PMP柱前衍生HPLC法测定八月瓜果皮多糖中单糖组成

为建立同时测定八月瓜果皮中6 种单糖组分的色谱分离方法,采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（1-phenyl-3-methyl-5-pyrazolone,PMP） 柱前衍生和高效液相色谱法测定八月瓜果皮中6 种单糖组分。色谱柱为SHIMADZU-C18（4.6 mm×250 mm,5 μm）,流动相为乙腈（A）-0.05 mol/L 甲酸铵溶液（B）梯度洗脱（0～10 min：18% A;10～20 min：18%～20% A;20～40 min：20%～23% A;40～60 min：23% A）,柱温30 ℃,流速1 mL/min,检测波长245 nm。结果表明,所建立的PMP-HPLC 柱前衍生化法可准确地测定八月瓜果皮中的D-甘露糖、L-鼠李糖、D-半乳糖醛酸、D-葡萄糖、D-半乳糖和D-阿拉伯糖含量,6 种单糖成分在各自质量浓度范围内线性关系良好（R2≥0.998 3）,加样回收率为92.58%～100.02%。10 批八月瓜果皮样品中均检出6 种单糖,D-甘露糖、L-鼠李糖、D-半乳糖醛酸、D-葡萄糖、D-半乳糖和D-阿拉伯糖平均物质的量比为1.18 ∶1.00 ∶23.25 ∶11.73 ∶3.51 ∶5.88,其中D-半乳糖醛酸含量为51.84～212.84 mg/g,D-葡萄糖含量为22.44～73.23 mg/g,D-阿拉伯糖含量为6.14～60.01 mg/g,是八月瓜果皮中的单糖主要成分。该试验所建立的方法操作简便、重复性好和准确度高,适用于八月瓜果皮多糖中单糖成分的分析。     

黄秋葵发酵酒渣中果胶多糖的提取及理化性质分析

为了探讨黄秋葵发酵酒渣综合利用技术,减少资源浪费,本文采用酶法提取黄秋葵发酵酒渣中的果胶多糖,通过单因素实验和响应面优化提取工艺;采用PMP柱前衍生HPLC法测定黄秋葵酒渣果胶多糖的单糖组分。结果表明,果胶多糖提取得到的最佳工艺条件为:使用1%的纤维素酶,提取温度45℃、溶液pH5.5、液料比1:36、时间10 h、提取次数2次,此条件下的果胶多糖得率为6.85%;黄秋葵酒渣果胶多糖的理化性质:酯化度为74.45%、半乳糖醛酸含量20.07%、灰分含量8.52%、蛋白质含量2.24%、干燥失重率为18.06%、pH为6.47;从黄秋葵酒渣中提取的果胶多糖属于酸性杂多糖,其单糖摩尔比例为甘露糖:鼠李糖:葡萄糖醛酸:半乳糖醛酸:葡萄糖:半乳糖:阿拉伯糖为5.2:8.8:0.8:25.6:30.6:20.4:8.7。     

柱前衍生化HPLC法分析枸杞多糖中单糖组成

利用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生化高效液相色谱（high?performance?liquid?chromatography,HPLC）法,建立6?种常见单糖的色谱分离条件,并用于10?种不同产地的自制枸杞多糖的单糖组成分析和8?种市售枸杞多糖的分析鉴定。该HPLC方法简便、灵敏度高、重复性好,可用于枸杞多糖的组分分析和质量控制。对自制枸杞多糖的单糖组成分析结果表明,自制枸杞多糖由甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖及阿拉伯糖6?种单糖组成,平均物质的量比为1.00∶1.38∶0.63∶92.37∶1.18∶3.55。对市售枸杞多糖的分析鉴定结果表明,其中6?种枸杞多糖的含量在正常范围内,另外2?种多糖含量高于均值,其中葡萄糖相对物质的量比为自制枸杞多糖的2～3?倍。     

