一株芝麻枯萎病菌的鉴定及其生物学特性

为明确发生在南阳芝麻田块的芝麻枯萎病病原物,以有效防治病害,从南阳市采集枯萎病显症芝麻植株,用常规组织分离法获得一株镰刀菌ZY-2,依据柯赫法则确定ZY-2对芝麻幼苗的致病性,显微观察形态特征,检测生物学特性,并依据核糖体基因内转录间隔区（rDNA-ITS）序列和翻译延伸因子1α基因（tef）序列对该菌进行分子鉴定。在基于rDNA-ITS序列构建的系统发育树中,菌株ZY-2与2株尖孢镰刀菌Fusarium oxysporum的参比菌株（GenBank登记号：AF69310和EU285553）在自举值98%相聚一群。基于tef基因序列构建的系统发育树中,菌株ZY-2与3株F.oxysporum的参比菌株（GenBank登记号：KF030591、KF301636和FJ985299）在自举值100%相聚一群。该菌适宜生长温度为22~31℃,最适为28℃;pH2.0~10.0范围内均可生长,最适为pH6.5~7.5;能利用多种碳源和氮源进行营养生长,但在以葡萄糖和L-脯氨酸分别作为唯一碳源和氮源的培养基上不产生分生孢子。     

蓖麻枯萎病病原菌及其生物学性状研究

蓖麻枯萎病病原菌的分离鉴定表明病原菌为尖孢镰刀菌蓖麻专业型。该菌分生孢子萌发适温２５－２８℃相对湿度为１００％。萌发和生长最适ｐＨ值为６－７天，条件适宜４小时产生芽突，６小时萌发率达７０．２％，致死温度和时间分别为５５℃，２０分钟和６０℃，１０分钟。     

兰州百合青霉病病原菌分离鉴定及生物学特性研究

目的 探索引起兰州百合采后贮藏期间青霉病的主要病原菌,研究其生物学特性。方法 从自然发病的青霉病病害组织中分离纯化得到引起兰州百合青霉病的主要病原,通过形态学和分子生物学技术对其进行鉴定,并对影响该病原菌生长发育的温度、光照、pH、碳氮源、湿度进行分析。结果 引起新鲜兰州百合采后贮藏期间青霉病的主要病原菌为唐菖蒲青霉(Penicillium gladioli)。该菌在60℃下致死,温度20℃、pH中性偏碱、24 h黑暗,碳源为麦芽糖,氮源为尿素时,菌落生长最好;在温度为25℃、pH中性偏碱、24 h黑暗,碳源为蔗糖,氮源为酵母时,产孢量最多。结论 确定了引起兰州百合采后贮藏期间青霉病的主要病原菌为唐菖蒲青霉,并明确了其最适温湿度、pH、碳源、氮源、光照条件及致死温度等生物学特性,为进一步有效控制兰州鲜百合采后青霉病的发生提供理论基础。     

一株高产果胶酶的真菌分离鉴定及酶学特性

以果胶为唯一碳源,对采集自湖南武冈市脐橙果园土样（pH 5.5～6.5）进行富集筛选,分离得到一株产果胶酶的菌株,编号为BM201。根据形态学观察、ITS rDNA及28S rDNA D1/D2序列同源性比对及系统进化分析对菌株进行多相鉴定,初步将该菌株鉴定为尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）BM201。该菌株发酵产酶条件为30 ℃、160 r/min摇床发酵培养3 d,在该条件下获得的果胶酶酶活为421 U/L。该酶最适反应温度为50 ℃,在30～50 ℃条件下处理60 min,该酶的相对酶活在80%以上,表明该酶的热稳定性较好;该酶的最适作用pH值为5.0,在pH 4.0～7.0下处理60 min,该酶的相对酶活在50%以上,表明该酶在酸性条件下的稳定性较好。     

