类β-内啡肽物质在两栖类胚胎表皮细胞的免疫电镜定位

本文用免疫电镜包埋后技术研究了类β－内啡肽物质在两栖类胚胎表皮细胞中的定位。观察到类β－内啡肽物质主要分布在胚胎表皮外层细胞的外缘部位。除在囊泡状结构内含物上、囊泡壁以及附近,在细胞卢的外缘和细胞外分泌物上也都观察到金颗粒的分布。认为,类β－内啡肽物质在表皮细胞中,首先集中在外层细胞的囊泡状结构内,然后释放到细胞外。     

一种特殊形态高尔基体内含物的立体观察和研究

本文运用明、暗场互换观察法和样品倾斜法对一种罕见的高尔基体内含物进行了立体结构观察和研究。结果表明,这种高尔基体内含物是由集中于扁囊及囊泡中部的高电子密度物质和其周围的微纤丝样结构组成。在扁囊中,微纤丝样结构以S形结构为中轴呈放射状分布,并与扁囊膜相连。在囊泡中,这些微纤丝样结构结成网状。明暗场互换观察法所得的浮雕象具立体感,能将细胞的膜性结构和纤维状结构显示得更加清晰,但它不能反应出细胞超微结构本身的三维图形,而运用样品倾斜法可以达到这一目的。     

应用高压冷冻-冷冻置换技术研究受Potyvirus侵染的寄主细胞超微结构

应用高压冷冻-冷冻置换技术（HPF-FS）制备了马铃薯Y病毒属的小西葫芦黄花叶病毒（ZYMV）和大豆花叶病毒（SMV）侵染寄主植物叶细胞的超薄切片样品,并与传统化学固定方法进行比较。透射电镜观察结果显示：病毒粒子和内含体的形态分布在两种方法处理的样品中无明显差异,但高压冷冻样品的细胞超微结构精细,细胞壁与细胞质之间边界清晰,质膜平滑而完整,细胞基质丰富;细胞核和叶绿体、线粒体等形态饱满,高尔基体潴泡结构及分泌小泡清晰,在ZYMV感染细胞的叶绿体中观察到囊泡结构。而化学处理的样品普遍存在细胞结构的收缩和变形,特别是质膜褶皱,与细胞壁分离,叶绿体呈梭形,片层结构发生改变,高尔基体潴泡结构及分泌小泡相当少见。实验结果有利于正确区别病毒所引起的细胞病理变化和化学处理而产生的人工假象。     

缺铁水稻根细胞膜泡相关基因群的分析与电镜观察

在缺铁固体培养基中,可清楚地观察到水稻根表面的分泌物和根的形态变化以及侧根增多.为了从分子水平深入了解水稻受缺铁胁迫后的反应机理,对缺铁水稻根进行了10531个EST芯片的微点阵分析,发现膜泡相关的基因群相对转录表达率最高.利用超薄切片技术,在透射电镜下观察了缺铁胁迫下水稻根尖细胞的结构变化.结果显示：缺铁根尖细胞中,膜泡好似起源于质膜和囊泡的组装,然后在质膜上凸起,并且是双方向性的.膜泡表面有衣被.虽然正常供铁情况下也有膜泡出现,但与缺铁比较有很大区别.缺铁根尖细胞的膜泡明显大,膜泡和凹陷泡上有较清晰的衣被.同时还观察到在单层膜的膜泡内有管状和圆球形的内含物质.内含物的来源有可能,至少是部分通过内吞作用来源于细胞外基质.     

玉米雌穗性别决定过程中雄蕊原基退化的电镜观察

玉米的雌花发育是由于小 早期雄芯原基细胞退化解体所致在雄蕊原基退化过程中，先出现细胞液泡化，随后是除线粒体以外的细胞器丢失，细胞形状不规则，解体细胞的物质可能过囊泡运输方式转移。     

