红曲霉的分离筛选及初步应用研究

红曲霉作为白酒发酵的重要菌种,得到了白酒企业的重视。本研究从大曲及酒醅中分离到8株红曲霉,对8种红曲的酯化力、糖化力、产酒精能力进行了研究,确定红曲霉E具有应用价值。其应用于清香麸曲酒发酵,总酯增加了44.86%,乙酸乙酯增加了87.30%,且能改善麸曲酒的口感,但其与所使用生香酵母之间并无协同增酯功效。     

红曲霉菌种的筛选

本实验通过平板分离和紫外诱变两种方法对红曲霉菌种进行了筛选,选出的红曲霉菌种产色能力强、稳定性好,其产色率比出发菌株提高了32%。     

低产桔霉素红曲霉菌种筛选

对部分红曲霉菌种的液态发酵液和固态红曲米中桔霉素质量分数进行了测定 ,从中筛选了数株低产桔霉素的红曲霉菌种 ,重点对红曲霉ZK0A菌种生产的红曲米的色价及桔霉素质量分数进行了测定 .连续培养 3批该菌种 ,所生产的红曲米色价高于 10 0 0U / g ,桔霉素质量分数低于5mg/kg.而另一株红曲霉ZH 12生产的红曲米 (色价 170 0U/ g)中桔霉素质量分数则高达 1g/kg以上 .对这两株红曲霉菌种的菌落形态进行了鉴定 ,初步认定这两株菌种都是紫色红曲霉 .     

麦曲中红曲霉的分离方法

麦曲中红曲霉的分离方法赵晓本徐希望徐世江谢恩举山东兰陵美酒厂技术处（２７７７３１）麦曲中红曲霉的分离方法关键词微生物麦曲红曲霉分离红曲霉用途很多，我国早在明朝时就利用它培制红曲。红曲霉能产生淀粉酶、麦芽糖酶、蛋白酶、柠檬酸、琥珀酸、乙醇、麦角甾醇等。...     

红曲霉的分离和纯化研究

根据红曲霉菌的性质，用麦芽汁培养基将红腐乳中的红曲霉分离出来，并分别用麦芽汁琼脂培养基、大米培养基、黄豆芽培养基和发酵培养基进行纯化培养，结果以大米培养基纯化效果最好。培养结果表明，红曲霉是一种耐酸、耐热和耐乙醇的霉菌。纯化后的红曲霉在麦芽汁琼脂培养基上呈现圆形菌落，在32℃培养48h开始生长，菌落初期为白色，进而变为淡粉红色、红色，直至紫红色，但菌落四周为白色。培养12d后整个菌落呈紫红色。显微镜镜检观察，菌丝无横隔，多核，分枝甚繁，分生孢子着生在菌丝及其分枝的顶端，孢子单生或成链，闭囊壳为球形、有柄。     

豆瓣酱发酵种曲红曲霉LLMY-18的筛选分离

从麦芽汁培养基中利用籼米分离菌株,通过平板筛选和固体培养的方法,筛选分离获得一株优质、稳定、高产、周期适合的红曲霉菌株LLMY-18。此菌株在发酵周期和发酵条件方面与豆瓣酱所需的条件相似,产红色素的能力大大提高,可将其应用到豆瓣酱的加工生产中。初步表明,红曲霉LLMY-18参与发酵制成的红曲豆瓣酱具有色泽红润、口感醇厚、味道鲜美等优点。     

山西老陈醋大曲红曲霉分离鉴定

本试验对山西老陈醋使用的红心大曲中红曲霉进行分离鉴定,从山西老陈醋专用红心大曲中共分离到8株红曲霉,经固体平板培养特征、显微镜镜检个体特征、以及生物学特性和生化试验等,确定其为红曲霉属（Monascus）中的两个种即红色红曲霉（Monascus ruber）和紫色红曲霉（Monascus purpureus）.     

