蘑菇中多酚氧化酶的酶学特性研究

采用二次丙酮法与75％硫酸铵沉淀法从蘑菇(Agaricus bisporus)中提取多酚氧化酶；用分光光度法对蘑菇中多酚氧化酶酶学特性进行了较为系统的研究。结果表明：二次丙酮法优于75％硫酸铵沉淀法；以邻苯二酚为底物，多酚氧化酶的最适pH为7．0，最适温度为30℃；亚硫酸钠、半胱氨酸、抗坏血酸为强抑制剂。     

小麦多酚氧化酶酶学特性的研究

选取3个小麦品种作为试验材料,以邻苯二酚为底物,采用分光光度法在410 nm处测定小麦多酚氧化酶的活性,研究温度、pH值、底物浓度对其活性的影响以及酶促动力学常数Km,结果表明:小麦多酚氧化酶的最适温度范围为60～75℃,最适pH值为4.0～4.6,描述的单底物酶促反应动力学,相应的动力学参数km=0.19 mol/L,vmax=4.04×102(mol·L-1)·min-1.     

国产大麦多酚氧化酶酶学特性的初步研究

以邻苯二酚为底物通过分光光度计法,对国产大麦中多酚氧化酶（PPO）的酶学特性进行了研究。同时建立了 PPO 活性测定方法,确定了大麦 PPO 的米氏常数 Km 为1.96mol/L。结果表明,最适测定条件为酶添加量≤6mL、反应时间为4min,检测波长为415nm;国产大麦 PPO 的最适作用温度为80℃,最适作用 pH 为7.6。PPO 在沸水中处理6min 即可有效抑制其活性。实验中同时考察了柠檬酸、抗坏血酸对大麦 PPO 的抑制作用。     

菊芋多酚氧化酶的酶学特性研究

采用0.1mol/L柠檬酸缓冲溶液匀浆法从菊芋中提取多酚氧化酶(PPO),并对菊芋中多酚氧化酶的酶学特性进行了研究。实验结果表明,以邻苯二酚为底物,该酶的最适pH值为7.4,最适温度为20℃,Km值为11.11mmol/L,Vm值为0.536OD415/min,90℃热处理2min可完全钝化PPO的活性,0.40g/L的抗坏血酸、5.0mmol/L的亚硫酸氢钠能有效抑制PPO的酶活性。     

香菇多酚氧化酶酶学特性的研究

以没食子酸为底物,以3-甲基-2-苯并噻唑腙盐酸盐（MBTH）与酶作用产物形成粉红色的复合物,通过分光光度法在505nm处测定该复合物的吸收来测定香菇多酚氧化酶（PPO）的活性。分别研究了温度、pH、底物浓度对酶活性的影响,得到了米氏常数Km和最大反应速度Vmax,并探讨了PPO提取液的稳定性。结果表明:香菇PPO活性在20～60℃内逐渐升高,其最适pH为4.6,温度对酶活的影响比pH的影响要大。三种底物与PPO亲和力高低的顺序为L-多巴>一水没食子酸>邻苯二酚,其米氏常数Km分别为0.98、1.45、3.07mmol/L,最大反应速度Vmax分别为29、49、80U。      

香菇多酚氧化酶酶学特性的研究

以没食子酸为底物,以3-甲基-2-苯并噻唑腙盐酸盐(MBTH)与酶作用产物形成粉红色的复合物,通过分光光度法在505nm处测定该复合物的吸收来测定香菇多酚氧化酶(PPO)的活性.分别研究了温度、pH、底物浓度对酶活性的影响,得到了米氏常数Km和最大反应速度Vmax,并探讨了PPO提取液的稳定性.结果表明:香菇PPO活性在20～60℃内逐渐升高,其最适pH为4.6,温度对酶活的影响比pH的影响要大.三种底物与PPO亲和力高低的顺序为L-多巴-水没食子酸邻苯二酚,其米氏常数Km分别为0.98、1.45、3.07mmol/L,最大反应速度Vmax分别为29、49、80U.     

