植酸酶高产菌株的选育及固态产酶条件的优化

以本实验室筛选到的一株黑曲霉为出发菌株，经紫外线和EMS诱变，并通过初筛、复筛等步骤而得到的一株植酸酶高活性黑曲霉变异菌株为菌种，接种麸皮培养基，通过对水分、温度、培养时间系列测定，从而得出此菌产植酸酶的最适条件。通过进一步实验证实，在麸皮中加葡萄糖对产酶也有一定的影响，太高或太低均影响黑曲霉的生长和产酶。另外，本实验对植酸酶的产酶条件也做了优化，得知，麸皮加水量为90％，产酶的最适温度为30％，最佳培养周期为96小时，葡萄糖加入量为2．5％时酶活较高。     

产纤维素酶菌株产酶条件的研究

主要研究了绿色木霉固态发酵培养基的酯比、接种量、氮源、培养时间和培养温度等条件，通过测定其所产纤维素本科的CMC和FPA酶活，找出该菌株最佳的产酶条件，即：秸秆粉：麸皮为2：1，固液比为1：3，添加（NH4）2SO4为氮源，添加量为2%，接种量5%，30℃培养84h左右为宜。CMC、FPA酶活分别达到372IU/g和69IU/g。     

产纤维素酶菌株的筛选及产酶条件的优化

为了得到产酶性能好且稳定的菌株,利用CMC平板初筛和摇瓶发酵复筛,从采自不同地区的样品中筛出5株产酶较高的菌株。采用液体发酵方法对其中产酶最好的菌株A6产酶条件进行研究。结果表明,该菌株最适产酶温度为32℃,初始pH值为5.5,接种量为5%,培养时间为4d,微晶纤维素与麸皮配比为7:3,氮源为复合氮源。     

产纤维素酶海洋菌株的分离及培养条件研究

从烟台近海处采集样品,用羧甲基纤维素钠刚果红培养基筛选得到一株高产纤维素酶的菌株,初步鉴定为革兰氏阴性芽孢杆菌。用羧甲基纤维素酶活测定法,确定了最佳酶促反应温度,并研究了培养时间、pH值,碳源、氮源等培养条件对菌体产酶的影响。结果显示,最适酶促反应温度为40℃,培养时间为54h,最适pH值为7．5,最佳碳源为羧甲基纤维素钠,最佳生长氮源为酵母膏,最佳产酶氮源为硫酸铵。与陆地纤维素酶产生菌相比,海洋纤维素产生菌所产纤维素酶具有低温催化的优势。     

纤维素酶高产菌株产酶条件的优化

通过产酶培养基及产酶条件的优化,确定产纤维素酶菌株N-57的最佳产酶条件.利用液体发酵培养法探讨培养基起始pH值、培养温度、碳源、氮源对菌株N-57产酶的影响.在单因素试验的基础上,通过Box-Behnken响应曲面法筛选出产CMCase的最佳发酵条件:pH值为6;稻草粉浓度为0.30％;(NH4)2SO4浓度为0.30％.在最佳条件下培养,该菌株的CMCase的酶活达到459.54U.     

菊粉酶产菌株的诱变选育及产酶条件的研究

以克鲁维酵母野生为出发菌株,经紫外筛选选到一株产菊粉酶较突变株ＵＶ－Ｇ－４０－３,并对其进行了发酵条件的研究,在菊糖３％、蛋白胨３％、酵母膏１％、ＰＨ５．５、３６℃,装量３０ｍｌ／３００ｍｌ,２４０ｒ／ｍｉｎ摇瓶培养３３ｈ,酶活比野生株提高近一倍,为１３．９Ｕ／ｍｌ。     

产纤维素酶细菌的复合诱变及产酶条件优化

以产纤维素酶细菌LBT-3．6为出发菌株，经紫外、微波先后谤变，选育得一株高产突变株WB-2，滤纸酶活力比出发菌株提高了202．7％。经过培养条件优化后，以麸皮为碳源，最适浓度为50g／L，（NH4）3PO4 4g／l，蛋白胨lg／L，添加0．4％NaCl和0．2％吐温80，滤纸酶活力达到12．35U／mL。     

α-乙酰乳酸脱羧酶高产菌株的选育及产酶条件的研究

以从土壤中分离出的9株地衣芽孢杆菌株，通过产酶实验发现BL－4的产酶活性最好，通过UV和NTC对BL－4进行复合诱变，获得了一株产酶活性比出发菌株BL－4高1．22倍的α－乙酰乳酸脱羧酶高产菌株，并研究了该菌株的最佳发酵产酶条件：培养温度30℃，发酵时间36h，发酵液起始pH6.5.     

