钙调神经磷酸酶对金黄色葡萄球菌肠毒素C2超抗原活性的作用

目的探讨钙调神经磷酸酶(Calcineurin,CaN)对金黄色葡萄球菌肠毒素C2(staphylococcal enterotoxin C2,SEC2)发挥超抗原活性的作用。方法以终浓度为0.5、1、2、3和4μg/ml的重组野生型rSEC2及其增强型突变体蛋白mSEC2(T20L/G22E/H118A/H122A)刺激SD大鼠脾淋巴细胞,MTT法检测大鼠脾淋巴细胞增殖水平;检测终浓度为1μg/ml的rSEC2和mSEC2在诱导大鼠脾淋巴细胞增殖过程中CaN活性的变化、终浓度为0.1、0.5、1、2和3μg/ml的CaN特异性抑制剂环孢菌素A(cyclosporine A,CsA)对该过程的影响,以及CaN3个亚基CaN Aα、CaN Aβ、CaN B在mRNA水平上的变化。结果在低浓度rSEC2和mSEC2刺激下,大鼠脾淋巴细胞增殖指数(proliferation index,PI)与给药浓度成正比,高浓度刺激下,可明显抑制大鼠脾淋巴细胞的增殖,1μg/ml浓度增殖效果最好;CsA对大鼠脾淋巴细胞增殖具有较强的抑制作用,呈明显的剂量依赖性,当CsA浓度为0.5～1μg/ml时,rSEC2和mSEC2的刺激作用即被完全抑制;CaN的活性及其相关亚基(CaN Aβ和CaN B)mRNA水平与其超抗原的刺激增殖活性具有明显相关性。结论 CaN对SEC2发挥超抗原活性具有重要作用,为提高SEC2的临床应用价值及规避毒副作用奠定了理论基础。     

生物信息学方法筛选华支睾吸虫成虫功能基因——钙调神经磷酸酶B亚基样蛋白

目的本文通过建立华支睾吸虫成虫cDNA文库,筛选其功能基因。方法应用SMART方法构建华支睾吸虫成虫cDNA文库,进行大量EST测序,然后应用生物信息学方法将EST序列与GenBank中登陆的序列进行同源性比对、序列拼接及基因完整性判断;并应用NCBI上的RPSBLAST对所筛选基因的保守域进行搜索比对,利用PredictProtein分析、预测其功能域及二级结构。结果从华支睾吸虫成虫cDNA文库中筛选的钙调神经磷酸酶B亚基样蛋白(CsCBLP)基因,经同源性分析,CsCBLP与褐家鼠钙调神经磷酸酶(CaN)同源性为53%,与尾刺耐格里原虫CaNB同源性为40%,与新小杆线虫属结合蛋白的同源性为51%;保守域的比对及功能域、二级结构的预测显示所筛选的CsCBLP是钙调神经磷酸酶B亚基的的类似物,属于钙结合蛋白家族。结论应用生物信息学方法从华支睾吸虫成虫cDNA文库中筛选出钙调神经磷酸酶B亚基样蛋白基因。     

基因重组钙调蛋白提取纯化的新方法

目的建立一个简捷高效的纯化基因重组钙调蛋白(Recombinant-calmodulin,CaM)的新方法。方法 培养CaM基因重组大肠杆菌,并用IPTG诱导CaM表达,将菌体冻融、超声破碎,再经三氯醋酸、硫酸铵沉淀及超速离心,获得CaM;经SDS-PAGE检测CaM的纯度与相对分子质量,用甘油电泳和Scoin Image密度扫描软件检测CaM激活肌球蛋白轻链激酶(MLCK),从而引起肌球蛋白轻链(MLC20)磷酸化的活性。结果SDS-PAGE显示,重组大肠杆菌表达了大量CaM,且所提取CaM的相对分子质量及纯度均与CaM标准品一致;甘油电泳结果显示,CaMO.1μg/ml即可激活MLCK,使MLC20部分磷酸化,至3μg/ml时使MLC20双重磷酸化,其所致磷酸化的程度与等剂量的CaM标准品基本相同。Scoin Image密度扫描结果显示,CaM激活MLCK引起MLC20磷酸化的百分率与等剂量CaM标准品差异无显著意义(P>0.01)。结论已建立了简捷高效纯化CaM的新方法。     

骨特异性碱性磷酸酶在慢性肾脏病患者中的水平及与钙磷代谢的相关性分析

目的:探讨慢性肾脏病(Chronic kidney disease,CKD) 3～5期患者的血清骨特异性碱性磷酸酶(BALP)水平及与钙磷代谢的相关性.方法:收集120例CKD 3～5期患者及40例健康者血清骨特异性碱性磷酸酶(BALP)、甲状旁腺激素(iPTH)、钙(Ca),磷(P)等指标,并对其进行相关性研究.结果...     

