穿心莲内酯抗炎及抗肿瘤作用的研究进展

穿心莲内酯是爵床科穿心莲属植物穿心莲(Andrographis paniculata)提取物的主要有效成分之一,为双萜内酯类化合物.本文将穿心莲内酯的抗炎与抗肿瘤分子机制的研究进展作一综述.     

沙葱总黄酮水洗组分的体外抗炎活性

本实验在体外应用脂多糖（lipopolysaccharides,LPS）诱导小鼠腹腔巨噬细胞建立炎症模型的基础上,探讨沙葱总黄酮水洗组分的体外抗炎活性。应用CCK-8法检测0、50、100、200、400、800 μg/mL沙葱总黄酮水洗组分对小鼠腹腔巨噬细胞增殖活力的影响;将细胞分为空白对照组、LPS应激模型组及不同质量浓度沙葱总黄酮水洗组分预处理组,采用Griess法及酶联免疫吸附测定法分别测定各处理组细胞上清液中NO浓度和肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白细胞介素（interleukin,IL）-1β、IL-6、IL-10的质量浓度,反转录实时荧光定量聚合酶链式反应法检测各处理组细胞中诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10、髓样分化蛋白（myeloid differential protein,MyD）88、核因子 κB（nuclear factor κB,NF-κB）mRNA的表达水平。结果显示：与对照组相比,沙葱总黄酮水洗组分在50～800 μg/mL时对小鼠腹腔巨噬细胞无明显细胞毒性作用。与LPS应激模型组相比,沙葱总黄酮水洗组分能够极显著抑制促炎介质NO、TNF-α、IL-1β、IL-6质量浓度及其mRNA的表达（P＜0.01或P＜0.001）;高度显著提高抗炎细胞因子IL-10质量浓度及其mRNA的表达（P＜0.001）,且呈剂量依赖效应;极显著降低MyD88、NF-κB mRNA的表达水平（P＜0.01或P＜0.001）。由此得出,沙葱总黄酮水洗组分对LPS诱导的小鼠腹腔巨噬细胞具有抗炎作用,其抗炎活性可能是通过抑制促炎性介质NO、TNF-α、IL-1β、IL-6的分泌并提高抗炎性细胞因子IL-10的质量浓度实现的,其作用机制可能与NF-κB信号通路有关。     

低聚半乳糖体外抗炎活性及其构效关系

以脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7为体外炎症模型,以促炎症细胞因子白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)和炎症介质NO为指标,考察低聚半乳糖(GOS)的体外抗炎活性,并从聚合度的角度探究GOS抗炎活性的构效关系。结果表明,GOS能显著降低促炎症细胞因子(IL-1β,IL-6,TNF-α)和炎症介质NO的分泌,表现出良好的体外抗炎活性。不同聚合度的GOS在调控促炎症细胞因子与炎症介质分泌能力上差异显著,较高聚合度的GOS表现出更强的体外抗炎活性。     

枸杞多糖对LPS诱导BV2小胶质细胞的抗炎活性及NF-κB信号通路的调控作用

为探究枸杞多糖（Lycium barbarum polysaccharide,LBP）对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导的BV2小胶质细胞的保护作用。本研究利用MTT法检测细胞活性,ELISA检测炎症因子的分泌,Western Blot检测蛋白表达情况。结果显示,单独LPS处理BV2小胶质细胞后,细胞的活性无显著变化而细胞上清液中的炎症因子PGE2、IL-1β、IL-6及TNF-α释放显著增多;将枸杞多糖梯度与LPS诱导的BV2小胶质细胞共孵育24 h后,有效地提升了LPS诱导的BV2小胶质细胞的活性,同时显著抑制了LPS激活的BV2小胶质细胞炎症因子的释放（P<0.05）;流式结果表明,LPS组小胶质细胞可产生大量ROS,小胶质细胞经不同浓度LBP处理12 h后,ROS含量显著降低（P<0.05）;Western Blot检测结果显示,与对照组相比,LPS组和LBP组中NF-κB信号通路相关蛋白表达及细胞核内p65蛋白表达水平均显著上调（P<0.05）,且与LBP浓度成反比,而细胞质内p65蛋白表达显著降低（P<0.05）,且随着LBP浓度增加而降低。本研究表明,枸杞多糖对LPS激活的BV2小胶质细胞有显著的保护作用,对于LPS激活的BV2小胶质细胞引起的炎症反应具有抑制作用,同时能抑制小胶质细胞中ROS的含量以发挥抗氧化应激作用,同时有效地抑制LPS刺激后细胞内p-TAK1、iκB、p-iκB及p-p65的表达。     

