一种苗期鉴定烟草赤星病抗性的新方法

烟草赤星病抗性的高通量鉴定是快速筛选和培育烟草抗赤星病品种的前提条件。以15份对赤星病表现不同抗性水平的烟草种质为材料,采用链格孢菌菌饼接种苗期离体叶片,以发病叶片病斑面积作为抗性评价指标,对15份烟草种质的抗性进行评价,并与其田间成株期赤星病抗性进行比较分析。结果表明,采用苗期菌饼接种,供试15份烟草种质的病斑面积差异显著,感病品种病斑平均面积明显大于抗病品种;各品种苗期赤星病鉴定结果与成株期抗性鉴定结果基本一致,且苗期病斑面积大小与3个不同年份、同一地点的成株期平均病级指数间相关性均达到显著水平,分别为0.78、0.74和0.66。表明本研究探讨的苗期离体叶片菌饼鉴定法可以用于烟草赤星病早期鉴定,病斑面积可以作为评价指标准确反映不同烟草品种间赤星病的抗性差异。     

利用花药培养系统选育烟草抗赤星病品系

在接种有烟草赤星病菌的双层培养基上及含赤星病菌毒素的选择培养基上，获得了烟草推广品种ＮＣ８９的花药培养苗。温室内采用离体叶片法对这些花培苗进行了赤星病抗性鉴定，结果约１８％－４２．９％的植株抗性较对照ＮＣ８９有所提高。选其中４株抗性较高且农艺性状与对照ＮＣ８９相近的单株经秋水仙素加倍后收获了种子，然后于１９９２、１９９３年分别在赤星病病圃及大田条件下对其Ｒ—１代、Ｒ—２代植株进行了赤星病抗性及农艺性状测试。两年试验结果一致表明：在染色体加倍以后，所选植株的后代在基因型上已完全纯合，赤星病抗性较对照ＮＣ８９有较大提高，农艺性状也有所改善，而且均稳定遗传，是不同于原ＮＣ８９的烟草新品系。其中两个品系对赤星病的田间相对防效分别达５７．８％和５３．４％，且农艺性状优异，在生产上具有广泛应用前景。     

利用双层培养基筛选烟草抗赤星病突变体

在接种有赤星病菌(Alternaria alternata)的双层培养基上,成功地从高感赤星病烟草品种 NC89的花药中诱导出突变体苗,对这些突变体苗进行了离体抗病性鉴定,结果表明:其中70％的植株不同程度地表现赤星病抗性,部分表现高度抗性。     

烟草靶斑病(Thanatephorus cucumeris)侵染特性研究

采用室内离体叶片针刺接种的方法对烟草靶斑病菌(Thanatephorus cucumeris(Frank)Donk(anamorph Rhizoctonia solani kühn))侵染特性进行了研究。结果表明:病菌可侵染烟草幼苗茎基部引起立枯病的症状,也可在成株期侵染烟株近土表的茎基部引起椭圆形凹陷斑,又称之茎基腐症;病菌易侵染烟草各个生长期的叶片引起靶斑症状,也可侵染主脉及侧脉引起凹陷斑。光镜下观察病菌在接种6h即可侵入烟草叶片组织,接种24～48h菌丝迅速在细胞间和细胞内扩展,最终导致细胞死亡;病菌适宜的侵染温度为25℃～30℃,高湿及连续黑暗都有利于病菌侵染。     

云南玉溪烟区烟草黑胫病菌的生理小种鉴定及其致病性分析

为明确云南玉溪烟区烟草黑胫病菌生理小种的类别及对主栽品种的致病性，以来源于玉溪市新平县和澄江市的172株烟草疫霉菌为材料，采用TTC法及活体植株接种法明确其生理小种的归属和组群分布，以不同生理小种的烟草疫霉菌株为接种体，研究生理小种鉴定接种技术并验证其可靠性。结果表明，TTC平板上呈现红色的供试烟草疫霉菌株均属于0号或1号生理小种；活体植株接种显示，0号和1号生理小种有149株和12株，分别占比86.63%和6.98%；无致病力及未鉴定出小种归属的菌株分别有2株和9株，分别占比1.16%和5.23%。表明新平县和澄江市烟草黑胫病菌以0号生理小种为主。致病性测定显示，170个菌株对主栽品种KRK26、云烟87和K326均有较强致病力。此外，寄主离体叶片与茎秆轻微致伤后，对烟草黑胫病菌生理小种的抗感反应与活体植株注射接种结果一致，具有同等的鉴别力。说明离体材料致伤接种的方法可用于区分不同烟草品种对黑胫病的抗感性。     