铁皮石斛多糖分离纯化及单糖组成测定

将铁皮石斛粗多糖经DEAE-52纤维素柱分离得到了四个多糖组分（DO-1、DO-2、DO-3、DO-4）,并将组分DO-1经Sephadex G-200柱纯化得到多糖DOP。采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）柱前衍生化方法进行高效液相色谱分析,分析结果得出,多糖DOP由D-甘露糖、L（+）-鼠李糖和D-葡萄糖三种单糖组成,通过外标法定量得知D-甘露糖∶L（+）-鼠李糖∶D-葡萄糖=1.936∶0.856∶0.691。测定了多糖DOP抗氧化活性,结果显示其具有良好的清除能力。      

柱前衍生化HPLC法分析真菌多糖的单糖组成

通过柱前衍生化HPLC法分析了6种真菌多糖的单糖组成。将6种真菌的胞外粗多糖及其菌体用1mol/L的硫酸水解成单糖,用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生化,利用高效液相色谱法检测各单糖。结果表明,灵芝、树舌类真菌胞外多糖的产率均较高,胞外多糖产率在0.0921～0.1528g/100mL之间。胞外多糖主要以甘露糖为主,其次含有葡萄糖和半乳糖,并且一般含有少量的阿拉伯糖。胞内多糖中葡萄糖含量最高,其次含有甘露糖和半乳糖,个别菌种还含有少量的阿拉伯糖和葡萄糖醛酸。而虫草胞外多糖的组成依次为半乳糖、葡萄糖、甘露糖和葡萄糖醛酸,胞内多糖同样是主要含有葡萄糖,其次含有甘露糖、半乳糖和葡萄糖醛酸。     

大粒车前子麸壳多糖的分离纯化及部分理化性质

以大粒车前子麸壳为研究对象,提取水溶性多糖组分并对其部分理化性质进行分析。车前子麸壳水提粗多糖经过SephacrylTMS-400 HR葡聚糖凝胶柱得到纯化的多糖组分（polysaccharide from bran of Plantago asiatica L.,PBPL）。结果显示：PBPL为均一多糖,平均分子质量为619 651 D,糖含量、蛋白质含量和糖醛酸含量依次为（71.420±0.007）%、（6.07±0.02）%、（20.74±0.05）%。PBPL含有鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖及半乳糖5 种单糖,物质的量比为2.24∶1.87∶1.00∶3.24∶3.49,糖醛酸主要是半乳糖醛酸。红外光谱中有多糖、蛋白、糖醛酸以及β-吡喃糖环特征吸收峰。     

壶瓶枣多糖的纯化及结构初步分析

采用Sepharose CL-6B凝胶柱纯化壶瓶枣多糖（polysaccharides from Zizyphus jujube Mill. cv. Hupingzao,简称ZJP）ZJP-2和ZJP-5组分,并对纯化后多糖的结构进行分析。结果表明：经纯化后得到ZJP-2b和ZJP-5a两种组分均一的壶瓶枣活性多糖,分子质量分别为89.21、61.60 kD,均具备多糖的特征吸收峰,且均以β-构型的吡喃糖为主;ZJP-2b中单糖组成主要为鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖,其物质的量比为32.4∶9.5∶9.4∶14.7∶9.7,而ZJP-5a中单糖组成主要为鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖和半乳糖,其物质的量比为20.2∶42.9∶2.2∶7.5∶14.5;当质量浓度为3.5 mg/mL时,ZJP-2b和ZJP-5a的羟自由基清除率分别为30.51%和57.22%。     

气相色谱法分析豌豆粉渣中多糖的单糖组分

采用糖醇衍生化方法,运用气相色谱分析测定豌豆粉渣中多糖的单糖组分及各单糖的相对组成比例。结果表明：经水洗处理的豌豆粉渣中各单糖的相对组成质量比为鼠李糖∶阿拉伯糖∶木糖∶葡萄糖∶半乳糖=1.00∶92.00∶39.50∶21.80∶12.30;未经水洗处理的豌豆粉渣中各单糖的相对组成质量比为鼠李糖∶阿拉伯糖∶木糖∶葡萄糖∶半乳糖=1.00∶68.86∶38.43∶25.00∶9.57。豌豆粉渣中多糖主要由阿拉伯糖和木糖组成,其中阿拉伯糖的相对含量为23.78%。     