几种天南星科植物受芋花叶病毒感染后的叶片组织病变研究

对自然感染芋花叶病毒（ＤＭＶ）的几种天南星科植物的叶片超微结构进行电镜观察的结果表明：ＤＭＶ感染天南星科植物同时形成风轮状（Ｐｉｎｗｈｅｅｌ）、卷筒状（Ｓｃｒｏｌｌ－ｌｉｋｅ）和片层状聚集体（ｌａｍｉｎａｔｅｄａｇｒｅｇｇａｔｅｓ）结构的细胞质内含体（即柱状内含体，ＣｙｌｉｎｄｅｒｉｃａｌＩｎｃｌｕｓｉｏｎ，ＣＩ）。ＤＭＶ所产生的细胞质内合体与Ｅｄｗａｒｄｓｏｎ等所划分的Ⅱ型ＣＩｓ相符。在叶肉细胞质中还观察到分散的病毒粒子、大量紧密聚集的病毒粒子以及主要由病毒粒子组成的类似病毒包含体（Ｖｉｒｏｐｌａｓｍａ）的结构。同时，不同寄主来源对ＤＭＶ细胞质内含体的形状有明显影响：来源于自然感病的马蹄莲细胞中ＣＩｓ横切面上主要是风轮状结构组成；在芋、广东万年青的感病细胞中亦是以风轮状结构占优势，但具有一定数量的片层状结构和卷筒状结构；在魔芋、半夏和海芋的细胞中则以卷简状结构为主，具有一定数量的片层状结构，有的甚至完全不形成风轮状．     

多泡体的细胞化学研究

多泡体是细胞质内的一种球形结构,外有界膜包围,内含很多小泡。本研究用细胞化学方法观察了大鼠睾丸间质细胞中多泡体的形态、细胞化学特性及其与细胞内吞活动的关系,以进一步了解多泡体的来源,结构与功能。实验动物为雄性Wistar大鼠16只,体重300-350克,分二组分别进行CMP酶细胞化学和阳离子铁蛋白示踪细胞化学实验(具体方法见参考文献1,2)。实验结果表明,睾丸间质细胞中多泡体的形成可分三个阶段。首先,一些含内吞物质的泡状结构进入     

抗菌肽magainin Ⅱ对E.coli杀伤作用的AFM观察

利用原子力显微镜（AFM）观察了不同浓度magainin Ⅱ对E．coli的作用效果。分别用低于MIC和高于MIC浓度的magainin Ⅱ作用E．coliD31结果发现当magainin Ⅱ浓度低于最低抑制浓度MIC时,细菌外膜的粘弹性增大,膜表面产生数量、大小不等的囊泡结构。当magainin Ⅱ高于MIC时,细胞很快破损,胞浆内容物外泄,菌体破裂导致死亡。推测magainin Ⅱ分子可能以“地毯”模式迅速集结于细胞膜上,环绕菌体切断细胞膜。这些结果都说明微生物的细胞膜结构是抗菌肽攻击的首要靶点。     

复合病毒感染对大豆叶片细胞超微结构的影响

本文应用电镜对大豆花叶病毒(SMV)和烟草环斑病毒(TRSV)复合感染大豆叶片细胞进行了观察。研究结果表明:在同一寄主细胞中,见到了两种病毒;细胞中出现大量的高尔基小泡囊,叶绿体中的片层膜系统消失,取而代之的是大量淀粉粒、细胞核形态异常,核膜破损;细胞中出现风轮状和园柱状内含体;液泡中的束丝只包裹SMV粒体,不包裹TRSV粒体。     

九种Potyviruses柱状内含体结构的比较研究

通过寄主叶肉细胞超薄切片的透射电镜观察，对马铃薯Ｙ病毒（ＰＶＹ），芋花叶病毒（ＤＭＶ），大蒜黄条病毒（ＧＹＳＶ），大豆花叶病毒（ＳＭＶ），蚕豆叶卷花叶病毒（ＰＬＲＭＶ），芜菁花叶病毒（ＴｕＭＶ），大丽菊上的马铃薯Ｙ组病毒（Ｐｏｔｙｖｉｒｕｓ－Ｄｈ），莴苣花叶病毒（ＬＭＶ）和大麦黄花叶病毒（ＢＹＭＶ）九种病毒共１２个病毒分离物所产生的柱状内含体的结构进行了比较研究，结果表明同一病毒的不同分离物所产生     

药用肉苁蓉花粉的形态观察研究

目的:对《中国药典》规定的2种肉苁蓉的花粉进行形态学研究,为肉苁蓉属植物的分类鉴别建立实验依据.方法:采用扫描电镜观察荒漠肉苁蓉和管花肉苁蓉的花粉形态并进行测量.结果:两种肉苁蓉的花粉粒在形状、萌发孔及外壁纹饰等方面具有其各自特殊的形态结构特征.结论:孢粉学研究可作为鉴别肉苁蓉属植物的分类鉴别依据.     

