藏灵菇耐胃肠道环境酵母菌和乳酸菌的筛选

以藏灵菇发酵乳液为原料,分别利用改良的马铃薯乳糖培养基和改良MRS培养基分离出8株酵母菌和10株乳酸菌。以pH值为3.0,质量分数为0.3%牛胆盐的培养液模拟胃肠道环境作为初筛条件,以不同pH值和牛胆盐质量分数作为耐酸和耐胆盐的复筛条件,筛选得到耐受性好活力高的两株酵母菌C3和C8,两株乳酸菌M1和M3。     

4株乳酸菌对模拟胃肠环境的耐受性及生长特性研究

对4株来源于自然发酵肉制品中的乳酸菌进行耐酸耐胆盐性能的测定,选取在pH3.0和含0.3 g/100 mL胆盐的MRS培养基中存活率均超过50%的2株菌（M12、M23）,进一步研究其在模拟胃肠液中的耐受性及MRS培养基中的生长特性。结果表明,这2株乳酸菌对人工模拟胃肠道环境有较好的耐受性,经过人工模拟胃液处理2 h后,存活率均＞50%,经人工模拟肠液处理10 h后仍可存活;这2株菌具有较强的增殖及产酸能力,24 h内均已进入稳定生长期,随着菌体数目的增加,培养基pH值快速降低,在肉制品的发酵温度范围内均能较好地生长。因此,这2株菌可作为潜在的益生菌菌株应用于肉制品的发酵。     

降胆固醇乳酸菌的筛选、鉴定与益生特性评价

目的：从婴儿粪便和发酵食品中筛选具有高效降胆固醇能力且益生特性优异的乳酸菌。方法：从20份婴儿粪便、8份传统发酵泡菜和4份金华火腿样品中初步筛选到乳酸菌102株,采用气相色谱法测定供试菌株的降胆固醇能力,菌株ZY08和I631的降胆固醇能力显著高于（P<0.05）标准菌株（ATCC 43121）;采用16S rDNA测序对这2株乳酸菌进行鉴定,评价菌株的酸耐受性、胆盐耐受能力、抗生素敏感性及抗菌活性。结果：筛选得到2株高效降胆固醇乳酸菌：植物乳杆菌ZY08和发酵乳杆菌I631,胆固醇降低率分别为67.45%和63.19%。在pH 1.5和pH 3.0的条件下培养6 h,菌株ZY08和I631的活菌数均大于6 lg（CFU/mL）。2株菌对3,5及1.0 g/L胆盐具有一定的耐受性,胆盐耐受能力均在80%以上（胆盐含量为3 g/L）;对常见的8种抗生素（青霉素、氨苄青霉素、头孢唑林、丁胺卡那、庆大霉素、红霉素、复方新诺明、氯霉素）都不具备耐药性,对人体健康不存在潜在威胁;2株菌的代谢产物对4种肠道致病菌（金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特菌、大肠杆菌O157∶H7、鼠伤寒沙门氏菌）具有一定的抑制作用。结论：获得具有高效降胆固醇能力的植物乳杆菌ZY08和发酵乳杆菌I631,为功能性乳制品的开发提供菌株来源。     

具有胆固醇去除能力和胆盐水解酶活性的乳酸菌的体外筛选

对分离自内蒙古传统稀奶油或酸化稀奶油中的10株乳酸菌进行了胆固醇去除能力和胆盐水解酶活性的研究(定性和定量),筛选出了3株具有较高胆固醇去除能力和胆盐水解酶活力的乳酸菌菌株,分别为KLDS6.0330、KLDS6.0333和KLDS6.0335,并对它们进行16SrDNA分子生物学鉴定、酸耐受性和胆盐耐受性的测定。结果表明:这3株菌均为植物乳杆菌(L.Plantarum),并且表现出了较好的酸耐受性和胆盐耐受性。     