人参寡肽抗苯并芘诱发肺上皮细胞炎性损伤研究

本研究从人参中提取获得人参寡肽,解析其氨基酸序列;利用CCK-8技术筛选保护人肺上皮II型（A549）细胞免受苯并芘（Benzopyrene,Bap）损伤效果最好的寡肽;流式细胞术检测人参寡肽-1（Renshen Oligopeptides-1,RSO-1）在10 μmol/L及50 μmol/L浓度下对浓度为10 nmol/L的Bap导致的A549细胞凋亡、线粒体膜电位降低和活性氧（Reactive Oxygen Species, ROS）含量增加的影响;蛋白免疫印迹验证10 nmol/L浓度的Bap对A549细胞芳香烃受体（Aromatic Hydrocarbon Receptor,AHR）、NF-κB与MAPK信号通路及AP-1因子的影响,并检测了RSO-1在10及50 μmol/L浓度下对Bap毒性的抑制作用。结果表明,10 nmol/L的Bap暴露诱发A549细胞氧化应激（与空白对照组相比具有显著性差异,P<0.05）,激活芳香烃受体（Aromatic Hydrocarbon Receptor,AHR）和NF-κB信号通路并诱发细胞凋亡（与空白对照组相比具有显著性差异,P<0.05）。而浓度为10和50 μmol/L人参寡肽（Ginseng Oligopeptide,RSO,RSO-1~氨基酸序列-EGHGF）均可抑制Bap暴露导致的AP-1因子表达及芳香烃受体（AHR）和NF-κB的激活,从而抑制Bap暴露导致的细胞凋亡（与Bap组相比均具有显著性差异,P<0.05）。本研究对人参的应用及深层次开发提供理论依据。     

茯苓碱提多糖的免疫活性及作用机制

采用碱提醇沉法和柱层析分离法从茯苓中获得2种多糖,命名为PCAPS2和PCAPS5,其分子质量大小分别为3.97×10⁵ u和9.61×10⁵ u。采用MTT法测定PCAPS2和PCAPS5对小鼠脾细胞的增殖作用,发现2种碱提多糖均可以促进小鼠脾细胞和T淋巴细胞增殖,并且PCAPS5对脾细胞的增殖效果优于PCAPS2。利用荧光免疫标记法和抑制剂中和实验分析相关免疫机制,结果表明,PCAPS2和PCAPS5可以通过与TLR4/MR受体结合,进一步激活NF-κB以诱导巨噬细胞分泌细胞因子TNF-α。茯苓碱提多糖可以作为新型食品添加剂和免疫调节剂进一步开发利用。     

大蒜素对脂多糖诱导腹腔巨噬细胞炎症反应的抑制作用及机制

目的:探讨大蒜素对脂多糖(LPS)诱导小鼠腹腔巨噬细胞炎症反应的抑制作用及机制。方法:建立LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞炎症反应细胞模型,并用地塞米松和不同浓度大蒜素处理,MTT法检测细胞活力,中性红吞噬实验检测吞噬能力,Griess法检测一氧化氮(NO)及ELISA法检测COX-2酶活性和IL-6的分泌,qPCR检测环氧合酶2(COX-2)、一氧化氮合酶(iNOS)和IL-6的mRNA表达水平,Western Blot检测COX-2、iNOS和IL-6的蛋白表达以及核转录因子NF-κB p65及其磷酸化产物的相对表达。结果:大蒜素浓度在40~160 μg/mL范围内对腹腔巨噬细胞均无细胞毒性;与LPS组比较,大蒜素处理组能促进腹腔巨噬细胞的吞噬能力,能显著(P<0.05)抑制炎症因子COX-2酶活性、NO和IL-6的分泌,能显著(P<0.05)抑制基因COX-2、iNOS和IL-6 mRNA和蛋白的相对表达,并极显著(P<0.01)抑制NF-κB p65信号通路的磷酸化。结论:大蒜素能显著抑制LPS诱导的小鼠腹腔巨噬细胞的炎症反应,其机制可能与抑制NF-κB信号通路激活有关。     