高效液相色谱法分析地瓜儿多糖的单糖组成

研究分析地瓜儿多糖的单糖组成。采用水提醇沉法提取地瓜儿多糖,用三氟乙酸水解多糖成单糖,单糖产物经衍生化试剂1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化后,利用高效液相色谱法分析单糖的PMP衍生物。结果表明,地瓜儿多糖由甘露糖(Man)、鼠李糖(Rha)、葡萄糖醛酸(GlcUA)、半乳糖醛酸(GalUA)、葡萄糖(Glc)、半乳糖(Gal)、木糖(Xyl)和阿拉伯糖(Ara)8种单糖组成,是一种酸性杂多糖,其中以半乳糖、葡萄糖和半乳糖醛酸为主,为进一步开发利用地瓜儿这一新的野菜资源提供了科学依据。     

高效液相色谱法测定油茶饼粕多糖组成

提出并对比了3种分析油茶饼粕多糖组成的高效液相色谱方法——氨基柱-折光示差检测器法、氨基柱-串级质谱法、1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生-C18柱-紫外检测器法（柱前衍生法）。综合考虑分离效果、灵敏度、仪器成本等因素,最终选定柱前衍生法。柱前衍生法可同时测定油茶饼粕多糖中的鼠李糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸,线性关系良好（线性系数>0.99）,检出限为0.02~0.29 mg/L,定量限为0.06~0.96 mg/L;单糖及糖醛酸的加标回收率分别为77.2%~111.9%、60.1%~87.0%;峰面积日内精密度为0.08%~3.77%,日间精密度为0.39%~17.15%。利用柱前衍生法检测油茶饼粕多糖样品,结果显示所检的4个样品中均含有5种或6种单糖及2种糖醛酸,且含量最高的组分均为葡萄糖。     

茶叶酸性多糖的分离、纯化及其理化性质研究

采用水提醇沉法从采自江西婺源的粗老绿茶中提取茶叶多糖,通过Sevag法脱蛋白得到精制茶叶多糖,应用高效凝胶渗透色谱法（high performance gel permeation chromatography,HPGPC）分析茶叶多糖纯度并测定其分子质量,进一步测定茶叶多糖的糖含量、蛋白质含量、单糖组成、糖醛酸组成等理化指标,同时对其进行紫外和红外光谱扫描,考察其光谱性质。结果表明：该茶叶多糖组分为均一性高的酸性多糖组分,分子质量约为289 734 D,糖含量为55.1%,蛋白质含量为1.8%。该茶叶多糖酸性组分主要由鼠李糖、核糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成,其物质的量比为1.26∶3.18∶4.08∶1.00∶1.52∶3.92,该茶叶多糖酸性组分中含有大量半乳糖醛酸,含量为33.5%。     

衍生化气相色谱法测定亚麻胶的单糖组成

目的采用衍生化气相色谱法(GC)测定亚麻胶的单糖组成。方法从亚麻粕中提取纯化得亚麻胶,经酸水解、衍生化后,用气相色谱分析。结果亚麻胶样品中鼠李糖、阿拉伯糖、岩藻糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖的质量分数分别为12.13%,6.83%,4.30%,12.70%,3.75%,10.15%,15.30%。结论亚麻胶主要由鼠李糖、阿拉伯糖、岩藻糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖7种单糖组成,以半乳糖含量最高。     

