鲐鱼免疫活性肽的酶解工艺优化

为了优化鲐鱼免疫活性肽的酶法制备工艺,以水解度和小鼠脾淋巴细胞相对增殖率为指标,在单因素实验的基础上,选择酶添加量、酶解时间和酶解温度为考察因素,采用Box-Behnken法进行三因素三水平响应面试验设计,确定鲐鱼免疫活性肽的最佳酶解条件,并对得到的鲐鱼免疫活性肽进行氨基酸组成分析。结果表明,中性蛋白酶为最优蛋白酶,最佳酶解条件为酶添加量8800 U/g、时间7 h、温度52 ℃,验证实验发现在该条件下得到的酶解产物对小鼠脾淋巴细胞相对增殖率为48.11%±2.67%,与回归方程预测值相近。同时鲐鱼免疫活性肽氨基酸含量丰富,其中人体必需氨基酸达45.52%,疏水性氨基酸含量为32.00%。研究结果为鲐鱼免疫活性肽的酶法制备提供了理论依据,为进一步实现鲐鱼资源的高值化利用提供了参考。     

酶解制备羊胎盘抗氧化肽工艺条件的优化

对羊胎盘下脚料为原料制备羊胎盘抗氧化肽的工艺进行了研究。以DPPH自由基清除率和水解度为考察指标,分别采用4种蛋白酶酶解制备羊胎盘抗氧化多肽,结果表明木瓜蛋白酶酶解产物的自由基清除率最高且水解度适中,因此木瓜蛋白酶被确定为水解酶。通过单因素试验与二次响应面回归分析对酶解工艺参数进行了优化。最佳酶解条件为:底物质量浓度33 mg/m L、pH 6.4、酶解温度55℃、加酶量4 900 U/g、酶解时间120 min,此时羊胎盘蛋白水解度为7.92%,10 mg/m L酶解产物对DPPH自由基、超氧阴离子自由基与羟基自由基的清除率分别可达92.15%、93.45%与46.88%,显示出较好的抗氧化活性。     

响应面法优化莜麦蛋白的酶解工艺及酶解物抗氧化活性的研究

以莜麦蛋白为原料,采用响应面分析法优化莜麦蛋白制备抗氧化肽工艺。以酶解液的还原能力为指标,研究pH值、加酶量、酶解温度和酶解时间对莜麦蛋白酶解产物抗氧化活性的影响。在单因素试验的基础上,采用4因素3水平的响应面分析法优化莜麦蛋白制备抗氧化肽工艺,同时研究其酶解物抗氧化活性。结果表明,胰蛋白酶酶解莜麦蛋白的最佳工艺条件为:pH8.1,加酶量16 900U/g,酶解温度55℃,酶解时间2.62h,该条件下制备的莜麦蛋白酶解物具有较好的抗氧化活性。     

模拟酶解优化鸽血红蛋白抗氧化肽酶法制备

以鸽血红蛋白为原材料,采用在线数据库ExPASy Peptide Cutter中的蛋白酶模拟酶解,通过生物信息学工具筛选多肽潜在的生物活性、溶解性、毒性和致敏性,由此预测最适宜制备鸽血红蛋白源抗氧化肽的蛋白酶。设置不同的酶解时间、酶添加量和酶解温度作为单因素,探究不同酶解条件对酶解产物水解度和DPPH自由基清除率的影响。在单因素试验的基础上,通过响应面法优化试验,探究酶解法制备鸽血红蛋白抗氧化肽的最优工艺条件。结果表明,蛋白酶K为虚拟筛选出的最佳蛋白酶,最佳的制备鸽血红蛋白抗氧化肽的工艺为鸽血红蛋白浓度1 g/100 mL、pH8、酶解时间3 h、酶添加量415.54 U/g、酶解温度65℃。在此条件下,通过验证试验得出响应值DPPH自由基清除率为（33.21±0.68）%,与预测值相差较小,故而此条件为最优工艺。采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳试验,发现最优工艺条件下鸽血红蛋白酶解后目的条带消失,进一步验证该方法为酶解鸽血红蛋白源抗氧化肽的最优工艺。     