蒲公英糖蛋白体外抗炎作用及对NF-κB信号通路的调控

探讨蒲公英糖蛋白(glycoprotein from Taraxacum,TG)对由脂多糖引起的RAW264.7细胞炎症的抗炎效果,并阐明其活性的基本分子机制。利用脂多糖刺激RAW264.7细胞,建立体外炎症模型,采用噻唑蓝比色法检测TG对RAW264.7细胞的增殖毒性,Griess试剂法检测了一氧化氮(nitric oxide,NO)的分泌情况,反转录聚合酶链式反应检测炎症细胞因子——白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)m RNA以及诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,i NOS)m RNA的表达水平,酶联免疫吸附测定法测定IL-6和TNF-α的分泌量,Western blot检测P-IκB-α蛋白的表达水平,用以研究TG对核转录因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)信号转导通路的抑制作用。结果表明:TG能够显著甚至极显著地抑制NO的分泌,IL-6、TNF-α、i NOS的m RNA的表达,IL-6和TNF-α的分泌(P0.05、P0.01)。TG高度显著上调了IκB-α的蛋白表达(P0.001),并显著下调了P-IκB-α的蛋白表达(P0.05),且与TG质量浓度成正比。其中在TG质量浓度为250、500、1 000μg/m L时对TNF-α分泌量的抑制率分别为28.6%、65.4%、89.3%,对IL-6分泌量的抑制率分别为32.3%、54.1%、85.7%。TG间接抑制了NF-κB信号转导途径,有显著的体外抗炎效果且抗炎效果与TG的质量浓度呈剂量依赖性。     

核桃多肽的制备及其体外抗氧化性研究

以核桃蛋白为原料,以水解度为指标,通过单因素和正交试验优化了碱性蛋白酶酶解核桃蛋白制备抗氧化肽的工艺参数。得到碱性蛋白酶最佳酶解条件为酶添加量5%,底物浓度3%,酶解温度55℃,酶解p H为9.0,酶解时间6 h;在各酶最佳条件下获得的核桃多肽具有一定的抗氧化性。     

酵母甘露糖蛋白体外发酵及其代谢产物的抗炎活性

通过体外肠道菌群厌氧发酵技术研究酵母甘露糖蛋白（mannoprotein,MP）的益生活性。结果表明,MP可调节肠道菌群结构,在门水平增加了拟杆菌门（Bacteroidetes）的相对丰度,降低了厚壁菌门（Firmicutes）、变形菌门（Proteobacteria）的相对丰度,降低了Firmicutes/Bacteroidetes比值。MP显著提高了发酵液中短链脂肪酸尤其是乙酸和丙酸的含量。MP与菊粉具有相似的益生菌活性,菊粉可促进双歧杆菌属（Bifidobacterium）的增殖,而MP可选择性促进拟杆菌属（Bacteroides）、韦荣球菌属（Veillonella）、Clostridium＿sensu＿srticto、布劳特氏菌属（Blautia）、粪杆菌属（Faecalibacterium）、纺锤链杆属（Fusicatenibacter）和产丁酸球菌属（Butyricicoccus）的生长。脂多糖诱导RAW 264.7巨噬细胞模型结果表明MP对炎症没有显著调节作用（P>0.05）,而其发酵液具有显著抗炎活性,且其活性与菊粉组相似,均优于空白组。因此,MP有望成为通过调...     

菊糖抗氧化活性及其机理

通过测定菊糖的还原能力、Fe2+螯合能力,以及DPPH自由基清除能力等方法,评价菊糖的抗氧化能力,并采用Caco-2细胞模型探讨其抗氧化机理。3种抗氧化活性实验结果表明,菊糖具有良好的抗氧化活性。与阳性对照组比较,菊糖对H2O2诱导的Caco-2细胞氧化损伤具有显著的保护作用。当菊糖质量浓度为0.8 mg/m L时,Caco-2细胞中过氧化氢酶、谷胱甘肽还原酶,以及谷胱甘肽过氧化物酶的活力,分别提高了35.8%,47.6%和61.2%。菊糖主要通过提高细胞内抗氧化酶的活力发挥其抗氧化作用。     

纳豆激酶纤溶功能及其机理研究

以 2 0 %FeCl3制造兔颈动脉血栓模型 ,并将 18只日本大耳兔 ,随机分为 3组 ,即十二指肠注射NK高、低剂量实验组 (分别为 45 0 0UI/kg、2 5 0 0UI/kg)、生理盐水模型对照组。观察纳豆激酶粗酶液体外、体内溶解血栓的作用。体外试验表明 ,B N 12液体发酵粗酶液作用血凝块 10、2 2h后 ,溶解率分别为 78 2 3%、98 16% ,对照组分别为 2 1 43%、2 3 91% (P<0 0 5 ,P <0 0 1) ;动物试验表明 ,NK高剂量组给药 1、1 5h后 ,CT (P <0 0 5 )、PT (P <0 0 5 )、TT (P <0 0 1)和APTT (P <0 0 5 )均显著延长 ,给药 2h后ELT和Fig含量显著降低(P <0 0 1、P <0 0 5 ) ,FDP含量明显增高 (P <0 0 5 ) ,血浆D dimer呈阳性 ;低剂量组CT、PT和APTT各指标及Fig含量无显著变化 ,但ELT明显缩短 (P <0 0 5 ) ,FDP含量、TT值显著增高 (P <0 0 5 ) ,且血浆D dimer呈阳性。纳豆激酶在体内和体外均具有明显的溶栓效果 ,提高纤溶活性、增强抗凝作用是其溶栓机理之一。     