紫外线诱变选育高产豆豉纤溶酶菌株及其产酶条件优化

该研究以分离自豆豉样品中产豆豉纤溶酶的枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）DC-1为出发菌株,采用紫外线诱变选育高产豆豉纤溶酶且稳定遗传的菌株,并以豆豉纤溶酶活力为评价指标,通过单因素试验及正交试验对其发酵条件进行优化。结果表明,筛选出一株高产豆豉纤溶酶活力且稳定遗传的诱变菌株DC-V5,其最优发酵条件为：接种量3%、装液量70 m L/250 m L、发酵温度34℃、初始pH 6.5。在此优化发酵条件下,诱变菌株DC-V5产豆豉纤溶酶活力最高达到（451.26±11.09）IU/m L,是优化前出发菌株DC-1的1.74倍。     

产腈水合酶菌株的驯化选育及其产酶条件的优化

以Rhodococcussp YL 1为出发菌株 ,通过逐渐增加培养基中丙烯腈的浓度重复继代培养 ,得到 1株酶活为 79 8U/mg的腈水合酶高活力菌株YL 2 ,酶活比出发菌株YL 1提高了 87%。对菌株YL 2的产酶条件进行了优化。结果表明 ,葡萄糖、诱导剂脲、Co2 + 及pH是影响腈水合酶高效表达的主要因素。在葡萄糖浓度为 2 0g/L ,诱导剂脲的添加量为 0 0 6g/L ,钴离子加入量为 0 3g/L ;培养温度为 30℃ ,培养基初始 pH为 7 0的条件下培养 4 0h后 ,酶活可达 134 5U/mg ,比优化前提高了 6 9%。     

木聚糖酶高产菌株的筛选及其产酶营养条件研究

采用木聚糖为唯一碳源的平板初筛培养基以及摇瓶复筛液体培养基从保藏的菌株中筛选到产木聚糖酶活力较高、茵丝生长快的粗糙咏孢菌(Neurospora crassa)菌株,采用优化的碳源(30 g/L浓度的麸皮)、氮源(20g/L浓度的硝酸钠),粗糙脉孢茵在摇瓶发酵培养的第6天产酶活力最高,可达136.90u/mL.     

植酸酶产生菌的选育及产酶条件的初步研究

经大量菌种初筛和复筛,得到一株产植酸酶较高的菌株 G8。菌种经 NTG 和 CO~(60)诱变,得到一株植酸酶高产菌株 CN-50,适合该菌种产植酸酶的优良培养基:豆饼粉,麸皮,硫酸铵。最适宜产酶条件:培养温度 30℃,培养基起始 PH 是 5.5,时间为 72 h。     

一株耐盐纤维素酶海洋曲霉的筛选及产酶条件研究

从东海海底泥中分离到了一株耐盐和高产内切葡聚糖酶(CMCase)及β-葡萄糖苷酶(β-Gluase)的海洋曲霉ZJUBE-1,根据形态特征及18S rDNA分析,初步鉴定该菌为黑曲霉(Aspergillus niger).通过液体发酵产酶优化,获得最佳培养基组成,质量分数分别为:麸皮2.5％,氯化铵(或蛋白胨、磷酸二氢铵)1％,含NaCl 3.0％～3.6％的人工海水作无机盐液.发酵条件为100mL三角瓶装培养液30 mL,在起始pH 6.0、37℃,接种量为6％,180 r/min条件下振荡培养7d,测得发酵液中CMCase、β-Gluase.酶活及滤纸酶活(FPA)分别为5.3、5.4、0.75 U/mL.该菌在NaCl质量分数24％下仍具产酶能力,所产3种纤维素酶的最适反应温度均为65℃,最适反应pH分别为4.0、5.0、5.0;在NaCl质量分数为2％～12％(-Gluase在2％～16％)范围内,3种酶活力维持较高水平.该菌及其所产纤维素酶的高度耐盐性预示着其在废水处理、纺织业、海洋养殖、海产品加工或海藻的能源化利用等高盐环境下可能有较好的应用前景.     

酒药中凝乳酶菌株筛选及产酶条件研究

从酒药中筛选出凝乳酶高产菌株M10 ,并进行产酶条件研究。结果表明 ,土豆汁培养基是适宜的产凝乳酶培养基 ,摇瓶培养中培养基起始 pH值为 6 4 3～ 6 51,培养时间为 59～ 6 4h ,培养温度为 34～ 35℃ ,M 10菌株的产酶活力可以达到 80SU/mL。     

高产α-转移葡萄糖苷酶菌株的选育及其产酶条件研究

α-转移葡萄糖苷酶是生产低聚异麦芽糖的关键酶。本文成功选育一株高产a-转移葡萄糖苷酶菌株ASP-2。并对该菌株进行了固态发酵条件优化，结果表明：麸皮和水的质量比为1：1，35℃培养48h时产酶量及酶活较高，ASP-2菌株生长的最适pH值为6．0，碳源和氮源不是该菌株在此培养基中产酶的必需元素，从降低生产成本的角度考虑，可以不用。     

