榨前分离苹果皮多糖的鉴定及抗氧化活性研究

以榨前分离苹果皮为原料,采用超声波辅助法提取多糖,通过改变洗脱液的极性对多糖进行分离纯化,并对各组分的抗氧化活性进行分析。结果表明:多糖样品经过DE-52纤维素柱梯度洗脱得到三个含量较大的洗脱峰,分别为水、0.3mol/L NaCl和0.9mol/L NaCl洗脱组分。采用Sephadex G-200凝胶柱对洗脱组分进一步纯化,得到APPSH2O、APPS-0.3mol/L和APPS-0.9mol/L三种不同组分的多糖纯品。抗氧化实验表明:三种不同组分多糖均有一定的还原力、清除·OH、DPPH·,O-2·的能力,但其抗氧化能力均小于粗多糖和V C。     

软枣猕猴桃多糖的分离纯化及抗氧化活性测定

对微波辅助提取的软枣猕猴桃多糖进行分离纯化并对各纯化组分的抗氧化活性进行测定。利用DE-AE-纤维素阴离子交换层析对软枣猕猴桃多糖进行初步分离,得到1个水洗组分和3个盐洗组分;利用Sephade-xG-100、G-200凝聚柱层析对其进行进一步分离纯化。结果表明:4个组分都为均一多糖且都不含有蛋白质;软枣猕猴桃多糖对DPPH自由基和羟基自由基具有一定的清除能力,对超氧阴离子自由基的清除能力很弱,盐洗组分的抗氧化活性明显优于水洗组分;0.1盐洗组分(0.1 mol/L NaCl溶液洗脱的组分)、0.2盐洗组分(0.2 mol/L NaCl溶液洗脱的组分)、0.3盐洗组分(0.3 mol/L NaCl溶液洗脱的组分)、Vc清除DPPH自由基的IC50分别为0.57、1.61、1.18、0.03 mg/mL;清除羟基自由基的IC50分别为1.5、5.6、2.7、0.2 mg/mL;0.1盐洗组分为软枣猕猴桃多糖中主要的抗氧化活性组分。     

基于膜技术的灵芝粗多糖分级分离及抗氧化活性比较

本文主要研究膜分离技术对灵芝粗多糖分级分离效果及其抗氧化活性的影响。以灵芝子实体为原料,通过热水浸提后用100、10和1 kDa超滤膜多级组合对灵芝粗多糖进行分级分离,分别记为GLP100、GLP10和GLP1。比较3种不同孔径膜对灵芝粗多糖的分级效果、理化性质和抗氧化活性的差异。傅里叶红外变换光谱分析结果证明3种多糖样品均具有典型的β-型糖苷键吸收峰,刚果红与圆二色谱分析证明了3种粗多糖是具有螺旋结构的多糖,且GLP100和GLP10是具有三螺旋结构的多糖。SEM结果表明三种多糖颗粒大小明显不同,进一步验证了不同膜是可以对灵芝粗多糖进行分级。还原力、OH自由基、2, 2’-联氮双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二铵盐阳离子自由基（ABTS自由基）和1, 1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基（DPPH自由基）清除结果表明,3种粗多糖样品均具有一定的抗氧化能力,但存在些许差异。其中三种多糖还原力十分接近,GLP100的OH和DPPH自由基清除能力好于其他两种多糖, GLP1的ABTS自由基清除能力比其他两种多糖效果更好。实验结果表明,膜分离技术可以有效地对灵芝多糖进行分级。     

3种不同产地灵芝子实体粗多糖体外抗氧化活性比较研究

采用2,2'-联氮基双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除法、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除法、羟基自由基清除法和铁氰化钾法4种方法,分别对3种不同产地(安徽金寨、吉林通化、吉林蛟河)灵芝子实体粗多糖的体外抗氧化活性进行评价。结果表明,3种灵芝子实体粗多糖均具有抗氧化能力。安徽金寨灵芝子实体粗多糖对ABTS自由基、DPPH自由基的清除能力最强,其对应EC50值分别为1.50 mg/m L和2.09 mg/m L,同时也具有最强的总还原力;吉林通化灵芝子实体粗多糖对羟基自由基的清除能力最强,其EC50值是2.13 mg/m L;吉林蛟河灵芝子实体粗多糖的体外抗氧化活性均最低。因此,不同产地灵芝子实体粗多糖的抗氧化活性不同。     

