烘干温度对铁皮石斛叶多糖抗氧化活性影响的研究

本论文主要探讨不同烘干温度对铁皮石斛叶多糖得率和抗氧化活性的影响。结果表明:不同实验温度下,40℃烘箱烘干后铁皮石斛叶多糖得率最高,达到26.93%且抗氧化能力最强。该条件下多糖提取液浓度为2.5 mg/mL时,对羟自由基消除率、超氧自由基消除率、DPPH自由基消除率分别为48.9%、21.9%、35.9%。说明烘干温度会显著影响铁皮石斛叶多糖的得率和抗氧化活性,随着烘干温度的升高,多糖的得率和抗氧化活性均会随之降低。研究结果可为铁皮石斛叶进一步开发利用提供参考依据。     

铁皮石斛不同部位多糖含量及其抗氧化活性研究

目的测定铁皮石斛茎、叶、花中多糖含量,并对多糖的体外抗氧化活性进行比较,为更充分地开发利用铁皮石斛资源提供实验依据。方法采用苯酚-硫酸法测定铁皮石斛不同部位多糖含量,分别采用DPPH自由基清除法、羟基自由基清除法和超氧阴离子清除法测定铁皮石斛不同部位多糖的体外抗氧化活性。结果铁皮石斛茎、叶、花中多糖含量分别为34.61%,23.51%,13.47%。茎多糖对DPPH自由基的清除率最高,达87.41%;叶中多糖对羟基自由基的清除率最高,达85.39%;茎、叶、花中多糖对超氧阴离子的清除率均不高。结论铁皮石斛茎、叶、花多糖含量丰富,其多糖有良好的抗氧化活性,具有一定的开发价值。     

铁皮石斛多糖提取及抗氧化活性研究

从铁皮石斛中提取多糖。以铁皮石斛多糖提取得率为评价指标,在单因素试验的基础上通过正交试验优化提取条件,得到最佳提取条件:提取时间2h,料液比1∶80,提取温度80℃,提取次数3次。此条件下铁皮石斛多糖提取得率为19.01%±0.49%。通过测定铁皮石斛多糖对1,1-二苯基-2-苦肼基(DPPH)、超氧阴离子自由基(O~(2-))和羟基自由基(-OH)的清除能力及铁皮石斛多糖对三价铁的还原能力,对铁皮石斛多糖进行抗氧化活性研究。结果表明,铁皮石斛多糖对三种自由基均有较高的清除能力,且清除能力随多糖浓度的增加而增大,在多糖浓度为3mg/mL时,自由基清除率分别达到38.83%、56.25%、56.58%。同时铁皮石斛多糖具有较高的还原能力。铁皮石斛多糖具有较强的抗氧化活性。     

超高压提取铁皮石斛多糖工艺优化及其抗氧化活性分析

目的:优化超高压提取铁皮石斛多糖工艺条件,并分析其基本性质及体外抗氧化活性。方法:以铁皮石斛干粉为原料,优化超高压技术提取铁皮石斛多糖工艺条件,分析传统热水浸提法、超高压法两种提取方法下的铁皮石斛多糖的相对分子量与单糖组成,并比较其体外抗氧化活性。结果:超高压提取铁皮石斛多糖的最佳工艺条件为超高压压力200 MPa,料液比1:25 (g/mL),保压时间5 min,此时铁皮石斛多糖得率为33.3%,比传统热水浸提法提高了128%,且超高压法提取的多糖蛋白含量和相对分子量下降,甘露糖含量提高,对DPPH自由基的清除能力提高。结论:超高压提取的铁皮石斛多糖得率高,体外抗氧化活性较好。     

石斛多糖体外抗氧化活性的研究

本实验利用对邻苯三酚自氧化体系产生的超氧阴离子自由基(O2·)的清除作用、Fenton反应检测对羟基自由基(·OH)的清除作用以及对烷基自由基引发的亚油酸氧化体系的抑制作用,对霍山石斛和铁皮石斛多糖抗氧化活性能进行了研究。结果表明,两种多糖对超氧阴离子自由基和羟基自由基具有不同程度的清除作用,同时对烷基自由基引发的亚油酸氧化体系也有显著的抑制作用。研究还发现霍山石斛多糖的抗氧化能力显著强于铁皮石斛多糖。     