青蒿多酚氧化酶的酶学特性研究

以新鲜青蒿为材料,考察不同温度、pH值、底物浓度、激活剂、抑制剂对青蒿多酚氧化酶（polyphenoloxidase,PPO）活性的影响。结果表明：温度和pH值对酶活性的影响均存在一个最适值,分别为40 ℃和6.8;在一定底物浓度范围内,酶促反应速率随底物浓度的增加而增大,其米氏常数（Km）为0.015 4 mol/L,最大反应速率（Vmax）为125 U/min;MgC12、SDS对青蒿PPO活性有一定激活作用,当MgC12浓度为0.9 mmol/L、SDS浓度为8 mmol/L时,青蒿PPO活性分别高出对照组30.3%和45.3%;当VC质量浓度为0.03 g/L、柠檬酸质量浓度为1.2 g/L、PVP质量浓度为20 g/L时抑制率分别为70.4%、83.7%、77.6%;NaHSO3在0.01～0.08 mmol/L的浓度范围内对青蒿PPO抑制作用缓慢上升。     

山楂多酚氧化酶的酶学特性研究

研究山楂多酚氧化酶(PPO)的酶学特性。采用分光光度法测定PPO的酶活性,考察底物特异性、p H值、温度、热稳定性、底物浓度、金属离子以及抑制剂对PPO酶活性的影响。实验结果表明,山楂PPO的最适底物为邻苯二酚;最适p H值为6.5;最适温度为40℃;90℃热处理1.0 min或85℃处理1.5 min PPO酶活基本完全丧失;山楂PPO最适底物浓度为0.10 mol/L,PPO酶促褐变反应动力学符合米氏方程,相应的动力学参数Km=55.83 mmol/L,Vmax=98.04 U/min;Al3+对PPO酶活的抑制作用较强,Mn2+、Ca2+和Zn2+次之,Cu2+和Mg2+对PPO酶活抑制作用不明显,Fe3+对PPO酶活有一定的促进作用;四种抑制剂对山楂PPO酶活均有一定的抑制作用,且抑制效果与抑制剂浓度呈量效关系,相同浓度下抑制效果由强到弱顺序为:抗坏血酸L-半胱氨酸亚硫酸氢钠柠檬酸,抗坏血酸的抑制效果最为显著。     

白萝卜多酚氧化酶的酶学特性研究

白萝卜作为我国第二大蔬菜。其贮运和加工过程中的褐变多以酶促褐变为主,全面系统地了解白萝卜多酚氧化酶(PPO)的酶学特性,并研究其抑制手段,对提升白萝卜及其制品的品质和商品价值有着重要的意义。本文以新鲜白萝卜为原材料,采用丙酮洗涤、0.2 mol/L磷酸盐缓冲溶液匀浆法从中提取PPO,考察了pH、温度对酶活的影响,分析了其温度稳定性、底物浓度对PPO活性的影响,探讨了过程的反应动力学,并对多种酶抑制剂对PPO活性的影响进行了比较,为控制加工过程中白萝卜的酶促褐变提供了理论依据。试验结果表明:以邻苯二酚为底物,该酶的最适pH值为6.0,最适反应温度为40℃,Km和Vmax值分别为53.8 mmol/L和588 U/min。90℃热处理2.5 min或85℃热处理3.5 min可基本完全钝化其活性,Vc、异Vc和L-cys对PPO酶活的抑制较为明显。     

白萝卜多酚氧化酶的酶学特性研究

白萝卜作为我国第二大蔬菜。其贮运和加工过程中的褐变多以酶促褐变为主,全面系统地了解白萝卜多酚氧化酶（PPO）的酶学特性,并研究其抑制手段,对提升白萝卜及其制品的品质和商品价值有着重要的意义。本文以新鲜白萝卜为原材料,采用丙酮洗涤、0.2 mol/L磷酸盐缓冲溶液匀浆法从中提取PPO,考察了pH、温度对酶活的影响,分析了其温度稳定性、底物浓度对PPO活性的影响,探讨了过程的反应动力学,并对多种酶抑制剂对PPO活性的影响进行了比较,为控制加工过程中白萝卜的酶促褐变提供了理论依据。试验结果表明：以邻苯二酚为底物,该酶的最适pH 值为6.0,最适反应温度为40 ℃,Km和Vmax值分别为53.8 mmol/L和588 U/min。90 ℃热处理2.5 min或85 ℃热处理3.5 min可基本完全钝化其活性,Vc、异Vc和L-cys对PPO酶活的抑制较为明显。     