海藻酸钠-钙-铝水凝胶的制备及其对水中氟的吸附性能研究

本文以自制海藻酸钠-钙-铝水凝胶为吸附剂,通过吸附法去除水中氟离子,通过对吸附条件的探讨,优选出吸附温度为25℃,吸附时间为80 min,吸附效率高达93%以上。本研究方法新颖,成本较低,为以后的研究工作做了重要的铺垫。     

磷酸-蔗糖钙法对糖汁清净作用的研究

赤砂糖回溶糖浆采用磷酸-蔗糖钙法进行澄清脱色,考察了糖浆pH值、反应温度、中和汁pH值以及反应时间对糖浆澄清脱色的影响。结果表明,用磷酸调节赤砂糖回溶糖浆pH值至3.00、反应温度35℃,以蔗糖钙溶液中和至pH值为7.20,反应5 min,脱色率可达61.8%,除浊率达到96.6%。结合X衍射图谱、扫描电镜图以及光学显微图像,对澄清脱色机理进行了探讨。     

磷酸-蔗糖钙法对糖汁清净作用的研究

赤砂糖回溶糖浆采用磷酸-蔗糖钙法进行澄清脱色,考察了糖浆pH值、反应温度、中和汁pH值以及反应时间对糖浆澄清脱色的影响。结果表明,用磷酸调节赤砂糖回溶糖浆pH值至3.00、反应温度35℃,以蔗糖钙溶液中和至pH值为7.20,反应5 min,脱色率可达61.8%,除浊率达到96.6%。结合X衍射图谱、扫描电镜图以及光学显微图像,对澄清脱色机理进行了探讨。     

β-硅酸二钙对腐殖酸钠的吸附特性

通过考察β-硅酸二钙(β-C2S)对腐殖酸钠的吸附动力学及热力学,研究了其对腐殖酸钠的吸附行为,并探讨了吸附前后β-C2S表面zeta电位的变化规律。结果表明:根据吸附等温曲线的相关数学模型拟合,得出β-C2S对腐殖酸钠的吸附过程符合Langmuir吸附等温式模型,同时符合二级吸附动力学。吸附自由能变为–20～0kJ/mol,表明此过程属于物理吸附和化学吸附共存,以物理吸附为主的自发吸热过程。表面zeta电位的测定表明在铝酸钠溶液中β-C2S表面带负电荷。     

焦磷酸盐微晶玻璃对β-磷酸三钙生物陶瓷的抗弯强度及生物活性的影响

通过熔融法制备组成为Na2O-MgO-CaO-P2O5的基础玻璃,在800℃进行热处理,得到主要组成为Na4P2O7和β-Ca2P2O7(β-calcium pyrophosphate,β-DCP)的焦磷酸盐微晶玻璃(pyrophosphate glass,PG).将PG和β-磷酸三钙(β-tricalcium phosphate,β-TCP)按质量比为10:90混合,干压成型,烧结制得PG/β-TCP生物陶瓷.采用差热分析、X射线衍射、扫描电镜、能谱、模拟体液浸泡等方法研究了基础玻璃的析晶、PG/β-TCP生物陶瓷材料体系的相组成、力学性能和生物活性.结果表明:PG能有效提高PG/β-TCP陶瓷的抗弯强度,1300℃烧结3h制备的PG/β-TCP陶瓷的弯曲强度与纯β-TCP陶瓷相比,由87.4MPa提高至113.2MPa;同时,PG可有效改善β-TCP基体的生物活性,在模拟体液中浸泡14d后,PG/β-TCP陶瓷表面形成Ca与P摩尔比为1.46的叶状磷灰石.     

矿渣对阿利特-硫铝酸钡钙水泥水化硬化过程的影响

通过对水泥力学性能、水化速率和水泥硬化浆体孔结构的测定,结合XRD、SEM分析,研究了矿渣对阿利特-硫铝酸钡钙水泥水化硬化过程的影响。研究结果表明:掺入矿渣后,水泥的早期强度下降幅度较大,但后期强度下降幅度较小。在试验掺量范围内,当矿渣掺量为20%时,该水泥各龄期抗压强度下降幅度最小,其后期抗压强度接近纯熟料水泥;加入矿渣后,水泥水化热明显降低,矿渣在受到碱激发与硫铝酸盐双重激发作用下发生二次水化反应,使水泥水化速率有一定增加而出现第三个放热峰;矿渣二次水化反应有效地改善了硬化水泥浆体的孔结构,使水泥后期强度逐渐增加。     