兰州肉苁蓉多糖的组成分析及抗氧化活性

对兰州肉苁蓉多糖进行组成分析和抗氧化活性研究。采用沙生植物兰州肉苁蓉肉质茎鲜样,使用传统水提醇沉法进行兰州肉苁蓉粗多糖（CLP）的提取,利用DEAE-纤维素阴离子交换色谱柱法对粗多糖CLP进行洗脱,得到中性糖CLP-1和酸性糖CLP-2。用高效凝胶渗透色谱法（HPGPC）和高效液相色谱法（HPLC）对其分子量和单糖组成进行测定,通过DPPH自由基清除实验和总抗氧化能力实验进行抗氧化活性测定。根据HPGPC对分子量测定得出兰州肉苁蓉多糖有多个洗脱峰,其多糖分子量主要分布在0~10 kDa之间,为不均一的小分子量杂多糖;经过分级得到的中性糖CLP-1和酸性糖CLP-2的单糖组成差异明显,CLP-1中较明显的单糖及占比分别为:甘露糖2.78%、半乳糖醛酸4.07%、葡萄糖88.62%、半乳糖1.80%、阿拉伯糖2.39%;CLP-2中为:鼠李糖5.79%、半乳糖醛酸7.78%、葡萄糖9.99%、半乳糖13.30%。根据抗氧化实验结果分析,CLP-1的抗氧化效果最好,2.0 mg/mL浓度下对DPPH自由基清除能力高达91.73%,IC₅₀为0.383 mg/mL,且同一浓度下总抗氧化能力高于CLP和CLP-2。本文对兰州肉苁蓉多糖进行初步分析,为兰州肉苁蓉的进一步研究提供基础的数据支撑。     

大果白刺多糖的物理特性及抗氧化活性研究

以新疆野生大果白刺果实为原料,采用水提醇沉法分离大果白刺粗多糖（CNRFP）,并对其单糖组成、物理特性和抗氧化活性进行研究。结果表明,大果白刺多糖主要由葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖、半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸、甘露糖等组成,单糖组成质量比为葡萄糖:阿拉伯糖:半乳糖=5.43:2.98:1.94。大果白刺多糖在25~125 ℃范围内具有良好的热稳定性;大果白刺多糖溶液是具有剪切变薄的假塑性流体,且有良好的保湿性。此外,还具有良好的发泡能力和乳化能力,当大果白刺多糖浓度为5%时,其发泡率和乳化率分别是42.16%和65.29%。大果白刺多糖对自由基清除能力和总还原能力均随浓度增大而增大。CNRFP的清除DPPH、ABTS和羟基自由基半数清除率浓度（IC₅₀）值分别为是1.14、0.54和1.11 mg/mL,抗氧化活性良好。研究结果为大果白刺多糖在食品添加剂、制药和材料科学行业中的应用提供理论依据。     

不同产地大花红景天多糖的单糖组成分析

通过气相色谱-质谱联用技术对不同产地大花红景天水提和碱提粗多糖的单糖组成及其比例进行分析。结果表明:西藏3个产地大花红景天水提粗多糖ST-Ⅰ、ST-Ⅱ、ST-Ⅲ均由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖构成,摩尔比分别为:1∶2.86∶0.43∶2.12∶0.63、1∶2.81∶0.28∶1.72∶0.37、1∶3.37∶0.58∶2.36∶0.66;碱提粗多糖JT-Ⅰ、JT-Ⅱ由甘露糖、葡萄糖和半乳糖构成,摩尔比分别为:1∶0.93∶2.90、1∶2.01∶2.92,JT-Ⅲ与其他两地相比,单糖组成有较大差异,由鼠李糖、岩藻糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖,其摩尔比为5.60∶1.02∶13.20∶1∶9.27∶0.92。     