兰州百合鳞茎贮藏腐烂病原菌的鉴定及生物学特性

为确定引起兰州百合鳞茎贮藏期间腐烂的病原菌,应用柯赫氏法则测定了从病样中分离的纯培养物的致病性,根据形态学特性和ITS序列分析对病原菌进行鉴定,并对病原菌的生物学特性进行了研究。结果表明,引起兰州百合鳞茎腐烂的病原菌分别是黄曲霉和米根霉。两种病原菌的最适生长条件相同,最适宜菌丝生长和产孢的培养基均是百合培养基和百合葡萄糖培养基,葡萄糖和蛋白胨为菌丝生长及产孢的最适碳源和氮源,最适生长温度为25℃,在p H5~9范围内都可生长,光照有利于菌丝的生长和产孢。      

致病性尖孢镰刀拮抗菌的筛选与鉴定

该研究从清香型白酒大曲中筛选出一株对致病性尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）拮抗效果最好的拮抗菌株,采用形态观 察、生理生化试验和16S rRNA序列分析对其进行鉴定,并绘制该菌株生长曲线、考察其培养液中的蛋白类及脂肽类物质的抑菌效 果。 结果表明,从清香型白酒大曲中筛选出一株对致病性尖孢镰刀菌拮抗效果最好的拮抗菌株,编号为P9,其抑菌圈直径达到20 mm 左右。 经鉴定,拮抗菌P9为贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis）;生长曲线结果表明,拮抗菌P9在第9小时生长速率达到最大;抑菌物 质提取实验表明,拮抗菌P9能分泌具有抑菌作用的蛋白类物质及脂肽类物质。     

生姜贮藏期病原菌分离鉴定及精油抑菌效果

分离、纯化及鉴定生姜贮藏期病原菌,筛选出对抑制病原菌效果较好的精油并验证该精油抑菌效果。通过分离、纯化及致病性实验得到了病原菌菌株ljr4及ljw2。以病原菌18S rDNA序列进行进化树分析,结果表明该两种病原菌分别属于镰刀菌属及被孢霉属。根据病原菌种属选择了6 种精油进行抑菌性实验,结果发现肉桂精油及百里香精油在用量为2 000 μL/L时对病原菌生长抑制率均为100%。在药敏实验中发现肉桂精油比百里香精油抑菌活性更强。肉桂精油对ljr4、ljw2这2 种病原菌最低抑菌用量分别为64、32 μL/L,最低杀菌用量分别为125、500 μL/L。与未熏蒸生姜相比,在贮藏30 d后肉桂精油熏蒸处理分别使接种ljr4及ljw2的生姜感病率下降了59.33%和47.33%。肉桂精油作为生姜贮藏前的熏蒸剂有较好的应用前景。     

龙牙百合多糖的纯化及其分子量的测定

本研究用DEAE-sepharose Fast Flow柱从百合水提物中分离纯化得到两种多糖LLP1、LLP2,经高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)鉴定LLP1为单一组分、LLP2为糖蛋白,将这两种多糖进行气相色谱分析。结果如下:LLP1由甘露糖、葡萄糖和阿拉伯糖组成,分子量为11756D,LLP2由半乳糖、鼠李糖和阿拉伯糖组成,分子量1038773D。     

一株梨孢镰刀菌的分离与鉴定及其生长特性研究

从大麦表面分离出一株引起啤酒喷涌的镰刀菌,根据菌株在PDA上的菌落特征、菌丝和孢子形态,以及26srDNA序列,鉴定为Fusarium poae(AY188915.1).该菌的最适生长温度为25℃,最适pH为6,最适转速为200r/min,制麦条件适合该菌生长.     

