灵芝多糖抗肿瘤的细胞机制及作用通路研究

灵芝多糖是灵芝的主要活性物质,对荷瘤机体有免疫调节作用,包括提高抗原提旱细胞、单核吞噬细胞功能,增强细胞和体液免疫功能,在体内引起一系列信号级联反应.但灵芝多糖的免疫调节及抗肿瘤作用机制尚未十分明确,仍有许多问题尚待解决.     

灵芝多糖免疫调节及抗肿瘤作用综述

目的：进一步探讨灵芝多糖免疫调节作用机理。方法：对近年来国内外对灵芝多糖在免疫调节及抗肿瘤方面的研究进展进行综述。结果：灵芝多糖促进免疫细胞数量增长活性增强的药理作用已为众多研究实验所证实。结论：灵芝多糖免疫调节及抗肿瘤作用机理尚未十分明确，但ILEs免疫调节学说的研究为进一步了解多糖免疫作用提供了一个新的研究方向。     

灵芝多糖抗肿瘤试验

通过以相当于人体推荐摄入量11．7mg／kg．bw／d的5倍、10倍和20倍3种剂量的灵芝全粉和灵芝精粉对70只雄性ICR小鼠的试验，表明灵芝全粉和灵芝精粉各剂量组小鼠体重与模型对照比较，差异无显著性（P〉0．05），瘤体重量进行方差分析，各剂量组具有抑制小鼠S-180肉瘤生长的作用。     

攥茶多糖抗肿瘤及免疫调节作用的研究

研究藤茶多糖的体内抑瘤作用及免疫调节活性。通过制备S180荷瘤小鼠动物模型，随机分组，分别腹膜注射生理盐水、环磷酰胺和藤茶多糖，连续9d，然后测定小鼠瘤重、脏器指数、免疫能力、血清LDH活性等。结果表明，25-100mglkg·d的藤茶多糖（AGP）抑瘤率为5．81％-32．56％；与模型对照组比较，50、100mg／kg.d的AGP能显著提高荷瘤小鼠迟发性超敏反应、腹腔巨噬细胞吞噬率与吞噬指数、小鼠血清溶血素含量与脾细胞抗体形成等指标，并显著抑制S180小鼠血清LDH活性和提高红细胞CAT活性（p〈O．05，P〈O．01）。说明，藤茶多糖具有体内抑制S180鲫小鼠肿瘤生长的作用，其机理可能是通过增强荷瘤小鼠免疫力和抗氧化能力。     

藤茶多糖抗肿瘤及免疫调节作用的研究

研究藤茶多糖的体内抑瘤作用及免疫调节活性。通过制备S180荷瘤小鼠动物模型,随机分组,分别腹膜注射生理盐水、环磷酰胺和藤茶多糖,连续9d,然后测定小鼠瘤重、脏器指数、免疫能力、血清LDH活性等。结果表明,25～100mg/kg·d的藤茶多糖(AGP)抑瘤率为5.81%～32.56%;与模型对照组比较,50、100mg/kg·d的AGP能显著提高荷瘤小鼠迟发性超敏反应、腹腔巨噬细胞吞噬率与吞噬指数、小鼠血清溶血素含量与脾细胞抗体形成等指标,并显著抑制S180小鼠血清LDH活性和提高红细胞CAT活性(p<0.05,p<0.01)。说明,藤茶多糖具有体内抑制S180小鼠肿瘤生长的作用,其机理可能是通过增强荷瘤小鼠免疫力和抗氧化能力。     

混合碳源对灵芝多糖发酵及其抗肿瘤活性的影响

为了高效生产活性灵芝多糖,以葡萄糖液体发酵的基本碳源,同时添加两种灵芝多糖的主要单糖组分——半乳糖和甘露糖,研究混合碳源对灵芝生长、多糖合成及其抗肿瘤活性的影响。结果表明,以不同的混合碳源作为灵芝液态发酵的碳源,发现不同比例的单糖碳源对灵芝多糖产量和生物量影响较小。不同的灵芝多糖剂量对皮肤基底癌细胞A431和人乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖均有抑制作用,碳源比例对灵芝多糖活性影响较大。葡萄糖和半乳糖以质量浓度比1∶1作碳源时抑制率可达到50%~60%;葡萄糖和半乳糖质量浓度比1∶2作碳源时抑制率可达到75%~85%;葡萄糖和甘露糖质量浓度比1∶1作碳源时抑制率可达到60%~65%;葡萄糖和甘露糖质量浓度比1∶2作碳源时抑制率可达到80%~85%;葡萄糖、半乳糖和甘露糖质量浓度比1∶1∶1作碳源时抑制率可达到80%~85%。初始培养基中半乳糖和甘露糖所占比例大有利于灵芝多糖抗肿瘤活性的发挥。     

