乳酸菌降胆固醇体外筛选的培养基研究

许多体外或体内实验研究表明,益生菌有一定的降胆固醇作用。探讨了10株不同的益生菌在3种不同胆固醇源的高胆固醇MRS-broth培养基中的降胆固醇效果以及生长状况,结果发现,这些益生菌在3种高胆固醇培养基中,37℃培养24h后,均表现出降胆固醇活性,其中胆固醇胶束溶液配制的高胆固醇MRS-broth具有较好的筛选效果。     

青藏高原牦牛酸奶中降胆固醇乳酸菌的筛选及特性研究

目的:本研究旨在从天祝、那曲、若尔盖、玉树、红原和玛曲采集的202份牦牛酸奶样品中,筛选出具有高降胆固醇特性的优良菌株。方法:选择MRS、M17和SL培养基(MRS培养基是培养乳酸菌的基础培养基,M17培养基和SL培养基均为分离乳酸菌的培养基,其中SL培养基为分离嗜酸性乳酸菌的培养基)进行分离纯化,过氧化氢筛选阴性菌。根据邻苯二甲醛法测定胆固醇,筛选具有降解脂溶性胆固醇能力的菌株,水溶性胆固醇法复筛验证菌株降解能力,16SrDNA分子生物学法鉴定其种属。结果:分离纯化后总计720株乳酸菌,所有菌株经初筛都具有一定的胆固醇降解能力,其中降解率在68%以上的菌株,共有52株,菌株BX39的胆固醇降解率高达90.05%;复筛发现菌株BT18胆固醇降解率高达96.26%;16S rDNA分子生物学法分析比对后发现,72株乳酸菌中有64株罗伊氏乳杆菌、4株乳酸片球菌、3株瑞士乳杆菌和1株植物乳杆菌。结论:罗伊氏乳杆菌BT18具有高降胆固醇特性,可作为后备菌株进一步的研究和利用。     

传统腊肠中降胆固醇降甘油三酯益生菌的筛选及鉴定

从传统腊肠中筛选高效的降胆固醇降油三酯的益生菌,并对其进行菌种鉴定。通过平板分离、降胆固醇降甘油三酯能力测定,从传统腊肠中分离筛选出1株胆固醇降解率65.23%、甘油三酯降解率42.93%的菌株G1-28。耐酸耐胆盐及抗菌能力测定结果表明,在pH2条件下培养4 h后,其存活率为77.8%,经0.1%胆盐处理4 h后,菌株G1-28的存活率为87.2%,并且对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均具有较强抑菌能力。经形态学、生理生化实验和16S rDNA部分序列分析,将菌株G1-28鉴定为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。     

具有降胆固醇功能的罗伊氏乳杆菌的筛选及其益生作用

为获得具有较强降胆固醇功能的益生菌株,试验从内蒙古呼伦贝尔满洲里通达牧场制作的奶豆腐中筛选分离菌株,并采用邻苯二甲醛法测定菌株降胆固醇的能力,从中选出降胆固醇能力强的菌株,通过形态学鉴定、生理生化及16S rDNA对菌株进行鉴定,并测定了其耐受酸、胆盐和胃肠液的能力。结果筛选分离出5株具有降胆固醇功能的菌株,其中一株菌对胆固醇降解能力最强,降解率达50.60%,经鉴定此株菌为罗伊氏乳杆菌（Lactobacillus reuteri）,将其命名为HCS02-001（CGMCC No. 19746）;经对酸、胆盐及胃肠液的耐受试验,该株菌在pH 3.0和pH 2.0的环境中培养17 h后存活率分别为86.80%和85.52%;在0.30%、0.50%的胆盐浓度环境中培养17 h后存活率分别为97.42%和95.17%;在人工胃液中作用3 h,存活率为96.74%;在人工肠液中作用4 h,存活率高达98.41%。该研究筛选出了一株具有较好降胆固醇功能的罗伊氏乳杆菌（Lactobacillus reuteri）,其具有较强的耐受酸、胆盐环境和胃肠液的能力,对关于降胆固醇功能方面的产品研究开发具有重要意义。     