马铃薯中多酚氧化酶的酶学特性研究

采用分光光度法对马铃薯中多酚氧化酶的酶学特性进行了较深入系统的研究，其中包括酶活力，酶热稳定性以及pH，抑制剂对酶活性的影响。结果表明：多酚氧化酶的最适pH为6．6，最适温度为30℃，酶热失活遵循一级动力学原理，二巯基丙醇，亚硫酸钠，半胱氨酸，抗坏血酸对酶活性有较强的抑制作用。     

杏鲍菇多酚氧化酶的酶学特性研究

以杏鲍菇中多酚氧化酶（PPO）为研究对象,采用分光光度法在420nm处对其酶学特性进行研究。结果表明,杏鲍菇PPO的最适底物为邻苯二酚;最适pH为6.0;最适温度为35℃;90℃处理2min,可使酶完全失活;PPO催化的酶促褐变反应动力学符合米氏方程,动力学参数为K_m=0.0207mol/L,V_max=41.32U/min;7种金属离子对PPO酶活性的影响效果各不相同,Al³⁺、Mn²⁺对PPO酶活性有一定的抑制作用,Mg²⁺、Zn²⁺、Ca²⁺和Cu²⁺对PPO酶活性的抑制作用不明显,Fe³⁺对PPO酶活性有激活作用;抗坏血酸、柠檬酸、L-半胱氨酸和亚硫酸钠对PPO酶活性的抑制作用均随浓度的增大而加强,抑制能力由强到弱依次为:抗坏血酸>亚硫酸氢钠>L-半胱氨酸>柠檬酸。      

茄子多酚氧化酶的酶学特性研究

本文对日本千年2号茄子中多酚氧化酶的酶学特性进行了较详细研究。结果表明：茄子中多酚氧化酶的最适pH为6．8，当体系pH≤5．0或者pH≥7．4时，能有效降低PPO活性。30～50℃下PPO具有较高活性，其最适温度为30℃。PPO的热稳定性较差，沸水加热1min时，酶活已丧失87．57％。柠檬酸、抗坏血酸、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、EDTA-2Na等对PPO活性有抑制作用，其中抗坏血酸抑制作用最强。     

烟草中多酚氧化酶的酶学特性研究

从新鲜的烟叶中提取多酚氧化酶,该酶在55℃时经过10分钟酶的活性就达到高峰,但持续的时间很短,热稳定性差;在40℃时经过20分钟酶的活性才达到高峰,但持续的时间较长,具有良好的热稳定性。烟草中的多酚氧化酶在 pH 值为6时,酶的活性最高:pH 值高于6或低于6,活性均下降。烟草中的多酚氧化酶与焦儿茶酚(二元酚)的结合力最强,三元酚次之,一元酚不作用。烟草中的多酚氧化酶是一种含酮的蛋白质,增加铜离子的浓度能增强多酚氧化酶的活性;EDTA、亚硫酸氢钠、硼酸、柠檬酸都是烟草多酚氧化酶的良好抑制剂。     

蓝莓中多酚氧化酶的酶学特性

为分析蓝莓中多酚氧化酶的酶学特性,本文对影响蓝莓多酚氧化酶（PPO）的酶活力的主要因素:p H、温度、金属离子、抑制剂及热稳定性进行了研究。结果表明:蓝莓中PPO最适p H为6.5,最适温度为30℃,Ca²⁺和Mn²⁺对蓝莓PPO有抑制作用,Cu²⁺、Mg²⁺、Zn²⁺、Fe³⁺对蓝莓PPO有激活作用。柠檬酸、抗坏血酸、L-半胱氨酸及亚硫酸氢钠能抑制PPO酶活,但柠檬酸抑制效果较差。热稳定性实验结果表明:蓝莓果PPO耐热性较差,高温短时可显著抑制PPO酶活性。      