抗炎低聚糖的制备及其抗炎机制研究进展

炎症是机体对各种致炎因素及损伤的一种防御反应,也是许多慢性疾病发生的关键因素.研究表明低聚糖具有抗炎、抗菌、抗氧化和抗癌等多种生理活性.作为新型功能性糖源,低聚糖具有低热量、高溶解度、促进双歧杆菌增殖等特点.本文对近年来具有抗炎活性低聚糖的种类和制备方法进行介绍,并从炎症介质和炎症信号通路两方面对其抗炎机制进行综述,以...     

浒苔多糖的分离纯化及其对非特异性免疫功能的体外实验研究

用离子交换层析、凝胶层析等方法对浒苔多糖进行了分离纯化,得到2个组分EP1和EP2。对EP2进行了非特异性免疫功能的体外实验研究,结果表明:适宜浓度的EP2能明显促进T、B淋巴细胞的增殖反应,而且对抗原提呈细胞活化所致的诱导IFN-g的产生有非常显著的增强作用,但对ConA诱导T细胞直接活化所致的IFN-g和IL-2的产生未见显著的影响,说明EP2有增强免疫反应的作用。     

狭叶荨麻醇提物的体外抗氧化及抗炎活性

为了开发利用狭叶荨麻资源,本研究以狭叶荨麻为原料,对其醇提物的体外抗氧化及抗炎活性进行了研究。在单因素试验的基础上,采用响应面法对提取条件进行了优化,得到最佳提取条件为提取时间114 min、料液比1:15、乙醇浓度为64%,所得醇提物得率(10.00±0.26)%,该狭叶荨麻醇提物中活性物质含量总酚(160.77±0.01)mg/g、总黄酮(366.85±0.05)mg/g、原花青素(7.81±0.01)mg/g、皂苷(516.76±0.04)mg/g、生物碱(2.01±0.02)mg/g。在优化条件下进行了提取,分别采用抗坏血酸(Vc)、双氯芬酸钠作抗氧化、抗炎阳性对照,对所得狭叶荨麻醇提物进行总还原力、清除DPPH·、清除·OH及抑制透明质酸酶、抑制白蛋白变性活性评价。该狭叶荨麻醇提物总还原力高于Vc,且量效关系比Vc更明显(p0.001),EC50为0.04 mg/m L;清除DPPH·、清除·OH活性比Vc好,IC50分别是0.02 mg/m L、1.87 mg/m L;抑制透明质酸酶、抑制白蛋白变性活性与双氯芬酸钠相近,IC50分别是2.43 mg/m L,0.31mg/m L。     

黑果枸杞叶槲皮素的制备及其体外抗氧化活性研究

采用超声波-微波协同提取黑果枸杞叶醇提物,利用大孔吸附树脂分离富集黑果枸杞叶总黄酮,采用Sephadex LH-20,分离纯化槲皮素。利用高效液相色谱-质谱联用法(high performance liquid chromatography and mass spectrometry,HPLC-MS)对所得的槲皮素进行结构鉴定。通过考察槲皮素的总抗氧化活性、清除DPPH自由基、ABTS+自由基、超氧阴离子自由基以及脂质过氧化体系中脂质过氧化抑制率5个指标,由此评价槲皮素的体外抗氧化活性。研究结果表明,槲皮素在5种自由基中清除ABTS+自由基能力最强,浓度在300 nmol/L～400 nmol/L时清除率达68.0%。清除DPPH自由基能力和清除超氧阴离子自由基能力基本持平。     

热处理对金枪鱼肉体外消化产物特性和抗氧化活性的影响

为探讨热处理对金枪鱼肉体外消化特性及其消化产物抗氧化活性的影响,对未加热及加热后的金枪鱼肉进行模拟胃肠道消化,测定各阶段消化产物的水解度(DH)、消化率、分子质量分布及其抗氧化活性,分析金枪鱼肉加热前、后在不同溶剂中的溶解度及其SDS-PAGE图谱.结果表明:热处理后,金枪鱼肉消化4 h后的消化率较对照组降低21.72...