肉苁蓉雌雄配子体发育的研究

肉苁蓉(Cistanche deserticola Y.C.Ma)是一种沙生根寄生濒危药用植物.采用石蜡切片法,利用光镜观察,对内苁蓉雌雄配子体发育进行了系统研究.结果表明:花药壁由5层细胞组成,分别为表皮、药室内壁、中层(2层)和绒毡层,绒毡层细胞起源具异型性,发育类型为腺质型.小孢子母细胞胞质分裂为同时型,四分体为四面体型,成熟花粉粒为2-细胞型,部分败育.大孢子由单个孢原细胞直接发育为大孢子母细胞,大孢子母细胞减数分裂形成线状四分体,珠孔端3个大孢子最后退化,且退化顺序不一,大部分胚囊中的大孢子从合点端第2个开始退化,合点端大孢子为功能大孢子并发育为单核胚囊,胚囊发育属蓼型.研究结果为内苁蓉资源的保护提供细胞学依据.     

大豆与白粉病菌相互作用的超微结构与细胞化学

对大豆与白粉病菌相互作用的超微结构与细胞化学的研究表明,病原菌随着胞的侵染可诱导绝大多数寄主细胞产生强烈的乳突反应,但缺乏有效的乳突抗性。抗病寄主的细胞以过敏性反应抑制病原菌的侵染,病菌初生吸器的产生往往诱导感病寄主的细胞代谢迅速增强,甚至分化成一些结构简单但却能够进行光合作用的小型叶绿体。与菌丝相比,病菌分化孢子和吸器的壁中只含有少量的几丁质,而吸器外围的分枝几乎没有。     

小麦与白粉病菌相互作用的钙调素定位

本文对白粉病菌侵染后小麦表皮细胞内钙调素的动态变化过程进行了分析。结果表明,在正常情况下钙调素主要集中分布在泡内和胞外,在细胞衰老时进入解体的细胞器如细胞核等;接种白粉病菌后,感病细胞内的钙调素含量降低;但随着细胞的衰老钙调素含量又逐渐增加。钙调素逐渐穿过吸器外膜进入吸器外基质和退化的吸器内部。病原菌侵染后,抗病细胞中的钙调素迅速增加,并随着细胞的死亡散布在这个细胞中,上述结果说明,适当的钙离子浓度梯度是白粉病菌吸器发育和行使其功能的重要条件。     

激光扫描共聚焦显微镜在骨髓基质细胞移植中的应用

目的：探讨激光扫描共聚焦显微镜（laser scanning confocal microscope,LSCM）技术在骨髓基质细胞（Bone Marrow Stromal Cells,BMSCs）移植中的应用。方法：使用活细胞示踪剂CM-DiI、细胞核探针DAPI和DNA合成前体物BrdU体外标记BMSCs,移植到动物模型体内,利用LSCM技术,观察BMSCs在受体组织内的分布和分化。结果：体外标记BMSCs后再移植到受体,使用LSCM技术可以观察到BMSCs定位于受体心肌组织和脑组织,并有部分BMSCs表达相应的组织特异性蛋白Cx43和GFAP。结论：利用LSCM技术观察BMSCs在受体组织内分布和分化是一种简单可行的方法。     

主光轴平行于基底的微透镜阵列制作与测试

应用SU-8负性感光胶的独特性能,采用水浴倾斜紫外光刻的方法,优化工艺参数,构造出主光轴平行于基底的球面微透镜阵列,其单个透镜的直径约为200μm。利用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)对微透镜的表面形貌及曲率半径进行测量,并搭建光学观测平台,测得透镜焦距并观察成像效果。经观测,所加工球面微透镜具有较好的表面形貌和成像效果。基于此方法加工的微透镜阵列,主光轴平行于基底,因而便于与其他光学系统进行片上集成,完成对光线的聚焦,最终实现光开关、扫描成像等功能。此微透镜阵列也将集成在微流式细胞仪上,用于样本流的荧光检测,可极大提高检测精度。     