灵芝多糖和猪苓多糖及其复方的免疫调节作用研究进展

多糖是由多个单糖聚合而成的一类天然高分子物质,食用菌多糖是多糖家族中的一员,作为天然化合物,食用菌多糖在食品、药品和保健品研发中具有良好的发展前景。灵芝和猪苓均是珍贵的食药用菌,有很高的营养价值。两者均有广泛的药理作用,如抗肿瘤、免疫调节、抗氧化等。灵芝和猪苓中含有多种活性成分,其中,多糖主要发挥免疫调节的作用,能够作用于多种免疫细胞,调节机体的免疫功能。据报道,灵芝多糖和猪苓多糖组成的复合制剂能增强小鼠先天性免疫功能。本文将对多糖的性质进行简要介绍,总结概括灵芝多糖和猪苓多糖的免疫调节功能及作用机制,为灵芝多糖和猪苓多糖在免疫功能调节方面的研发和应用提供指导。     

多糖抗肿瘤作用机制研究进展

恶性肿瘤正在威胁人类的身体健康,抗肿瘤药物的研发已引起国内外学者的广泛关注。已有研究表明,多糖不但能够参与生物机体细胞的新陈代谢和免疫调节,还具有抗肿瘤、抗抑郁、抗病毒、抗氧化、抗衰老和保肝护肝等多种生理功能,且多糖因具有毒副作用小、来源广泛、价格低廉等优点,成为潜在的新型抗肿瘤药物资源。然而,不同来源多糖的抗肿瘤作用机制并不相同。本文通过查阅国内外关于多糖抗肿瘤作用机制方面的研究文献,从多糖抑制肿瘤细胞增殖、干扰肿瘤细胞生长周期和细胞膜流动性、抑制肿瘤细胞的入侵和转移以及增强机体免疫调节功能等多个方面综述了多糖抗肿瘤的作用机制,以期促进多糖抗肿瘤作用的深入研究,为多糖类物质在肿瘤治疗方面的产品开发和临床应用奠定理论基础。     

黑灵芝多糖对S-180荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞cAMP/PKA、IP_3/Ca~(2+)及DAG/PKC信号通路的影响

目的:探讨黑灵芝多糖(polysaccharide from Ganoderma atrum,PSG-1)对S-180荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)/细胞蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)、三磷酸肌醇(inositol triphosphate,IP3)/Ca2+及甘油二酯(diacylglycerol,DAG)/蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)信号通路的影响。方法:将S-180细胞接种于BALB/c小鼠体内建立荷瘤小鼠模型,成模后收集腹腔巨噬细胞进行体外培养,用不同浓度的PSG-1干预;ELISA法分别检测巨噬细胞培养上清液中的IP3、DAG和AMP含量;流式细胞仪测定细胞内Ca2+含量;Western blotting测定细胞PKA及PKC蛋白表达。结果:PSG-1在20~160μg/mL质量浓度范围能促进S-180荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞产生cAMP、IP3和DAG,同时能增加细胞内Ca2+含量,并显著增强PKA及PKC蛋白表达量。结论:PSG-1能有效激活S-180荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞cAMP/PKA、IP3/Ca2+及DAG/PKC信号通路。由此推测,PSG-1可能通过cAMP/PKA、IP3/Ca2+及DAG/PKC信号通路促进S-180荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞抗肿瘤作用。     