铁皮石斛茎、叶、花功能性成分、抗氧化活性及其相关性

目的：探索铁皮石斛茎、叶、花主要功能性成分的差异性、抗氧化能力大小及抗氧化活性的主要贡献成分。方法：以铁皮石斛茎、叶、花为试验材料,分别采用苯酚—硫酸法、NaNO₂-Al₃+NaOH法、福林酚法和酸性染料比色法对其多糖、总黄酮、总多酚和总生物碱含量进行测定比较,研究茎、叶、花的抗氧化能力,并通过相关性分析确定其主要抗氧化活性成分。结果：铁皮石斛茎、叶、花中均含有多糖、黄酮、多酚和生物碱类成分,但含量差异极显著（P<0.01）,其中多糖含量为茎（31.00%）＞叶（15.04%）＞花（8.11%）;总黄酮和总多酚含量均以花中最高,分别为2.133%和15.71%,叶中次之;总生物碱含量以花中最高,达0.022 3%,为茎中的近4倍;铁皮石斛茎、叶、花均具有较高抗氧化活性,且随着浓度的增大,其对DPPH自由基和ABTS自由基的清除能力逐渐增强,其中花的水提物和醇提物清除DPPH自由基和ABTS自由基的IC₅₀均最小,说明其氧化活性最大,较接近于维生素C的。相关性分析发现,铁皮石斛茎、叶、花抗氧化活性与总黄酮、总多酚和总生物碱含量呈正相关,与多糖含量无明显相关性,说明总黄酮和总多酚含量对铁皮石斛茎、叶、花的抗氧化活性贡献最大,总生物碱含量的贡献显著。结论：铁皮石斛叶和花同样具有广阔的应用价值和开发前景。     

铁皮石斛花化学成分及抗氧化活性研究

通过HPLC-MS/MSQQQ液相色谱串联质谱联合仪检测分析了铁皮石斛花中的氨基酸组成,并分别采用苯酚硫酸法、NaNO2-Al(NO3)3-NaOH显色体系、Folin-Cioealteau显色法测定铁皮石斛茎和花的多糖、总黄酮、总酚含量;结合清除DPPH自由基能力、还原力评价铁皮石斛花的抗氧化作用,并与铁皮石斛的茎条进行比较。研究结果表明:铁皮石斛花的氨基酸中主要以精氨酸为主、其次为脯氨酸;铁皮石斛茎条的多糖含量高于铁皮石斛花,而铁皮石斛花的总酚和总黄酮高于铁皮石斛茎;铁皮石斛花的还原力强于铁皮石斛茎。铁皮石斛花有广阔的开发前景。     

铁皮石斛多糖复合酶法提取工艺及其抗氧化性

探讨复合酶法提取铁皮石斛多糖的最佳工艺以及酶解多糖的抗氧化活性。利用单因素及L₁₈(3⁷)正交实验研究了酶配比、酶浓度、酶解温度、酶解时间、料液比及pH对多糖得率的影响,并通过清除DPPH、ABTS自由基研究酶解多糖的抗氧化活性。结果显示酶解最优条件:中性蛋白酶与纤维素酶比例为2:1,酶浓度为10%,料液比为1:120,酶解温度为55 ℃,pH6.0,酶解时间为3 h,在此条件下多糖得率为43.85%±1.8%;酶解多糖对DPPH、ABTS自由基的IC₅₀分别为1.331、0.467 mg/mL,说明酶解石斛多糖具有较好的抗氧化活性。     

组培铁皮石斛多糖对自由基清除作用的研究

采用水提法从组培铁皮石斛中提取出多糖,研究组培铁皮石斛中多糖对自由基的清除作用。结果表明:组培铁皮石斛中多糖具有较强的抗氧化能力,对羟基自由基、超氧阴离子自由基和1,1-二苯基-2-苦基苯肼自由基(DPPH·)均具有良好的清除作用。当多糖质量达到60μg时,其对羟基自由基清除率能达到91.4%,对超氧阴离子自由基的抑制率最高达47.08%;当多糖质量达到700μg时,对DPPH·的清除率达到51.91%。因此,组培铁皮石斛中多糖具有较强的清除自由基的作用。     

铁皮石斛低温干燥抑制其水溶性多糖的聚合反应

本研究旨在探明干燥温度对铁皮石斛中多糖分子结构和抗氧化活性的影响。分别以新鲜铁皮石斛、以及60、100和140℃热风干燥铁皮石斛为实验材料,通过提取和纯化制备水溶性石斛多糖FDOP、60 DOP、100 DOP和140 DOP,然后对石斛多糖进行分子结构分析和抗氧化活性测定。FDOP和60 DOP的还原端含量分别为1.82%、1.70%。然而,100 DOP和140 DOP的还原端含量分别降低至1.42%、1.10%。各铁皮石斛多糖主要由甘露糖和葡萄糖组成,单糖摩尔比与干燥温度之间无明显的关联。随着干燥温度的升高,石斛多糖的分子量分布曲线向大分子量方向偏移。FDOP、60 DOP、100 DOP和140 DOP中分子量103～106 u的多糖组分质量比分别为70.68%、67.70%、62.24%和58.11%。在UV光谱的280 nm处,FDOP、60 DOP、100 DOP没有吸收峰,而140 DOP有吸收峰。分子量103～106 u的多糖组分、还原端较多的铁皮石斛多糖具有较大的自由基清除能力和还原力。在铁皮石斛干燥中,60℃的温度有利于抑制多糖的聚合反应,保持多糖的抗氧化活性。本研究为石斛功能食品的生产及利用提供了技术数据和理论依据。     

