高效液相色谱法测定烟草中的果糖、葡萄糖和蔗糖

以72%(体积比)乙腈/28%水预混合溶液作流动相,High-Performance Carbohydrate卡套柱作色谱柱,等梯度洗脱,采用带示差折光检测器的高效液相色谱仪测定了烟草中的果糖、葡萄糖和蔗糖含量。结果表明:方法的日内精密度和日间精密度的范围分别为0.46%~1.54%和0.96%~4.74%,回收率97.0%~102.3%,果糖、葡萄糖和蔗糖的检出限(LOD)分别为95,107和105μg/mL(S/N=3∶1),可以满足烟草中果糖、葡萄糖和蔗糖含量的日常检测要求。     

毛细管气相色谱法测定烟草中葡萄糖、果糖、蔗糖的含量

建立了一种用毛细管气相色谱法测定不同烟草样品中水溶性葡萄糖、果糖、蔗糖含量的方法。以80%(v/v)乙醇提取烟样中水溶性糖,糖液利用三甲基氯硅烷进行硅醚化反应后,进行毛细管气相色谱分析。结果表明葡萄糖、果糖和蔗糖的含量与其峰面积具良好的线性(相关系数在0.9995~0.9998),重复性好(RSD< 1.39%),加标回收率在96.19%~99.16%,可以实现对烟草中单糖的分离鉴定。      

萃取液和标准制备液对烟草中葡萄糖、果糖、蔗糖和麦芽糖含量测定的影响

为探究萃取液和标准制备液对烟草中葡萄糖、果糖、蔗糖和麦芽糖4种糖含量测定的影响,比较了水和氢氧化钠水溶液作溶剂萃取烟草样品中4种糖的稳定性,以及所配制标准制备液的稳定性。结果表明:①0.02 mol/L氢氧化钠溶液萃取烟草样品,可有效抑制提取液中蔗糖和麦芽糖的水解,葡萄糖、果糖、蔗糖和麦芽糖在16 h内的含量与初始值的偏差小于15%;②用水配制标准制备液,30 d内储备液的相对标准偏差在1%以内,能够保证定量准确。用氢氧化钠水溶液萃取烟草样品和用水配制标准制备液有助于准确测定烟草中葡萄糖、果糖、蔗糖和麦芽糖的含量。     

烟草及烟草制品中霉菌数量检验用培养基的开发与应用

为开发适用于烟草及烟草制品中霉菌数量检验用的培养基,以烟草及烟草制品中8种常见的污染霉菌(黄曲霉、黑曲霉、局限曲霉、桔青霉、产黄青霉、总状毛霉、匍枝根霉和绿色木霉)为试验菌种,采用5种常见的霉菌培养基(孟加拉红琼脂、察氏琼脂、高盐察氏琼脂、含20％蔗糖的高渗察氏琼脂和马铃薯葡萄糖琼脂培养基)及4种研发的新型培养基进行烟草及烟草制品中霉菌数量检验用培养基的初筛和复筛研究.结果表明:与其他培养基相比,Ⅰ号改良马铃薯葡萄糖琼脂培养基(马铃薯200 g,葡萄糖20.0 g,NaCl 30.0 g,琼脂16.0 g,氯霉素0.1g和蒸馏水1000 mL)具有检验霉菌菌相全面、获得霉菌数量结果准确等优点,适用于烟草及烟草制品中霉菌数量的检测.     

HPLC法测定烟草及烟草制品中马来酰肼残留

建立了萃取溶剂、固相萃取小柱净化、高效液相色谱( HPLC)法检测烟草及烟草制品中马来酰肼(MH)残留量的方法,并采用该方法检测了23个烟草样品中的马来酰肼残留.结果表明:①用4 mol/L盐酸加热回流萃取1h效果较好;②用Varian Microsorb- MV 100-5 C18色谱柱,以0.1 mol/L醋酸水溶液为流动相,等梯度洗脱,流速0.7 mL/min,检测波长313 nm,20 min内MH色谱峰和杂质色谱峰可以有效分离;③该法的回收率为97.11％,相对标准偏差为7.13％.该方法适合烟草及烟草制品中马来酰肼的测定.     

