氨基酸折算法计算婴幼儿配方粉中乳清蛋白含量方法的评估

目的评价以氨基酸折算法计算婴幼儿配方粉中乳清蛋白含量的方法。方法本实验使用自配的流动相,采用酸水解氨基酸自动分析仪测定婴幼儿配方粉中氨基酸含量,再根据乳清蛋白中天冬氨酸/天冬酰胺、丙氨酸、苯丙氨酸和脯氨酸4种特征氨基酸含量的经验公式折算出婴幼儿配方粉中乳清蛋白占总蛋白的百分比。结果对我国市售多种品牌的婴幼儿配方粉中的水解氨基酸进行了检测,再计算出乳清蛋白含量,发现仅1阶段乳基婴儿配方粉基本符合大于60%的国标规定。结论该氨基酸折算法对婴幼儿配方粉中乳清蛋白含量的定量研究具有参考价值,但对掺有大豆蛋白的产品无法进行准确测定。     

毛细管电泳技术检测羊乳婴幼儿配方粉中的牛乳成分

婴幼儿配方乳粉的乳源鉴别对于保障产品安全和真实性至关重要。采用毛细管电泳技术对羊乳来源的婴幼儿配方粉中的牛乳成分进行检测。通过比较不同乳源产品中主要蛋白质组分的电泳图谱,筛选出牛乳表征蛋白峰。通过方法验证以及检测市售样品,证实毛细管凝胶电泳在准确度、精密度及重复性方面表现良好,筛选的表征蛋白峰峰面积与羊乳中牛乳含量呈现良好线性相关性(R~20.99),检测灵敏度0.5%,表明该方法可用于羊乳来源婴幼儿配方粉中牛乳成分的定性和定量检测。     

实时荧光定量PCR法鉴定婴幼儿配方乳粉中动物双歧杆菌乳亚种

该研究通过系统发育树分析确定目标基因,并设计引物和探针,建立一种婴幼儿配方乳粉中动物双歧杆菌乳亚种（Bifidobacterium animalis subsp. lactis）的实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-fqPCR）鉴定方法。通过特异性、灵敏性和抗干扰实验对该方法进行验证,并对市售的64份标识含有动物双歧杆菌乳亚种的婴幼儿配方乳粉样品进行检测。结果表明,atpD基因在动物双歧杆菌乳亚种间具有较高的种间特异性,种间差异率＞10%,确定其为目标基因。基于该基因建立的RT-fqPCR方法能够特异性的检测动物双歧杆菌乳亚种,检测绝对灵敏度可以达到1 pg/μL,相对灵敏度可以达到103 CFU/mL;基因水平和培养物水平抗干扰能力良好。采用该方法从64份标识含有动物双歧杆菌乳亚种的乳粉样品中均能检测出动物双歧杆菌乳亚种,表明基于atpD基因建立的RT-fqPCR方法能够快速准确的对动物双歧杆菌乳亚种进行检测。     

市售进口婴幼儿配方奶粉中乳铁蛋白含量的检测

目的 根据国家进口婴幼儿配方奶粉全项目检测的需求,采用酶联免疫方法对市售的多个品牌的进口婴幼儿配方奶粉中的乳铁蛋白含量进行了定量测试,为相关乳品企业、检测部门和消费者提供有益参考.方法 采用实验室建立的酶联免疫方法,方法操作方便、灵敏度高、可同时定性定量检测多个样品.结果 对市售16种进口婴幼儿配方奶粉中乳铁蛋白的含量进行检测,检测出乳铁蛋白的含量从16 ～167 mg/100 g.结论 乳铁蛋白作为高端进口婴幼儿奶粉中添加的一种营养强化剂,在不同品牌的奶粉中的含量有一定的差异,提醒有关部门、乳品企业和消费者关注.     

Real-time PCR和双向电泳联合鉴别婴幼儿配方羊乳粉的乳源成分

为实现对婴幼儿配方羊乳粉中乳源成分的准确判别,将基因检测作为初筛方法,以蛋白质双向电泳作为确证方法,研究该技术路线下对乳源成分检测的灵敏度、准确性等指标。优化建立的基于嗜热蛋白酶的一步式DNA提取法,仅需通过温控反应在17 min内完成DNA步骤,极大缩短了样品前处理时间;建立的快速实时聚合酶链式反应（real-time polymerase chain reaction,real-time PCR）程序仅需28 min 26 s即可完成检测。通过牛（家牛、水牛、牦牛）、羊（山羊和绵羊）、山羊、绵羊单一乳源成分,以及哺乳动物内参照检测体系,可以实现对低至10～100 pg/μL DNA的检测,对混合样品中牛源性成分检测的灵敏度可达1%（m/m）。然后结合双向电泳技术进一步确证产品的蛋白成分来源,可以判定牛基因检测阳性的样品是否含有来源于牛乳酪蛋白或乳清蛋白,进而对样品的真实性进行判定。real-time PCR法和双向电泳技术联合检测解决了以往婴幼儿配方乳粉检测中因配料复杂乳源判别困难的瓶颈问题。     