超声破碎辅助提取灵芝多糖工艺优化及抗氧化活性研究

对超声破碎辅助提取灵芝多糖工艺进行优化,比较灵芝多糖的抗氧化活性,体外筛选最优抗氧化活性部位。在单因素试验的基础上,考察液料比、超声时间、超声功率对灵芝多糖提取得率的影响,采用Box-Behnken中心组合方法进行响应面优化试验,采用乙醇分级沉淀法得灵芝多糖GLP40、GLP60、GLP80,比较对DPPH·清除活性,羟自由基(·OH)的清除活性和还原力大小,分析体外抗氧化活性。结果表明响应面优化试验所得最佳提取条件为液料比25∶1(mL/g)、超声时间60 min、超声功率760 W,灵芝多糖的提取得率为3.60%,所得GLP40、GLP60、GLP80多糖比例为45∶29∶26,具有一定的抗氧化活性,其中GLP80清除DPPH自由基的能力最强,GLP40清除羟自由基能力最强,GLP60还原力最强。     

莲藕多糖的分离纯化及抗氧化活性研究

本实验从莲藕渣中通过水提醇沉法提取得到水溶性莲藕粗多糖NPh,采用DEAE Sephrose Fast Flow离子交换层析法纯化NPh,实验不同pH值及盐浓度对NPh的洗脱效果,确定了合适的纯化条件为以pH5.0 0.05mol/L HAc-NaOAc缓冲液作为起始缓冲液,起始缓冲液加0.5mol/L NaCl进行分步洗脱,洗脱速度为6.0ml/min,收集得到均-多糖组分NPhz.通过清除DPPH·自由基和保护红细胞氧化溶血的实验研究NPh2的抗氧化活性,结果显示,NPh不存在清除DPPH·自由基的作用,能够有效抑制红细胞氧化损伤.     

灵芝多糖提取工艺优化及抗氧化活性的研究

目的研究灵芝多糖(Ganoderma lucidum polysaccharides,GLP)的最优提取工艺,并研究其抗氧化活性。方法通过单因素和响应面法优化提取工艺参数,获得GLP;将GLP进行乙醇分级得到GLP30、GLP60和GLP80 3个组分;采用还原力、DPPH自由基清除试验和羟自由基清除试验评估GLP及3个组分的抗氧化活性。结果灵芝多糖最优提取条件为:温度86°C,液料比50:1(mL/g),时间142min,实际提取得率为1.71%;抗氧化活性试验结果表明:GLP及GLP30、GLP60和GLP80均具有一定的抗氧化活性,均呈现浓度-活性依赖性,其中GLP80还原力最强,GLP清除DPPH自由基和羟自由基的能力最强。结论响应面法有效优化了GLP的提取,灵芝多糖具有较好的抗氧化活性,值得进一步研究及开发利用。     

铁棍山药多糖纯化及抗氧化活性

对铁棍山药粗多糖进行纯化分离获得单体组分,并对其抗氧化活性进行评价。利用AB-8大孔树脂对铁棍山药多糖进行富集纯化,再利用DEAE-52纤维素层析柱和Sephadex G-100层析柱分离多糖粗品,利用DPPH自由基清除实验、ABTS自由基清除实验和总还原能力测定评价分离得到的3种铁棍山药多糖组分的抗氧化活性。结果显示,AB-8大孔树脂可纯化铁棍山药粗多糖,使其纯度从53.13%提高到82.57%,获得多糖粗品,洗脱参数为:上样浓度为1.12 g/L,上样体积为4000 mL,上样流速为500 mL/h,洗脱液速度为750 mL/h,洗脱液体积为1000 mL,解吸率可达到95.62%。经过DEAE-52纤维素层析柱和Sephadex G-100层析柱分离得到3种铁棍山药多糖组分DOTP1、DOTP2和DOTP3,得率分别为0.34%、0.42%和0.36%,纯度分别为93.11%、91.22%和92.75%。DPPH自由基清除实验、ABTS自由基清除实验和总还原能力测定结果显示,铁棍山药多糖DOTP1的抗氧化活性优于DOTP2和DOTP3,而3种多糖组分的抗氧化活性都略优于阳性对照VE。研究所用纯化分离方案可实现铁棍山药多糖的分离纯化,得到的3种多糖组分具有较好的抗氧化活性。     