乳酸菌MR25的筛选、鉴定及降胆固醇益生特性

通过气相色谱法,从萝卜干中共分离到31株具有清除培养基中胆固醇能力的乳酸菌,其中乳酸菌MR25的胆固醇清除率最高(42.48％).通过形态观察、生理生化试验、糖发酵试验等,鉴定MR25为米酒乳杆菌.乳酸菌MR25具有酸耐受性、胆盐耐受性和一定的胆固醇降低能力.在pH 2.0、培养2h条件下菌株浓度仍能达到106 cfu/mL.加胆盐(0.3％～0.4％)对菌株生长量(OD值)的影响很小.热杀死和休眠的细胞能去除很少的胆固醇,分别是3.26 mg/mL和8.42 mg/mL,而生长的细胞去除的胆固醇达到44.06 mg/mL.胆固醇去除与菌体的生长有一定的相关性.乳酸菌MR25去除胆固醇的机理是菌体对胆固醇的吸附作用,以及菌体在生长过程中对胆固醇的吸收利用.     

一株高效降解胆固醇乳酸菌的筛选鉴定及其益生潜能初探

从新鲜牛粪中分离出的5株乳酸菌中筛选得到一株具有高效降胆固醇能力的乳酸菌,其体外胆固醇脱出率达到50.83%。经API50CHL系统及16S rRNA序列比对鉴定为发酵乳杆菌Lactobacillus fermentum,命名为发酵乳杆菌DF-4。模拟胃液中的低pH和小肠中的胆汁盐浓度进行了耐受性试验,结果表明该菌株具有较强的耐酸和耐胆盐的性能,对致病大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有显著抑制作用,是一株具有开发前景的高效降胆固醇的益生菌。     

植物乳杆菌耐酸耐胆盐的体外试验及其降胆固醇作用

目的:研究产胆盐水解酶植物乳杆菌H13的耐酸、耐胆盐特性,在此基础上对其可能的降胆固醇作用机理进行体外试验研究.方法:采用MRS培养基,模拟人体胃酸环境(pH=3)和胆盐环境(0.3%),测定H13菌株在酸性及高胆盐环境作用后的存活菌数,并在此胆盐浓度下测定植物乳杆菌H13的胆盐水解酶活力、降解胆盐能力和胆固醇沉淀量.结果:菌体能够耐受pH 3的环境和0.3%的胆盐环境;该菌产生的胆盐水解酶在降低胆固醇方面具有重要作用,酶活性与游离胆酸量、胆固醇沉淀量呈正相关,而且胆盐水解酶对反应底物的特异性不同,以甘氨胆酸钠为佳.结论:植物乳杆菌H13体外降胆固醇作用的机理主要是其产生的胆盐水解酶使胆盐失去共轭作用,在酸性(pH<6.0)条件下,解共轭胆盐与胆固醇形成复合物共同沉淀下来.     

来宾酒糟酸菜中降胆固醇乳酸菌的筛选鉴定及发酵工艺研究

该研究采用钙溶圈法及MRS-胆固醇培养基从来宾酒糟酸菜汁中分离筛选具有降胆固醇能力的乳酸菌,通过形态观察及分子生物学技术对其进行菌种鉴定,同时对其耐酸性、耐胆盐性能进行研究,并以胆固醇去除率为考察指标,通过单因素试验及正交试验对其发酵条件进行优化。结果表明,筛选得1株具有去除胆固醇能力的乳酸菌,编号为XL-02,经鉴定,菌株XL-02为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）,其具有较好的耐酸能力和胆盐耐受性。在pH2.0的酸性环境下培养24 h,菌株存活率为3.14%;在胆盐含量为0.3%条件下培养24 h,菌株存活率为12.17%。菌株XL-02去除胆固醇的最优发酵条件为以MRS液体培养基为发酵培养基,初始pH值6.0,接种量4%,发酵温度39 ℃,发酵时间72 h。在此优化条件下,胆固醇去除率为（61.56±0.08）%。     