烟草镰刀菌根腐病抗性鉴定方法研究

为获得不同烟草品种镰刀菌根腐病抗性的鉴定方法，采用镰刀菌粗毒素幼芽接种、孢子悬浮液培养、带菌菌谷接种、离体叶片菌饼接种、草酸局部注射等5种方法对4个品种（小黄金1025、中烟100、长脖黄、664-01）的镰刀菌抗病性进行了研究。结果表明，镰刀菌毒素液胁迫法可以鉴定品种的抗感程度，适宜体系毒素浓度为8%，处理时间6d；镰刀菌孢子悬浮液接种法可以鉴定品种的抗感程度，适宜体系孢子液浓度为107个/mL，处理时间4 d；带菌菌谷接种也可以鉴定品种的抗感程度，适宜体系菌谷比例为20%，处理时间9 d；离体叶片用菌饼和草酸液处理，能区分品种的抗感性，但不能区分品种的抗感程度。研究结果认为孢子悬浮液接种法和带菌菌谷接种与其他3种方法相比可以准确评价品种对镰刀菌根腐病的抗感性。     

烟草对黑颈病的抗性的新鉴定法

前言烟草对黑胫病(Phytophthoraparasitica var.nicotianae)的抗性的鉴定方法,大致分为大田病圃自然鉴定与人工接种鉴定,目前日本几乎都采用人工接种鉴定法。人工接种鉴定有根部接种法(Apple,Trout-man 等,Litton 等)和叶片接种法(鱼住,Wills 和 Crews,Wills,大部),现在在抗性鉴定和选择上广泛利用的是Apple 的铝盘鉴定法(大桥、金泽)。但是人工接种鉴定比自然鉴定的结果常有发病过高的趋势,有时观察到抗病品种感病过重。其原因是受     

恩施烟区烤烟黑胫病菌致病力测定及抗性品种差异鉴定

为有效进行恩施烟区烟草黑胫病的防控,本研究采用菌丝块茎基部创伤接种法鉴定了恩施烟区烟草黑胫病菌的致病力。根据黑胫病菌菌株接种K326、红花大金元、云烟202后的AUDPC （病害流行曲线下面积）数值进行了聚类分析,将恩施烟区烟草黑胫病菌划分为I、Ⅱ、Ⅲ 3种致病型。3种致病型病原菌没有表现出典型的强、中、弱致病特性。7个抗性烟草品种对不同致病型黑胫病菌表现出抗性差异,革新3号对3种致病型菌株均表现出较好的抗性。     

Nicotiana tabacum-N. plumbaginifolia杂种回交后代中筛选抗黑胫病异源染色体植株初报

为从Nicotiana tabacum-N.plumbaginifolia杂种(2n=58)回交N.tabacum的后代中筛选对黑胫病具有较强抗性的植株,利用离体叶片侵染法对存活的120株后代植株进行了初步筛选。筛选分为两次,第1次为初选,对第1次接种后不发病和发病较轻的植株第2次接种进行复选,对经第2次接种后叶片不发病和发病较轻的植株进行基因组原位杂交(GISH)分析。结果显示:第1次接种后5株植株的叶片不发病和8株植株的叶片发病较轻;第2次接种后4株植株的叶片不发病,1株植株的叶片发病较轻。GISH鉴定结果显示:第2次接种后4株叶片不发病的植株携带1-4条N.plumbaginifolia染色体,叶片发病较轻植株则未见N.plumbaginifolia染色体,携带1条外源染色体植株的染色体数目为48。对这5株材料的离体叶片接种病原菌以对其离体叶片的黑胫病抗性进行再次鉴定,结果与复选时所得结果相近。综上所述,自Nicotiana tabacum-N.plumbaginifolia杂种回交一代(BC1)中筛选获得了4株叶片对黑胫病具有较强抗性的异源染色体植株,其中一株可能为异源单体代换植株。     