九香虫的营养评价及酶解多肽制备工艺优化

目的：探究九香虫营养成分组成与九香虫多肽的最佳酶解工艺条件。方法：按照国标法测定脂肪、蛋白质、总糖含量和脂肪酸组成,采用标准曲线法测定总黄酮和多酚含量;以九香虫多肽得率为指标,采用响应面法优化九香虫的酶解工艺条件;采用氨基酸分析仪、高效凝胶渗透色谱法测定九香虫酶解物的氨基酸组成和相对分子质量分布;考察九香虫酶解物对DPPH自由基和ABTS⁺自由基的清除能力及总还原能力。结果：九香虫粗脂肪含量为43.40%,蛋白质含量为37.08%,总糖含量为7.64%,总黄酮含量为1.67%,总酚含量为1.90%;九香虫最佳酶解工艺为蒸煮时间5 h,酶解pH 10,酶解时间6 h,酶解温度55 ℃,该条件下多肽得率为35.74%;九香虫酶解物必需氨基酸和非必需氨基酸的比值为70.46%,九香虫酶解物相对分子质量＜1 000所占比例为88.1%;九香虫酶解物质量浓度为1.0 mg/mL时ABTS⁺自由基清除率达到88.44%。结论：在最佳酶解工艺下,九香虫多肽得率为35.74%,具有较高的营养价值和较好的抗氧化活性。     

鸽肉酶解液水解工艺优化及其体外抗氧化性研究

以乳鸽胸脯肉为原料,利用风味蛋白酶、碱性蛋白酶、菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶对其进行水解,以水解度为指标,利用单因素实验和正交实验对酶解工艺进行了优化,并以抗坏血酸为对照,以还原能力、DPPH自由基清除能力、超氧阴离子自由基清除能力、羟自由基清除能力为指标分析了酶解液的体外抗氧化能力。结果表明,最佳水解工艺为:风味蛋白酶600 U/g(原料),水解温度55 ℃,pH7. 0,在此条件下水解2.5 h,水解度达到28.69%±0.29%;水解得到的鸽肉酶解液具有一定的还原能力,对DPPH自由基、超氧阴离子自由基、羟自由基均具有很好的清除作用。     

猪血红蛋白酶解条件优化及酶解物抗氧化研究

以猪血为原料,以DPPH自由基清除率为指标,采用酶法制备抗氧化肽并用响应面分析法(RSM)优化酶解条件。试验结果表明,冰浴+超声波粉碎的血红细胞破碎率高达97.1%,试验条件下水解猪血红蛋白制备抗氧肽的最适用酶为碱性蛋白酶,在温度58℃、pH7.7、加酶量6.5%条件下的酶解产物对DPPH自由基的实际清除率达96.94%,与模型预测值基本相符。     

大鲵肽酱香酒酶解工艺优化及抗氧化活性研究

为研发一种具有抗氧化活性的大鲵肽酱香酒,以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基清除率为主要指标,多肽含量为辅助指标,比较酸水解、酶水解和直接浸泡等不同预处理方式对大鲵肽酱香酒抗氧化活性的影响,并在单因素试验基础上采用响应面法对大鲵肽酱香酒酶解条件优化。结果表明,酶水解法优于酸水解法和直接泡制,其最佳酶解工艺为木瓜蛋白酶添加量6 126 U/g、酶解时间4 h、酶解温度55 ℃、酶解pH 4.5。在此优化条件下,大鲵肽酱香酒多肽含量为（14.20±0.11） mg/mL,对DPPH自由基的清除率为（77.98±0.99）%,羟自由基清除率为（70.66±0.70）%,还原能力（吸光度值A700 nm）为0.651,表明大鲵肽酱香酒具有一定抗氧化性。     

响应面法优化酶解草菇蛋白制备抗氧化肽工艺

以草菇蛋白为原料,以DPPH自由基清除率为评价指标,采用单因素试验和响应面试验优化酶解工艺,探讨酶种类、酶解温度、酶解时间、底物浓度和酶浓度对抗氧化肽活性的影响,并采用Box-Behnken试验设计的响应面(response surfacemethodology,RSM)分析方法优化工艺.结果表明,木瓜蛋白酶为最佳酶,...     

