人参皂苷F2通过PI3K/Akt途径改善3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗

该研究探讨了人参皂苷F2对3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗的影响及其机制。将3T3-L1前脂肪细胞诱导分化成熟后,用1 μmol/L地塞米松处理48 h,建立胰岛素抵抗模型。用10 μmol/L的罗格列酮（阳性对照）和25、50、100 μmol/L人参皂苷F2处理胰岛素抵抗细胞12 h,检测细胞对2-NBDG的摄取。实验结束后用RT-qPCR检测各组细胞中葡萄糖转运蛋白4（GLUT-4）和胰岛素底物受体1（IRS-1）mRNA相对表达量,并利用Western blot检测PI3K/Akt信号通路中蛋白表达及其磷酸化水平。结果表明：与模型组相比,25、50、100 μmol/L人参皂苷F2均能促进胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞对2-NBDG的摄取,分别增加了12.58%、29.07%和34.62%（p<0.05）;人参皂苷F2作用12 h后,GLUT-4和IRS-1 mRNA相对表达量以及PI3K、Akt的磷酸化水平显著提高（p<0.01）。该研究表明人参皂苷F2可通过促进胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞中GLUT-4和IRS-1mRNA相对表达,增加PI3K和Akt蛋白磷酸化,从而激活PI3K/Akt信号通路,改善其糖代谢和胰岛素抵抗。     

三疣梭子蟹蟹黄油的降血糖作用

为研究三疣梭子蟹蟹黄油(egg oil from Portunus trituberculatus,Pt-egg oil)对糖尿病大鼠高血糖症的改善作用及机制,本文采用注射链脲佐菌素的方法建立糖尿病大鼠模型,给予100和400 mg/kg·bw的Pt-egg oil 60 d。实验结束后,检测大鼠空腹血糖和胰岛素水平,检测葡萄糖耐受性,采用实时荧光定量PCR方法检测Pt-egg oil对糖尿病大鼠骨骼肌胰岛素信号通路关键基因m RNA表达水平,采用Western blotting法检测Pt-egg oil对糖尿病大鼠胰岛素信号通路关键蛋白表达的影响。结果显示,经Pt-egg oil饲喂后,大鼠的空腹血糖水平显著地降低了36.52%(p0.01),血清胰岛素浓度增加了40.21%(p0.01),葡萄糖耐受性显著改善,骨骼肌磷脂酰肌醇-3-羟激酶(phosphatidylinositol 3-hydroxy kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)和葡萄糖转运蛋白4(glucose transporter 4,Glut4)基因m RNA分别显著增加了114.52%、83.17%和90.06%(p0.01),蛋白表达分别显著提高了1.54倍、1.61倍和1.37倍(p0.01),细胞膜上Glut4蛋白表达提高了1.27倍(p0.01)。表明Pt-egg oil能通过激活PI3K/Akt胰岛素信号通路起到降低糖尿病大鼠血糖的作用。     

鱼油对KKAy糖尿病小鼠糖代谢及PI3K/Akt信号通路的影响

目的：探讨鱼油对KKAy糖尿病小鼠糖代谢及磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K）/蛋 白激酶B（protein kinase B,Akt）信号通路的影响。方法：40 只KKAy小鼠,分为模型组和鱼油低、中、高剂 量组,每组10 只。另设10 只C57BL/6小鼠为正常对照组。灌胃12 周后,测定血糖、胰岛素、脂联素、瘦素及 PI3K/Akt信号通路中相关基因的表达水平。结果：与模型组相比,鱼油低剂量组血糖水平极显著降低（P＜0.01）, 鱼油低、中剂量组胰岛素水平显著提高（P＜0.05）,鱼油各剂量组的脂联素水平显著提高（P＜0.05）。此外,鱼油 各剂量组可上调胰岛素受体底物-1、PI3K、Akt、葡萄糖转运蛋白-4基因的表达,其中低剂量鱼油对Akt和葡萄糖转 运蛋白-4基因的调控效果更显著。结论：低剂量鱼油可能通过调节PI3K/Akt信号通路改善糖代谢。     

n-3/n-6多不饱和脂肪酸的生理功能与膳食平衡研究

多不饱和脂肪酸(PUFAs)是一种独特的生物活性物质,对人体有着重要的生理功能。其中,n-3/n-6多不饱和脂肪酸具有重要的生物学功能,它们在人体内的平衡对于维持细胞的正常生理功能、促进血清胆固醇的代谢、降低血液黏稠度以及增强记忆、活跃思维等方面起着重要作用。综述n-3/n-6多不饱和脂肪酸的生理功能及膳食平衡等研究进展,为后续研究提供理论依据。     