清香型小曲白酒生产中红曲霉的分离及发酵特性研究

研究采用培养组学首次从清香型小曲白酒绿衣观音土曲和酒醅中分离出9株红曲霉,经形态学和分子生物学分析鉴定为7株紫色红曲霉和2株红色红曲霉。进一步通过耐受性实验发现,该批红曲霉最适pH值为4～5,最低可耐受p H值为3,最高可耐受乙醇浓度为25%vol,以及最适温度为30～35℃。同时,对9株红曲霉制成的红曲米糖化酶活、蛋白酶活和酯化力进行了检测,结果发现红曲T4蛋白酶活最高,红曲M2糖化酶活最高,红曲T2的酯化力最高。本研究阐明了清香型小曲白酒生产中红曲霉种类及发酵特性信息,为下步红曲霉的应用提供了理论依据。     

五粮液大曲中嗜热红曲霉的筛选及初步研究

从五粮液大曲中筛选到1株嗜热产红色素霉菌,通过理化性能测定,形态分析,该株菌为一种嗜热红曲霉,命名为MH-1。该菌生长温度范围35~60℃,最适生长温度45℃。最适p H值为5,最低可耐受的p H值为3,酯化酶活可高达280 U。     

曲霉糖化酶高产菌株平板分离培养基的筛选

以“苏-16”黄曲霉为出发菌株,筛选出曲霉糖化酶高产菌株,该菌株淀粉液化酶活力较原菌株提高85.2%,糖化酶活力提高24.4%。筛选培养基配比为:可溶性淀粉1.3%,(NH4)2SO40.3%,KH2PO40.1%,MgSO4·7H2O0.05%,FeSO·7HO0.001%,琼脂粉1.8%。(孙悟)     

高速逆流色谱法分离纯化红曲色素组分

采用高速逆流色谱法(HSCCC)分离纯化红曲发酵产品中6 种Azaphilone 类色素组分。筛选弱极性分离溶剂系统正己烷- 醋酸乙酯- 甲醇- 水,研究6 种色素组分在不同溶剂体系中的分配系数,建立两步逆流萃取分离的技术路线。经过HPCCC 分离纯化和丙酮结晶操作,得到6 种高纯度的Azaphilone 类色素组分,纯度均大于98.5%,得率达到81.40%～84.78%,所得的6 种色素组分的摩尔吸光系数分别为13313、13877、9380、9360、25621、25849L/(mol·cm)。本研究可提供一种新型的制备高纯度红曲Azaphilone 类色素组分的技术路线。     

红曲色素萃取发酵中表面活性剂的分离与重复利用

研究三氯甲烷萃取-大孔树脂吸附（trihalomethanes extraction combined with resin absorption,THMS-Resin）对萃取发酵液中红曲色素的分离能力和Triton X-100回收重复利用的萃取性能。结果显示,THMS-Resin法能够很好地分离非离子表面活性剂Triton X-100和红曲色素,Triton X-100回收率达到78%;红曲黄色素回收率达到52%左右,同时具有显著的抗氧化活性。将回收的Triton X-100重复用于红曲霉萃取发酵,细胞生长和色素代谢良好,并且萃取剂保持较好的萃取分离性能。采用合适比例的新旧Triton X-100混合进行红曲霉萃取发酵,能显著促进红曲霉胞内外色素代谢,总色素产量最大提高35%左右。Triton?X-100经过5?次重复萃取发酵,每次回收率均可达到80%左右;并且各批次红曲霉细胞生长稳定,萃取效率和代谢能力强,胞外黄色素相对含量达到1.0,胞内黄色素相对含量维持0.6以上。该分离方法能够获得较高含量的黄色素,促进Triton?X-100的重复利用,具有很好的应用潜力。     

产红曲色素菌株的筛选及发酵培养基优化

从市售红曲米中分离得到1株高产红曲色素的红曲霉菌株M02,利用单因素实验和正交实验确定了M02菌株的最适发酵培养基。结果表明,最适发酵培养基的组成为大米粉5%,硝酸钠0.3%,KH2PO40.105%,K2HPO40.045%,MgSO40.2%。在此培养基条件下,调整初始pH为5.0,发酵温度为30℃,转速为180r/min摇床发酵,发酵5天后色价达到72.8U/mL。     