侗族传统酸肉与腌鱼中降胆固醇乳酸菌的筛选与鉴定

以侗族传统酸肉、腌鱼作为乳酸菌筛选源,分离出23株乳酸菌。采用邻苯二甲醛法筛选出2株体外降胆固醇能力较强的乳酸菌YRA7和YRB4。经形态学观察、理化指标鉴定及16S r DNA分子生物学鉴定,确定2株菌分别为植物乳杆菌(YRA7)和消化乳杆菌(YRB4)。两者均呈现出较好的耐酸、耐盐和耐胆盐特性,在p H3.0以及含6%Na Cl的培养基中可以生长,在含0.3%胆盐的MRS培养基中存活率分别为75.68%(YRA7)和61.37%(YRB4)。此外,两者均具有较好的生长性能与产酸性能,可以作为降胆固醇的潜在益生菌。     

杏鲍菇中土著益生菌的筛选与鉴定

以杏鲍菇的表皮为材料,通过添加溴甲酚紫的MRS培养基分离得到56株土著菌。以降解亚硝酸盐和降胆固醇的综合能力为指标进行复筛,得到4株土著益生菌。对这4株菌进行耐酸和耐胆盐的模拟试验,得到1株降亚硝酸盐和胆固醇综合能力较强以及耐胆盐能力较强的菌株C3。通过生理生化试验和16Sr DNA鉴定,确定其为乳酸乳球菌。     

降胆固醇乳酸菌的筛选、鉴定及生长特性

从香肠、腊肉、泡菜、酸奶等传统发酵食品中获得的42株乳酸菌,应用不同胆固醇源的高胆固醇MRS-broth测定其降胆固醇能力,从中筛选出降胆固醇能力较高的6株菌,分别为CM7,S9,P5,P9,Y1,P215菌株。其中P215菌株具有较好的耐酸性、一定的胆盐耐受力和较高胆固醇降解率。结合形态学、生理生化特性和16S rDNA序列同源性分析,P215菌株被鉴定为植物乳杆菌(Lactobacillus plan-tarum)。并研究了P215菌株在添加鸡蛋黄和化合物胆固醇的MRS-broth中的生长曲线、pH值变化及胆固醇降解率。结果表明,P215菌株在高胆固醇MRS中2 h后进入对数生长期,10 h后进入稳定期,22 h后逐渐进入衰退期。     

降胆固醇优良菌株的筛选及其胆盐水解酶特性研究

对已证实具有降胆固醇能力并能产生胆盐水解酶(BSH)的3株乳酸菌进一步筛选,综合模拟人工胃肠液的耐受性、疏水性能力和去结合胆盐能力三个指标,筛选出一株具有优良的降胆固醇综合性能的潜力菌株,并对其产生的BSH的部分特性进行研究。结果表明,屎肠球菌90-1作为降胆固醇潜力菌株其综合性能较好,其所产的BSH最适反应pH为6.0,最适反应温度为37℃,最适底物浓度为7mmol/L,最适三磷酸腺苷二钠(ATP)浓度为2.5mg/mL。     

青藏高原牦牛酸奶中降胆固醇乳酸菌的筛选及特性研究

目的:本研究旨在从天祝、那曲、若尔盖、玉树、红原和玛曲采集的202份牦牛酸奶样品中,筛选出具有高降胆固醇特性的优良菌株。方法:选择MRS、M17和SL培养基(MRS培养基是培养乳酸菌的基础培养基,M17培养基和SL培养基均为分离乳酸菌的培养基,其中SL培养基为分离嗜酸性乳酸菌的培养基)进行分离纯化,过氧化氢筛选阴性菌。根据邻苯二甲醛法测定胆固醇,筛选具有降解脂溶性胆固醇能力的菌株,水溶性胆固醇法复筛验证菌株降解能力,16SrDNA分子生物学法鉴定其种属。结果:分离纯化后总计720株乳酸菌,所有菌株经初筛都具有一定的胆固醇降解能力,其中降解率在68%以上的菌株,共有52株,菌株BX39的胆固醇降解率高达90.05%;复筛发现菌株BT18胆固醇降解率高达96.26%;16S rDNA分子生物学法分析比对后发现,72株乳酸菌中有64株罗伊氏乳杆菌、4株乳酸片球菌、3株瑞士乳杆菌和1株植物乳杆菌。结论:罗伊氏乳杆菌BT18具有高降胆固醇特性,可作为后备菌株进一步的研究和利用。     

