响应面法优化紫贻贝蛋白酶解工艺条件

分别采用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、酸性蛋白酶、复合蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和风味蛋白酶7种蛋白酶对紫贻贝蛋白的酶解工艺条件进行研究。根据水解度和感官评定的结果,确定中性蛋白酶、复合蛋白酶、木瓜蛋白酶和风味蛋白酶可以作为紫贻贝蛋白酶解的外加蛋白酶。将上述4种蛋白酶进行两两复配,通过试验确定复合蛋白酶与中性蛋白酶按1:1进行复配,可作为紫贻贝蛋白酶解的最适复配酶。采用响应面优化分析得出复配蛋白酶最佳酶解条件为酶解时间2h、pH7、酶解温度50℃、酶添加量0.4%,在此条件进行实验,测得水解度为70.25%,游离氨基酸总量增加了388.46%。     

葡萄与葡萄酒中多酚氧化酶研究进展

在葡萄与葡萄酒的加工过程中,多酚氧化酶可以引起葡萄汁和葡萄酒的氧化,尤其是白葡萄酒,严重影响了葡萄酒的品质。本文总结了葡萄中多酚氧化酶的结构和功能及其在葡萄中的分布情况,并且揭示了在葡萄酒酿造工艺中其引起氧化褐变的机制,同时介绍了影响多酚氧化酶活性的因素和多酚氧化酶抑制剂应用等的研究进展,为进一步控制葡萄酒酿造过程中多酚氧化酶引起的氧化褐变提供参考。     

佛手瓜多酚氧化酶酶学特性研究

以佛手瓜中的多酚氧化酶为研究对象,对其酶学特性的研究表明：佛手瓜果实多酚氧化酶的最适pH 值为7.5,最适温度为30℃,底物浓度与酶活性呈正相关;该酶迅速催化焦性没食子酸的酶促氧化反应,但对邻苯二酚、对苯二酚和间苯二酚的催化活性较低。抗坏血酸、柠檬酸、四硼酸钠、MgCl2 和EDTA-2Na 对佛手瓜多酚氧化酶的抑制作用依次减弱,抗坏血酸、柠檬酸对佛手瓜多酚氧化酶的抑制作用随着浓度的升高而加强。     

芦荟多酚氧化酶特性的研究

研究了芦荟多酚氧化酶的基本性质。以邻苯二酚为底物,采用分光光度法在4 10nm处测定芦荟多酚氧化酶的活性,研究了温度、pH值、底物浓度以及酶浓度对其活性的影响,并建立了酶促褐变反应动力学方程。实验结果表明,芦荟多酚氧化酶的最适温度为4 0℃,最适pH值为6 5 ,其酶促褐变反应动力学符合米氏方程所描述的单底物酶促反应动力学,相应的动力学参数Km=0 2 8mol/L ,Vmax=2 32×10 -2 U/min。文中还研究了利用蛋白酶抑制褐变的方法,以芦荟多酚氧化酶液(mL)∶木瓜蛋白酶(mL ,浓度0 5mg/mL) =5∶1的比例向芦荟多酚氧化酶粗酶液中添加木瓜蛋白酶,在5 5℃、pH5 7条件下,水解10min可较好地抑制多酚氧化酶的活性,从而抑制芦荟的酶促褐变。     

紫贻贝蛋白酶解过程中呈味物质释放规律和呈味肽结构

通过氨基酸分析法、超滤法、凝胶层析柱法、反相高效液相色谱法、超高分辨四极杆—飞行时间质谱法等,研究紫贻贝蛋白酶解过程中各种呈味物质的释放规律及呈味肽的结构。结果表明,酶解过程中,大分子肽逐渐降解为小分子肽,游离呈味氨基酸含量、三甲胺含量升高,肽基呈味氨基酸的含量先上升后下降,总糖含量变化不明显。pH较低时有利于低分子量肽的生成。总酸含量在酶解1h、酶解温度为50℃时最高。在50℃、pH 6.5条件下酶解2h后,紫贻贝酶解液中低分子量肽的比例较高,有机酸、糖和呈味氨基酸的释放较充分。紫贻贝酶解液中海鲜风味肽的分子量1kDa,其结构为Cys-Ser-Val-Gln-Asp-Gln或Gln-Ala-ValAsn-Phe-Thr,不同于任何已知序列的呈味肽,其呈味阈值为0.1mg/mL。     