黄粉虫粗多糖的初步纯化及体外抗氧化活性研究

以黄粉虫粗多糖为原料,通过单因素脱蛋白试验,利用响应面法优化脱蛋白工艺,经DEAE-纤维素阴离子层析柱纯化,对多糖进行体外抗氧化活性分析。结果表明：各因素对黄粉虫粗多糖蛋白去除率的影响程度为：脱蛋白次数>振摇时间>静置时间。当Sevage试剂加入量与粗多糖溶液体积比为1:1时,优化条件为：振摇时间17 min、静置时间19 min、脱蛋白次数2次,蛋白去除率达61.25%。与未除蛋白的粗多糖相比,除蛋白后黄粉虫多糖对DPPH自由基、羟自由基清除能力的IC₅₀减小,分别为3.052、7.276 mg/mL,说明多糖抗氧化活性增强。黄粉虫多糖经不同浓度NaCl溶液梯度洗脱纯化获得4个主要组分,其中0.5 mol/L NaCl洗脱的多糖体外抗氧化性综合能力最强。     

化橘红多糖的提取纯化及抗氧化活性研究

对化橘红粗多糖及其纯化组分的抗氧化活性进行研究。化橘红粉末经热水提取、乙醇沉淀、sevage法脱蛋白、透析得到粗多糖,粗多糖经DEAE-52纤维素阴离子交换层析柱分离,得到2个纯化组份ECP1和ECP2。采用化学法分别测定了粗多糖及其纯化组分的体外清除自由基(DPPH.,.OH,ABTS.+)能力、还原能力。粗多糖的多糖含量为74.29%,经DEAE-52纯化的组分ECP1和ECP2的多糖含量分别为83.39%和85.77%。结果表明粗多糖及其两个纯化组分均具有较好的抗氧化清除自由基的能力,并且抗氧化能力与多糖浓度之间存在良好的相关性。其中ECP2的抗氧化清除自由基能力强于ECP和ECP1,但是低于对照VC。     

对破壁处理灵芝孢子粉功能特性的测定与分析

采用球磨法对灵芝孢子粉进行破壁处理,测定对比灵芝孢子粉破壁前后的水分、粗蛋白、粗脂肪和灰分的溶出量,粗多糖和总三萜的生物活性物质溶出量,测定分析了水、醇提取物DPPH·、ABTS·清除能力和还原能力。结果表明:灵芝孢子粉破壁前后水分和灰分变化不显著,粗蛋白溶出量增加了33.96%,粗脂肪溶出量提高了2.94倍;灵芝孢子粉粗多糖和总三萜活性物质溶出量分别增加了40.90%和55.21%;破壁后灵芝孢子粉抗氧化能力显著提高。     

新疆沙枣多糖的提取分离及抗氧化活性研究

采用水提醇沉法提取新疆沙枣多糖,并采用DM-18型大孔树脂对粗沙枣多糖进行分离纯化,确定了最佳的分离条件。通过粗沙枣多糖和纯化后的沙枣多糖对DPPH自由基、羟基自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O2-·)的清除能力进行比较。结果表明:在沙枣多糖样品溶液2.0 mg/m L,上样速率为1.5 BV/h,上样液p H值为7.0,上样量为3.0 BV、洗脱剂乙醇浓度为35%、洗脱剂用量为3.0 BV、洗脱速率为1.0 BV/h时,洗脱剂p H值为8时,DM-18型大孔树脂对沙枣多糖的动态吸附率和解吸率分别达到90.23%和92.37%,粗沙枣多糖的纯度为42.33%,纯化后的多糖纯度为70.56%。粗多糖和纯化后多糖对DPPH·、·OH、O2-·均有清除作用,纯化后多糖的抗氧化活性大于粗多糖。     