传统发酵肉源乳酸菌介导NPC1L1、ABCG5/G8基因表达对胆固醇代谢的影响

过高的胆固醇摄入可能会导致机体心脑血管出现健康问题。通过乳酸菌可以调控小肠中胆固醇代谢相关基因的表达,调节机体内胆固醇的吸收代谢,从而影响体内胆固醇含量。对15株传统发酵肉制品中分离筛选的乳酸菌进行体外降胆固醇能力和耐酸耐胆盐能力筛选,将筛选到的乳酸菌用于动物实验。结果表明,15株乳酸菌中有4株乳酸菌(CM6、CM9、CM28、CM42)具有良好的体外降胆固醇能力,平均降解率为52.92%。对它们进行耐酸和耐胆盐试验,在pH 2和0.3%胆盐添加量的条件下菌株CM6活菌数达到106 CFU/mL,选择CM6进行后续动物实验。乳酸菌灌胃小鼠30 d后,乳酸菌组小鼠血清中总胆固醇含量和甘油三酯含量乳显著低于对照组(P＜0.05);乳酸菌组小鼠小肠中NPC1L1基因相对表达量显著低于对照组(P＜0.05),ABCG5/G8基因表达量显著高于对照组(P＜0.05)结论:乳酸菌CM6具有调控胆固醇代谢相关基因表达的能力,从而降低体内胆固醇含量。     

发酵酸菜中嗜热链球菌的分离鉴定与特性研究

从东北自然发酵酸菜中分离筛选得到一株乳酸菌,经形态学鉴定、显色培养基初步鉴定和API鉴定为嗜热链球菌,命名为ST-111,对其进行生理特性及耐酸、耐盐试验的初步研究,该嗜热链球菌在pH 4以下几乎不生长,最适生长pH为7~10,最适盐浓度为0%~3%;在MRS液体培养基中菌株生长较快,2 h即达到对数期,12 h达到稳定期时OD600可以达到4.5左右;该菌株产酸能力较强,培养24 h后发酵液pH可降到3.6以下;耐胆盐试验和胆固醇移除率试验结果表明,该菌株具有较强的胆盐耐受力和较高的胆固醇移除率,在0.1%胆盐条件下生长良好,在0.1%的胆盐条件下的胆固醇移除率为42.3%。     

降胆固醇乳酸菌的筛选及其益生元干预生长作用分析

本研究从传统自然发酵的酵素饮品中分离筛选出一株高效降胆固醇菌株,该菌株具有较好的胆盐耐受性和耐酸能力。在pH3的酸性环境下,耐酸率为71.53%,该菌株能够长时间耐受胆盐环境,培养16h的胆盐耐受率为42.09%。以二甲苯为吸附剂,疏水率为35.91%,有较好的黏附特性;益生元不仅能够促进菌株生长,而且可显著提高降胆固醇能力。4种益生元中乳果糖促进生物量增加幅度最大,培养至16 h时生物量达到最高。乳果糖对菌株产酸性能影响最显著,pH值可降至3.56,胆固醇去除率达41.10%。该菌株对菊粉的利用率低,说明菌株对不同益生元具有选择性代谢。菌株经形态学观察和16S rDNA鉴定为副干酪乳杆菌,并命名为Lactobacillus paracasei S0940。本研究为进一步研究体内降脂能力以及开发功能性乳酸菌食品提供理论依据。     

牦牛酸乳中耐酸耐胆盐乳酸菌的分离筛选和鉴定

通过对青海地区采集的牦牛酸乳中乳酸菌的分离鉴定,共获得48株乳酸菌。以生长旺盛且可用于食品的11株乳酸菌为研究对象,进行人工胃液和胆盐耐受性评价。结果表明,有6株菌株在pH 3.00人工胃液中存活率50.00%,2株菌株在0.30%胆盐中生长率15%。其中鼠李糖乳杆菌2016SWU.05.0601为最佳抗性菌株,在人工胃液中存活率为119.53%,在0.30%胆盐中生长率为41.64%。     