芡实多酚氧化酶的酶学性质

以紫花苏芡和紫花刺芡种仁为原料制备粗酶液,研究多酚氧化酶(PPO)酶学性质。结果表明：紫花苏芡和紫花刺芡PPO最适作用条件均为温度45℃和pH 6.5;铁离子和亚铁离子对芡实PPO酶活性具有较强的促进作用,钙离子低质量浓度时抑制酶活性,较高质量浓度时使酶活性反弹,没有表现出明显的激活作用,铝离子有一定的促进作用,铜离子低质量浓度对酶活性有促进作用,高质量浓度有抑制作用;有机酸柠檬酸、草酸、抗坏血酸和EDTA、还原剂亚硫酸氢钠和硫代硫酸钠对紫花苏芡和紫花刺芡PPO酶活性都有抑制作用。     

甜柿多酚氧化酶特性的研究及褐变控制

本文研究了从罗田甜柿中提取的多酚氧化酶的酶学特性。以邻苯二酚为底物时它的最适温度为20℃，最适pH值为6．6，Km=9．617mmol／L Vmax=0．0495A420／min。四种抑制剂的效果由强到弱依次是亚硫酸氢钠、L-半胱氨酸、抗坏血酸、柠檬酸。在温度为90℃时加热3min，酶活性被完全抑制。     

曙光油桃和丹墨油桃中多酚氧化酶性质及抑制研究

采用分光光度法研究了曙光油桃和丹墨油桃中多酚氧化酶(PPO)的酶学特性。结果表明:以邻苯二酚为底物时它们的最适温度分别为20℃和25℃,最适pH6.0和pH7.0。在80℃条件下,保持5min,两种油桃的多酚氧化酶失活比较严重。四种物质对该酶均表现出抑制作用,抑制效果由强到弱依次是抗坏血酸、柠檬酸、NaCl溶液、EDTA溶液。     

Apple Polyphenol Oxidase Inhibitor(s) from Common Housefly (Musca Domestica L.)

ABSTRACT: A new natural apple polyphenol oxidase (PPO) inhibitor(s) from housefly ( Musca domestica L.) was discovered. Crude inhibitor (s) isolated by buffer extraction, heat treatment, and dialysis from housefly pupae inhibited the activity of apple PPO up to 90% at pH values above 5.0. Inhibition was strictly pH-dependent. The inhibitor(s) was further characterized by employing heat, freezing and thawing, irradiation, pH adjustment, and ultrafiltration studies. The potential PPO inhibitor(s) was stable to heating at 100 °C for 1 h, repeated freezing and thawing, and irradiation. The inhibitor(s) was most stable at pH around 5.0 and least stable at alkaline pH. The PPO inhibition profile of housefly during metamorphosis also was evaluated.     

薯蓣多酚氧化酶特性及褐变控制

从薯蓣中提取多酚氧化酶，采用分光光度法对其动力学特性进行研究。结果表明，该酶最适作用pn为5．8，最适作用温度为20℃，Km=1．82mol/L，Vmax=1．11(△OD/min)。本文同时考察了抑制剂对薯蓣多酚氧化酶活性的影响。     

紫薯中多酚氧化酶活性的研究及褐变控制

研究紫薯组织中多酚氧化酶(PPO)的活性,最适pH值、最适温度等特性,并在此基础上,研究加热温度、加热时间、抗坏血酸和柠檬酸添加量对PPO褐变的抑制效果。结果表明：紫薯PPO最适pH值范围为5.5～7.5,最适温度为30℃。在较好的分离淀粉的前提下,最佳抑制褐变条件是：加热温度80℃、加热时间10min、抗坏血酸添加量0.9‰、柠檬酸添加量1.2g/L。     

苦杏仁多酚氧化酶的理化特性

研究苦杏仁多酚氧化酶粗提物的理化特性。结果表明：苦杏仁多酚氧化酶活性的最佳测定波长为410 nm,底物邻苯二酚最佳浓度为1.0 mol/L,Km和Vmax分别为20.53 mol/L和1.27 U/min,最适缓冲液pH值为7.40,最适反应温度和时间分别为40 ℃和3 min。热稳定性实验表明：苦杏仁多酚氧化酶在30～50 ℃范围内,热处理时间对其活性影响较小;在60～100 ℃范围内,随着温度增加酶活力也随之快速下降,使苦杏仁多酚氧化酶（polyphenol oxidase,PPO）活性丧失50%所需时间从60 ℃的15 min缩短到100 ℃的3 min左右。     