甘薯多糖的抗肿瘤研究

采用水提醇沉法从“广薯98”中提取甘薯粗多糖,通过灌胃给药,研究了甘薯多糖对荷瘤小鼠(H22)的抑瘤率、存活期和脾脏指数、胸腺指数、腹腔巨噬细胞活性的影响。其研究结果显示:甘薯多糖对H22实体瘤小鼠具有明显的抑瘤作用(P<0.05),对H22腹水瘤小鼠具有明显的延长存活期作用(P<0.05);甘薯多糖能明显增加H22实体瘤小鼠的脾脏指数、胸腺指数(P<0.05或P<0.01),能明显增强H22实体瘤小鼠的腹腔巨噬细胞活性(P<0.01)。表明甘薯多糖对H22荷瘤小鼠具有明显的抗肿瘤作用。     

灵芝多糖脱色工艺研究

目的优化灵芝多糖脱色工艺,选取最优脱色方式。方法选取活性炭、壳聚糖、H_2O_2 3种脱色剂对灵芝多糖脱色处理,以脱色率和多糖保留率为指标,在单因素实验基础上,进行正交工艺优化。以2,2-二(4-叔辛基苯基)-1-苦肼基自由基(DPPH·)清除活性分析脱色后的灵芝多糖的抗氧化活性。结果活性炭对灵芝多糖的脱色率为67.72%,多糖保留率为72.12%;壳聚糖对灵芝多糖的脱色率为33.57%,多糖保留率63.00%;H_2O_2对灵芝多糖的脱色率为84.11%,多糖保留率为73.12%,综合考虑H_2O_2脱色效果最好,壳聚糖脱色法所得多糖的DPPH自由基清除能力最强。结论活性炭、壳聚糖、H_2O_2 3种脱色剂均可用于灵芝多糖脱色, H_2O_2效果较好,值得进一步的开发和利用。     

灵芝多糖益生菌酸奶抗衰老的研究

对D-半乳糖致衰老小鼠分别灌胃添加不同含量灵芝多糖的益生菌酸奶,测定各组处理小鼠脏器指数,血清及不同组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、过氧化氢酶(CAT)活性指标,研究添加灵芝多糖的益生菌酸奶对D-半乳糖致衰老小鼠抗衰老作用的效果。结果表明:添加灵芝多糖的益生菌酸奶可显著提高衰老模型小鼠血清及不同组织中SOD、CAT、GSH-PX活性、降低MDA含量(P0.05),且以高剂量组[1 200 mg/(kg·d)]效果最优。与衰老模型组相比,高剂量组[1 200 mg/(kg·d)]小鼠血清、肝脏、脑组织中SOD活力依次提高20.34%、8.39%、48.95%;小鼠血清、肝脏中GSH-PX活力依次提高38.45%、39.67%;小鼠血清、肝脏、脑组织中MDA含量分别降低38.37%、43.97%、38.39%;小鼠脑组织、肝脏、肾脏中CAT活力依次提高60.02%、55.29%、37.73%。与酸奶组相比,高剂量组小鼠SOD活力依次提高18.36%、1.58%、25.13%;GSH-PX活力依次提高38.45%、30.26%;MDA含量分别降低10.47%、30.96%、18.91%;CAT活力依次提高41.31%、32.07%、26.64%。结论:灵芝多糖添加入植物乳杆菌益生发酵酸奶可发挥灵芝多糖和益生菌酸奶在抗衰老功能方面的协同作用发挥更强抗衰老效果。     

灵芝复合剂乙酸乙酯提取物的化学组成及其抗肿瘤活性

该文研究了灵芝复合剂乙酸乙酯提取物（Ganoderma lucidum Complex Ethyl Acetate Extract,GCE）的化学组成及抗肿瘤活性。GCE由灵芝、菟丝子、五味子、党参（质量比50.3:25.2:15.7:8.8）组成复合剂后再经乙酸乙酯萃取所得。试验采用超高压液相色谱飞行时间质谱联用仪（UPLC-Q-TOF-MS）分析其物质组成;设空白组、模型组、阳性对照组、GCE低、中、高剂量组。检测其抑瘤率,脏器指数,脾淋巴细胞增殖能力,血清细胞因子。结果表明：GCE主要由11种化合物组成：L-焦谷氨酸、DL-亮氨酸腺苷、D-赤酮酸内酯、L-正亮氨酸、邻苯三酚、2-羟基-3-甲基吡喃-4-酮、绿原酸、3-（3,4,5-三甲氧基苯基）丙酸、槲皮素、五味子素;GCE低、中、高剂量组（50、100、200 mg/kg）H22荷瘤小鼠的抑瘤率分别为35.14%、38.25%、50.87%;与模型组相比,GCE低、中、高剂量均能显著促进小鼠脾淋巴细胞的增殖（P<0.01）;GCE高剂量能显著促进小鼠的IL-6、TNF-α和IL-12分泌（P<0.05）。结论,GCE对H22荷瘤小鼠肿瘤有一定抑制作用,该研究结果可为抗肿瘤功能的产品研发提供新思路。     