胶基烟草制品中烟草特有亚硝胺(TSNAs)的分析

为检测胶基烟草制品中的烟草特有亚硝胺(TSNAs),建立了一种同时测定4种TSNAs的液相色谱串联质谱方法.以NNN-d4,NNK-d4,NAB-d4,NAT-d4为内标,以0.05 mol/L盐酸为提取溶液,通过HLB小柱固相萃取、Agilent Poroshell 120 SB-C18柱分离和多离子监测模式检测了实际样品中的TSNAs.结果表明:①TSNAs的定量限为0.026～0.076 ng/mL,回收率为80.00%～126.86%,相对标准偏差(RSD)为2.99%～8.32%;②样品中总TSNAs的范围为5.13～13.76 ng/g.其中,NNN与NAT含量最高,占总量的91.23%～95.71%.该方法适用于胶基烟草制品中TSNAs的分析.     

Prevail糖柱-HPLC-ELSD法测定烟草中水溶性糖

建立了一种55%乙腈水溶液超声萃取、水-乙腈梯度洗脱、Prevail糖柱-高效液相色谱-蒸发光散射(HPLC-ELSD)法测定烟草中8种水溶性糖含量的方法,并采用该方法测定了13个烟叶样品中的糖含量。结果表明:①鼠李糖、木糖、阿拉伯糖、甘露糖、果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖的平均回收率分别为113.4%,103.7%,109.8%,100.5%,87.1%,115.1%,91.5%和109.1%,RSD小于4%;②所有烟叶样品中均未检出阿拉伯糖、木糖和甘露糖;③11个烤烟样品中均检出鼠李糖,且其含量均与文献报道的基本一致,而香料烟AG、白肋烟BH1和马里兰烟C2样品中均未检出鼠李糖;④除马里兰烟样品外,其他12个烟叶样品中均检出果糖与葡萄糖,其含量都是最高的,且二者接近1:1,马里兰烟样品中仅检出果糖,而且仅仅检出此一种糖;⑤除香料烟AG和马里兰烟样品外,其他11个烟叶样品中均检出蔗糖,除龙岩C2F、香料烟AG、白肋烟BH1和马里兰烟样品外,其他9个烟叶样品中均检出麦芽糖,且大多数样品的麦芽糖含量高于其蔗糖含量。该法可用于批量烟草样品中这8种水溶性糖含量的常规检测。     

高效液相色谱法测定烟草底料中低聚糖的含量

建立了一种检测烟草底料中低聚糖(水苏糖、棉籽糖、蔗糖)的高效液相色谱分析方法.采用Waters Sugar Pak1 钙型阳离子交换色谱柱(6.5mm×300mm, 5μm);流动相为纯水;采用示差折光检测器进行检测;流量1.0 mL/min;柱温85 ℃;外标法定量.结果显示:3种糖的线性关系良好, 相关系数在0. 9991～0. 9997之间;精密度、稳定性的相对标准偏差(n=5)都低于4.7%;平均回收率为96.9%～103.5%;检出限为3.5～4.0 μg/mL.该方法前处理简单、快速,应用本方法可测定烟草底料中水苏糖、棉籽糖和蔗糖的含量变化.     

