烟草液泡前体的分离与超微结构研究

从含有液泡前体荧光标记物的烟草转基因细胞系中分离纯化液泡前体.用荧光共聚焦显微镜跟踪观察纯化过程,明显观察到荧光信号的逐渐增强.纯化后的组分经负染后直接用电子显微镜观察,可见大小形态均一的细胞器,经脱水包埋超薄切片处理后在电子显微镜下可见多小泡体结构的细胞器,该细胞器可被液泡前体的特异标记物VSR标记.荧光信号的逐渐增强和液泡前体特异标记物的标记结果证明,所分离得到的多小泡体是液泡前体.     

烟草细胞悬浮培养生产CoQ10的条件研究

采用细胞悬浮培养的方法,以烟草(NicotianatobacumL)细胞为材料,研究了不同温度、不同pH值、愈伤组织不同接种年龄和接种量对烟草细胞生长和CoQ10形成的影响.结果表明,在16～32℃间细胞能生长形成CoQ10,但在16～28℃范围内,细胞生物量随温度升高递增;在24～32℃范围内,CoQ10含量随温度上升而下降.在pH值为5～7 5条件下细胞能生长和形成CoQ10,当pH值为5 8时细胞干重和CoQ10含量最大.悬浮培养接种的"种子"年龄为7d左右时细胞干重及CoQ10含量均最大;接种量与培养基的质量分数比为1∶7 5时,较适合细胞生长和CoQ10的合成.     

逆境诱导烟草悬浮细胞内处理小体的形成

指出处理小体( processing body,P-body)在真核细胞基因表达调节过程中,特别是在逆境条件下,能为mRNA在细胞质内转运提供储存和降解场所.研究通过农杆菌转化法成功将含有处理小体荧光标记物-脱帽酶1( decapping enzyme,DCP1)与青色荧光蛋白(cyan fluorescent protein,CFP)融合蛋白基因的植物表达载体转入烟草悬浮细胞.利用激光共聚焦显微镜观察到在高温和盐胁迫下,处理小体的数量和体积都有增加.通过蔗糖密度梯度离心分析逆境条件下多核糖体的变化,发现在高温和盐胁迫下,多核糖体解体,呈现翻译抑制特征.