固相抗体包被管法TSH免疫放射分析

采用TSH单克隆抗体包被聚苯乙烯试管,并对抗体包被条件进行了研究,建立了TSH免疫放射分析法.结果表明:在2～8℃下过夜包被,抗体浓度为2.1mg/L时,制备的包被管用于TSH免疫放射分析,结合达到最大;不同浓度下包被,包被温度和时间对制备的包被管的影响不同.TSH免疫放射分析最小检测限为0.05mIU/L;回收率为88.4%～100.0%;批内、批间变异系数分别为7.4%～10.9%和8.7%～10.7%.46例健康人血样测定值为0.3～6.2mIU/L.     

胰岛素免疫放射分析方法的建立

摘要：采用两株抗胰岛素单克隆抗体，一株包被聚苯乙烯试管作为固相抗体、另一株标记125I，建立了胰岛素测定的双抗体夹心免疫放射分析方法。其方法学灵敏度为2.8mIU/L；曲线范围5～160mIU/L；批内、批间变异系数分别小于5%、10%；回收率92.3％～112.6％；高浓度胰岛素血清样品系列倍比稀释后测定，测定值与稀释度呈线性相关，相关系数0.996；39例健康人血清样品测定值为4.7～14.3mIU/L，该方法与胰岛素放射免疫分析法的相关性良好（r=0.981）。     

人促甲状腺激素酶促化学发光免疫分析方法的建立

采用双抗体夹心法建立了定量检测人血清中促甲状腺激素含量的酶促化学发光免疫分析方法,其中,1株抗TSH抗体包被96孔微孔板,另1株与辣根过氧化物酶结合形成酶标记物,鲁米诺-过氧化氢作为发光底物。该方法测量范围为0.1～100 mIU/L,分析灵敏度为0.04 mIU/L,批内、批间变异系数分别为3.98%～6.48%和4.61%～13.1%,回收率为95.8%～117.4%,高浓度TSH样品系列倍比稀释后,测定值与稀释度呈线性相关,相关系数大于0.99。与LH的交叉率＜1.62%,与FSH和HCG的交叉率分别＜0.05%和＜0.02%。与罗氏化学发光免疫分析方法测定的临床值进行比较,相关性方程为y＝1.10x-0.207,相关系数r＝0.969。与免疫放射分析试剂盒进行比较,相关性方程为y＝1.00x+0.191,相关系数r＝0.965。本方法操作简便、快速,适用于临床检测和科研应用。     

胰岛素酶联免疫分析方法的建立

采用两株抗胰岛素单克隆抗体，一株包被聚苯乙烯板、另一株标记辣根过氧化物酶，建立了人胰岛素测定的双抗体夹心酶联免疫分析法。方法学研究表明本方法的灵敏度为1.7mIU/L，曲线范围5～160mIU/L，批内、批间变异分别小于11%、15%，回收率96.4％～111.1％；高浓度胰岛素血清样品系列倍比稀释后测定，测定值与稀释度呈线性相关，相关系数0.998；38例健康人血清样品测定值为3.6～10.8mIU/L，该方法与人胰岛素放射免疫分析法测定结果的相关性良好，r=0.97。     

人促甲状腺激素酶联免疫吸附分析试剂盒的研制

TSH多抗用于固相包被，一株TSH单抗与辣根过氧化物酶偶联制备TSH标记物，以四甲基联苯胺（TMB）为底物，采用二步法，建立了TSH酶联免疫吸附分析法（ELISA）。本方法灵敏度为0.06mIU/L，批内CV≤5.9%(n=8)，批间CV≤9.1%(n=7)。回收率为（98．4－101．4）％。77例正常人血清的TSH均值为1.96mIU/L，用本法与IRMA法同时23例病人血样，两者相关方程为Y＝1．01X－0．47，相关系数r=0.992。本方法具有简便，快速和准确的特点，适于临床检测和科研应用。     

癌胚抗原(CEA)固相包被管法免疫放射分析

采用了两株CEA单克隆抗体(McAb),一株用于固相包被,另一株用于标记制备125I-CEAMcAb,研制了一步法CEA免疫放射分析(IRMA)试剂盒.本方法的灵敏度为0.5μg/L,批内变异系数＜10.0%,批间变异系数＜15.0%,回收率为97.4%～108.9%,特异性鉴定显示与其它肿瘤标志物无明显交叉反应.正常参考值＜10.0μg/L.     