中国市售配方粉中阪崎肠杆菌和其它肠杆菌的污染状况

目的:调查和研究我国市售配方粉中阪崎肠杆菌和其它肠杆菌的污染状况。方法:采用传统的微生物学分离和鉴定方法检测212份市售配方粉中阪崎肠杆菌和其它肠杆菌。试验采用无菌水增菌、EE肉汤选择性增菌、VRBGA平板选择性分离、TSA平板分离培养和生化鉴定等。结果:从11份配方粉中分离到阪崎肠杆菌(占检测样品总数的5.19%),从103份样品中检出肠杆菌(占检测样品总数的48.58%)。检出的肠杆菌包括:泛菌属某些种、肺炎克雷伯氏菌、阴沟肠杆菌、醋酸钙-鲍曼复合不动杆菌、阪崎肠杆菌、非脱羧勒克氏菌、伤口埃希氏菌和大肠埃希氏菌等。结论:配方粉中肠杆菌的污染可能会导致婴幼儿,特别是婴儿的严重感染。本研究结果将有助于针对我国市售配方粉的卫生预防和控制。     

江西省市售婴幼儿配方谷粉中镉的污染现状及对策分析

目的 对江西省各地市售婴幼儿配方谷粉中镉的污染情况进行调查研究, 分析原因并提出控制措施。方法 采用GB 5009.15-2014石墨炉原子吸收法, 对江西省食品检验检测研究院2018年受检的299份婴幼儿配方谷粉进行镉含量检测, 检测结果依据卫健委发布的婴幼儿谷物辅助食品镉临时限量值≤0.06 mg/kg进行评价。结果 299份样本中超出国家临时限量值的有78份, 总超标率26.1%, 公告发布前后镉超标率分别占37.1%和2.13%。结论 公告发布后江西省市售婴幼儿配方谷粉中镉含量总体趋势向好, 但仍应加强市场监管, 严格控制不合格食品流入市场, 确保婴幼儿饮食安全。     

同位素内标-气相色谱-质谱法同时测定婴幼儿配方粉中3-氯丙醇酯和缩水甘油酯的含量

建立同时测定婴幼儿配方粉中3-氯丙醇酯和缩水甘油酯含量的方法,并检测我国市售部分婴幼儿配方粉中3-氯丙醇酯和缩水甘油酯的含量。结果表明,在最优条件下,3-氯丙醇酯和缩水甘油酯在0.050～0.80 mg/L范围内呈现良好的线性关系,R~2均大于0.998,3-氯丙醇酯的加标回收率在81.4%～86.2%,相对标准偏差为4.42%～4.84%,缩水甘油酯的加标回收率为94.5%～101.1%,相对标准偏差为4.46%～6.12%,方法的检出限均为30 μg/kg。方法灵敏度高,精密度良好,适用于婴幼儿配方粉中3-氯丙醇酯和缩水甘油酯的定量检测。30份市售婴幼儿配方粉样品中3-氯丙醇酯的含量为50.0～207.8 μg/kg,平均值为98.0 μg/kg,缩水甘油酯的含量为50.0～480.0 μg/kg,平均值为208.1 μg/kg。     

柳江县市售国产婴幼儿配方粉中阪崎肠杆菌污染监测分析

目的 了解市售国产婴幼儿配方粉中阪崎肠杆菌污染状况,为消费预警提供科学依据。方法 分别按2011、2012年版国家食源性致病菌监测工作手册对市场上11家国内生产的32份婴幼儿配方粉进行检测。结果 32份样品检出2株阪崎肠杆菌,检出率为6.25%。其中婴幼儿配方奶粉中阪崎肠杆菌检出率4.35%(1/23);婴幼儿谷物食品中阪崎肠杆菌检出率11.11%(1/9)。结论 柳江县市售部分婴幼儿配方粉中存在阪崎肠杆菌污染,食用安全隐患不容忽视,应加强监测力度,预防和控制阪崎肠杆菌引起的食物中毒事件发生。     

