUC_inf降低,不同基因型间差异无统计学意义。结论: 两种制剂生物等效; CYP2C9基因1075A>C突变可导致氯沙坦代谢减慢,但氯沙坦临床剂量可能不需要根据CYP2C9基因型进行调整。     

药理效应法测定参附注射液药动学参数的研究

目的: 考察参附注射液在大鼠体内的药动学特征。方法: 采用结扎冠状动脉法复制大鼠心源性休克模型,以血压值作为效应指标,选取 1.25、2.5、5、10、20、25 mL/kg 六个剂量参附注射液做量-效曲线,选择 20 mL/kg 剂量做时-效曲线,依据时-效曲线和量效曲线求得时间-生物体存量曲线,用DASver2.0软件分析参附注射液的药动学参数。结果: 主要药物动力学参数为t_1/2=8.685 min, K_e=0.08 min^-1, CL=1.417 L·min^-1·kg^-1, AUC_(0-t)=12.63 mg·L^-1·min^-1。结论: 在大鼠体内静脉注射参附注射液的体存量的表观动力学过程符合一室模型。     

LC-MS/MS法测定犬体内托拉塞米浓度及相对生物利用度研究

目的: 建立LC-MS/MS法测定Beagle犬体内托拉塞米的浓度,并研究托拉塞米缓释片的相对生物利用度。方法: 色谱柱为Waters Symmetry-C₁₈ (100 mm×4.6 mm, 5 μm);流动相为甲醇∶20 mmol/L 甲酸铵(65∶35,V∶V);流速 0.4 mL/min;柱温 30 ℃。采用两制剂双周期随机交叉试验设计,分别给予6只Beagle犬受试制剂或参比制剂 5 mg,采用LC-MS/MS法测定给药后不同时间的血药浓度。结果: 托拉塞米线性范围为 0.02~5 μg/mL,最低定量限为 0.02 μg/mL,分析方法灵敏、稳定、特异性高。受试制剂和参比制剂的主要药动学参数:峰浓度(C_max)、达峰时间(t_max)和药-时曲线下面积(AUC_{0-48 h})分别为(2.6±0.5) g/mL 和 (3.0±0.6) g/mL、(3.3±1.4) h 和(1.2±0.8) h、(36.1±11.0) g·h·mL^-1和(32.1±13.1) g·h·mL^-1。以AUC_{0-48 h}计算,受试制剂的相对生物利用度F为(118.0±28.3)%。结论: 该方法操作简单、准确、重复性好,并成功地运用于犬体内托拉塞米相对生物利用度的研究。     

LC-MS 法测定Beagle 犬血浆中苦参碱及其药代动力学

目的: 建立Beagle 犬血浆中苦参碱的LC-MS测定法, 测定其药物动力学及绝对生物利用度。方法: 采用Lichrospher C18 柱, 250 mm×4.6 mm(ID),5 μm, 柱温:25 ℃;流动相:10 mmol·L^-1醋酸胺水溶液∶甲醇(25 ∶75), 流速:1 ml·min^-1 。电喷雾离子化(ESI) 方式, 采用选择性离子检测, 检测离子为正离子, 苦参碱的离子是[M+H] +, m/z 249.2 。结果: 苦参碱在2～5 000 μg·L^-1的范围内呈良好的线性关系(r=0.9975), 最低检出限达0.3 μg·L^-1。日内和日间误差均小于4.5 %, 方法回收率大于96.6 %;药-时数据符合二室模型, C_max 为3821±705 μg·L^-1, T_max为0.4±0.1 h, T_1/2β为11.2±2.1 h,AUC_0→∞为7446±1456 μg·h·L^-1, 绝对生物利用度为(60.1±19.0) %。结论: 该法灵敏、快速、简单, 专属性强, 苦参碱在Beagle 犬体内有较高的绝对生物利用度。