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以对DPPH自由基清除率为考察指标,筛选适宜蛋清肽制备蛋白酶。研究酶活、温度、蛋清含量及pH值对蛋清肽清除DPPH自由基的影响,利用正交试验探讨制备蛋清抗氧化肽的最佳工艺;以抗坏血酸(VC)为对照,研究蛋清肽总还原力大小、对羟自由基、超氧阴离子自由基的清除作用及对脂质过氧化的抑制作用;研究蛋清肽的部分特性。结果表明:风味蛋白酶适宜蛋清肽的制备,酶解时间选择90 min。最佳工艺为:pH 5,45℃,蛋清体积分数8%,酶活1 125 U。此条件下对DPPH自由基清除率为53.273%。蛋清肽对羟自由基(0.308 4~1.542 mg/mL)、超氧阴离子自由基(0.089~0.443 mg/mL)具有一定的清除能力,清除率随其质量浓度的增大而增加,且具有一定的还原力。对羟自由基,VC的IC50=0.092 mg/mL,蛋清肽IC50=1.24 mg/mL,对超氧阴离子自由基,VC的IC50=0.021 6 mg/mL,蛋清肽的IC50=0.054 mg/mL。在0.667~10.667 mg/mL范围内,蛋清肽对脂质过氧化的抑制作用随其质量浓度增加而减小,在0.667~10.667μg/mL范围内反而具有促进脂质过氧化作用。蛋清肽等电点在pH 3左右,其对羟自由基清除率随温度增加逐渐下降;在pH 2~10范围内,其溶解度几乎成线性增加。 相似文献
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研究了Protamex、Neutrase、Alcalase和Flavourzyme酶解蛋清肽对小鼠血清生化指标和肝脏抗氧化功能的影响。选取2月龄雄性小鼠80只,分成8组(P-3h、P-6h、N-3h、N-6h、A-3h、A-6h、P+N+F-3h和P+N+F-6h),每组10只,试验期每天灌胃酶解蛋清肽0.3ml,连续灌胃4周,试验结束后,检测血清生化指标和肝脏抗氧化性能。结果表明:与P-3h组相比,N-3h和A-3h组小鼠血清的GOT含量分别升高了15.34%和4.6%,肝脏的T-SOD活性分别升高了8.41%和16.03%(P0.05),而血清的TG含量和肝脏的GSH-PX活性则分别降低了29.92%和27.65%、6.93%和28.68%(P0.05)。与P-6h组相比,A-6h组和N-6h组小鼠血清TP、TC、TG、Ca和Mg的含量分别降低了8.10%和6.38%、25.20%和19.03%、16.06%和19.17%、4.42%和3.61%、12.83%和8.21%(P0.05);N-6h组小鼠肝脏的GSH-PX活性降低了21.28%(P0.05),而A-6h的MDA含量提高了4.64%。从本试验结果来看,蛋清Alcalase酶水解物改善小鼠血清生化指标和肝脏抗氧化能力效果较好,其中水解3h的效果优于6h。 相似文献
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乳清蛋白抗氧化肽的制备及体外抗氧化活性研究 总被引:1,自引:0,他引:1
采用酶解法制备乳清蛋白抗氧化肽并研究其体外抗氧化活性。结果表明:以羟自由基清除率和多肽含量为指标,筛选出中性蛋白酶为最优酶;在单因素试验的基础上,通过响应面试验确定最佳酶解条件为pH 5. 50、酶解温度65℃、酶解时间1. 65 h、底物质量分数5%、加酶量5 000 U/g,此条件下乳清蛋白抗氧化肽对羟自由基清除率为74. 54%;乳清蛋白抗氧化肽对羟自由基、ABTS+自由基、DPPH自由基和超氧阴离子自由基都具有较好的清除能力,IC50值分别为2. 174、0. 709、2. 813mg/m L和4. 579 mg/m L。表明乳清蛋白抗氧化肽具有较强的体外抗氧化活性,具有一定的开发利用价值。 相似文献
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以清料法腌制成熟的皮蛋清为原料,在单因素实验基础上,以物料比(皮蛋清与蒸馏水质量比)、酶解时间和酶添加量为考察因素,以水解度和DPPH自由基清除率为响应值,利用响应面试验优化设计得出皮蛋清抗氧化性多肽制备的最佳工艺参数:物料比1:10.4 g/mL、酶解时间4.1 h、酶添加量0.57%,该条件下的水解度为11.23%,DPPH自由基清除率为89.76%,最佳工艺下的酶解液具备一定的抗氧化性。当酶解液浓度为10.4 mg/mL时还原力、超氧阴离子自由基(O2?·)清除率和羟基自由基(·OH)清除率分别为0.599、66.78%和79.63%。 相似文献
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为了获得高活性、高纯度的蛋清抗氧化肽,以蛋清酶解物为原料,依次釆用超滤、离子交换色谱、凝胶色谱分离纯化抗氧化活性较强的肽段,运用基质辅助激光解吸离子化质谱解析肽链的氨基酸序列。结果表明:超滤法分离纯化EWPH所得的三个组分中,EWPH-Ⅲ(MW<3 kDa)组分的DPPH自由基清除率最高,达到79.62%。离子交换层析分离纯化EWPH-III所得到的碱性组分B的DPPH自由基清除率最高,达到82.05%。凝胶过滤色谱分离EWPH-III-B所得到4组分中E组分的DPPH自由基清除率最高,为88.49%。高活性高纯度EWPH-III-B-E组分的相对分子质量为237.575,该二肽的氨基酸序列为丙氨酸-甲硫氨酸。 相似文献