植物多酚通过PI3K/Akt信号通路抗肿瘤作用研究进展

磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸/苏氨酸激酶B（phosphatidylinositol 3-kinase/serine/threonine kinase B,PI3K/Akt）信号通路是一条经典的抑制细胞凋亡、促进细胞增殖的信号转导通路,在肿瘤、心血管疾病、神经系统疾病和糖尿病等的防治中发挥重要作用,特别是肿瘤。PI3K/Akt信号通路的异常活化与肿瘤的发生、侵袭和转移等过程密切相关,对该通路的研究已成为当今国内外治疗肿瘤的焦点。植物多酚因具有抗肿瘤作用而成为预防肿瘤的天然药物。本文综述了PI3K/Akt信号通路的结构、活化机制以及与肿瘤的关系,总结植物多酚通过该信号通路对肿瘤细胞的作用机制,以期为研发植物多酚作为预防肿瘤的保健食品或药品提供一定的科学依据。     

白花蛇舌草抑制大肠癌耐药裸鼠移植瘤多条信号通路的活化

目的探讨白花蛇舌草(HDW)在体情况下对大肠癌耐药移植瘤的抑制作用及耐药相关信号通路活化的影响。方法采用雄性BALB/c裸鼠接种大肠癌5-氟尿嘧啶(5-FU)耐药细胞HCT-8/5-FU构建皮下移植瘤动物模型,分为生理盐水(NS)组、HDW组和5-FU干预组,分别给予相应药物干预处理6周,通过测量移植瘤体积和称量移植瘤重量研究HDW对大肠癌耐药移植瘤生长的影响;采用Western Blot检测HDW对移植瘤细胞ERK、JNK、p38、PI3K/Akt信号通路活化的影响。结果构建的裸鼠大肠癌HCT-8/5-FU细胞移植瘤对5-FU具有耐药性,可作为大肠癌耐药研究的动物模型;HDW能显著抑制移植瘤的生长;HDW能抑制HCT-8/5-FU移植瘤细胞ERK、JNK、p38和PI3K/Akt等信号通路的活化。结论 HDW在体具有抑制大肠癌耐药移植瘤生长的作用,并可能通过抑制ERK1/2信号通路、JNK信号通路、p38信号通路、PI3K/Akt信号通路的活化逆转大肠癌耐药。     

单宁酸通过抑制TRAF6向细胞质膜的招募抑制Akt信号通路

目的：表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）/蛋白激酶B（protein kinase B, PKB,也称Akt）信号通路在大多数人类实体肿瘤中过度激活、表达失调,促进肿瘤细胞增殖。植物单宁属于植物 多酚类物质,能够抑制肿瘤细胞的增殖。然而,单宁酸通过何种机制调控肿瘤细胞中过度激活的Akt信号通路仍不 清楚。方法：本实验选用人胶质瘤U87细胞作为模型,研究单宁酸抑制人胶质瘤U87细胞EGFR/Akt信号通路的分子 机制。结果：单宁酸抑制人胶质瘤U87细胞Akt的磷酸化以及受Akt信号通路调控的相关蛋白4EBP-1和核糖体S6蛋 白的磷酸化。进一步研究发现,单宁酸抑制肿瘤坏死因子受体相关因子6（tumor necrosis receptor-associated factor 6,TRAF6）向细胞质膜的招募,导致与TRAF6相互作用的Akt蛋白减少,进而抑制人胶质瘤细胞中Akt的磷酸化 激活。利用EGFR组成型激活突变体EGFR vIII研究单宁酸对TRAF6向细胞质膜招募的影响发现：一方面单宁酸对 EGFR的抑制作用需要EGFR胞外区第2～7外显子区域的存在;另一方面单宁酸对EGFR磷酸化的抑制是导致TRAF6 向细胞质膜招募减少的原因。结论：EGFR是单宁酸发挥其抗肿瘤作用的受体蛋白,单宁酸通过抑制EGFR的磷酸 化改变TRAF6向细胞质膜的招募进而介导了单宁酸对肿瘤细胞中Akt磷酸化的抑制,从而控制蛋白质的翻译,为食 品来源单宁酸的抗肿瘤研究提供理论依据。     