基于非线性化学指纹图谱的羊乳广谱掺假检测研究

目前羊乳中发现的掺假物质种类繁多,而检测方法多为针对单一掺假物质的检测。本研究基于非线性指纹图谱技术构建非特异性的广谱掺假物质判定方法。本研究在测定32个纯山羊乳样品及添加5%、1%和0.1%不同浓度氯化钠、大豆蛋白胨、尿素和蔗糖羊乳样品的非线性指纹图谱基础上,对纯山羊乳与掺假羊乳的指纹图谱进行直观的比较和相似度比较。添加0.5%以上氯化钠或尿素的掺假样品和5%以上大豆蛋白胨或蔗糖的掺假样品与纯生鲜羊乳的指纹图谱明显不同,可判定为掺假羊乳。以纯羊乳样品最低相似度值为临界值,则含0.5%和1%蔗糖的掺假样品相似度值在临界值上下,其余掺假样品的相似度值均小于临界值83.4%。故对生鲜乳中添加以上四种掺假物质浓度大于5%的掺假行为通过指纹图谱的直观比较和相似度值比较均可判定为掺假,该方法可用于生鲜羊乳的掺假检测,一次检测即可排除多种掺假物质的存在。     

True ileal amino acid digestibility of goat and cow milk infant formulas

Goat milk is used as an alternative to cow milk for the production of infant formulas. However, little is known about the protein quality and, specifically, about the digestible AA pattern of goat milk formulas compared with their cow milk counterparts. In this study, the true ileal AA digestibility of a goat milk infant formula was compared with a premium cow milk infant formula. The 3-wk-old piglet was used as a model for the 3-mo-old infant. Both milk formulas were prepared as described by the manufacturer, with titanium dioxide added as an indigestible marker. The formulas were fed to the piglets over a 2-wk trial period. Digesta from the terminal ileum were collected post euthanasia and analyzed for AA content, along with samples of the formulas. True AA digestibility was determined after correcting for endogenous AA loss at the terminal ileum of pigs fed an enzyme-hydrolyzed casein-based diet, followed by ultrafiltration (5,000 Da) of the digesta. Total urine and feces collection was also undertaken to determine the nitrogen retention from the diets. The true ileal AA digestibility was similar between the goat and cow milk infant formulas for all AA except Gly and Trp. There was no significant difference in the nitrogen retention of piglets fed the two different formulas. The goat milk infant formula and the premium cow milk infant formula were similar in terms of protein quality.     

Mineral retention in three-week-old piglets fed goat and cow milk infant formulas

Goat milk and cow milk are commonly used in infant formula preparations and, as such, understanding the nutritional characteristics of infant formulas made from these milks is important. In this study, a goat milk infant formula was compared with an adapted (whey-enhanced) cow milk infant formula with respect to mineral absorption and deposition using the 3-wk-old piglet as a model for the 3-mo-old infant. Equal numbers of piglets (n = 8) were fed either the goat milk formula or the cow milk formula. The mineral composition of the prepared goat milk formula was higher than that of the prepared cow milk formula for most minerals, including calcium (75.1 vs. 56.7 mg/100 mL) but excluding iron, which was higher in the prepared cow milk formula (0.92 vs. 0.74 mg/100 mL). The amounts of calcium, phosphorus, and manganese absorbed by the piglets were significantly higher for the goat milk formula, whereas the amounts of zinc, iron, and magnesium absorbed were significantly higher for the cow milk formula. Apparent mineral absorption, relative to intake, was statistically higher in the cow milk formula for calcium and phosphorus, although the actual differences were very small (less than 1.3%). For copper, zinc, iron, and magnesium there was no significant difference between treatments in apparent mineral absorption, whereas for manganese, absorption was higher for the goat milk infant formula. The absolute mineral deposition was higher in piglets fed the goat milk formula for calcium, phosphorus, and manganese, whereas iron deposition was higher in the piglets fed cow milk formula. For all other minerals tested, there were no significant differences between treatments. The goat milk infant formula provided a pattern of mineral retention in the 3-wk-old piglet very similar to that of the adapted cow milk infant formula. The minor differences observed between the 2 appeared to be due to the different mineral contents of the 2 formulas.     

