侧流层析技术研究进展

在毛细管层析作用下,基于抗原抗体特异性结合或核酸探针和靶向核酸杂交反应来检测样品中的目标物质 的侧流层析技术与传统检测方法相比,以其成本低、特异性强、稳定性高、节省时间、不需专业人员、可现场检 验、结果肉眼可见等优势,广泛运用在人体临床医学、动植物医学、食品安全、环境监测等领域。本文重点介绍了 侧流层析技术的背景、原理、设计以及国内外应用现状、发展前景等,以期为侧流层析技术的发展提供参考。     

侧流免疫层析技术监控乳中致病因子的研究进展

随着乳品需求量的增加,其安全问题引起广泛关注。实时、快速、准确地检测乳中致病因子是解决乳品安全问题的重要保障。近年来,侧流免疫层析技术的发展为乳品中致病因子的现场检测提供了良好条件。本文针对乳中致病因子的监控,阐述了侧流免疫层析技术的原理,并针对增强显色的策略,新型纳米材料的应用与核酸扩增、智能手机技术的联用等增敏现状进行论述;并对多线型、多条型两种主要的高通量检测方法进行总结,旨在为实现乳中致病因子快速、高灵敏和高通量的现场监测提供理论指导。     

侧流免疫层析技术在食品安全检测中的研究进展

侧流免疫层析技术(lateral flow immunoassay,LFIA)不仅有效结合了层析技术的分离能力和免疫分析的高度特异性,而且操作简单、检测快速、价格低廉,为食品安全现场检测提供了一种理想的技术平台。常规的LFIA主要以纳米金颗粒作为信号标记材料,该种方法检测灵敏度相对较低,仅能满足定性和半定量检测。为了提高LFIA的检测性能,近年来研究者做了大量的努力。本文总结了LFIA的检测原理及其在在信号标记材料、信号增强方式、多元分析物同时检测、信号读出方式等方面的技术改进,并讨论了LFIA现有的不足以及未来的发展方向,以期为我国食品安全快速检测的发展提供技术参考。     

侧流免疫层析技术在食品安全检测中的研究进展

侧流免疫层析技术(lateral flow immunoassay,LFIA)不仅有效结合了层析技术的分离能力和免疫分析的高度特异性,而且操作简单、检测快速、价格低廉,为食品安全现场检测提供了一种理想的技术平台.常规的LFIA主要以纳米金颗粒作为信号标记材料,该种方法检测灵敏度相对较低,仅能满足定性和半定量检测.为了提...     

荧光标记免疫层析技术在食品安全检测中的应用研究进展

食品安全快速检测技术是食品安全保障的重要技术支撑。荧光免疫层析技术是结合了荧光检测高灵敏度和免疫层析检测特异性强、快速便捷等特点的一项新型免疫检测技术,已成为食品安全快速定量检测领域研究的热点。本论文介绍了荧光免疫层析技术的基本原理,对有机染料荧光素免疫层析技术、量子点免疫层析技术和上转换纳米粒子免疫层析技术的最新研究进展及其在食品安全检测中的应用进行了综述并提出了其发展方向,以期为我国食品安全快速定量检测技术的发展提供文献支持。     

侧流层析技术在大肠杆菌O157:H7检测中的应用

大肠杆菌O157:H7作为一种常见的食源性致病菌,在低感染剂量下即可导致人类患严重疾病。侧流层析技术（LFCA）由于其具有高效分离的特性,能够满足食品中大肠杆菌O157:H7的快速检测需求。然而,目前广泛应用的LFCA方法,信号强度较弱,检测灵敏度较低,难以实现样本中低浓度大肠杆菌O157:H7的检出。因此,本文重点整理了近年来出现的新型侧流层析技术,围绕检测效率、灵敏度进行了系统性归纳,比较各方法的优势与短板,为大肠杆菌O157:H7侧流层析检测技术的发展提供重要结论性指导。     

免疫层析技术在食品违禁成分检测中的应用

胶体金技术是一种新型的免疫标记技术,在食品安全检测领域得到广泛应用和快速发展。简述胶体金免疫层析技术在瘦肉精、蛋白精、非食用色素、抗生素等食品违禁成分领域的研究和应用,并对该技术的发展前景作了展望。     

免疫层析技术在食源性病原菌检测中的应用展望

免疫层析技术是一种建立在层析技术和抗原抗体特异性免疫反应基础上的免疫检测技术。近年来国内外食源性疾病频繁爆发,越来越引起社会的关注。因此建立一种快速、简便且适用于食源性病原菌的检测方法在预防和诊断食源性疾病中具有重大的社会意义。免疫层析技术具有灵敏度高、特异性强、操作简便及检测速度快等特点,已经被广泛应用于食品领域的检测中。本文综述了6种免疫标记材料在检测不同种类病原菌方面的应用,并对其检测特点进行了介绍。     