胞外纤溶酶产生菌的筛选及其产酶条件研究

从豆豉、酱豆和纳豆样品中分离筛选到一株具强力纤溶活性的细菌 ,编号为NK—5,经鉴定为芽孢杆菌属枯草杆菌群细菌。该菌在固态基质及液体培养基中均产生大量胞外纤溶酶。摇瓶发酵试验表明 ,其最适产酶碳源和氮源分别为蔗糖和蛋白胨。通过正交试验确定最适产酶培养基为 :豆粕粉 2 0 %、麸皮 0 5%、玉米淀粉 0 5%、KH2 PO4 0 2 %、K2 HPO40 4 %、MgSO4 0 0 5%、CaCl2 0 0 2 % ,pH7 0。在优化条件下 ,发酵液酶活达 6 83 3IU/mL     

β-1,3葡聚糖酶高产菌株的筛选及其产酶条件研究

从土壤中分离筛选出一株β-1，3葡聚糖酶活较高的菌株，编号为M014，初步鉴定为木霉。研究了碳源、氮源、培养温度与时间等因素对M014产酶的影响。实验结果表明，MOl4在含3％茯苓粉、0．5％酵母膏及一些无机盐的液体培养基中(pH6．0)，于30℃，150r／min振摇培养6d，β-1，3葡聚糖酶活最高，达到4．95U／ml。另外，还就β-1,3葡聚糖酶的酶解条件进行了研究，结果显示，β-1,3葡聚糖酶的最适反应pH为4．5,最适反应温度为60℃.粗酶液在40℃和50℃保温12h，酶活基本稳定，最适反应温度为60℃保温时，酶活迅速下降。     

产几丁质酶菌株GXUN-20的筛选、鉴定及其产酶条件优化

为了提高虾蟹等海产品废弃物利用率及其附加值,从广西合浦县大神木海鸭场附近滩涂沉积物（虾蟹及贝壳废弃物）中分离、纯化、筛选出一株产几丁质酶菌株GXUN-20,经过生理生化鉴定以及16S rDNA序列构建系统发育树,初步判断该菌株为厚壁溶杆菌（Lysobacter firmicutimachus）。以几丁质酶活力为指标,对GXUN-20菌株进行发酵条件单因素优化,在单因素优化结果较显著的4因素（氮源浓度、发酵液初始pH、几丁质粉末浓度、接种量）基础上进行4水平正交试验及正交实验方差分析。结果显示:氮源浓度对产酶影响显著（P=0.013<0.05）,在氮源为1 g/L黄豆饼粉,几丁质粉末为20 g/L,接种量为3%,发酵液初始pH8.4,30 ℃、200 r/min发酵6 d的条件下,发酵液中几丁质酶活力最大,达到0.965 U/mL,是优化前酶活力的6.89倍。本研究结果为GXUN-20菌株产几丁质酶进一步开发与应用提供了基础数据和实验方法。     

中国曲中凝乳酶高产菌株的筛选及产酶条件的研究

目的:从中国曲中筛选凝乳酶高产茵株以代替小牛皱胃酶作凝乳剂.方法:采用酪蛋白平板进行初筛,测定茵株发酵产酶活力并进行复筛,研究其产酶发酵条件.结果:经多次复筛选育出1株高产凝乳酶活力茵株 Rhizopus arrhizus F34.碳源种类对该菌株产酶影响较大,无机氮源对产酶有抑制作用;MgSO4、FeSO4、ZnSO4对产酶也有较大的抑制作用,CaC12、KC1有利于凝乳酶的产生;pH、发酵温度和发酵时间对F34菌株产酶影响显著.结论:F34菌株产凝乳酶的最佳发酵培养基是:米粉麸皮水解液4.5%、豆粉水解液4.0%、CaC12 0.3%、KC10.5%;最适发酵条件:初始pH 4.5,发酵温度34℃,培养时间60 h.     

中性纤维素酶高产菌株的诱变选育及产酶条件

通过紫外线和γ射线交替诱变,筛选得到一株高产纤维素酶的突变菌株BE40 39.与出发株相比,其产酶能力提高1.3倍,发酵性状与出发菌株也有明显的差异.突变菌株发酵试验发现,Avicel是突变菌株产酶最合适的纤维素质碳源.通过对发酵培养条件的试验,得出最佳培养条件是:Avicel质量浓度为0.1g/dL,胰蛋白胨质量浓度为0.3g/dL,最适发酵温度为30℃,最佳培养基初始pH4.2,发酵5d达到产酶高峰.