复合酶酶解条斑紫菜工艺条件及优化

条斑紫菜是一种具有很高营养价值和多种活性物质的藻类。以酶解液中游离氨基酸含量为指标,结合酶配比、酶加量、pH值、酶解温度、酶解时间等因素,确定复合酶对条斑紫菜酶解工艺,并在此基础上进行条件优化。试验结果表明,条斑紫菜酶解优化条件:复合酶配比1:3:3,复合酶加量为条斑紫菜总量的0.8%,酶解温度为45℃,酶解时间为170min,pH值为6.5。经优化后条斑紫菜酶解液中游离氨基酸含量为0.541g/100mL。     

不同干条斑紫菜和烤条斑紫菜光合色素含量分析

为探究不同干条斑紫菜和烤条斑紫菜外观颜色与光合色素含量之间的关系,以6种干条斑紫菜和5种烤条斑紫菜为对象,进行颜色指标与光合色素含量间的相关性分析。结果表明,干条斑紫菜和烤条斑紫菜各光合色素含量差异显著(P <0.05),干条斑紫菜和烤条斑紫菜中光合色素含量最多的为藻蓝蛋白、藻红蛋白、别藻蓝蛋白和叶绿素a。干条斑紫菜和烤条斑紫菜各光合色素含量之间均有不同程度的相关性(|r|=0.037～1.000,|r|=0.041～0.994),光合色素含量与颜色指标值存在相关性,但相关性不强(|r|=0.033～0.994,|r|=0.034～0.914)。通过逐步回归分析发现,光合色素含量预测值与实际值的相关系数均有不同程度提高,藻蓝蛋白含量可以很好地预测条斑紫菜总光合色素含量(P <0.01)。该研究为商业生产紫菜产品的质量评价提供参考依据。     

条斑紫菜活性肽的抗氧化作用

以条斑紫菜为原料,使用木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶水解紫菜蛋白制备活性肽,采用还原能力、清除羟自由基和二苯代苦味酰基自由基作为抗氧化性评价指标,研究紫菜活性肽的体外抗氧化活性,并测定其分子质量分布。结果表明：3种蛋白酶对紫菜蛋白具有较好的酶解效果,酶解产物具有一定的还原能力;自由基清除率和底物浓度之间具有正相关关系,木瓜蛋白酶酶解活性肽清除羟自由基活性最强,半数清除率质量浓度为0.397mg/mL;胃蛋白酶酶解活性肽清除二苯代苦味酰基自由基活性最强,半数清除率质量浓度为0.261mg/mL;经测定,具有抗氧化活性的小分子肽分子质量分布在148～1963u之间。     

条斑紫菜蛋白酶解物降血压活性

研究了以条斑紫菜为原料,采用木瓜蛋白酶制备紫菜蛋白活性寡肽,以ACE抑制率为评价指标,研究不同水解条件下酶解液的降血压活性,优化酶解工艺条件并测定酶解物的分子量。优化后的木瓜蛋白酶酶解工艺条件为pH7.5,温度50℃,底物浓度30 mg/mL,酶添加量600 U/g,在此条件下,水解4 h的酶解产物抑制活性达30%以上,ACE抑制肽的半抑制浓度IC50值为4.48 mg/mL。将制备的酶解液进行层析分析,测得具有降血压活性的紫菜蛋白酶解产物是相对分子质量小于2 000的活性肽。     

条斑紫菜提取物对大鼠高血压的改善作用

为研究条斑紫菜(Porphyra yezoensis)的抗高血压作用,用不同方式制备其提取物后灌胃给予自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)和血压正常的Wistar大鼠,监测颈总动脉血压变化情况。结果显示：条斑紫菜水提物和醇提物均无显著降压作用,而其胃蛋白酶酶解物、中性蛋白酶酶解物均具有一定程度的降压作用,且对心率及血压正常的Wistar大鼠血压无不良影响。与血管紧张素转换酶抑制剂卡托普利相比,降压作用的大小顺序为卡托普利＞中性蛋白酶酶解物＞胃蛋白酶酶解物。表明条斑紫菜蛋白经中性蛋白酶和胃蛋白酶酶解后产生的活性肽具有高血压改善作用。     

