提取方式对十字花科蔬菜中异硫氰酸酯的影响

通过环缩合法和气质联用法探究先酶解后提取（hydrolysis followed by extraction,HFE）和酶解-提取同时进行（simultaneous hydrolysis and extraction,SHE）两种提取方式对6种十字花科蔬菜（萝卜、芥菜、榨菜、甘蓝、花菜和西兰花）种子中异硫氰酸酯（isothiocyanate,ITC）种类和含量的影响,并分析B16细胞抑制活性和NAD（P）H：醌氧化还原酶1[NAD（P）H：quinone oxidoreductase 1,NQO1]诱导活性受提取物影响的差异。环缩合法的结果表明,与HFE相比SHE可显著提高西兰花和萝卜种子ITC含量（P＜0.05）。气相色谱-质谱联用的结果表明,SHE比HFE显著提高了萝卜种子中莱菔素（3.26倍）、erucin、raphasatin、4-MI和 B,4-I-1,西兰花种子中 erucin（1.63倍）和芥菜、甘蓝、花菜和西兰花种子中iberverin的含量（P＜0.05）。与HFE相比,SHE增加了芥菜和西兰花种子中ITC的种类,分别为iberverin和octane（OCT）,并减少了花菜种子中ITC的种类,cyclopropyl isothiocyanate（CP）。两种方法对alyssin、iberin等其他ITC种类和含量无显著影响（P＞0.05）。细胞活性试验表明,SHE组萝卜、甘蓝、花菜和西兰花种子提取液的细胞抑制率均显著高于HFE组（P＜0.05）,并且SHE组西兰花种子的NQO1诱导活性显著高于HFE组（P＜0.05）。     

西兰花茎叶蛋白酶解条件优化及其降血脂活性

为优化胰蛋白酶水解西兰花茎叶蛋白的酶解条件及研究西兰花茎叶蛋白肽辅助降血脂活性,选取pH、温度、加酶量和底物浓度为自变量,水解度为响应值,利用响应面分析法,确定最佳酶解工艺参数;通过小鼠喂养实验分析西兰花茎叶蛋白肽对小鼠甘油三酯(TC)、总胆固醇(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)含量以及动脉硬化指数(AI)的影响。结果表明,西兰花茎叶蛋白胰蛋白酶酶解的最优条件为:pH7.5,温度50℃,加酶量2000 U/g,底物浓度4%,水解度22.37%±0.46%;西兰花茎叶蛋白肽低剂量组(300 mg/kg)小鼠血清TC、ALT含量与模型组相比有极显著差异(P<0.01),TG、LDL-C含量与模型组有显著差异(P<0.05),对AST含量无明显降低作用;中(600 mg/kg)、高(1200 mg/kg)剂量组样品在降低TC、TG、LDL-C、ALT和AST含量上与模型组有极显著差异(P<0.01);高剂量组(1200 mg/kg)对HDL-C含量无明显影响,低(300 mg/kg)、中剂量组(600 mg/kg)能增加HDL-C含量,与模型组间有极显著差异(P<0.01),有利于AI指数的降低。以上结果表明西兰花茎叶蛋白肽具有良好的降血脂活性。     

香水莲花提取物的美白功效研究

天然提取物由于其安全性高,近年来成为化妆品功效研究的热点。通过体外法测定香水莲花提取物所含活性成分及其对酪氨酸酶活性的抑制效果,再采用细胞模型探究其对B16小鼠黑素瘤细胞形态、增殖、黑素含量以及细胞内酪氨酸酶活性的影响。结果显示,黄色、蓝色香莲整花提取物均能有效抑制体外酪氨酸酶活性,其中体积分数60%醇提物能有效减缓B16黑素瘤细胞增殖、抑制黑素合成及胞内酪氨酸酶活性,添加100μg/m L的黄、蓝色整花体积分数60%醇提物的细胞增殖率分别为(84.44±1.77)%、(48.24±3.14)%,黑素质量分数为(69.69±1.40)%、(66.98±2.44)%,具有较好的美白功效。     