赵州雪花梨多酚氧化酶酶学特性研究

研究赵州雪花梨多酚氧化酶的酶学特性.结果表明:以邻苯二酚为底物,雪花梨中多酚氧化酶的最适pH值为7.0, 最适温度为25 ℃;底物浓度与酶活成正相关,90 ℃处理4 min 可钝化其活性;酶反应动力学研究表明,以邻苯二酚为底物时,Vmax=437 U/min,Km=0.015 6 mM.     

蓝莓中多酚氧化酶的酶学特性

为分析蓝莓中多酚氧化酶的酶学特性,本文对影响蓝莓多酚氧化酶(PPO)的酶活力的主要因素:p H、温度、金属离子、抑制剂及热稳定性进行了研究。结果表明:蓝莓中PPO最适p H为6.5,最适温度为30℃,Ca~(2+)和Mn~(2+)对蓝莓PPO有抑制作用,Cu~(2+)、Mg~(2+)、Zn~(2+)、Fe~(3+)对蓝莓PPO有激活作用。柠檬酸、抗坏血酸、L-半胱氨酸及亚硫酸氢钠能抑制PPO酶活,但柠檬酸抑制效果较差。热稳定性实验结果表明:蓝莓果PPO耐热性较差,高温短时可显著抑制PPO酶活性。     

毛酸浆多酚氧化酶的酶学特性研究

以毛酸浆中多酚氧化酶(PPO)为研究对象,采用分光光度法在420nm处对其酶学特性进行研究。结果表明,毛酸浆PPO的底物邻苯二酚的最适质量分数为0.04%;最适pH为7.0;最适温度为35℃;100℃处理2min,可使酶完全失活;PPO催化的酶促褐变反应动力学符合米氏方程,动力学参数为Km=0.025mol/L,Vmax=125U/min;抗坏血酸、柠檬酸、L-半胱氨酸和亚硫酸钠对PPO酶活性的抑制作用均随浓度的增大而加强,抑制能力由强到弱依次为:抗坏血酸柠檬酸L-半胱氨酸EDTA亚硫酸氢钠。     

小麦多酚氧化酶的分离纯化及酶学性质研究

为了减少多酚氧化酶(PPO)对产品所带来的负面影响,对从苏北红麦中提取的PPO粗提物进行分离纯化。经硫酸铵沉淀、DEAE阴离子交换层析和Superdex 200凝胶过滤层析,最终得到电泳纯化后只有一条条带的PPO,并对该纯化后的PPO进行酶学性质研究。试验结果为:纯化后PPO总酶活回收率为7.03%,纯化倍数22.35,比酶活为373.44 U/mg,电泳分析表明其相对分子质量约为30 000。测得其最适反应p H为6.5,最适反应温度为37℃;金属离子影响的研究表明,K~+、Na~+对其活性基本无影响,Ca~(2+)、Mg~(2+)、Mn~(2+)略有激活作用,Zn~(2+)、Cu2+激活作用较强;小麦PPO对邻苯二酚的K_m值为6.90 mmol/L,对焦性没食子酸(三酚类)、邻苯二酚(二酚类)底物亲和性较强,对单酚类(苯酚、愈创木酚)、二酚类(对苯二酚、间苯二酚)底物亲和性很低。     

金银花叶多酚氧化酶的酶学特性

对金银花叶多酚氧化酶(PPO)的酶学特性进行研究。以新鲜金银花叶片为原料,采用溶剂法从中提取多酚氧化酶粗液,研究不同的温度、pH值、底物浓度、抑制剂等因素对PPO活性的影响,建立酶促褐变动力学方程。研究结果表明,金银花叶PPO的最适温度45℃,最适pH6.5,安全、经济的褐变抑制剂柠檬酸;当以邻苯二酚为底物时,金银花叶PPO活性与底物浓度关系符合米氏方程的酶促反应动力学规律,最大反应速度Vmax=313U/min,Km=0.0197mol/L。