高灵敏度人促甲状腺激素(hTSH) 酶联免疫分析试剂盒

以辣根过氧化物酶标记链亲合素 (SA) ,二株识别人促甲状腺激素 (hTSH)高度特异的单克隆抗体分别用于包被微孔和生物素化 ,以四甲基联苯胺 (TMB)为底物 ,建立了高灵敏度人促甲状腺激素生物素 亲合素酶联免疫分析 (sTSH BA ELISA)试剂盒的制备方法。本试剂盒的灵敏度为 0 0 2mIU/L ,批内变异系数 <7 8% ,批间变异系数 <9 6% ,回收率为 93 3 %～ 1 0 7 8% ,特异性鉴定显示与其它糖蛋白激素 (如FSH ,HCG ,LH)无明显的交叉反应性。正常参考值范围为 0 3～ 4 1mIU/L。本法所制备的试剂盒与中国原子能科学研究院同位素研究所的TSH IRMA试剂盒的相关方程为 y =1 .2xIRMA 0 1 4,相关系数r =0 969。本试剂盒较常规ELISA灵敏度高、简便、快速 ,适用于临床检测和科研应用     

催乳素酶促化学发光免疫分析试剂盒的研制

采用两株催乳素(PRL)单克隆抗体,一株包被化学发光板,一株标记辣根过氧化物酶,研制了测定人血清PRL浓度的酶促化学发光免疫分析试剂盒。本试剂盒测定范围50~4 000 mIU/L,灵敏度4.26 mIU/L,批内、批间变异系数分别小于10%、15%,回收率90.3%~100.8%;血清样品倍比稀释后的测定值和稀释度的相关系数为1;本试剂盒正常参考值范围:女性43.2~513.1 mIU/L(n=52),男性54.8~334.3 mIU/L(n=68)。     

癌胚抗原(CEA)固相包被管法免疫放射分析

采用了两株CEA单克隆抗体(McAb),一株用于固相包被,另一株用于标记制备125I-CEAMcAb,研制了一步法CEA免疫放射分析(IRMA)试剂盒.本方法的灵敏度为0.5μg/L,批内变异系数＜10.0%,批间变异系数＜15.0%,回收率为97.4%～108.9%,特异性鉴定显示与其它肿瘤标志物无明显交叉反应.正常参考值＜10.0μg/L.     

分化型甲状腺癌131I全身显像和治疗条件探讨

回顾性分析了142例分化型甲状腺癌病例,所有病人均接受甲状腺近全切除术,以评价分化型甲状腺癌甲状腺全切术后和甲癌术后经131I去除残留组织后,用甲状腺素替代治疗病人半年复查时停服甲状腺素后TSH升高的最佳时间。将142例分为两组,一组为近期手术后未即刻给予甲状腺素替代治疗,计划一个月后用131I去除残留组织者,共83例;另一组为甲状腺全切,已经过131I去除处理后半年复诊病人,停止服用甲状腺素后拟行131I全身显像者共59例。两组病人均在2~4周时常规测定血中TSH浓度,观察两组TSH升高的程度。结果证实,手术后不用甲状腺素替代治疗组,TSH浓度14~30天(平均16天)为15.8~145mIU/L(平均45.4 mIU/L),TSH浓度在2周内超过30 mIU/L的患者占83%,在3周内超过30 mIU/L的占86%,3周以后占88%。停止服用甲状腺激素组,TSH浓度15~35天(平均22天)为21~92 mIU/L(平均为60.1mIU/L),在2周内>30 mIU/L者占87%,3周内占90%,3周以后为97%。以上结果提示,分化型甲癌患者绝大多数在131I全身显像和治疗前需做准备,但2~3周后80%以上的患者血中TSH浓度>30mIU/L,达到全身显像和治疗所要求的水平。