降血脂鼠李糖乳杆菌的筛选及其对高脂模型地鼠血脂的影响

该实验旨在筛选出一株具有较强降血脂功能的乳杆菌。试验采用的菌株分离自健康婴儿肠道,通过邻苯二甲醛比色法测定菌株降胆固醇能力、单试剂法测定降甘油三酯能力,并测定了其对酸及胆盐的耐受性,从中筛选出具有降胆固醇和降甘油三酯功能较强的菌株进行16S rDNA鉴定。通过建立高血脂地鼠模型,研究菌株体内降血脂能力。结果表明,鼠李糖乳杆菌HCS01-013的降胆固醇和甘油三酯能力较强,其胆固醇降解率达到35.40%;甘油三酯降解率达到44.32%;在0.3%和1.5%的胆盐环境下培养17 h的存活率分别为99.67%和96.79%,在pH 3.0和pH 2.0环境下培养17 h后存活率能达到88.76%和71.34%;黄金地鼠喂养高脂饲料建立的高脂地鼠模型后,喂养鼠李糖乳杆菌HCS01-013各剂量组与喂养生理盐水的模型对照组相比甘油三酯含量均明显降低。鼠李糖乳杆菌HCS01-013具有一定的降血脂功能,且耐逆环境能力较强,为该菌株相关研究及产品研发提供理论依据。     

高效降胆固醇降甘油三酯乳酸菌的分离鉴定和功能分析

筛选出高效降胆固醇降甘油三酯(Triglyceride,TG)菌株,为新型药物、保健食品的研制提供优良菌株。从6种西北特有样品中筛选分离出乳酸菌,采用磷硫铁比色法测定菌株降胆固醇能力,并测定菌株降甘油三酯能力,通过抑菌实验、耐酸、耐胆盐及小鼠体内毒性试验研究菌株各项性能,利用生理生化及16S rDNA法对菌株进行鉴定。结果表明,本试验筛选出3株高效降胆固醇降甘油三酯乳酸菌,其中菌株ZL010降胆固醇、降甘油三酯效果最强,蛋黄中胆固醇的降解率为73.65%,高纯度胆固醇降解率为40.06%,甘油三酯降解率为5.10%。3株菌都具有很好的抑菌、耐酸、耐胆盐能力,菌株经生理生化及16S rDNA鉴定ZL005为耐久肠球菌(Enterococcus durans),ZL010为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum),ZL016为戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)。小鼠毒性试验表明,菌株无毒副作用,小鼠各脏器一切正常,菌株可用于降脂降胆固醇保健药品及功能食品的制备。     

高效降胆固醇乳酸菌的筛选

研究了25株嗜酸乳杆菌在MRS-CHOL培养基中对胆固醇的降解量,降胆固醇的能力,以及对酸、胆盐的耐受性。实验表明:所有实验菌株均有降解培养物中胆固醇的能力,其中有6株实验菌对培养物中胆固醇的降解率大于40%,这6株菌对胆固醇的脱除效力也较高,同时对这6株菌的耐酸、耐胆盐,以及对胆固醇的脱除能力进行了比较,筛选出降胆固醇能力较强同时对酸和胆盐耐受性较强的嗜酸乳杆菌1株。     

长寿老人源降胆固醇肠球菌的生化特性研究

目的:以新疆和田维吾尔族长寿老人和一般人肠道中筛选出来的27株菌株为试材,采用耐胆汁盐,耐酸,降胆固醇等实验方法对该菌株进行综合性分析,并对其降胆固醇机理进行初步探讨。方法:采用硫酸铁铵法测定该菌株对培养基中胆固醇的脱除率,同时用吸光度法对候选菌株耐酸,耐胆汁盐以及蛋白酶的耐受性进行检测,筛选综合性能高的菌株。结果:27株实验菌都能从培养基中除去胆固醇,脱除率在22.32%～78.57%之间,平均脱除率50.63%,13株脱除率高于平均值（50.63%）。其中10株菌株脱除率高于52.58%,被选为后续研究的菌株;又通过胆汁盐耐受性,低pH耐受性和蛋白酶耐受性实验,从10株菌中筛选出综合性能比较高的R02-23,R03-13,S04等3株菌。结论:从长寿老人肠道中分离筛选的R02-23,R03-13,S04菌株均具有降胆固醇,耐胆汁盐,耐酸,耐蛋白酶能力。且胆固醇的降解机理研究表明它们都有吸收胆固醇和同化胆固醇的能力,但对病原菌的抑菌作用机理有待进一步研究。      