36种蔬菜抑制肝癌HepG2和结肠腺癌Caco-2细胞增殖活性评价

为明确36种中国主要消费蔬菜多酚提取物的总酚含量和抑制人肝癌细胞Hep G2和人结肠腺癌细胞Caco-2增殖活性,分别采用Folin-Ciocalteu法确定了蔬菜提取物的总酚含量,采用亚甲基蓝法确定了其抗Hep G2和Caco-2细胞增殖的活性,分析了总酚含量与抗Hep G2和Caco-2细胞增殖活性之间的相关性。结果表明,36种蔬菜每百克中没食子酸当量:芥蓝(973.09±31.29)μmol/hg,莲藕(920.55±29.00)μmol/hg,它们的总酚含量最高;丝瓜(44.94±4.16)μmol/hg,其总酚含量最低。在可测出抗增殖EC50值的蔬菜中,韭菜(15.96±0.88)mg/m L和蒜苔(17.54±0.03)mg/m L,它们的抗Hep G2细胞增殖的活性最强;上海青(390.52±17.63)mg/m L和空心菜(394.25±11.89)mg/m L,它们的活性最弱。韭菜抗Caco-2细胞增殖的活性最强,为(21.08±1.67)mg/m L;青尖椒的活性最弱,为(390.17±4.78)mg/m L。这些蔬菜的抗Hep G2和Caco-2细胞增殖活性与其总酚含量相关性均不显著(R2=0.027 1,p0.05;R2=0.151 3,p0.05),表明蔬菜的抗肿瘤活性不能单从其多酚含量的高低来推测。     

响应面法优化西兰花种子中异硫氰酸酯的酶解制备工艺

本研究采用单因素和响应面分析法优化了西兰花种子中异硫氰酸酯（Isothiocyanates，ITCs）的酶解制备工艺，分别考察了酶与底物的质量比、酶解时间、酶解温度、pH及浸提料液比对ITCs提取率的影响，在单因素实验基础上，选取酶解时间、温度及pH进行响应面试验，并使用硫脲法和气相色谱-质谱法（Gas chromatography-mass spectrometry，GC-MS）进行检测分析。结果表明，ITCs的最佳酶解条件为:酶解时间3.95 h，酶解温度44.6 ℃，pH6.52，实验提取率达到8.36 mg/g，理论提取率为8.51 mg/g，相对误差为1.8%。气相色谱-质谱测得酶解主要产物包括4-（甲硫基）丁腈、1-异硫代氰酸丁酯、萝卜硫腈、噁唑烷硫酮以及萝卜硫素五种相关化合物，其中目标活性物质萝卜硫素的相对含量最高。综上，该提取工艺参数用于西兰花种子中ITCs的制备是可行的。     

西兰花种子发芽过程中生理活性物质含量的变化

以西兰花种子为试材,测定不同品种西兰花种子中萝卜硫苷和萝卜硫素含量,分析选取的种子在发芽过程中抗坏血酸、总酚、花色苷、萝卜硫苷、黑芥子酶活性和萝卜硫素含量的变化。结果表明,10种西兰花种子中萝卜硫苷和萝卜硫素含量差异显著,两者在LX5种子中含量最高,分别为134.06μmol/g DW和11.37 mg/g DW,且硫苷水解的产物中萝卜硫素的含量最高。LX5中,抗坏血酸在发芽过程中逐渐生成,发芽4 d时高达127.49mg/100 g FW,随后逐渐下降;总酚在发芽过程中逐渐下降,发芽5 d时其含量下降42.14%;花色苷含量与抗坏血酸含量变化趋势基本一致;萝卜硫苷和萝卜硫素含量在发芽过程中呈下降趋势;黑芥子酶活性在0~3 d无显著变化,随后逐渐增强。     