两种灵芝多糖对小鼠免疫功能增强作用研

研究两种不同工艺提取的灵芝多糖-超声提取多糖(UCP)和碱提多糖(ACP)对小鼠免疫功能的增强作用。实验小鼠分别按低、中、高剂量胃饲两种灵芝多糖提取物,测试其对小鼠免疫功能的影响(小鼠碳廓清实验、迟发性变态反应、血清溶血素测定、NK细胞活性实验)。结果表明,各剂量组的UCP和ACP血清溶血素含量,ACP各剂量和UCP高剂量组的小鼠迟发型变态反应(DTH),高剂量组的ACP小鼠碳廓清能力,高剂量组UCP和ACP中、高剂量的小鼠NK细胞活性,UCP低剂量组的小鼠胸腺指数,与对照组比较均有显著性差异(p<0.05)。说明两种灵芝多糖均能提高小鼠的免疫功能,ACP的作用优于UCP,且灵芝多糖对小鼠免疫功能的增强作用并不是剂量越大越好,而是存在最适剂量。     

脉冲超声辅助提取灵芝多糖的试验研究

以灵芝饮片为原料,用脉冲超声辅助提取灵芝多糖,由单因素试验和正交试验确定的最佳提取工艺参数为超声功率1500W、液料初始温度80℃、提取时间90min、液料比50︰1mL/g、脉冲超声间歇时间1s、工作时间3s。在此条件下,灵芝多糖的提取率为3.39%。与传统水提法相比,在液料初始温度和液料比取值相当的情况下,用脉冲超声辅助提取,多糖的提取率提高了26.02%,提取时间缩短了50%。     

灵芝发酵液多糖抑菌作用研究

通过水提醇沉法提取得到灵芝发酵液粗多糖,以6种常见食品有害菌为供试菌,研究灵芝发酵液粗多糖对其抑制作用.结果表明,灵芝发酵液粗多糖对金黄色葡萄球菌有很强的抑制作用,最小抑菌浓度(MIC)为6.25 mg/mL:对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、乙型副伤寒沙门氏菌的抑制作用较强,其MIC均为50mg/mL;对酿酒酵母菌的抑制作用较弱,MIC为100mg/mL;对黑曲霉几乎没有抑制作用,只在高浓度下才显示出抑制作用.     

灵芝多糖提取工艺优化及抗氧化活性的研究

目的研究灵芝多糖(Ganoderma lucidum polysaccharides,GLP)的最优提取工艺,并研究其抗氧化活性。方法通过单因素和响应面法优化提取工艺参数,获得GLP;将GLP进行乙醇分级得到GLP30、GLP60和GLP80 3个组分;采用还原力、DPPH自由基清除试验和羟自由基清除试验评估GLP及3个组分的抗氧化活性。结果灵芝多糖最优提取条件为:温度86°C,液料比50:1(mL/g),时间142min,实际提取得率为1.71%;抗氧化活性试验结果表明:GLP及GLP30、GLP60和GLP80均具有一定的抗氧化活性,均呈现浓度-活性依赖性,其中GLP80还原力最强,GLP清除DPPH自由基和羟自由基的能力最强。结论响应面法有效优化了GLP的提取,灵芝多糖具有较好的抗氧化活性,值得进一步研究及开发利用。     

利用大孔树脂对低分子量灵芝多糖脱色研究

比较了7种树脂对低分子量灵芝多糖脱色的效果,从中筛选出D354-FD、AB-8和HPD400 3种树脂,并通过单因素实验和正交实验对脱色条件进行优化,结果表明:采用AB-8树脂,在pH=4.0,温度60℃时,对低分子量灵芝多糖脱色率可达到87.38%,多糖保留率为89.24%,蛋白质去除率为77.11%.