n-3多不饱和脂肪酸对小鼠糖脂代谢影响及机制

目的:基于Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子(MyD88)/NF-κB通路探讨n-3多不饱和脂肪酸(n-3 PUFAs)改善小鼠糖脂代谢的机制。方法:40只SPF级C57BL/6雄性小鼠适应性喂养1周,随机分为4组:正常对照组、高脂猪油组(富含饱和脂肪酸)、高脂大豆油组(富含n-6多不饱和脂肪酸)和高脂亚麻籽油组(富含n-3多不饱和脂肪酸),持续饲喂9周后进行葡萄糖耐量实验,全自动生化分析仪测定血脂血糖相关指标,ELISA试剂盒测定相关炎症因子,RT-PCR检测各组小鼠脂肪组织中TLR4/MyD88/NF-κB通路相关基因表达水平。结果:与其他高脂组相比,高脂亚麻籽油组能显著降低血糖水平,提高血清胰岛素水平,降低血清甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白(LDL)水平(P0.05);同时能下调TLR4/MyD88/NF-κB通路相关基因及炎症因子TNF-α、IL-6及IL-8的表达量。结论:n-3 PUFAs能够抑制高脂引起的小鼠糖脂代谢紊乱,抑制TLR4/MyD88/NF-κB通路所介导的炎症反应可能是其作用机制。     

n-6/n-3多不饱和脂肪酸比例对HepG2细胞脂代谢的影响

本文研究了不同比例n-6/n-3多不饱和脂肪酸对HepG2细胞影响,通过体外培养细胞60μM不同比例LA/ALA培养24 h,通过反转录PCR研究不同比例LA/ALA对HepG2细胞SREBP-1、FAS、HMG-CR、LDLr和Apo B蛋白等脂代谢相关基因及蛋白表达量的影响。结果表明在组1(LA)、组2(10:1 LA/ALA)、组3(5:1 LA/ALA)、组4(1:1 LA/ALA)、组5(1:5 LA/ALA)、组6(1:10LA/ALA)和组7(ALA)7组比例中,1:1 LA/ALA比例处理细胞效果最佳,此比例脂肪酸通过下调HepG2细胞SREBP-1和FAS基因的表达来降低细胞TG的含量;下调HMG-CR基因的表达,上调LDLr基因的表达来降低细胞TC和LDL-C含量;通过上调SR-B1基因表达增加胆固醇逆转运,从而实现对HepG2脂代谢的有效调控。此多不饱和脂肪酸体外营养评价模型,为n-6/n-3多不饱和脂肪酸最佳营养比例推荐及食用植物油中多不饱和脂肪酸比例营养评估提供理论依据。     

膳食中n-3多不饱和脂肪酸对2型糖尿病患者血糖和胰岛素敏感性的影响

2型糖尿病是世界上最常见的慢性疾病之一。膳食中的n-3多不饱和脂肪酸可能会减少亚洲人的2型糖尿病风险, 中国2型糖尿病患者血浆磷脂n-3不饱和脂肪酸与胰岛素敏感性呈正相关。而欧美的前瞻性研究均发现, 鱼类的摄入和n-3多不饱和脂肪酸的摄入会增加2型糖尿病的发病风险, 在西方白种人群中进行的n-3多不饱和脂肪酸干预的随机对照试验也并未发现n-3多不饱和脂肪酸能够改善患者胰岛素抵抗水平或血糖水平, n-3多不饱和脂肪酸甚至可轻微地降低患者胰岛素的敏感性。本文综述了目前n-3多不饱和脂肪酸摄入量与2型糖尿病风险之间的关系。     

草苁蓉环烯醚萜苷含药血清诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡中PI3K/Akt通路的作用

研究草苁蓉环烯醚萜苷(IGBR)含药血清对人肝癌SMMC-7721细胞活力与凋亡的影响并探讨其可能作用机制。MTT法检测IGBR含药血清对人肝癌SMMC-7721细胞活力的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot检测PI3K/Akt信号通路相关蛋白。结果表明,IGBR含药血清可降低人肝癌SMMC-7721细胞活力,诱导细胞凋亡。与对照组比较,5-FU组与IGBR组人肝癌SMMC-7721细胞中Bax蛋白表达增多,而p-Akt和Bcl-2蛋白的表达减少(p<0.05),两组间无明显差异(p>0.05);而总Akt没有明显改变。IGBR含药血清可通过PI3K/Akt信号通路,调节Bcl-2家族成员(Bax和Bcl-2),诱发人肝癌SMMC-7721细胞凋亡。     