烟草种子带菌分析及种子处理

经分离、接种证实，烟草种子上带有烟草赤星病菌Ａｌｔｅｒｎａｒｉａａｌｔｅｒｎａｔａ、烟草野火病菌Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｙｒｉｎｇａｅｐｖ．ｔａｂａｃｉ；带菌率随品种和发病程度而异。赤星病菌一般为１８％左右，野火病菌为８％～１６％；此外，种子上还有镰刀菌Ｆｕｓａｒｉｕｍｓｐｐ．和一些杂菌。赤星病菌和野火病菌不仅种子表面带有，而且种皮内部和胚乳也带有，胚则无菌。对带有这两种病菌的种子进行处理，以温汤浸种５０℃１０分钟、５０℃１５分钟和５２℃１０分钟对赤星病和野火病菌的灭菌效果最好；链霉素浸种对烟草野火菌也有很好的灭菌作用。５０℃、５２℃温汤浸种及链霉素浸种对烟草种子发芽率均没有明显的影响。     

温度、湿度、接菌量及pH对烟草青枯病菌致病力的影响

烟草青枯病菌是土传病原细菌,其致病力易受多种因素影响。采用穿刺法接种离体叶片,系统性地研究了温度、湿度、接菌量和pH对烟草青枯病菌致病力的影响。试验范围内青枯病菌可致病的病原菌数量为1.3~1.3×108 cfu,1.3×108 cfu病斑面积最大;致病的温度范围为20~35℃,最适为30~35℃,病害潜伏期随着温度升高而变短;40%~100%的相对湿度范围内均可发病;致病pH范围为5.0~8.0,最适发病pH为6.0。影响青枯病菌致病力的关键因子为温度和pH,湿度不是青枯病发生的关键因素,结果为研究烟草青枯病发生机制提供了科学依据。     

一种快速有效鉴定烟草苗期青枯病抗性的水培接种法

为探寻一种快速有效的烟草青枯病苗期抗性鉴定方法，以红花大金元、青梗、长脖黄和D101等4个烟草品种为材料，在水培条件下采用伤根和不伤根法进行青枯菌侵染接种，依据病情指数进行抗病性鉴定。结果显示，水培条件下采用伤根和不伤根接种法，接种后7～10 d便可判断出各品种的抗性，结果为D101中抗、长脖黄高感、红花大金元高感或感病、青梗感病，与传统盆栽伤根灌菌接种法的评价结果基本一致，而盆栽伤根灌菌接种法则需3～4周。本研究建立的水培接种法可快速、高效准确鉴定和评价烟草苗期青枯病抗性。     

云南省烟草赤星病菌致病力分化及生物防治研究

从省内烟草种植区分离到烟草赤星病菌39株,利用离体叶片悬滴法,在感病品种RG17上进行致病力分化测定。结果表明,上述病菌的致病力按照病情指数可分为4种类型：即强、中、弱、不致病。从上述代表不同致病力的菌株中选取7株菌,采用对峙法与18株木霉菌对峙培养,从中筛选出一株对赤星病菌具极强拮抗作用的菌株TV-1。TV-1与赤星病菌的孢子混和液在PDA平板上的孢子萌发试验表明,TV-1不能抑制病菌孢子的萌发但能抑制其芽管的伸长。用TV-1制成的菌剂进行离体叶片、烟草苗期、大田期防效测定。结果表明：该菌剂为10^5个／mL时,具有抑制离体叶片病斑扩展的作用;浓度达10^7个／mL时,可明显防止病斑出现;同时它还能促进烟苗生长,其中苗期施用量,TV-1菌剂：营养土=1：15,促生效果显;苗期防猝倒病与对照相比防效达86．5％;大田营养袋亩施颗粒剂31kg、62kg,叶面喷施孢子液剂10^4个／mL4次,与对照相比对赤星病的防效分别高达60．57％、70．53％。     

黑龙江省烟草野火病菌生理小种鉴别寄主的筛选

为明确黑龙江省烟草野火病菌生理小种的分化情况,采用针刺接种法,将黑龙江省主要烟区采集的15个烟草野火病菌菌株接种到28个供试烟草品种上,通过对发病率的差异性分析和聚类分析来测定供试烟草品种的抗性表现,从而建立了一套鉴定烟草野火病菌生理小种的鉴别寄主体系,并将15个供试菌株划分为Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ4个生理小种.     