HPLC法定量分析氯氰菊酯和高效氯氰菊酯

本文报道了氯氰菊酯和高效氯氰菊酯的新的高效液相色谱分析方法。     

氯氰菊酯和高效氯氰菊酯的气相色谱分析

采用气相色谱法,选用ＤＢ－５毛细管柱,ＦＩＤ检测器,以邻苯二甲酸二壬酶为内标,对氯氰菊酯和高效氯氰菊酯进行定量分析。氯氰菊酯和高效氯氰菊酯的线性回归系数分别为０．９９３和０．９９８,变异系数分别为０．２２１和０．３１８,回收率分别为９９．１％－１００．２％,和９９．６％－１００．３％。     

1.4%氯氰菊酯ULV的高效液相色谱分析

建立了一种高效液相色谱法(HPLC)测定氯氰菊酯含量的方法。采用填充Hypersil SiO2柱,在以正己烷+四氢呋喃为流动相条件下,在240 nm波长处,用正相高效液相色谱和紫外检测器分离测定氯氰菊酯的有效成分。结果表明,方法的标准偏差为0.016,变异系数为1.4%,平均回收率为100.12%,线性相关系数为0.9992。     

超声波法降解氯氰菊酯的工艺条件优化

为了研究降解氯氰菊酯有机氯农药的最佳工艺条件,通过超声波及响应曲面法(RSM)来优化最佳工艺条件。用气相色谱及气质-联用色谱仪对氯氰菊酯进行了定性及定量检测,实验结果表明氯氰菊酯的超声波降解最优工艺条件为处理时间28.64 min,处理温度26.85℃,超声波功率为223.65 W,在此条件下的降解率为44.9%。     

原药和制剂中氯氰菊酯的气相色谱分析

本文研究了在原药和制剂中氯氰菊酯的气相色谱测定方法。邻苯二甲酸二壬酯被用作内标物。介绍了定量分析的气相色谱操作条件。     

混合培养微生物降解氯氰菊酯的特性研究

通过富集培养,获得了降解氯氰菊酯的混合微生物。结果表明,该混合微生物发挥最优降解力的温度是35℃,pH为7.5,培养时间为72h。氯氰菊酯降解速度和混合培养微生物生长对外加碳源有较强的依赖性。培养液中添加5g.L-1葡萄糖和3g.L-1酵母粉,72h氯氰菊酯去除率可达80%以上,氯氰菊酯降解速率可达0.56mg.L-1.h-1;当氯氰菊酯作为培养菌生长的唯一碳源、氮源和能源时,72h内氯氰菊酯去除率为65%,降解速率为0.45mg.L-1.h-1。     

2.5%高渗氯氰菊酯乳油的气相色谱分析

采用5%OV–101色谱柱,以邻苯二甲酸二双环己酯为内标物,用FID检测器对2.5%高渗氯氰菊酯乳油定量分析,氮酮、氯氰菊酯的标准偏差分别为0.0496、0.0583,变异系数分别为4.82%、2.29%,氮酮的回收率为98.58%～101.52%,氯氰菊酯的回收率为98.65%～104.90%。该方法方便、快捷、准确。     

氯氰菊酯微乳液可视化研究

采用亚微观可视化反应装置对氯氰菊酯微乳液的样品进行微粒运动状态的动态观察,对微粒的粒径进行了测试。结合图像讨论了微乳液中微粒状态与粒径分布的关系和微粒的分布与分散性的关系,实现了微乳液微观状态的可视化和微粒粒径测量的可视化。讨论得出颗粒越细粒径分布越窄,微乳液稳定性越好;当可测量微粒的粒径越小,在单位图片上（或单位时间内）微粒的分布越少时,微乳液的分散性越好,透光率越高。     

对氯杀虫酯乳油中氯氰菊酯的气相色谱分析

本文提出了用气相色普法，采用邻苯二甲酸二辛酯作内标，分析对氯杀虫酯中的氯氰菊酯，简单，快速，避免了众多杂质峰的干扰，其标准偏差为０．０１４，变异系数为３．８％。     

氯氰菊酯立体异构体的毛细管气相色谱分离与测定

采用30m×0.25mmi.d.OV-1石英毛细管柱,FID氢火焰离子化检测器,在柱温220℃,对氯氰菊酯四个立体异构体进行了完全分离。该法快速、简便、重现性好,可同时完成混合物中顺反立体异构体的含量及总量的定量分析。回收率97.3％～98.6％。