Dynamic in vitro gastric digestion of infant formulae made with goat milk and cow milk: Influence of protein composition

The gastric digestion behaviours of infant formulae made with goat milk and cow milk, with different ratios of casein to whey protein, were investigated using an in vitro dynamic infant human gastric simulator. The goat milk infant formulae formed smaller flocs of aggregated protein and oil droplets under gastric conditions, leading to faster protein digestion in goat milk infant formulae than in cow milk infant formulae. The extent of coagulation of protein and the size of flocculated oil droplets were dependent on the protein composition of the formulae. The casein-dominated cow milk infant formula had greater aggregation initially during gastric digestion, but a lower rate of casein digestion. The results suggest that the different composition of the casein micelles in goat milk may play an important role in the lower extent of coagulation and the faster protein gastric digestion in goat milk compared with cow milk.     

不同乳基婴幼儿配方乳粉的理化性质和表面组成

为探究不同乳基对婴幼儿配方乳粉稳定性的影响,本研究对以牛乳和羊乳为基料制备的婴幼儿配方乳粉的水分质量分数和水分活度(water activity,a_w)、玻璃化转变温度(glass transition temperature,T_g)、乳糖结晶度、溶解度、色度、蛋白组成、总脂肪酸和表面游离脂肪酸组成等理化性质进行分析,用X射线光电子能谱(X-ray photoelectron spectroscopy,XPS)仪对乳粉表面成分进行测定,并通过扫描电子显微镜(scanning electron microscopy,SEM)观察乳粉表面形貌。结果表明：羊乳婴幼儿配方乳粉具有较好的理化性质,与牛乳婴儿配方乳粉相比具有较低的水分质量分数、a_w、色度和T_g,而结晶度和溶解度接近,通过气相色谱-质谱(gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)对脂肪酸含量进行测定发现,牛乳和羊乳婴幼儿配方乳粉均表现出总脂肪酸中不饱和脂肪酸含量较高,表面游离脂肪酸中饱和脂肪酸含量较高的...     

基于牛乳非蛋白生物标志物定量检测山羊乳中掺加的牛乳

为克服酶联免疫吸附法无法检测羊乳中掺加的经过热处理的牛乳的局限，本研究首先通过气相色谱-质谱法发现牛乳区别于山羊乳的关键非蛋白生物标志物为N-乙酰氨基葡萄糖，然后基于该标志物开发基于高效液相色谱手段定量检测山羊乳中掺加的牛乳的方法。样品在70?℃经1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮衍生60?min后，在高效液相色谱仪上使用反相C18色谱柱对目标物进行分离，在245?nm紫外波长下对其进行检测，根据N-乙酰氨基葡萄糖含量推算山羊乳中掺加的牛乳量。该方法的牛乳掺加量检出限和定量限分别为0.3%和1.0%，在1%～100%的牛乳掺加范围内线性良好，相关系数为0.999?4，该方法的加标回收率为100.4%～105.1%，在10、50?mg/L和100?mg/L加标质量浓度下，日内和日间精密度分别为1.8%和2.0%、1.7%和3.7%、2.6%和2.7%。该方法具有较高的灵敏度、准确度和精密度，可用于山羊乳中掺加牛乳的定量分析。     

不同基料的婴幼儿配方奶粉蛋白质营养评价

目的:旨在评价不同基料的婴幼儿配方奶粉蛋白质营养差异。方法:通过邻苯二醛(OPA)-9-芴甲基氯甲酸甲酯(FMOC)在线柱前衍生利用高效液相色谱方法测定氨基酸组成及含量,以WHO/FAO推荐的氨基酸理想模式为基准,选择氨基酸评分(AAS)、氨基酸比值(RC)、氨基酸比值系数分(SRC)、必需氨基酸指数(EAAI)及灰色关联度法5项指标,通过加权评分法对市售不同品牌的婴幼儿配方牛、羊奶粉进行综合评价。结果表明:加权评分及各分项指标比较显示,母乳均为最优,其必需氨基酸组成与理想模式吻合度最佳,蛋白质质量最好,利用率最高,即表明母乳是婴幼儿的最佳营养来源,同时也表明该综合评价方法可信;采集的各配方奶粉样品第一限制性氨基酸均为蛋氨酸+胱氨酸,所有样品必需氨基酸指数均在90以上,均属于优质蛋白源;所有样品中,综合得分最高的为配方羊奶粉样品C为74.78,配方牛、羊奶粉和理想氨基酸模式均存在一定差距,羊奶粉较优,整体营养评价:母乳>配方羊奶粉>配方牛奶粉。     