中国主要水果抑制肝癌HepG2细胞和结肠腺癌Caco-2细胞增殖活性评价

分别采用Folin-Ciocalteu法测定了水果提取物的总酚含量,采用亚甲基蓝法测定了其抗人肝癌细胞Hep G2和人结肠腺癌细胞Caco-2增殖的活性,分析了总酚含量与抗Hep G2和Caco-2细胞增殖活性之间的相关性。结果显示,25种水果中李子的总酚含量最高(1686.08±96.94μmol GAE/100鲜果),西瓜(83.54±2.10μmol GAE/100 g鲜果)和哈密瓜(79.35±0.76μmol GAE/100 g鲜果)的总酚含量最低;在可测出抗增殖EC50值的水果中,李子(18.99±0.06 mg/m L)和番石榴(20.94±0.09 mg/m L)抗Hep G2细胞增殖的活性最强,梨的活性最弱(389.63±10.82 mg/m L)。李子抗Caco-2细胞增殖的活性最强(8.73±0.11 mg/m L),火龙果的活性最弱(388.07±7.04 mg/m L)。水果的抗Hep G2和Caco-2细胞增殖活性与其总酚含量相关性显著(R2=0.4147,p0.01;R2=0.4071,p0.05),该相关性表明水果中的多酚具有良好的抗肿瘤细胞增值的活性。     

西兰花茎叶肽的酶法制备及其降血脂功能研究

本文以西兰花茎叶为原料,用煮沸法从中提取蛋白。蛋白粗提物经酶解制备,得到西兰花肽后用Valflow50超滤、Sephadex G-15分离纯化,通过细胞实验进行降血脂功能筛选,最后通过动物实验对其降血脂功能进行评价。结果表明,西兰花蛋白粗提物的蛋白质含量为49.6%,酶解可以增强西兰花蛋白的降血脂活性,分离组分G15-Ⅱ的体外降血脂功能最强。以400、200 mg/kg灌胃的大鼠血液总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)含量水平降低(P<0.01),同时400 mg/kg组的HDL-C含量提高(P<0.05),表明G15-Ⅱ具有降血脂作用。此研究可为西兰花的深度开发和综合利用提供基础数据和科学参考。     

西兰花芽提取物体外抗肿瘤活性及作用机制研究

西兰花芽是多种生物活性成分的良好来源,营养价值极高,近年来被广泛研究。该文对西兰花芽提取物的抗肿瘤活性及其潜在机制进行探讨。通过观察细胞形态学变化,发现西兰花芽提取物可使结肠癌Caco-2细胞和肝癌HepG2细胞密度下降,且细胞出现凋亡状态。细胞增殖抑制率结果表明西兰花芽提取物能够抑制两种肿瘤细胞增殖,且呈剂量依赖性,CaCl2组对 Caco-2和 HepG2细胞半数抑制浓度分别为（0.030±0.002）、（0.043±0.004）mg/mL。通过流式细胞术检测凋亡率,发现西兰花芽提取物可使细胞凋亡比例达到82.95%。活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平和线粒体膜电位检测结果表明,西兰花芽提取物可能通过诱导细胞产生ROS,降低线粒体膜电势,促进细胞凋亡,从而抑制Caco-2细胞增殖。     

黄芪甲苷抑制黑色素瘤B16细胞的增殖作用

本文研究了黄芪甲苷抑制黑色素瘤B16细胞增殖并诱导细胞凋亡的影响。将细胞培养成功后,分别分成空白对照组、低浓度组(10 mg/mL)、中浓度组(20 mg/mL)、高浓度组(50 mg/mL),检测黄芪甲苷对黑色素瘤B16细胞增殖及凋亡的影响,并测定Caspase-3、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bax、β-catenin等蛋白的表达量。结果表明,黄芪甲苷具有较好的抗氧化活性,50 mg/mL处理时,其还原能力和DPPH自由基清除能力分别为0.92和70.82%;在此作用浓度下,处理72 h后,其对B16细胞的增殖率和凋亡率分别为15.55%和40.45%,和其他各组均有显著性差异(p<0.05)。此外,在高浓度黄芪甲苷作用下,Caspase-3、Bcl-2、Bax、β-catenin蛋白的表达量分别为0.56、0.58、0.27、0.25,显著区别于其他各实验组(p<0.05),说明黄芪甲苷能抑制较好黑色素瘤B16细胞的增殖,并通过调控Caspase-3、Bcl-2、Bax、β-catenin蛋白表达,诱导细胞凋亡。