硫酸-甲醇衍生化对烟草中乙酰丙酸质量分数测定的影响

为考察采用硫酸-甲醇衍生化方法测定烟草中乙酰丙酸质量分数的可靠性,分析了硫酸-甲醇衍生化时间和温度对烟草中乙酰丙酸质量分数测定的影响,探索了5种糖类成分在硫酸-甲醇衍生化条件下是否产生乙酰丙酸甲酯,比较了263个烟草实际样品中果糖和蔗糖质量分数与乙酰丙酸质量分数的关系。结果表明：(1)硫酸-甲醇衍生化时间和温度对烟草样品甲酯化产物中乙酰丙酸甲酯响应的影响不同于其他有机酸甲酯,且这种不同与烟草基质有关;(2)果糖和蔗糖在硫酸-甲醇衍生化条件下能产生乙酰丙酸甲酯,而葡萄糖、麦芽糖和肌醇在衍生化过程中不产生乙酰丙酸甲酯;(3)蔗糖在硫酸-甲醇衍生化条件下产生的乙酰丙酸甲酯的质量仅为相同质量果糖产生的1/2;(4)利用硫酸-甲醇衍生化法测定得到的烟草中乙酰丙酸的质量分数受烟草中果糖和蔗糖的影响。     

离子色谱法测定蜂花粉与蜂王浆中的葡萄糖、果糖、蔗糖和麦芽糖

研究了蜂花粉与蜂王浆中葡萄糖、果糖、蔗糖和麦芽糖的离子色谱分析方法。样品用热水溶解,乙腈沉降蛋白,使用2个固相萃取小柱去除色素与脂肪等干扰成分后,以CarboPac PA10分析柱为色谱柱,氢氧化钠和乙酸钠溶液为流动相进行离子色谱分离。葡萄糖、果糖、蔗糖和麦芽糖的检出限分别为0.12,0.14,0.21,0.33mg/L。蜂花粉的回收率93.5%～102.2%,精密度为4.4%～6.3%,蜂王浆的回收率为95.0%～103.5%,精密度为6.7%～10.2%。利用该方法对20个蜂花粉和20个蜂王浆样品进行了分析,花粉中葡萄糖含量为9.9%～20.6%,果糖14.2%～26.9%,蔗糖1.8%～8.3%,麦芽糖0.33%～1.4%;王浆中葡萄糖含量为6.2%～8.3%,果糖7.0%～8.7%,蔗糖0.38%～3.6%,麦芽糖0.27%～0.83%。该方法简单、灵敏度高,可作为标准方法对蜂花粉与蜂王浆中葡萄糖、果糖、蔗糖和麦芽糖进行分析。     

不同香型区烤烟水溶性糖组分含量差异及与感官质量的关系

以2018—2019年207份C3F初烤烟叶样品为材料,研究了不同香型区域烟叶水溶性糖组分含量及其与感官品质的关系。结果表明：（1）烤烟果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖占总糖的比例均值分别为46.43%、48.15%、2.29%、3.13%。（2）清甜香型、蜜甜香型和醇甜香型区烤烟总糖、还原糖含量极显著高于焦甜焦香型、焦甜醇甜香型和清甜蜜甜香型区;（3）各香型区烤烟水溶性糖组分含量与占比特点为：清甜香型、蜜甜香型和醇甜香型果糖、葡萄糖含量高,麦芽糖含量适中,葡萄糖占比高;焦甜焦香型果糖、葡萄糖含量低,麦芽糖含量高,麦芽糖占比高;焦甜醇甜香型果糖、葡萄糖、麦芽糖含量低;清甜蜜甜香型葡萄糖、蔗糖、麦芽糖含量低,果糖含量高,果糖占比高,蔗糖占比低。（4）典型相关分析结果表明,果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖含量与烟气浓度呈负相关;果糖含量与香气质和杂气呈正相关,与劲头呈负相关;葡萄糖、蔗糖和麦芽糖含量与香型风格凸显程度呈正相关。     