鹿茸多糖分离纯化及抗氧化活性研究

采用DEAE-52离子交换层析和Sepharose CL-6B凝胶排阻层析对鹿茸粗多糖进行分离纯化,并通过对DPPH自由基、羟基自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O2-·)清除能力和还原能力的测定,研究了粗多糖及纯化后多糖的抗氧化能力。结果表明:DEAE-52离子交换层析和Sepharose CL-6B凝胶排阻层析对鹿茸多糖分离效果较好,可以分离纯化得到一种单一多糖;粗多糖和纯化后多糖对DPPH·、·OH、O2-·均有清除作用,且具有一定的还原能力,纯化后多糖抗氧化活性和还原能力均大于粗多糖。     

北沙参乙醇分级多糖的理化性质及抗氧化活性研究

采用水提醇沉法分级纯化得到4种北沙参多糖(GLP-30、GLP-50、GLP-70、GLP-剩余),采用傅里叶变换红外光谱、高效液相色谱、凝胶渗透色谱、扫描电镜以及差示扫描量热—热重分析等进行分析,并测定其抗氧化活性。结果表明:4种北沙参多糖均具有多糖的典型基团,但差示扫描量热结果相差较大;各多糖组分分子量随乙醇浓度的增加而降低;不同组分间的多糖得率及单糖含量有一定差异,其中GLP-50得率(5.43%)和半乳糖醛酸含量(2.03%)最高,蛋白含量(7.66%)较高,具有最高的保油性,在清除DPPH自由基和羟基自由基中表现出最高的抗氧化能力。乙醇分级沉淀的方法可用于分级纯化北沙参多糖组分,其中50%乙醇更适宜沉淀制备北沙参多糖,且所得多糖抗氧化性较强。     

破壁与去壁灵芝孢子粉的化学成分与抗氧化活性比较

本研究以去壁灵芝孢子粉与破壁灵芝孢子粉为原料,探究不同孢子壁加工工艺对灵芝孢子粉化学成分及抗氧化活性的影响。实验对比了两种灵芝孢子粉的水分、灰分、膳食纤维、蛋白质、总三萜、总多糖、微量元素、氨基酸等主要指标及其体外抗氧化活性。结果表明,去壁灵芝孢子粉在灰分、水溶性膳食纤维、蛋白质、总多糖、总三萜和水解氨基酸的含量分别是2.227%、8.810%、15.922%、12.129%、2.556%、6.744%,均高于破壁灵芝孢子粉,其中总多糖含量较破壁提高了近12倍。三萜的色谱图显示,去壁孢子粉中含有更丰富的萜类物质。对比两种孢子粉醇提相与水提相的抗氧化活性,去壁灵芝孢子粉醇提相显示出最强的抗氧化活性,在2 mg/mL的浓度下,总还原力和DPPH自由基清除率分别为1.114和89.860%;在0.5 mg/mL的浓度下,其ABTS+自由基清除率为99.714%,与同浓度下V_C阳性对照组结果相当;在10 mg/mL浓度时,羟基自由基清除率达到84.301%。因此,去壁技术提高了灵芝孢子粉中关键物质含量,增强了其抗氧化能力。     

雪樱子粗多糖提取、纯化工艺及抗氧化活性研究

以雪樱子为原料,优化雪樱子粗多糖水提醇沉提取法及AB-8型树脂纯化工艺。并以维生素C作为对比,以羟自由基清除能力、超氧阴离子自由基清除能力、DPPH自由基清除能力作为指标,对雪樱子粗多糖进行了体外抗氧化活性的测定。结果表明,雪樱子粗多糖的优化提取工艺为:醇沉乙醇体积分数80%、料液比(g/mL)1∶20、提取温度95℃、提取时间6 h,粗多糖得率为(1.421±0.081) mg/g。雪樱子多糖优化纯化工艺为:上样液质量浓度1.00 mg/mL,上样液pH值5,吸附速率2 BV/h,乙醇洗脱剂体积分数25%,洗脱速率2 BV/h,回收率为44.99%±1.23%。雪樱子粗多糖具有较好的体外抗氧化活性。研究结果为雪樱子多糖活性分析和功能性产品开发提供了技术支持。     