青海湖裸鲤肠道中益生性乳酸菌的筛选

从青海湖裸鲤肠道中分离21株乳酸菌代表株,对其益生性进行研究。通过纸片扩散法、人工模拟胃肠道分析乳酸菌抗生素敏感性以及对胃肠道环境的耐受性。对筛选出来的优良乳酸菌进行胆盐耐受性、抑菌活性、高盐耐受性、温度生长范围的研究。结果表明:21株乳酸菌主要对万古霉素、庆大霉素、多粘菌素B、环丙沙星、青霉素G有抗性,抗性菌株分别达到20株(95.24%),18株(85.71%),20株(95.24%),20株(95.24%),17株(80.95%)。大多数乳酸菌对胃肠道环境的耐受性较差,7 h后活菌数最高的为qz1242,达到31.95%;其次为qz1209,存活率为18.52%;qz1215存活率为10%,qz1231存活率为9.27%。对这4株优良菌进一步检测显示:乳酸菌代表株在1%胆盐浓度下具有耐受性,并随着胆盐浓度的增加对乳酸菌的生长显示出抑制性。在质量分数为10%的盐条件下都生长良好,显示出耐盐性,其中qz1215在15%的高盐浓度下仍可以生长。qz1209、qz1215、qz1242在5~50℃温度范围内都生长良好,显示出较宽的温度生长范围。代表株发酵上清液对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌等6种病原菌具有较强的抑制作用。本研究可为动物肠道附着益生性乳酸菌的开发与应用提供依据。     

优良饲用乳酸菌的筛选及在模拟消化环境中的耐受性

通过MRS培养基进行初筛,耐酸耐胆盐复筛,从乳猪粪便中筛选出能够应用于饲料中的优良乳酸菌。MRS初筛得到26株乳酸菌疑似菌株,在pH2.0和3 g/L胆盐的MRS培养复筛得到7株菌,对性能较好的菌株G1和G9进行生理生化及分子生物学鉴定:G1为植物乳杆菌(NCU156)、G9为戊糖片球菌(NCU301)。进一步研究NCU156的耐酸耐胆盐性能以及模拟动物消化道耐受性能。结果表明:NCU156在p H2.5的MRS培养基中,作用4 h存活率为87.31%;在胆盐质量浓度为3 g/L的培养基中,作用6 h活菌数下降不到一个数量级;在pH3.0的人工胃液中作用4 h,NCU156的活菌数稍有增加,在3 g/L胆盐的人工肠液中作用6 h,活菌数下降约一个数量级(1.81×10~9~1.27×10~8CFU/m L),活菌数仍保持在10~8CFU/m L以上。可见NCU156对动物胃肠道有良好的耐受性,在饲料产品中有很好的应用前景。     

人源乳酸菌耐酸耐胆盐能力及降胆固醇作用研究

利用选择性培养基、人工胃液及含胆盐培养基,从如皋长寿地区的人群肠道中分离筛选出耐酸耐胆盐能力较强的乳酸菌,并研究其降胆固醇能力及方式。结果表明,分离筛选的60株乳酸菌在pH 3.0的人工胃液中存活率均30%;来源于中年组、老年组及长寿组的乳酸菌存活率分别为69%,71%,70%,均显著高于青少年组(P0.05);在0.3%及0.5%胆盐培养基中的存活率均20%,老年组及长寿组的乳酸菌在0.3%胆盐培养基中的存活率分别为53.85%,55.26%,均显著高于青少年组和中年组(P0.05);来源于长寿组的乳酸菌降胆固醇能力显著高于中年组(P0.05),其中,乳杆菌属与魏斯氏菌属的胆固醇降解率显著高于肠球菌属(P0.05),其降胆固醇的主要方式为细胞吸收和共沉淀。来源于长寿地区人群的乳酸菌耐酸耐胆盐能力及降胆固醇能力较强,其中长寿组的乳酸菌要高于其他年龄组。