羊乳乳清蛋白组成和功能及其与人乳、牛乳的对比分析

本研究将羊乳、牛乳、人乳中乳清蛋白进行分离并结合液质联用技术鉴定,在羊乳、牛乳、人乳乳清蛋白中分别鉴定出156、278、454种蛋白质。与牛乳与人乳乳清蛋白对比显示,羊乳含有99种特异性表达蛋白质,与牛乳和人乳分别有31种和15种相同表达蛋白质。通过分析基因本体(gene ontology,GO)功能注释发现,羊乳乳清蛋白在生物过程中主要发挥生物调节作用;在分子功能上,主要体现在结合作用方面;在细胞组成上,参与的细胞组成主要为细胞器区和胞外区。羊乳乳清蛋白在以上三种功能上与人乳有较大差距,但与牛乳相近。通过分析京都基因与基因组百科全书系统(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)代谢通路可知,羊乳主要参与补体和凝血级联反应以及吞噬作用,对人体免疫能力有积极影响。对羊乳与人乳、牛乳乳清蛋白组成及功能区别的研究,为羊乳的进一步研究和开发提供一定的理论参考。     

不同泌乳期羊乳和牛乳的高通量定量乳清蛋白质组学

利用高分辨质谱技术获取牛初乳、牛常乳、羊初乳和羊常乳的乳清蛋白组轮廓,基于其非标记定量强度建立偏最小二乘判别分析模型。结果发现牛初乳和牛常乳在蛋白质组成方面较羊初乳和羊常乳更相似,同时筛选出羊乳中丰度较高的9 种蛋白用作标志物区分这4 组乳样。生物信息学分析发现羊乳中的高丰度蛋白大部分与免疫应答和代谢过程有关,说明羊乳更有助于新生儿建立抗微生物感染的免疫系统。该研究可加深对羊乳蛋白的认识,对牛乳及其制品的营养改良和母乳替代品的生产具有重要意义。     

基于脂质组学技术探究热处理和发酵对乳脂质的影响

以羊乳和牛乳为研究对象,基于脂质组学技术,利用超高效液相色谱-串联四极杆静电场轨道阱质谱检测生乳、巴氏杀菌乳、发酵后酸乳3个阶段样品的脂质特性。结果表明,所有样品共检出27种脂质亚类包含1 607种脂质分子。巴氏杀菌对牛乳和羊乳的脂质特性基本无影响,而发酵使牛乳和羊乳的脂质特性产生显著变化,尤其是大幅下调了溶血型磷脂含量;分别筛选出27种和23种脂质分子可用作鉴定巴氏杀菌处理和发酵样品的潜在生物标志物。本研究提供了牛乳和羊乳及其酸乳的脂质特性和发酵过程中的动态变化,为酸乳加工过程中热处理和发酵阶段对乳脂的影响提供了分子基础,有助于对酸乳终产品质量和营养特性的理解。     

应用SDS-PAGE法评价乳基婴幼儿配方食品中有效蛋白质组分

利用SDS-PAGE法评价乳基婴幼儿配方食品中的有效蛋白组分,优化了样品前处理方法,采用Bio-Rad Quantity One软件对电泳谱图进行数据分析,实现牛乳蛋白组分的定性和半定量测定。采用该法对我国市售婴幼儿配方食品中的牛乳蛋白有效成分进行了质量评价分析,发现0～12月龄婴儿配方食品基本符合GB 10765-2010中对乳清蛋白不得低于60%总蛋白的规定;0～6月龄Ⅰ段婴儿配方食品中的乳清蛋白含量最高,乳清蛋白/酪蛋白为1.57～2.12(61∶39～67∶33);6～12月龄的Ⅱ段较大婴儿配方食品中乳清蛋白相对Ⅰ段少,二者比例为1.06～1.55(52∶48～61∶39);而在12月龄以上的Ⅲ段幼儿配方食品中二者比例为0.65～0.71(40∶60～42∶58)。虽然Ⅰ段婴儿配方食品乳清蛋白/酪蛋白符合标准,但是在母乳中占主要成分的α-LA(α-乳白蛋白)在Ⅰ段婴儿配方食品中含量偏低(19.1%～24.1%),母乳中不存在的α-CN(α-酪蛋白)在Ⅰ段婴儿配方食品中却占11.9%～17.8%,另外还发现Ig G(免疫球蛋白G)在乳基婴幼儿配方食品中的含量偏低。