不同提取方法对米邦塔仙人掌粗多糖体外抗氧化性的影响

目的:研究不同提取方法对米邦塔仙人掌粗多糖体外抗氧化活性的影响。方法:采用热水提法、酶法和超声波法分别提取米邦塔仙人掌粗多糖,苯酚-硫酸法测定粗多糖纯度,以抗肝组织自发性脂质过氧化能力、清除羟基自由基能力、清除超氧阴离子能力、清除1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基能力、总还原能力、总抗氧化能力6种方法作为体外抗氧化能力评价指标。结果:酶法提取的粗多糖得率最高,为10.14%;超声波法提取的粗多糖纯度最高,为47.62%;酶法和超声波法提取的粗多糖各项体外抗氧化指标的活性均高于热水提法。结论:米邦塔仙人掌粗多糖的体外抗氧化活性强弱与粗多糖的提取方法有关,酶法和超声波法提取的粗多糖具有较好的抗氧化活性。     

不同破壁方法对灵芝孢子粗多糖抗氧化活性的影响

采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除法、羟自由基清除法、2,2’-联氮基双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二铵盐自由基（2,2’-azinobis(3-ehtylbenzothiazolin-6-sulfnicacid)diammonium salt,ABTS＋·）清除法和铁氰化钾法以及酵母细胞氧化损伤保护模型,分别对未破壁灵芝孢子（unbroken Ganoderma lucidum spore,UGS）、机械法破壁灵芝孢子（mechanically broken Ganoderma lucidum spore,MGS）、生物法与机械法复合破壁的灵芝孢子（biologically and mechanically broken Ganoderma lucidum spore,BGS）提取粗多糖进行体外抗氧化活性评价。结果表明,3 种处理方法的灵芝孢子粗多糖表现出不同的抗氧化活性,且抗氧化活性与多糖质量浓度呈一定效量关系,多糖质量浓度越高,抗氧化活性越强。BGS所得粗多糖对DPPH自由基、羟自由基、ABTS＋?的清除能力以及还原力在3 种处理方法中均为最强。多糖质量浓度为5.0 mg/mL时,对3 种自由基的清除率分别为84.6%、91.0%、99.9%,还原力为1.09;BGS所得粗多糖对紫外损伤酵母细胞保护能力也相对较强。表明BGS粗多糖具有较高的抗氧化活性。     

灵芝结构多糖水解物促进细胞免疫的功能研究

通过提取水溶性功能性多糖得到的灵芝残渣用作原料,结构多糖在一定条件下水解,得到具有清除自由基功能的结构多糖水解产物。将其分离并纯化,得到两种单一组分,GLSP1和GLSP2。选择并测试两种典型的脾细胞和巨噬细胞免疫功能模型。GLSP对小鼠腹腔巨噬细胞的活性没有副作用,两者都能抑制LPS诱导的PM增殖。GLSP2对激活小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能具有显著作用,并且可以抑制LPS诱导的PM产生NO和TNF-α。GLSP2对巨噬细胞的调节充分证明了其作为先天免疫应答调节剂的潜力。它具有成为肿瘤、感染、自身免疫疾病和免疫缺陷疾病等疾病的辅助治疗药物的潜力。     

云南铜色牛肝菌多糖分离纯化及抗氧化活性研究

通过对铜色牛肝菌多糖进行分离纯化和活性分析,为野生铜色牛肝菌的进一步推广和应用提供理论依据。本研究采用热水浸提法提取的粗多糖为原料,并利用DEAE-52纤维素柱层析和Sephadex G-100柱层析对所获得的粗多糖进行纯化,得到两种单一多糖PB-1A、PB-2A,比旋光度和紫外扫描方法鉴定多糖的纯度。通过体外抗氧化实验评价体系研究,比较铜色牛肝菌粗多糖及纯化后的多糖PB-1A、PB-2A对羟基自由基、DPPH自由基的清除活性以及总还原能力。结果表明:铜色牛肝菌多纯化糖前后的对羟基自由基、DPPH自由基的清除活性以及总还原能力呈现一定效量关系,且均为PB-2APB-1A铜色牛肝菌粗多糖。