一株梨孢镰刀菌的分离与鉴定及其生长特性研究

从大麦表面分离出一株引起啤酒喷涌的镰刀菌,根据菌株在PDA上的菌落特征、菌丝和孢子形态,以及26s rDNA序列,鉴定为Fusarium poae(AY188915.1)。该菌的最适生长温度为25℃,最适pH为6,最适转速为200r/min,制麦条件适合该菌生长。      

百合花色素性能研究

从百合花中提取出了橙黄色素,试验了该色素的溶解性能和光、热、pH值及盐类物质对色素水溶液稳定性的影响。结果表明:百合花色素着色力强,稳定性好。百合花是一种有待开发、具有较高经济价值的新的天然色素资源。     

高效液相色谱法检测不同采收期邵阳龙牙百合的秋水仙碱含量

目的建立高效液相色谱法比较不同采收期邵阳龙牙百合中秋水仙碱含量。方法样品加水浸泡过夜后超声提取,再用氯仿萃取,氯仿层水浴蒸干,以流动相溶解稀释。色谱柱:Waters C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-水(40:60,V:V),等度洗脱;流速:1.0 mL/min;检测波长:254 nm;柱温:30℃;进样量:20μL。结果秋水仙碱在1.025~20.50μg/mL范围内线性关系良好(r~2=0.9997,n=5),回收率为99.2%(n=9)。样品实测显示,不同采收期龙牙百合秋水仙碱含量不同,茎叶枯黄脱落时期含量最高,平均含量达到3.64 mg/g。结论该法简单快速,定量准确,可以为评价龙牙百合质量和选择最佳采收时间提供参考。     

甜樱桃果实采后病原菌的分离鉴定及其生物学特性研究

为研究危害采后甜樱桃果实的病原菌,以‘拉宾斯’甜樱桃果实为试材,对低温贮藏过程中的病原菌进行分离鉴定,并对其生物学特性进行初步研究。根据病原菌形态学特征和18S r DNA序列分析结果将2个病原菌鉴定为子囊菌亚门锤舌菌纲柔膜菌目核盘菌科核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)和子囊菌亚门粪壳菌纲肉座菌亚纲肉座菌目生赤壳科螺旋聚孢霉属(Clonostachys sp.)。核盘菌菌丝在以牛肉膏为氮源的SDA培养基、20℃、p H=5.0及黑暗条件下生长最好,产孢量最佳条件为以乳糖为碳源,牛肉膏为氮源的SDA培养基,30℃、p H=7.0,黑暗环境;螺旋聚孢霉菌丝在以硝酸钾为氮源的SDA培养基、30℃、p H=6.0及光照条件下生长最好,产孢量最佳条件为20℃、p H=6.0,光照培养。      

3株魏斯氏菌的分离鉴定与生物学特性研究

目的 对泡菜发酵初期魏斯氏菌进行分离鉴定,并探究其安全特性和益生特性。方法 采用平板对细菌进行分离,进行分离菌株生理生化鉴定和16S rDNA测序鉴定,检测其代谢产物毒性,抗生素敏感性,耐药基因,评价细菌的耐酸、耐胆盐、耐人工肠液、黏附能力、对胆固醇及甘油三酯的降解能力、抗氧化能力以及抑菌能力。结果 共筛选出3株魏斯氏菌,命名为融合魏斯氏菌C13、食窦魏斯氏菌G232和W212; 3株菌代谢产物无毒性,对14类21种抗生素表现出不同程度耐药,耐药基因检测C13携带四环素类耐药基因(tetM), G232和W212携带磺胺类耐药基因(sulⅡ); 3株菌能耐受pH 2～4和3.0 g/L以下的胆盐,在人工肠液中3 h后存活率超过76.80%; 3株菌的黏附能力好,疏水性为60.47%～62.69%,自凝聚率为43.76%～52.55%,共凝聚率为43.20%～61.58%;对胆固醇及甘油三酯的降解主要在前15 h;表现出一定的抗氧化能力,对1,1-二苯基-2-三硝基苦肼自由基清除率较高(清除率25.69%～58.12%),对超氧阴离子自由基清除率相对较低(10.08%～35.29%); ...     