条斑紫菜活性肽的制备及其功能性质研究

采用木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶水解紫菜蛋白制备活性肽,以水解度为评价指标,优化酶水解条件;研究条斑紫菜活性肽的溶解性、乳化性与乳化稳定性、起泡性与泡沫稳定性等功能性质.结果表明,3种酶解物都具有良好的溶解性且在等电点附近不沉淀,乳化性及其稳定性不如紫菜蛋白且随着pH升高而增强,酸性条件下起泡性较好,胰蛋白酶解物起泡性最强.     

条斑紫菜中四个多糖组分的提纯及组成分析

利用离子交换柱层析和凝胶柱层析法对条斑紫菜热水提取物中的多糖进行了分离纯化,共获得四个不同的多糖组分．柱层析法测出它们的分子量分加别为2.2×105、2.0×104、1.8×105和1.5×104。采用气相色谱及化学分析等方法测出多糖各种组成成分的含量。     

条斑紫菜油脂与蛋白质组成分析

目的：分析条斑紫菜的油脂与蛋白质组成；方法与结果：采用高效液相色谱法分析条斑紫菜蛋白的组成，并采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析其相对分子量；发现其主要由EPA和DHA组成，条斑紫菜蛋白主要由相对分子量分别为38kDa和42kDa2个组分组成。     

超高压处理对条斑紫菜品质的影响

以条斑紫菜为原料,研究不同压力和保压时间的超高压处理对其微生物、色泽及质构的影响。结果表明,压力和保压时间对紫菜微生物的影响显著(P0.05):随着保压时间延长,处理压力升高,菌落总数总体呈下降趋势;保压时间超过15 min后微生物杀灭效果变化不显著;保压时间15min,压力600 MPa,菌落总数降低了2.44lg CFU/g。紫菜硬度随着处理压力的升高先下降后升高,随着保压时间的延长先升高后下降,但压力和保压时间对硬度的影响不显著(P0.05),保压时间15min,压力600 MPa时,紫菜硬度与未处理的紫菜硬度相比变化较小。处理时间对L值无显著变化(P0.05)。超高压处理条斑紫菜,处理压力600 MPa,保压时间15min时,微生物的杀灭效果较好,硬度和色泽也没有较大的变化,利于开发出新鲜高值的紫菜新产品。     

紫菜多肽降血脂及抗氧化作用的研究

为探讨紫菜多肽的血脂调节和抗氧化作用,通过动物实验,建立了高血脂大鼠模型,比较分析了紫菜多肽对高血脂大鼠体质量、肝脏系数、血脂指标及过氧化指标的影响情况。结果显示,紫菜多肽各剂量组大鼠的体质量增加幅度较高脂模型组有显著下降;血清TC、TG和LDL-C含量降低,HDL-C含量升高,综合表现为AI降低;血清中GSH-Px和SOD活性升高,MDA含量降低;肝脏组织中GSH-Px活性升高,MDA含量降低,但肝脏系数和SOD活性变化不大。研究表明,紫菜多肽能有效控制高血脂模型大鼠体质量的增加,改善血脂水平,提高抗氧化酶活力,抑制脂质过氧化反应,降低患动脉硬化疾病的风险。      

混合酶法制备紫菜蛋白降压肽

采用混料设计,研究混合酶配比,优化水解条件;HPCE法测定血管紧张素转换酶(ACE)抑制率。研究混合酶法制备紫菜蛋白降压肽的优化工艺。建立混合酶比例与降压活性的数学模型,确定最佳酶配比:Alcalase碱性蛋白酶38.1%,Neutrase中性蛋白酶31.9%,胰蛋白酶30.0%。最佳水解条件:底物质量分数5%、加酶量3%、pH 8.5、温度50℃、时间90 min。混合酶较单一酶制备降压肽的ACE抑制率提高了44.33%～86.45%。     