红曲发酵液中水溶性红曲黄色素的吸附分离

本文考察不同极性大孔树脂、离子交换树脂、活性炭及硅胶等吸附介质对红曲菌深层发酵液中水溶性红曲黄色素的吸附分离性能。结果显示非极性大孔树脂DA201-C效果最好,该吸附过程符合Freundlich方程,吸附动力学符合准一级动力学模型,表明吸附不受单层吸附的限制;液膜扩散是吸附主要限速步骤,扩散速率常数为0.16 min-1。通过静态和动态吸附洗脱条件优化,运用SPSS对数据进行分析,发现静态吸附、解吸料液比为1:2,吸附、解吸时间15 min,解吸液100%乙醇,酸性条件解吸效果较好;动态吸附解吸流速为0.25 BV/min条件下,可得到高回收率（96.99%）、脱盐率（99.44%）和脱糖率（92.52%）的水溶性红曲黄色素,经初步扩大实验显示吸附解吸性能稳定。大孔树脂DA201-C分离纯化发酵液中水溶性红曲黄色素操作简单、快速、放大性能好,具有很好的工业化生产应用价值。     

高产洛伐他汀红曲菌株的诱变选育

以红曲霉菌(Monascus Purpureus)HW为出发菌株,利用氯化锂进行诱变。诱变的最佳氯化锂(1mol/L)用量为200μL。经HPLC对诱变菌株发酵产物中的洛伐他汀进行检测,筛选正突变株,最终筛选到6株正突变菌株。其中三株正突变菌株HW3、HW5和HW6的发酵液中洛伐他汀的含量分别达到了35.94、38.86、30.07mg/L,比原始菌株的产洛伐他汀产量分别提高了214%、239%、169%。结合高产洛伐他汀的三株正突变株菌落形态观察发现:洛伐他汀的生产能力与产红曲色素能力有一定的相关性,其次菌落有无皱褶也可能影响洛伐他汀的生产性能。HW3、HW5、HW6正突变株经10次传代培养,产洛伐他汀的性能分别下降11.8%、14.9%、32.1%,HW3、HW5的性状较为稳定,可深入研究。     

红曲色素提取及分离纯化研究

红曲色素是由红曲霉发酵生产的天然食用色素,其作为添加剂在食品特别是肉品工业中有很好的应用前景。文章较全面地介绍了红曲色素的组成、提取及分离纯化技术,并对红曲色素的研究方向和前景进行了展望,为进一步研究和开发红曲色素提供理论依据。     

红曲霉的初筛及在黄酒酿造中的应用

在酿酒微生物的构建研究中,对中温大曲中的红曲霉进行初步筛选,经形态观察,确定3株红曲霉分别为Q1、Q2及Q3,用3株红曲霉分别培养红曲米。其中,红曲霉Q3产生的糖化力及红曲色素的含量较高,分别为1123.4 U/g和1227.6 U/g。将3株红曲霉分别应用到黄酒的发酵中,结果发现,红曲霉Q3发酵后剩余总糖的含量明显低于另外两株红曲霉,且酒精含量可多产1%,高级醇的生成量也明显减少,同时可生成较多的乳酸乙酯及高于另外两株红曲霉2倍的乙酸乙酯。     

红曲霉的分离鉴定及红曲色素的测定

从不同红曲发酵产品中分离得到15株红曲霉纯培养菌株,经形态特征观察确定为红曲霉属(Monascus)中的4个种:红色红曲菌(M.ruber),紫色红曲菌(M.purpureus),红曲红曲菌(M.anka)及巴克红曲菌(M.barkeri)。从中发现一株具有较突出的红曲色素生产能力的菌株,用该菌种生产的红曲米色价为1532.69U/g。     

高产酯化酶红曲菌的筛选、鉴定及酶学性质研究

该研究从研究室保藏的10株红曲霉菌株中筛选高产酯化酶菌株,通过分子生物学技术对其进行鉴定,并对其最适培养基进 行选择,最后对其所产的酯化酶酶学特性进行初步研究。结果表明,筛选获得一株高产酯化酶菌株X1,并被鉴定为血红红曲霉（Monascus sanguineus）。 其最适产酶培养基为可溶性淀粉70g/L,大豆蛋白胨20g/L,NaNO3 2 g/L,KH2PO4 1 g/L,MgSO4·7H2O 2g/L, 初始pH值4.5。采用最优培养基,在30℃、180 r/min条件下发酵4d,酯化酶活力为315.19 U/mL。 该酯化酶的最适反应温度为40℃,在 25～35℃范围内稳定性较好;最适pH值为5.0,在pH为6.0时稳定性较高;金属离子Ca2+可提高该酯化酶活性,Mg2+、Fe2+、Na+和Ag+则有 不同程度抑制作用,且Ag+抑制作用最明显。