提取方法对黄秋葵花多糖的结构组成及抗氧化活性的影响

以黄秋葵花为原料,研究热水、酸法、酶法、超声辅助提取工艺对黄秋葵花多糖提取率和样品结构组成等 的影响,在此基础上对4 种多糖抗氧化活性进行了比较分析。结果表明：4 种提取方法所得多糖的提取率大小依次 为：酶法提取（（21.90±0.14）%）＞酸法提取（（15.15±0.07）%）＞热水提取（（12.60±0.28）%）＞超声辅 助提取（（12.02±0.37）%）。经酶法和热水提取的多糖样品分子质量较高且特性黏度较大,而超声提取则显著降 低了多糖的分子质量和特性黏度,同时使多糖分子质量的分布更加均一。4 种多糖的单糖组成成分相同,主要包括 鼠李糖、半乳糖醛酸和半乳糖,但单糖的物质的量之比有所不同。傅里叶变换红外光谱分析结果表明,得到的4 种 样品都具有多糖的典型傅里叶变换红外光谱特征。对1,1-二苯基-2-苦基肼自由基清除能力等抗氧化活性的测定结果 表明,4 种多糖具有不同程度的抗氧化活性。其中,以超声辅助提取的多糖抗氧化活性最强。     

A sensitive analytical method for the component monosaccharides of the polysaccharides from a Tibetan herb Potentilla anserine L. by capillary zone electrophoresis with UV detector

A rapid and sensitive method was optimized and validated for the separation and quantification of derivatized monosaccharides in polysaccharide from Potentilla anserine L. using 1-naphthyl-3-methyl-5-pyrazolone (NMP) as precolumn derivatization reagent by capillary zone electrophoresis (CZE). On the basis of the optimum conditions, nine NMP-derivatized monosaccharides achieve baseline resolution within 16 min. The developed method has been successfully applied to analyze component monosaccharides of three Potentilla anserine L. samples, which were obtained by gradational precipitation with 50, 70, and 90% aqueous ethanol, respectively. The polysaccharide precipitated from 50% ethanol solvent was composed of fucose, mannose, xylose, glucuronic acid, glucose, rhamnose, galacturonic acid, galactose, arabinose in molar proportion of 1:1.65:1.99:5.08:7.38:8.14:13.05:27.41:39.02; the corresponding molar proportions for polysaccharide obtained from 70% ethanol solvent were 1:1.64:1.65:4.52:13.96:9.13:26.30:10.52:18.00; fucose and galacturonic acid were not found in the polysaccharide precipitated from 90% ethanol solvent, and mannose, xylose, glucuronic acid, glucose, rhamnose, galactose and arabinose were determined with molar proportion of 1:0.87:1.77:2.78:1.69:2.58:2.49. Quantitative recoveries of the component monosaccharides in the polysaccharide were in the range of 93.3–105.1% and the relative standard deviation (RSD) values fell within 3.4–6.3%, respectively. The results demonstrated that the proposed CZE method was precise and sensitive for the analysis of the composition of polysaccharide.     

Separation and quantification of component monosaccharides of the tea polysaccharides from Gynostemma pentaphyllum by HPLC with indirect UV detection

A reversed-phase high-performance liquid chromatographic (HPLC) method is described for the simultaneous determination of aldoses and uronic acids. The separation was carried out on a RP-C₁₈ column (4.6 mm i.d. × 250 mm, 5 μm, Venusil, USA) using precolumn derivatization with 1-phenyl-3-methyl-5-pyrazolone (PMP) and UV detection at 250 nm, and the 10 PMP derivatives of mannose, ribose, rhamnose, glucuronic acid, galacturonic acid, glucose, xylose, galactose, arabinose and fucose were baseline separated within 40 min. Furthermore, the described method was applied to the quantitative analysis of component monosaccharides in the water-soluble polysaccharides extracted from Gynostemma pentaphyllum Makino tea and the result showed that the tea polysaccharide was a typical heteropolysaccharide and consisted of mannose, ribose, rhamnose, glucuronic acid, galacturonic acid, glucose, xylose, galactose and arabinose in the molar contents of 16.3, 10.3, 47.1, 5.6, 24.0, 128.4, 25.0, 101.4 and 71.1 μM, respectively. Quantitative recoveries of the component monosaccharides in the tea polysaccharide were in the range of 94.6–108.0% and the RSD values were lower than 4.9%. The results demonstrated that the proposed HPLC method was precise and practical for the analysis of the G. pentaphyllum tea polysaccharide.