不同分子量铁皮石斛多糖体外抗氧化活性研究

采用分步醇沉法对铁皮石斛总多糖(DSP)进行分离,得到乙醇终浓度为40%(DSP3)、70%(DSP2)和90%(DSP1)的多糖。进一步对4 种铁皮石斛多糖的抗氧化活性进行测定,结果显示：DSP1 对DPPH·的清除作用、总抗氧化能力、抑制H2O2 诱导红细胞氧化溶血和抑制Fe2+-VC 诱导的小鼠肝匀浆脂质过氧化作用效果最佳,DSP 和DSP3次之,DSP2 相对较弱;对·OH 的清除率大小依次为DSP ＞ DSP3 ＞ DSP1 ＞ DSP2;且不同相对分子质量的铁皮石斛多糖均可显著抑制羟基自由基介导的DNA 氧化断裂。结果提示：不同相对分子质量铁皮石斛多糖均有抗氧化作用,且抗氧化能力与其相对分子质量大小有关。     

乌红天麻干燥工艺研究

为探究干燥工艺对乌红天麻干燥品质的影响。采用45~70℃分别干燥天麻茎块和天麻片,对比研究不同温度下两种加工方法的干燥速率以及对天麻干品色泽、成分、抗氧化效果及多糖含量等品质指标的影响。结果表明天麻切片干燥效率要远高于天麻整干,天麻块和天麻片的a*、b*值及天麻素的含量均随着干燥温度的升高而增加。相同干燥条件下,天麻切片更有利于天麻素、羟基苯甲醇和多糖的释放,提升天麻片提取液的抗氧化功能（DPPH自由基清除能力、FRAP值和ABTS自由基清除能力）。天麻切片2~3 mm,70℃条件下烘干4 h为本文研究的最佳干燥工艺。     

干燥方式对铁皮石斛品质的影响

本实验研究了铁皮石斛热风干燥、微波间歇干燥和真空冷冻干燥3?种干燥方式及其工艺参数对铁皮石斛色差及主要活性成分含量的影响。结果表明：铁皮石斛热风干燥的最佳条件为90?℃干燥4?h,微波间歇干燥的最佳条件为550?W、间隔时间30?s、干燥48 min,在这两种干燥条件下,微波间歇干燥后的铁皮石斛总酚及多糖的含量明显高于热风干燥,但二者黄酮含量无明显差异,说明微波间歇干燥可以有效保留总酚及多糖类物质;真空冷冻干燥所需时间为11?h,干燥后所得铁皮石斛多糖含量较高;在最佳工艺条件下,铁皮石斛平均干燥速率和最大干燥速率均为：微波间歇干燥＞热风干燥＞真空冷冻干燥,成品色泽以真空冷冻干燥更佳。微波间歇干燥具有速率快、活性成分破坏小的优势,具有更好的推广意义。     

不同干燥方式对银耳多糖理化特性及抗氧化活性的影响

研究传统热风干燥、冷冻干燥和抽真空干燥等不同干燥方式对银耳多糖（Tremel la fuci formispolysaccharides,TFPs）的理化特性和体外还原力、清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基、羟自由基（hydroxyl free radical,•OH）和超氧阴离子自由基（superoxide free radicals,O2－•）的影响。结果表明：3 种干燥方式对TFPs均有显著影响,其中冷冻干燥处理多糖（freezing drying Tremella fuciformispolysaccharides,TFPs-F）的得率、总糖和黏度最高;3 种干燥方式对粗多糖相对分子质量分布和和抗氧化活性有一定影响;TFPs-F的还原力、清除DPPH自由基、•OH和O2－•的半抑制浓度（half-inhibitory concentration,IC50）分别为2.61、1.64、1.78、1.75 mg/mL;传统热风干燥和抽真空干燥处理多糖的还原力、清除DPPH自由基、•OH和O2－•的IC50高于低温冷冻干燥处理多糖相应的IC50。结果说明,冷冻干燥处理是获得高品质和高活性银耳多糖的较好方法。     