酶法水解紫菜蛋白动力学研究

为阐明酶法水解紫菜蛋白的动力学特性,研究了酶解时间、初始pH值、温度、酶浓度、底物浓度对紫菜蛋白水解度的影响,建立紫菜蛋白水解动力学方程.结果表明:酶解温度50℃、初始pH 9.0为最适水解条件.紫菜蛋白的水解度随着酶浓度的升高而增强,随底物浓度的增加而减弱.在此条件下,碱性蛋白酶水解紫菜蛋白的动力学方程:X=3.597ln[1+(82.788E0/S0-3.058)t],总水解速率方程:am=297.8×(E0-11S0/297.8)×exp(-0.278x),为合理确定酶解反应实验的各种参数提供理论依据.     

条斑紫菜多糖对人肝癌Bel7402抗肿瘤作用的初步研究

目的：研究条斑紫菜多糖对人肝癌Bel7402体外抗肿瘤作用。方法：采用MTT法观察条斑紫菜多糖体外对肝癌Bel7402的增殖抑制作用;荧光显微镜观察不同浓度条斑紫菜多糖诱导Bel7402细胞凋亡作用情况,RT—PCR检测survivin、Bax基因表达量的变化。结果：条斑紫菜多糖对人肝癌Bel7402细胞有显著地增殖抑制作用,能诱导Bel7402细胞凋亡,并且能上调Bax、降低Survivin表达。结论：条斑紫菜多糖体外有一定的抗肿瘤作用,并能促进BelZ402~wJ＆凋亡．其机制可能与激活Bax、抑制Survivin表达有关。     

响应面法优化坛紫菜抗氧化肽酶法制备工艺

以坛紫菜为原料,通过酸性蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶和纤维素酶酶解制备活性肽,以DPPH自由基清除率和多肽得率为评价指标,研究坛紫菜水解肽的抗氧化能力。结果表明:5种酶的酶解产物都具有抗氧化能力,中性蛋白酶酶解产物DPPH自由基清除率最高,选择它为最佳工具酶。通过单因素和响应面试验优化酶解工艺,得到最佳酶解工艺:酶解时间3.6 h、酶解温度47℃、酶用量16362 U/g、底物浓度3.0%、pH7.0。此条件下制备得到的水解肽具有较强抗氧化能力,DPPH自由基清除率可达(91.83±0.81)%。     

微波辅助提取条斑紫菜多糖及其抗氧化性研究

采用微波辅助提取技术,研究微波功率、处理时间及料液比对条斑紫菜多糖提取率的影响。在单因素试验的基础上,通过正交试验确定最佳提取工艺条件为微波功率180W、微波提取时间8min、料液比为1∶40,在此条件下,条斑紫菜多糖提取率为5.358%。用提取的条斑紫菜多糖作抗氧化剂,在25℃、37℃和60℃的条件下,分别用0.05%和0.10%的条斑紫菜多糖以及0.20%的VC进行抗氧化试验,结果表明,条斑紫菜多糖具有很强的抗氧化活性。     

冲泡过程对条斑紫菜多糖溶出的影响及其动力学研究

基于Fick第二定律,对颗粒状和片状条斑紫菜冲泡过程中多糖的溶出进行动力学分析。测定条斑紫菜冲泡液中多糖溶出随冲泡水温及时间的变化,建立颗粒状和片状条斑紫菜冲泡过程的多糖溶出动力学模型。结果表明在整个冲泡过程中,颗粒状紫菜中多糖溶出率均大于片状紫菜。对于颗粒状紫菜,冲泡水温的影响大于冲泡时间,以363.15 K(90℃)热水或373.15 K(100℃)沸水冲泡20 min,其多糖溶出率达到62.07%和64.05%。实验数据与动力学模型计算值吻合良好(R>0.933);紫菜多糖溶出表观速率常数和扩散系数均随冲泡温度的升高而增加;颗粒状和片状紫菜多糖溶出过程的活化能分别为5.984、1.406 k J/mol;多糖溶出相对萃余率符合指数模型。该动力学模型可为条班紫菜多糖最佳冲泡方式奠定理论基础。