不同金属离子对多酚氧化酶的影响

采用匀浆法从茄子中提取多酚氧化酶(PPO),以绿茶粉为底物,研究Cu2+、Mn2+、Mg2+、Ca2+、Na+、Al3+和Fe3+7种金属离子对PPO活性的影响。结果表明:Cu2+、Mn2+和Mg2+3种金属离子对PPO的活性有不同程度的促进作用,而Ca2+、Na+、Al3+和Fe3+对PPO的活性有抑制作用。其中,Cu2+浓度为3mmol/L时对PPO有激活作用,此时茶黄素总量达到7.45mg;Fe3+浓度为5mmol/L对PPO有显著抑制作用,此时茶黄素总量降低至0.26mg。     

Polyphenol Oxidase from Apple (Malus domestica Borkh. cv Bramley's Seedling): Purification Strategies and Characterization

ABSTRACT Polyphenol oxidase (PPO) was isolated from Bramley's Seedling apples with 75.7‐fold purification and 26.5% recovery by ammonium sulfate precipitation, phenyl sepharose chromatography, ion exchange chromatography, and hydroxyapatite chromatography. Molecular weight was estimated to be about 45 kDa by sodium dodecyl sulfate‐polyacrylamide gel electrophoresis (SDS PAGE). Optimum PPO activity was at pH 6.5 and greater than 50% activity was retained during storage for 72 h at pH 5.5 to 6.5. Optimum temperature for activity was 30 °C and the enzyme had residual activity of greater than 50% during storage for 72 h at 20 °C to 30 °C and for 24 h at 40 °C to 50 °C. Of the substrates tested, activity was greatest with 4‐methylcatechol followed by catechol, pyrogallol, and (?)epicatechin. The most effective inhibitors tested were sodium metabisulfite and ascorbic acid.     

菜豆豆荚多酚氧化酶的酶学特性研究

目的:了解菜豆豆荚多酚氧化酶(polyphenol Oxidase,PPO)的酶学特性。方法:采用聚丙烯酰氨凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis,PAGE)法对菜豆豆荚PPO的最适pH值、最适温度、底物专一性、激活剂及抑制剂进行研究。结果:菜豆豆荚PPO最适pH值为6.0;最适温度为30℃,且温度为30℃时,该酶具有较强的热稳定性,80℃可使其完全失活;该酶对不同酚类物质表现出不同的底物专一性,邻苯二酚为该酶的最适底物;抗坏血酸、L-半胱氨酸、β-巯基乙醇、甘氨酸均能抑制该酶的活性,而1.0mmol/Lβ-巯基乙醇或抗坏血酸可完全抑制其活性;氯化铜、尿素对该酶均有激活作用,其中氯化铜的激活作用明显。结论:高温、偏碱性环境、β-巯基乙醇或抗坏血酸处理均可有效抑制菜豆豆荚PPO活性。     

小麦多酚氧化酶(PPO)活性的基因型、环境及其互作效应的分析

选用16个有代表性的小麦品种(系)，分别在山东8个地区进行小麦多酚氧化酶(PPO)活性的基因型与环境效应分析。结果表明，在随机效应中，小麦籽粒PPO活性的品种与试点互作效应最为显著。在对面团白度性状进行选择时，既要选择多酚氧化酶(PPO)活性低的品种，又要注意选择在PPO积累低的地区种植，以实现优质品种的优质生产。     

砀山酥梨膜结合态与可溶态多酚氧化酶性质比较

为探究砀山酥梨膜结合态多酚氧化酶（mPPO）性质,本文以砀山酥梨为原料,研究其mPPO催化特性及热失活动力学,并与可溶态多酚氧化酶（sPPO）性质进行比较。结果表明:以邻苯二酚为底物时,mPPO与sPPO催化特性及热失活动力学性质不同。mPPO比活力及对底物亲和力高于sPPO。mPPO在pH4.50时酶活最高,而sPPO最适pH为5.00。mPPO酸碱稳定性高于sPPO,mPPO在pH3.50～4.50环境中保持24 h后酶活大于原始酶活。砀山酥梨mPPO在35～45 ℃温度区间内活性最高,且mPPO在55～75 ℃区间热稳定性高于sPPO。热失活动力学分析结果表明,热处理对sPPO及mPPO的钝化均符合一级反应动力学,动力学参数E_a值及Z_T值分析表明mPPO比sPPO催化反应对温度的依赖性更小,热耐受性更高。     

芋头多酚氧化酶的分离纯化与酶学特性

以鲜芋头为原料,通过提取、30％～80％饱和度硫酸铵沉淀、透析、超滤,以及柱层析等步骤对芋头多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)进行逐级分离纯化,并探讨其酶学特性及抑制剂对其作用规律.结果 表明:经DEAE-Sepharose、Superdex G-75色谱柱纯化后,得到了电泳纯PPO,比活力为2...