烟草品种对低头黑病的抗病性鉴定

室内采用孢子悬浮液和病菌毒素滤液浸根法及盆栽烟株幼茎刺伤菌块接种法测定了２７个烟草品种和品系对低头黑病的苗期抗病性。自然重病地鉴定了６个生产推广品种的成株期抗病性。结果表明：烟草品种对低头黑病的抗病性有明显差异，苗期抗病性与田间成株期抗病性反应一致。筛选鉴定出中烟１４和Ｇ－８０两个抗病品种。比较了几种接种方法，证明病菌毒素滤液浸根法测定品种抗病性优于其它方法。苗期抗性测定可用作初筛，选出抗病和中抗     

烟草赤星病抗性因素遗传的双列分析

对烟草赤星病两个抗性因素遗传的1／2＊7(7+1)双列杂交分析表明,病斑数量和病斑大小的遗传都符合加性-显性模型。病斑数量的遗传属部分显性类型,显性基因主要表现为减效;病斑大小的遗传属完全显性类型,显性基因为增效基因。1996、1997两年的田间试验结果和苗期离体叶片接种的结果基本一致。烟草对赤星病病菌侵入的抗性较抗病斑扩展的能力更容易通过品种间杂交传递给后代。配合力分析表明,一些组合具有较好的抗侵入特殊配合力,另一些组合具有良好的抗扩展特殊配合力。抗×感组合Beinhart1000-1×NC82两个抗性因素特殊配合力均较好,在抗病育种中有较高的利用价值。     

烟草品种对低头黑病的抗病性鉴定

室内采用孢子悬浮液和病菌毒素滤液浸根法及盆栽烟株幼茎刺伤菌块接种法测定了27个烟草品种和品系对低头黑病的苗期抗病性。自然重病地鉴定了6个生产推广品种的成株期抗病性。结果表明：烟草品种对低头黑病的抗病性有明显差异，苗期抗病性与田间成株期抗病性反应一致。筛选鉴定出中烟14和G─80两个抗病品种。比较了几种接种方法，证明病菌毒素滤液浸根法测定品种抗病性优于其它方法。苗期抗性测定可用作初筛，选出抗病和中抗品种（系），再进一步进行田间成株期抗病性的鉴定。     

延边烟区烟草菌核病病原菌鉴定及抗性种质筛选

为防控延边烟区烟草菌核病提供基础资料和理论依据,开展了病原菌鉴定及抗性种质材料筛选研究。将收集的病原菌核采用常规方法进行分离、纯化,经致病性测定、形态学特征观察、rDNA-ITS测序比对及基于rDNA-ITS序列的系统发育分析,鉴定病原菌种类;并采用离体叶片法、活体叶片法对61份种质材料进行抗性筛选。结果表明：（1）经形态学、分子生物学方法鉴定该病原菌为核盘菌[Sclerotinia sclerotiorum（Lib.）de Bary]。（2）两种方法筛选出31份高感材料、6份中感材料、15份抗病材料,鉴定结果一致率为85.25%,未筛选到免疫和高抗种质材料。延边烟区烟草菌核病病原菌为核盘菌,离体叶片法、活体叶片法可用于苗期烟草种质材料对菌核病抗性筛选。     

烟草低头黑病菌毒素钝化物的初步研究

研究了10种化合物4个浓度对烟草低头黑病菌(Colletotrichum capsici f.nicotianae)毒素的钝化作用。结果表明，高锰酸钾、氢氧化钠和碳酸氢钠对毒素具有很强的钝化作用。高锰酸钾在离体叶片上的相对防效为100％；各浓度的氢氧化钠和碳酸氢钠均对烟草低头黑病菌菌丝生长和分生孢子萌发具有一定的抑制作用。高锰酸钾并不抑制菌丝生长。     

向日葵品种资源对菌核病抗性室内鉴定

利用两种不同的培养基培养核盘菌,用离体叶片接种方法对40个不同向日葵品种进行室内抗性鉴定,结果表明：在Minimal medium培养基上生长的核盘菌和PDA培养基相比,菌丝的生长速度大大降低。菌株经PDA培养基培养接种向日葵叶片后,不同向日葵品种之间抗性水平没有显著差异;而用Minimal medium培养基培养的菌株接种供试的向日葵不同品种叶片后,品种间表现出一定的抗性水平差异。依据接种后不同品种抗性水平的差异将供试向日葵品种划分为三组,即：抗病品种如食葵765、油葵KS7等,共3份;耐病品种如3146、新葵杂5号等,共9份;感病品种如LD1093、新葵杂6号等,共28份。