蛋白激酶B活性及其级联效应对肉品质的影响

蛋白激酶B(PKB/Akt)是真核细胞中非常重要的丝/苏氨酸蛋白激酶,也是磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)的关键下游信号分子。它既可以通过调控哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、糖原合成酶激酶-3(GSK-3)和叉头转录因子(FoxO)的表达影响蛋白质代谢;也可以通过磷酸化FoxO和GSK-3调节糖原合成/分解;还可以通过固醇调节元件结合转录因子(SREBPs)及mTOR信号通路促进机体的脂质合成。此外,Akt可磷酸化FoxO、前体凋亡蛋白(如Bad、Bcl-2)和半胱天冬蛋白酶抑制细胞凋亡,最终影响畜禽肉的品质。综上所述,Akt及其级联效应可能成为提高肉品质的重要手段。本文阐述了Akt的活化机制、级联效应及其对肉品质的影响,以期为改善肉品质提供参考。     

膳食中多不饱和脂肪酸营养与生理功能的研究进展

概述了多不饱和脂肪酸的种类、来源、营养和生理功能的相关研究，包括n-6系列多不饱和脂肪酸、n-3系列多不饱和脂肪酸。阐述了膳食合理比例的n-6/n-3多不饱和脂肪酸是保持身体健康的关键。     

n-3多不饱和脂肪酸对疾病的预防与治疗作用

n-3多不饱和脂肪酸主要源于亚麻籽、胡桃仁、大豆以及海洋生物。增加n-3多不饱和脂肪酸摄取量可以促进视网膜、大脑和神经系统发育。n-3多不饱和脂肪酸通过各种途径降低人体心血管疾病和炎症的发生,降低糖尿病患者血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和甘油三酯(TG)水平。膳食中增加n-3多不饱和脂肪酸的含量可以对心血管疾病、糖尿病、炎症等患者有辅助治疗效果;n-3多不饱和脂肪酸可以作用于神经细胞,对注意力不集中、抑郁症、精神分裂症有一定的疗效。n-3多不饱和脂肪酸可抑制体外培养的乳腺、前列腺和结肠癌细胞增生,促进细胞凋亡。     

n—3脂肪酸其它资源

<正>鱼和鱼油现已常视作n-3多不饱和脂肪酸首选来源,不过植物油、坚果、绿叶蔬菜、微藻和真菌都能成为n-3多不饱和脂肪酸的膳食资源。     

苦荞清蛋白酶解物对高糖诱导的HepG2细胞胰岛素抵抗的保护作用

目的：建立胰岛素抵抗HepG2细胞模型,观察苦荞清蛋白酶解物（tartary buckwheat albumin hydrolysate,TBAH）对HepG2细胞胰岛素抵抗的影响。方法：采用碱性蛋白酶水解苦荞清蛋白制备TBAH,超滤法截留分子质量小于3 kDa的TBAH;利用高糖高胰岛素诱导HepG2细胞36 h建立胰岛素抵抗模型,以2.5、5、10 μg/mL的TBAH培养细胞24 h。观察TBAH对HepG2细胞葡萄糖代谢的影响;检测细胞氧化损伤指标（一氧化氮（nitric oxide,NO）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）、乳酸脱氢酶（lactic dehydrogenase,LDH）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）和活性氧（reactive oxygen species,ROS））水平;Western blot检测胰岛素受体底物1（insulin receptor substrate 1,IRS-1）/磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K）/蛋白激酶B（protein kinase B,Akt）信号通路中相关蛋白表达情况。结果：与IR模型组相比,TBAH组葡萄糖消耗量显著增多（P＜0.05）,且呈剂量依赖性,同时MDA、NO和ROS水平显著降低（P＜0.01,P＜0.05）,SOD活力显著升高（P＜0.05）,LDH活力显著下降（P＜0.05）;p-IRS-1蛋白表达水平显著降低（P＜0.05）,磷酸化Akt、PI3K、葡萄糖转运蛋白4表达水平极显著上升（P＜0.01）。结论：TBAH通过抑制氧化应激改善胰岛素抵抗。     

n-3多不饱和脂肪酸分类、来源与疾病防治功能

n-3多不饱和脂肪酸包括ALA、EPA、DPA和DHA等。增加n-3多不饱和脂肪酸摄取量可以促进婴幼儿视网膜、大脑和神经系统发育；n-3多不饱和脂肪酸通过各种途径降低人体心血管疾病和炎症的发生，降低糖尿病患者血清LDL-C和TG水平，抑制体外培养的乳腺、前列腺和结肠癌细胞增生，促进细胞凋亡。     