海带源降亚硝酸盐和胆固醇益生乳酸菌的筛选与鉴定

海带是天然的保健食品,本研究以淡干海带为原料,从中筛选出具有较强的降亚硝酸盐和胆固醇能力的优良菌株。采用盐酸萘乙二胺法测定菌株在MRS液体培养基中亚硝酸盐的含量,邻苯二甲醛法测定菌株在MRS液体培养基中胆固醇的含量,再对筛出的菌株进行鉴定。结果表明:从淡干海带中分离出的27株菌株中,有7株菌株具有很强的降解亚硝酸盐能力,降解率均达到97%以上。进一步对这7株菌株降解胆固醇的能力进行筛选,结果表明其中3个菌株降解胆固醇能力较强分别为:55.02%(La-3)、61.21%(La-10)、56.85%(La-15);经过形态特征观察、生理生化实验和16S r DNA基因序列相似性分析,结果显示这7株菌株均为植物乳杆菌。本文结果还表明了相同的植物乳杆菌其降解胆固醇的能力存在差异,显示了物种的多样性。     

猪源降胆固醇乳酸菌的分离鉴定

乳酸菌是一种重要的益生菌,具有降解胆固醇能力。作者从猪消化道中分离出31株疑似菌株,在高胆固醇培养基中培养后有18株菌株生长。利用磷硫铁法对体外降胆固醇进行了研究,结果表明,胆固醇降解率在0～47.26%,其中4株乳酸菌的胆固醇降解率大于30%,分别是r16、r53、r762和m661。通过细胞形态、生理生化试验和16SrDNA分子生物学鉴定,最终鉴定r16、r53和r762为植物乳杆菌,m661为鹑鸡肠球菌。     

天然乳酸菌对肉中胆固醇降解作用及其生长特性

通过测定从内蒙古传统乳制品中分离的6株降胆固醇性能优良的乳酸菌的生长特性及其在模拟肉汤中胆固醇降解作用,研究其在发酵肉制品中的降胆固醇性能,结果表明,菌株2-2B33,TE7401,TE5301,TF5201胆固醇降解率高达70%以上且优于标准菌。各菌株在MRS、模拟肉汤、MRS+6%NaCl+150 mg/kg NaNO2培养基中的产酸性能较好且在2 d后pH可降到3.90左右。其中TE7401号菌对胆固醇的降解率、不同温度不同pH下的生长性能及产酸性能较好,故可做为1株降胆固醇性能、生长性能良好的发酵剂。     

降胆固醇益生乳酸菌的体外筛选

从传统发酵制品中筛选出6株降胆固醇的乳酸菌并在体外测定了降胆固醇的能力,其中菌株GL-10和LBA-11高达45%;同时测试了这些菌株的耐酸和耐胆盐性、细胞黏附、抑菌性的益生特性。结果表明,菌株GL-A-11,GL-11,ZPC-15能在pH值为2蒸馏水下存活1 h;GL-10,GL-A,ZPC-13能在质量分数为2%的胆盐混合液中存活12 h;GL-10对人结肠腺癌细胞系HT-29细胞黏附性最强,达4.8个/细胞,其次是菌株GL-A,ZPC-13,GL-11为3.7个/细胞左右,所有菌株对常见致病菌都有明显抑制作用。从中选择出乳酸菌GL-A作为今后益生菌制剂和功能性乳制品开发的潜在菌种。     

一株高效降解胆固醇乳酸菌的筛选鉴定及其益生潜能初探

从新鲜牛粪中分离出的5株乳酸菌中筛选得到一株具有高效降胆固醇能力的乳酸菌,其体外胆固醇脱出率达到50.83%。经API50CHL系统及16S rRNA序列比对鉴定为发酵乳杆菌Lactobacillus fermentum,命名为发酵乳杆菌DF-4。模拟胃液中的低pH和小肠中的胆汁盐浓度进行了耐受性试验,结果表明该菌株具有较强的耐酸和耐胆盐的性能,对致病大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有显著抑制作用,是一株具有开发前景的高效降胆固醇的益生菌。     

Growth and survival of various strains of enterohemorrhagic Escherichia coli in hydrochloric and acetic acid