响应面法优化菊芋渣酶解制备抗氧化肽工艺

以菊芋渣蛋白为原料,在单因素试验基础上,采用Plackett-Burman设计选出最显著的因素,即底物质量浓度、酶解时间、pH值,再用响应面分析法对其进行考察,以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除率为评价指标,优化菊芋渣抗氧化肽酶解工艺。结果表明,最佳酶解条件为加酶量8 000 U/g、酶解温度50 ℃、pH 5.0、酶解时间3.5 h、底物质量浓度0.16 g/mL,在此条件下DPPH自由基清除率实测平均值达88.10%,与预测值88.08%相近。     

响应面法优化酶解鸢乌贼制备抗氧化肽的工艺研究

利用响应面分析法对酶法水解鸢乌贼蛋白制备抗氧化肽的工艺条件进行优化。首先通过单因素实验最终确定木瓜蛋白酶为水解鸢乌贼蛋白制备抗氧化肽的最佳用酶,然后在单因素的基础上以加酶量、液料比、酶解时间为自变量,DPPH自由基清除率为响应值,建立二次回归设计模型,经修正后得到最佳酶解条件为:加酶量为0.66%(w/w),液料比为10.2(v/w),酶解时间为380 min,在此条件下DPPH自由基清除率为89.80%,与模型预测值相吻合。另外,氨基酸分析表明与鸢乌贼蛋白相比,优化后的酶解产物中必需氨基酸含量提高至原蛋白的2.2倍,蛋氨酸、色氨酸等抗氧化性氨基酸分别提高至7.2、25.6倍。      

响应面法优化风味蛋白酶水解棉籽蛋白工艺

采用风味蛋白酶对棉籽蛋白进行水解,研究酶与底物浓度比（E/S）、时间、pH和温度变化对酶解过程的影响。在单因素实验分析基础上,以水解度（DH）为评价指标,采用Box-Benhnken响应面分析法,设计了三因素三水平的实验优化棉籽蛋白质的水解条件。实验结果表明,当E/S为6000U/g,最优水解条件为:温度50℃、水解pH为7.45、水解时间4.14h,在此水解条件下,水解度可达到59.01%±0.81%。      

基于Plackett-Burman设计和响应面法优化羊肝抗氧化肽的制备工艺

以羊肝为原料,分别测定5种蛋白酶酶切羊肝所得的酶解液的羟基自由基清除率和肽得率。结果表明,风味蛋白酶羟自由基清除率（84.50%）和肽得率（22.49%）最好。在单因素试验基础上,以羟基自由基清除率为评价指标,采用响应面法优化最佳酶解条件。结果表明,羊肝抗氧化肽制备的最佳酶解条件为料液比1∶3（g∶mL）、加酶量2 400 U/g、酶解温度50 ℃、pH7.50、酶解时间2.8 h。在此优化条件下,测得实际羟自由基清除率为93.70%,与模型理论值相接近。羊肝酶解产物中总氨基酸含量为57.23 g/100 g,其中疏水性氨基酸和必需氨基酸占总氨基酸含量分别为46.47%和41.63%,表明以风味蛋白酶酶解羊肝产物具有较高的抗氧化活性和营养价值。     

响应面法优化酶解红松松仁粕制备抗氧化肽

以工业生产东北红松松仁油副产物松仁粕为原料,在单因素试验的基础上,利用响应面分析法对松松仁粕抗氧化肽酶解工 艺进行了优化研究。 结果表明,碱性蛋白酶是制备松仁粕抗氧化肽的最佳蛋白酶,其最佳酶解工艺条件为底物质量分数15%,酶添加 量为10 000 U/g,酶解pH值9.0,酶解温度63 ℃,酶解时间为80 min。 在此优化条件下,总还原力为0.69,水解度（DH）为36.23%。 该条件 下制备的松仁粕抗氧化肽有较强的还原力,当抗氧化肽的质量浓度为14 mg/mL时,总还原力达到同等浓度维生素（VC）的71.16%,对 羟基自由基、ABTS自由基、DPPH自由基的清除能力均效果显著。     