n-3多不饱和脂肪酸对结肠癌细胞HCT116抗增殖作用

目的:研究n-3多不饱和脂肪酸在结肠癌细胞内的代谢与转化,深入探究脂肪酸代谢调节因子LTB₄、PGE₂、LXA₄对结肠癌细胞HCT116的毒性作用。方法:选用结肠癌细胞HCT116为研究对象,采用不同浓度n-3多不饱和脂肪酸(ALA、EPA、DHA)和阳性药物5-氟尿嘧啶(以下简称5-FU)处理细胞,检测细胞存活率、细胞凋亡、细胞脂滴聚积、细胞脂肪酸组成变化,研究代谢因子LTB₄、PGE₂、LXA₄表达水平及其对细胞增殖影响。结果:ALA、EPA、DHA和5-FU对HCT116细胞的生长具有显著的抑制作用和诱导凋亡作用(p<0.05),ALA(200 μmol/L)、EPA(160 μmol/L)、DHA(120 μmol/L)诱导凋亡率分别为7.9%、21.8%、29.2%。ALA、EPA、DHA促进HCT116细胞内脂滴积聚状态,提高不饱和脂肪酸比例,降低LTB₄积累,提高LXA₄/PGE₂比率,使癌细胞趋向于抗炎状态。结论:n-3多不饱和脂肪酸(ALA、EPA、DHA)可通过促进抗炎因子LXA₄分泌,抑制促炎因子LTB₄生成,进而对HCT116细胞产生杀伤作用。     

金线莲苷促进骨骼肌细胞摄取葡萄糖的分子机制研究

在本研究中,先诱导大鼠骨骼肌细胞分化为成熟的肌管细胞,然后以肌管细胞为模型,在胰岛素敏感和胰岛素抵抗的情况下,通过蛋白免疫印迹的方法检测金线莲苷对蛋白激酶Akt和AMPK的活化,以荧光标记的2-脱氧葡萄糖为能量底物检测金线莲苷处理前后细胞对葡萄糖的摄取。结果显示在正常细胞中,10 nM金线莲苷作用24 h可显著增加Akt(34.53%,p0.05)和AMPK的活性(149.92%,p0.05),同时促进细胞对葡萄糖的摄取(43.35%,p0.05)。在胰岛素抵抗的细胞中,金线莲苷对AMPK的活化不受影响,并且可改善胰岛素对Akt的激活作用(79.05%,p0.05)。在正常及胰岛素抵抗的情况下,金线莲苷对胰岛素诱导的葡萄糖摄取都具有协同作用。这些结果表明金线莲苷可通过调控Akt和AMPK的活性改善细胞胰岛素抵抗,促进胰岛素抵抗细胞对葡萄糖的摄取。     

虾青素保护PC-3细胞免受H2O2氧化应激的作用机制

目的：研究虾青素对过氧化氢诱导PC-3细胞氧化应激的保护作用,探索其信号通路机制。方法：建立H2O2 氧化应激模型,采用不同浓度虾青素预处理PC-3细胞,检测细胞存活率、细胞凋亡、活性氧（reactive oxygen species, ROS）水平、B淋巴细胞瘤-2（B-cell lymphoma-2,Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2-associated X protein,Bax）、 活化半胱天冬酶-3表达及丝裂原活化蛋白激酶-核因子E2相关基因2-血红素氧合酶1（mitogen-activated protein kinases nuclear factor erythroid-2-related factor 2-heme oxygenase 1,MAPK-Nrf2-HO-1）通路的变化。结果：20 μmol/L虾青 素预处理显著提高H2O2所降低的细胞存活率、降低ROS水平（P＜0.05）,同时通过抑制Bcl-2/Bax比率下降及半胱 天冬酶-3的激活,从而使细胞凋亡率从51.4%降低至14.8%,进一步研究发现虾青素能够促进Nrf2磷酸化,并促进 HO-1的表达,呈现浓度依赖性。通过细胞外调节蛋白激酶（extracellular regulated protein kinases,ERK）抑制剂 （U0126）和Akt抑制剂（LY294002）预处理,发现当ERK和磷脂酰肌醇激酶/蛋白激酶B（phosphoinositide 3-kinase/ protein kinase B,PI3K/Akt）通路被抑制后,Nrf2表达降低,表明HO-1上调受上游ERK和胞内PI3K/Akt通路的调 控。在对MAPK途径对细胞毒性影响的研究中,ERK通路被抑制后细胞存活率显著下降,而c-Jun氨基末端激酶 （c-Jun N-terminal kinase,JNK）和p38 MAPK通路被抑制后并不影响其保护作用,表明虾青素抑制细胞存活率下降 是通过MAPK途径中的ERK通路,而不是JNK和p38通路。结论：虾青素预处理PC-3细胞可以减轻H2O2诱导的氧化 应激,维持细胞生理活性。