用HPLC柱后衍生法分析烟草中氨基甲酸酯类农药残留

采用反相高效液相色谱法对烟草中涕灭威亚砜、涕灭威砜、灭多威、三羟基克百威、涕灭威、克百威、甲萘威、异丙威等8种氨基甲酸酯类农药同时进行残留分析。样品采用乙腈/水提取,NH₂-SPE柱净化,柱后衍生荧光检测器(FLD)测定。8种农药在0.1～1.0 mg/L范围内线性良好,相关系数为0.9951～0.9999,在0.05、0.1、0.5 mg/kg添加水平的平均回收率分别为80.8%～110.6%、84.4%～109.7%和81.6%～112.9%,相对标准偏差分别为3.2%～10.8%、3.8%～11.8%和3.7%～8.5%。各种农药的检出限为0.008～0.01 mg/kg。方法适用于烟草中氨基甲酸酯类农药多残留检测。     

微波辅助萃取液相色谱快速检测烟草中的多酚类化合物

建立了卷烟烟丝中三个主要多酚化合物(绿原酸、莨菪亭、芸香苷)的超高效液相色谱(UPLC)的快速检测方法.采用微波辅助萃取法(microwave-assisted extraction MAE)分别进行单因素试验和正交试验,确定卷烟烟丝中三个主要多酚类化合物的最佳提取条件:60%(V/V)的甲醇水溶液为提取剂、萃取液温度...     

分散固相萃取净化UPLC测定烟草中4种水溶性糖

建立了分散固相萃取净化-超高效液相色谱/蒸发光散射检测器（UPLC/ELSD）快速测定烟草中4种水溶性糖（果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖）含量的方法。在优化的超高效液相色谱条件下,10分钟内可以实现4种糖的出峰及分离并快速完成定量检测。该方法具有快速、简单、灵敏等特点,应用于实际烟草样品检测取得了良好效果。      

超高效液相色谱串联质谱法测定烟草中的噁霉灵残留

为降低烟草中噁霉灵检测中的基质干扰，提高检测灵敏度和和稳定性，通过试验建立了以QuEChERS为样品前处理方法、液相色谱串联质谱仪为检测仪器的烟草中噁霉灵残留检测方法。样品加水浸润后，经丙酮提取、盐析试剂包除水、石墨化炭黑除杂后，采用Agilent ZORBAX 300SB-C8液相色谱柱（2.1 mm×100 mm，1.8 μm）分离，甲醇-水程序洗脱，ESI雾化，串联质谱MRM检测。结果发现，该方法在0.0025~0.0500 mg/L范围内线性良好，决定系数r²=0.9996，定量检测限1.06 μg/L，回收率在90.8%~92.0%之间，相对标准偏差为5.1%。运用该方法测定烟草中的噁霉灵，操作简单，检测精度高，满足CORESTA对烟草农残检测的要求。     

烟草中溴菌腈农药残留检测方法及消解动态

为摸清溴菌腈在烟草中的农药残留消解动态规律及残留特征,建立了QuEchERS前处理和气相色谱-串联质谱(GCMS/MS)检测相结合的烟叶中溴菌腈残留量的分析方法。烟叶经乙腈提取,N-丙基乙二胺吸附剂(PSA)净化,气相色谱-串联质谱法检测。结果表明,在0.01~1.0 mg/kg 3个添加水平下,溴菌腈在鲜烟叶和干烟叶中的平均回收率分别为85.8%~94.5%、83.2%~110.0%,相对标准偏差(RSD)分别为1.4%~10.6%、7.3%~14.1%,定量限(LOQ)均为0.01 mg/kg。利用山东和湖南2年2地的溴菌腈在烟叶中农药残留田间试验样品进行了深入研究,溴菌腈在烟叶中的半衰期7.8~14.9 d;按照162 g.a.i./hm²和243 g.a.i./hm²剂量,分别灌根施药1~2次,末次施药14 d后,溴菌腈在烟叶样品中的最终残留量为0.010~0.13 mg/kg。根据烟草青枯病发病条件、发病时期、农药在烟叶中使用情况及OECD农药残留限量计算结果,建议溴菌腈在烟叶中残留限量为0.2 mg/kg,安全间隔期为14 d。