一株产细菌素乳酸菌的分离、鉴定及生物学特性研究

从豆制品工厂自然发酵的豆清蛋白发酵液中分离得到一株产细菌素的乳酸菌,编号为NLB-3。通过排除发酵液中有机酸、过氧化氢对指示菌的抑菌作用,及抑菌物质的蛋白酶稳定性试验,初步确定菌株NLB-3的抑菌物质为细菌素。结合菌株NLB-3的菌落及菌体形态、生理生化特征及16SrDAN测序结果,初步将其鉴定为乳杆菌属NLB-3(Lactobacillus sp.NLB-3)。菌株NLB-3的生物学特性表明,该菌株最适生长温度为35℃,菌株在该温度下发酵16h后菌液pH低至3.45,菌株NLB-3有较广的盐耐受范围,当NaCl浓度大于10%时,菌株的生长受到明显抑制。     

两株益生菌生物学特性的研究

研究了两株益生菌植物乳杆菌ST-Ⅲ和干酪乳杆菌BD-Ⅱ的生物学特性，特别是对其在模拟消化环境下的耐受性进行了研究。结果表明，ST-Ⅲ和BD-Ⅱ是性能优良的两株益生菌。     

苎麻微生物脱胶菌株筛选及脱胶效果评价

为筛选并获得苎麻微生物脱胶菌种,将富集培养与稀释涂布相结合,从随机选取的几种腐烂苎麻样品中获得微生物纯培养物38株,以形态学观察、生理生化测定和16S rRNA聚类分析对细菌进行鉴定。利用透明圈法筛选得到脱胶能力相对较高的微生物9株,其中细菌6株,分别隶属于芽孢杆菌属（Bacillus）1株、不动杆菌属（Acinetobacter）2株,类芽孢杆菌属（Paenibacillus）2株,伯克霍尔德氏菌属（Burkholderia）1株,丝状真菌3株。以残胶率为标准,比较6株细菌综合脱胶能力,其中枯草杆菌（Bacillus subtilis）脱胶能力最强,残胶率为13.82 %。     

不同提取方法对兰州百合多糖结构及抗氧化活性的影响

以兰州百合为原料,研究微波辅助、超声波辅助及超声波复合酶法三种不同提取工艺对百合多糖结构组成的影响,并对其抗氧化活性进行了比较分析。通过微波辅助、超声波辅助及超声波复合酶法分别从兰州百合鳞茎中提取多糖(LPS),经醇沉、脱蛋白、冷冻干燥后得到3种百合多糖为LPS-M、LPS-C和LPS-CE。红外光谱分析结果表明,LPS-M、LPS-C、LPS-CE在3378 cm~(-1)、2931 cm~(-1)、1640 cm~(-1)、1060 cm~(-1)都有吸收峰,此为多糖的典型红外光谱特征吸收峰;通过GC-MS测定单糖组成分析表明3种多糖的单糖组成类型成分相同,主要由甘露糖、葡萄糖组成,但单糖的摩尔比有所不同,分别为5.2:4.9、5.1:4.7和4.8:5.3。通过清除羟自由基、超氧自由基、DPPH自由基及还原力测定试验表明,3种多糖具有不同程度的抗氧化活性,LPS-CE的体外抗氧化活性要显著高于LPS-C、LPS-M。因此,可将超声波复合酶法作为提取功能性兰州百合多糖的首选方法。     

川秋葵1号采后菌核病病原菌鉴定及其生物学特性研究

为明确引起川秋葵采后菌核病的病原菌种类及其主要生物学特性,从自然发病的川秋葵上分离到1株丝状致病真菌,经形态学特征观察及r DNA ITS序列分析确定为腐皮镰孢霉菌(Fusarium solani),并对其进行了生物学特性研究。结果表明:该菌生长的最适温度为28℃,最适为p H7,最适生长Na Cl浓度为0.5%;所考察的碳源、氮源、微量元素中,乳糖、天冬酰胺、柠檬酸铁能显著增加(p<0.05)腐皮镰孢霉菌的菌落直径,表明其对腐皮镰孢霉菌的生长有益。