响应面法优化核桃油复合抗氧化剂的研究

以过氧化值为评价指标,采用Schaal烘箱法研究了几种不同抗氧化剂及增效剂对核桃油的抗氧化效果。结果表明:单一抗氧化剂TBHQ的抗氧化效果最好,在60℃烘箱中核桃油保质期为96 h;复合抗氧化剂试验组的过氧化值均低于空白对照的,其中TBHQ和BHT复合使用抗氧化效果较好,在60℃烘箱中核桃油保质期为192 h;柠檬酸和抗坏血酸均能显著提高复合抗氧化剂TBHQ和BHT的抗氧化作用,添加0. 010%柠檬酸的核桃油保质期为312 h,添加0. 010%和0. 012%抗坏血酸的核桃油保质期为288 h;响应面分析试验筛选出抗氧化效果最优组合为0. 017%复合抗氧化剂(TBHQ与BHT质量比1∶1)+0. 012%柠檬酸+0. 010%抗坏血酸,在20℃下核桃油的理论货架期可延长至288 d。     

响应面法优化奶酪酶解工艺条件的研究

在单因素实验的基础上,采用蛋白酶Flavourzyme和Neutrase组合,在允许pH自然变化的条件下,水解切达奶酪制备乳滋味增强物质。利用主成分分析方法结合响应面分析确定得到酶解奶酪制备乳滋味增强组分的最佳工艺条件为:Flavourzyme酶添加量为3.5%(w/w),Neutrase酶添加量为2.25%,水解温度45℃,pH8.0,水解时间为7.6h水解液的滋味综合评价指标分值最高为60.93。在该条件下制备得到的水解液具有较浓郁的奶滋味,风味较佳,无苦味和异味,并且其浓厚味滋味评分结果明显高于脱脂纯鲜牛奶样品。      

响应面设计法优化花生分离蛋白酶解条件的研究

以花生粕为原料,利用响应面设计对其花生分离蛋白的酶解条件进行了优化。通过对花生分离蛋白水解的最佳用酶进行了筛选,确定以碱性蛋白酶Alcalase水解效果最好。在单因素实验基础上,以水解度为指标,设计了响应面分析方案,通过数学推导及实验分析,得出Alcalase可控酶解花生分离蛋白的动力学模型及相关参数:Alcalase水解花生分离蛋白的最优工艺参数为反应温度53.11℃、酶浓度为135.94μL/g、pH为8.05、预测蛋白水解度为24.15%,实际结果与拟合方程预测结果(24.57%)基本吻合。      

响应面法优化猕猴桃皮渣酶解取汁工艺

以猕猴桃皮渣为原料,研究了果胶酶对皮渣出汁提高率的影响。在单因素分析的基础上,采用Box-Behnken中心组合实验,建立二次回归方程模型,模型相关系数R2=0.9636,对模型进行方差分析,确定了猕猴桃皮渣的最佳酶解工艺参数:酶解温度48.98℃、p H3.42、酶解时间3.32h、果胶酶用量0.26mg/g,在此条件下,皮渣的实际出汁提高率为（44.21±1.22）%,与理论值45.73%的相对误差为2.46%。      

响应曲面法优化番茄汁加工工艺

为优化番茄汁加工工艺,以出汁率为指标,在单因素实验基础上,进行响应面实验分析得到最佳工艺参数为:纤维素酶添加量0.08%,酶解时间79min,酶解pH4.0,酶解温度54℃,此时番茄出汁率为90.08%。同时建立了番茄出汁率的二次数学模型,对出汁率具有很好的预测作用。