Nineteen strains of enterohemorrhagic Escherichia coli isolated from humans and foods were examined for their ability to grow and survive at low pH in organic (acetic) and mineral (HCl) acids. Strains were subcultured in tryptic soy broth adjusted to various pH values (3.75 to 4.75 for HCl and 4.75 to 5.75 for acetic acid) and incubated for 72 h at 37 degrees C to determine the minimum growth pH value. Minimum pH values for growth of 4.25 and 5.5 were found for HCl and acetic acid, respectively. Strains were also exposed to pH 2.0 (HCl) and pH 4.0 (acetic acid) for up to 24 h at 37 degrees C to assess their ability to survive. HCl was a more effective inhibitor after 6 h of exposure, whereas acetic acid was more effective after 24 h. Outbreak strains survived acid treatment significantly (P < or = 0.05) better than strains isolated from fermented or high-pH foods or animal or human isolates. Significant (P < or = 0.05) differences among serotypes and between O157:H7 and other serotypes were apparent after 3 or 6 h of exposure to acids.     

酸菜中降胆固醇功能植物乳杆菌的体外筛选

以分离自东北家庭自制酸菜中的9株植物乳杆菌为研究对象,采用邻苯二甲醛法筛选具有降胆固醇功能的乳杆菌,并通过耐酸、耐胆盐及抗生素敏感性实验,分析菌株的益生特性。结果表明,多株植物乳杆菌具有良好的降胆固醇功能,其中菌株S56的脱除胆固醇的量最高,达到22.40μg/mL。实验菌株均能耐受pH 3.0的酸度和10 g/L的牛胆盐。其中菌株S2-6、S2-5、S4-1和S56在pH 2.0的环境中能保持生长1 h,具有较强的耐酸性。     

降胆固醇乳酸菌菌株的筛选及其影响因素的研究

选择由本实验室分离并保存的4种乳酸菌株,接种到10%脱脂乳培养基中进行活化和扩大培养。测量培养基在接种前后吸光度值的变化,从中筛选出较强降胆固醇能力的一株乳酸菌种,并考察在不同培养时间、接种量、培养温度、胆盐浓度、盐浓度、乳糖添加量下该菌种降胆固醇能力的变化。结果表明：胆酸盐和盐对该菌株的降胆固醇能力都有一定的抑制作用,胆酸盐的抑制作用高于盐的作用;对于培养条件来说,当培养温度为42℃,接种量为1%,培养时间为24h时,该菌株的降胆固醇能力最高。     

耐酸耐胆盐乳酸菌的鉴定及筛选

从自然发酵的酸奶中分离出2 株细菌,经16S rDNA分子鉴定为Lactobacillus plantarum SN1和Lactobacillusrhamnosus SN6,并对其生长曲线、产酸速率、耐酸耐胆盐能力进行了研究。L. plantarum SN1和L. rhamnosus SN6在2 h后进入对数期,16 h后达到稳定期,其OD600 nm值分别为8.47、7.43。L. plantarum SN1和L. rhamnosus SN6的产酸速率较快,pH值在8 h后就降到了4.2以下,48 h后降到3.3左右。L. plantarum SN1和L. rhamnosus SN6在pH 4的培养基培养16 h后,其相对OD600 nm值分别为49.29%、47.14%,具有较强的耐酸能力。L. plantarum SN1和L. rhamnosus SN6在0.3 g/L胆盐质量浓度下培养16 h后,相对OD600 nm值分别为57.7%、69.48%;在0.6 g/L胆盐质量浓度下的相对OD600 nm值分别为48.22%、29.56%,具有较强的耐胆盐能力。结果表明：L. plantarum SN1和L. rhamnosus SN6是生长性能好、产酸能力强、耐酸耐胆盐的益生菌株。     

人源乳酸菌体外降胆固醇的影响因素研究

研究从如皋长寿人群肠道中分离的乳酸菌体外降胆固醇的影响因素。通过对分离获得的86株乳酸菌体外降胆固醇能力的测定表明:胆固醇降解率超过30.0%的乳酸菌有5株,分别为2株食窦魏斯氏菌、1株干酪乳杆菌、1株植物乳杆菌和1株屎肠球菌;5株乳酸菌体外降胆固醇的最佳胆盐浓度不同,中性pH较酸性pH更有利于乳酸菌降解胆固醇;细胞存活状态对乳酸菌的降胆固醇能力有较大的影响,大部分实验乳酸菌的降胆固醇能力与其生长情况有直接的关系。