ALA-PDT在耐药白血病细胞株HL-60/ADR中的实验研究

目的:本研究观察5-氨基乙酰丙酸介导的光动力疗法(ALA-PDT)对耐药白血病细胞株HL-60/ADR的诱导凋亡作用.方法:以耐药白血病细胞株HL-60/ADR为实验模型.实验分为4组,对照组、单纯ALA组、单纯光照组及ALA PDT组.用MTT法检测细胞的存活率,瑞特染色观察细胞形态学改变,用双染法检测细胞凋亡率,并用共聚焦激光显微镜观察凋亡细胞的特征.结果:ALA PDT组光照后瑞特染色可见凋亡改变;MTT法显示细胞存活率明显下降,24h为(48.67±8.14)%,48h进一步降低至(22.23±6.07)%,两者比较差异有统计学意义;流式细胞仪检测显示细胞凋亡率3h、4h和24h分别为(6.35±1.40)%、(8.07±1.87)%和(57.66±7.55)%,与对照组相比差异有统计学意义;LSCM观察AnnexinV-FITC单阳性及AnnexinV-FITC/PI双阳性细胞均具有典型的凋亡特征,而单纯ALA组、单纯光照组及对照组则无上述改变.结论:ALA-PDT能灭活耐药白血病细胞株HL-60/ADR,主要通过诱导凋亡的方式实现的,并呈一定的时间依赖性.     

激光共聚焦显微技术在细菌粘附肾小管上皮细胞研究中的应用

目的:观察尿路致病大肠杆菌和甘露糖在肾小管上皮细胞(PTEC)内的共定位,探讨细菌粘附PTEC的可能机制.方法:在C5a刺激和C5aR拮抗剂(PMX53)作用下,利用激光共聚焦扫描显微镜观察荧光标记的大肠杆菌和甘露糖在原代培养的肾小管上皮细胞中的表达位置.结果:在无任何刺激情况下,PTEC本身表达的甘露糖主要分布在细胞核周围;加入细菌后,甘露糖表达明显升高,并观察到少数细菌与甘露糖共定位;在C5a刺激和等量细菌刺激情况下,PTEC表面粘附的细菌明显增多,且甘露糖的表达明显增多,另外细菌与甘露糖共定位也明显增多;而在PMX53和等量细菌作用下,PTEC粘附的细菌量和甘露糖表达均明显减少.结论:C5a-C5aR信号改变了细胞表面甘露糖的表达,从而影响了细菌在PTEC上的定殖.     

Diamagnetic levitation causes changes in the morphology, cytoskeleton, and focal adhesion proteins expression in osteocytes

Diamagnetic levitation technology is a novel simulated weightless technique and has recently been applied in life-science research. We have developed a superconducting magnet platform with large gradient high magnetic field (LG-HMF), which can provide three apparent gravity levels, namely, μg (diamagnetic levitation), 1g, and 2g for diamagnetic materials. In this study, the effects of LG-HMF on the activity, morphology, and cytoskeleton (actin filament, microtubules, and vimentin intermediate filaments) in osteocyte - like cell line MLO-Y4 were detected by 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) methods, hematoxylin-eosin (HE) staining, and laser scanning confocal microscopy (LSCM), respectively. The changes induced by LG-HMF in distribution and expression of focal adhesion (FA) proteins, including vinculin, paxillin, and talin in MLO-Y4 were determined by LSCM and Western blotting. The results showed that LG-HMF produced by superconducting magnet had no lethal effects on MLO-Y4. Compared to control, diamagnetic levitation (μg) affected MLO-Y4 morphology, nucleus size, cytoskeleton architecture, and FA proteins distribution and expression. The study indicates that osteocytes are sensitive to altered gravity and FA proteins (vinculin, paxillin, and talin) may be involved in osteocyte mechanosensation. The diamagnetic levitation may be a novel ground-based space-gravity simulator and can be used for biological experiment at cellular level.     

拓宽激光扫描共聚焦显微技术运用的新探索

利用一些醛类固定液在固定作用中可产生荧光物质的特性，在荧光显微术中选择合适的激发波长和发射波长，使得一些未经荧光标记的生物组织结构也能在激光扫描共聚焦显微镜下成像，并可进行三维图像的构建，这不仅使激光扫描共聚焦显微技术的运用范围大为扩展，而且大大节约了研究费用和时间，提高了效益。此外，该技术还为组织学和细胞学的回顾性研究提供了一个有效手段，并将激光扫描共聚焦显微技术与普通光镜及电镜技术有机地结合起来，使组织和细胞的形态学研究得以全方位进行。