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Alcalase碱性蛋白酶酶解蛋清制备抗氧化活性肽 总被引:4,自引:0,他引:4
研究Alcalase碱性蛋白酶酶解鸡蛋蛋清制备小分子活性肽.确定酶解的最佳工艺是:酶解pH值为9.0,酶解温度为70℃,底物浓度[S]为4.5%,酶加入量[E]/[S]为6%.水解时间4 h,水解度达到33%.采用化学发光法研究蛋清肽混合物的抗氧化性,结果表明,不同浓度和水解度的蛋清肽混合物均具有清除活性氧和抗脂质氧化的能力.随着蛋清肽混合物浓度增大,清除能力增大,抗氧化性增大.不同水解度的蛋清肽混合物,其清除活性氧和抗脂质氧化能力稍有不同,但区别不大.用葡聚糖凝胶SephadexG-15测定水解物分子量分布,结果表明水解产物中的主要成分是分子量集中在1300u的寡肽. 相似文献
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为探究酸化蛋清粉对油酸诱导Hep G2细胞建立的体外肝细胞脂肪堆积的清除作用,将质量浓度分别为4 mg/mL、2 mg/mL、0.8mg/m L的酸化蛋清粉孵育经1.0mol/L的油酸诱导24h的Hep G2细胞后,用油红O染色观察细胞内脂质沉积情况,测定细胞内TC、TG含量及SOD活性的变化,检测ROS荧光强度,测定·DPPH自由基及·OH自由基的清除率。结果显示酸化蛋清粉浓度为2 mg/mL时具有最显著的降血脂效果,TG和TC的清除率分别为27.27%±0.02%、44.66%±0.02%;SOD活性及ROS荧光检测结果显示:随着酸化蛋清粉浓度的升高,细胞内抗氧化能力呈现上升趋势;·DPPH自由基和·OH自由基的清除能力随酸化蛋清粉浓度升高呈现出显著的随剂量依赖性的上升趋势,当酸化蛋清粉浓度18 mg/m L时,其清除率分别为88.58%±0.04%、87.82%±0.03%。结果证明酸化蛋清粉具有显著的体外降血脂及抗氧化作用。 相似文献
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抗氧化大豆多肽制备的研究 总被引:1,自引:2,他引:1
以还原能力、清除超氧阴离子自由基和过氧化氢能力为指标,筛选制备抗氧化大豆多肽的水解酶及水解条件,得到高效的抗氧化大豆多肽制品。结果表明:选择1000U/g菠萝蛋白酶、2000U/g中性蛋白酶、2000U/g碱性蛋白酶,三酶复合在pH6.0,酶解温度50℃,底物浓度8.0%的酶解条件下,对大豆蛋白酶解4h,多肽的抗氧化能力表现最强,还原能力达到0.898,超氧阴离子自由基的清除率达到40.93%,过氧化氢的清除率达到33.37%。经超滤分离,分子量小于10KDa而大于5KDa的多肽表现出较强的还原能力,而小于5KDa的多肽表现出较强的清除超氧阴离子自由基和过氧化氢的能力。 相似文献
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为了获得具有高抗氧化性的大鲵多肽,以大鲵肌肉为原料,经复合酶(风味蛋白酶和中性蛋白酶)酶解后,水解度达到44.12%,制得多肽得率为90.28%的大鲵多肽酶解液,用截留分子量分别为20、5、2、0.3 ku的超滤膜将其分离成5个分子量段,研究不同分子量段大鲵多肽对DPPH·、·OH和O-2·清除能力的影响。结果表明:不同分子量段的大鲵多肽组分的抗氧化能力大小顺序为:0.32 ku组分>25 ku组分>小于0.3 ku组分>520 ku组分。分子量为0.32 ku的大鲵多肽抗氧化活性最高,其对DPPH·、·OH和O-2·的EC50分别为0.4、0.7、1.5 mg/m L。因此,采用截留分子量为2 ku和0.3 ku的超滤膜可以分离得到具有高抗氧化活性的大鲵多肽。 相似文献
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鸡蛋不仅是人们饮食营养的重要来源,而且还含有许多生物活性蛋白。鸡蛋活性蛋白经酶解后会产生许多具有生物活性的多肽,其中最重要的就是具有降血压活性的多肽。本文介绍了鸡蛋来源的降血压多肽的发现、特性、生产和分离及体内外活性,以期为国内相关研究提供参考。 相似文献
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采用0.22、0.45μm两种孔径滤膜过滤猪股骨酶解液,再利用截留分子量为5、3、2ku的超滤离心管对过滤后的酶解液进行超滤,比较两种滤膜过滤的酶解液超滤分离后的各分子量段滤液的色值、澄清度、蛋白损失率及ACE(血管紧张素转换酶)抑制活性,并将ACE抑制活性最高的分子量段进行模拟胃肠道及耐热、耐酸碱实验。研究显示:0.22μm微孔滤膜处理的酶解液超滤后的色值、澄清度效果好于0.45μm微孔滤膜,两者超滤后各个分子量段的ACE抑制率差异不显著,蛋白回收率前者较低,分子量<2ku的滤液活性最高,其IC50值为0.83mg/m L。分子量<2ku经胃蛋白酶、胰蛋白酶作用后,ACE抑制活性仍然保持原来的95%以上,该分子量段的滤液有良好的胃肠道耐受性、热稳定性及耐酸碱性。 相似文献