不同干燥方法对黄精干燥特性和品质的影响

研究微波真空干燥法、自然晒干法、微波干燥法、真空干燥法和热风干燥法5种不同干燥方法对黄精干燥曲线和黄精多糖、总酚、总皂苷、5-羧甲基糠醛含量及多糖抗氧化活性的影响。分别采用超声波辅助法提取黄精中的黄精多糖、总酚、总皂苷、5-羟甲基糠醛,并运用文献介绍的方法测定其含量。同时用FRAP和超氧阴离子自由基检测法检测黄精多糖抗氧化活性。结果表明,微波真空干燥法干燥速率最大,所用干燥时间最短,黄精干燥产品中多糖、总酚、总皂苷含量损失最少,5-羧甲基糠醛生成量较小,其干燥品中黄精多糖含量达(63.59±1.25) mg·g^-1,且其20 mg·mL^-1多糖溶液对超氧阴离子自由基的抑制率达(30.01%±1.30%)。说明微波真空干燥法更适于得到高品质的黄精干燥产品。     

干燥方式对白三叶多糖理化性质和抗氧化活性的影响

本研究采用水提法提取白三叶多糖,比较3 种干燥方式（热风干燥、冷冻干燥、真空干燥）对白三叶多糖 理化性质和抗氧化活性的影响,旨在筛选出白三叶多糖的最佳干燥方式。结果表明：冷冻干燥多糖的得率显著高于 热风干燥和真空干燥（P＜0.05）。干燥方式对多糖总糖质量分数、硫酸基质量分数和糖醛酸质量分数有显著影响 （P＜0.05）,总糖和糖醛酸质量分数由高到低的干燥产品顺序依次为：冷冻干燥＞真空干燥＞热风干燥。干燥方 式对多糖蛋白质质量分数、氨基糖质量分数、水分质量分数、pH值和相对黏度无显著影响（P＞0.05）。冷冻干燥 多糖的溶解时间显著短于热风干燥多糖和真空干燥多糖（P＜0.05）。白三叶多糖含有少量蛋白质或多肽,并且具 有三股螺旋结构。冷冻干燥多糖的还原力、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基清除活力和2,2’-联氨-双-（3-乙基苯并 噻唑啉-6-磺酸）二胺盐自由基清除活力均显著高于热风干燥和真空干燥多糖（P＜0.05）。因此,冷冻干燥是保持 白三叶多糖抗氧化活性的较好方法。     

铁皮枫斗多糖对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用

采用热水浸提方法提取铁皮枫斗多糖,研究其对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用。通过体积分数50%乙醇溶液灌胃诱导小鼠急性肝损伤,连续给药14 d后,摘眼球取动物血,采用血细胞计数仪测定红细胞（red blood cell,RBC）含量、红细胞比容（hematocrit,HCT）、红细胞平均体积（mean corpuscular volume,MCV）、白细胞（white blood cell,WBC）含量和血红蛋白（hemoglobin,HGB）质量浓度,采用试剂盒测定血清中谷丙转氨酶（aspartate transaminase,ALT）活力、谷草转氨酶（aspartate amino transferase,AST）活力及甘油三酯（triglyceride,TG）含量,取肝脏计算肝脏指数并制备肝匀浆,测定其中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活力、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）活力及TG含量,并对小鼠肝脏进行组织切片观察。结果表明：与空白对照组相比,模型组血液的RBC含量、WBC含量以及血清中的TG含量、ALT活力、AST活力,肝脏指数,肝组织的TG含量、SOD活力和GSH-Px活力具有显著性差异（P＜0.05或P＜0.01）。相对于模型组,给药（铁皮枫斗多糖）后可显著降低血液的RBC和WBC含量,血清中的TG含量,ALT活力、AST活力,肝脏指数,肝组织的TG含量（P＜0.05或P＜0.01）,提高肝组织的SOD和GSH-Px活力（P＜0.05或P＜0.01）,明显改善肝组织损伤程度。铁皮枫斗多糖对酒精诱导的小鼠急性肝损伤有明显的保护作用。     

铁皮石斛多糖化学修饰及其对免疫活性的影响

采用水提醇沉法结合冻融制备高纯度铁皮石斛多糖,并利用硫酸化、脱乙酰化及羧甲基化修饰方法对铁皮石斛多糖进行化学修饰,探讨不同方法修饰的铁皮石斛多糖对RAW264.7巨噬细胞免疫活性影响。结果表明,铁皮石斛纯多糖(purified polysaccharides of Dendrobium officinale,DOP)的中性糖含量较高,而糖醛酸及蛋白质含量则较低,分别为87.37%、3.19%和0.51%,羧甲基化及硫酸化显著降低了铁皮石斛多糖的中性糖含量。红外分析结果显示硫酸化、脱乙酰化及羧甲基化修饰衍生物均已成功制备。高性能凝胶渗透色谱法测定铁皮石斛多糖分子质量为960 k D,硫酸化及羧甲基化修饰显著增加了其分子质量。体外实验研究发现,硫酸化和脱乙酰化修饰的铁皮石斛多糖能够增强RAW264.7巨噬细胞的免疫活性,而羧甲基化修饰则表现为显著的抑制作用,表明不是所有的官能团接枝改性都可以改善铁皮石斛多糖对免疫活性的影响。