标记免疫层析技术在食品安全检测中应用进展

食品安全检测技术是食品质量保证和食品安全管理的重要基础,主要以仪器检测方法为主。标记免疫层析技术是建立在层析技术和和抗原-抗体特异性免疫反应基础上的一项新兴免疫检测技术,具有灵敏度高、特异性强、使用便捷、检测速度快等特点,被广泛应用于食品安全快速检测过程中。本文对胶体金标记免疫层析技术、量子点标记免疫层析技术、上转换发光标记免疫层析技术等在食品安全检测领域的应用进行了综述,通过分析目前各种标记免疫层析技术的优点和不足,提出了发展方向,以期为我国食品安全快速检测技术的发展提供文献支持。     

免疫层析技术在检测食品中硝基呋喃类药物的应用

硝基呋喃类药物属于人工合成的广谱抗生素,主要包括呋喃唑酮、呋喃妥因、呋喃它酮、呋喃西林等。因其价格低廉、抗菌效果好而被广泛地应用于牲畜和水产动物的细菌性疾病的预防和治疗。由于硝基呋喃类药物具有致突变性和致癌性,因此许多国家在动物食品生产中早已禁止使用,然而仍存在非法使用该类药物的情况。免疫层析技术是色谱法与免疫学反应相结合的产物,因具有操作简单、成本低、特异性强、灵敏度高等优点而被广泛应用于食品中硝基呋喃类药物的检测。本文概述了免疫层析技术的基本原理,重点综述利用不同标记材料的免疫层析技术在检测食品中硝基呋喃类药物的应用情况,并对未来发展趋势进行展望。     

羧基化磁性纳米微球的表面生物修饰方法

采用A和B两种羧基化磁珠,以山羊抗小鼠IgG为模式蛋白,优化了EDC/sulfo-NHS法的羧基磁珠表面抗体的修饰条件,对比分析了抗体修饰前后磁珠粒径和多分散系数(PDI)的变化,并利用竞争性免疫层析法评价了磁珠表面修饰抗体的生物学活性。优化结果显示,不同粒径和厂家的羧基磁珠,其表面的最佳抗体修饰条件是不同的。磁珠A抗体修饰前后的平均水力学粒径变化率为6.55%,PDI分别为0.011和0.046,变化微小,而磁珠B在抗体修饰前后的平均水力学粒径变化率为135.55%,分散性能变差。生物学活性评价结果显示优化条件下制备的磁珠A和B表面的抗体均具有较好的抗原结合活性,磁珠B的磁信号强于磁珠A。综上所述,抗体修饰磁珠用于免疫层析检测时,抗体修饰前后磁珠粒径和分散性能的变化、材料的磁响应性能对于检测灵敏度和层析速度具有重要意义。     

基于时间分辨纳米荧光微球的免疫层析技术快速检测副溶血性弧菌

由副溶血性弧菌引起的食品中毒事件频繁爆出,开发一种简单、快速且能大规模现场检测的方法对确保食品安全、避免经济损失具有重要意义。该研究成功开发了针对副溶血性弧菌现场快速检测的时间分辨荧光免疫层析技术（TRF-LFIA）。该方法将时间分辨纳米荧光微球（EuNPs）标记副溶血性弧菌单克隆抗体形成可以作为特异性免疫荧光探针的微球抗体偶联物,通过测定探针与目标致病菌结合后的荧光信号值来实现对目标致病菌的定量检测。该研究开发的TRF-LFIA方法对副溶血性弧菌检测的灵敏度为8.2×102 CFU/mL,视觉检测限为1.2×104 CFU/mL,线性范围为1.8×103~1.8×107 CFU/mL,回收率为84.25%~105.13%,变异系数（CV）为2.56%~9.14%,并且对其他7种主要食源性致病菌株检测未发生交叉反应。该研究所建立的TRF-LFIA检测方法具有灵敏度高,操作简单、快速,重复性、特异性好等优点,为针对副溶血性弧菌的现场快速检测提供了一种有力的检测工具。     

基于胶体金免疫层析技术的赤霉素快筛试纸条的研制

研制快速检测豆芽中赤霉素的快筛试纸条。采用免疫层析技术,以胶体金为标记物制备赤霉素单克隆抗体-胶体金偶联物,以竞争抑制模式制备赤霉素胶体金免疫层析试纸条。该试纸条对豆芽中赤霉素的检测限为100 μg/kg,灵敏度为98%,特异性为97%,假阴性率为2%,假阳性率为3%。该方法操作简便,具有较高的灵敏度和特异性,可广泛应用于豆芽中赤霉素残留的现场筛查和检测。     

高灵敏度磁荧光免疫层析试纸模式构建及在呕吐毒素检测中的应用

构建基于磁荧光纳米材料的免疫层析试纸模式,弥补现在免疫层析技术的不足,为更灵敏的免疫学快速检测提供技术支撑。以呕吐毒素（deoxynivalenol,DON）为靶标,采用溶剂热法制备羧基修饰的超顺磁颗粒,碳二亚胺法将磁颗粒、绿色荧光蛋白及DON单克隆抗体进行偶联,一步法制备磁荧光抗体探针,以DON人工抗原（DON-BSA）为检测线建立磁荧光免疫层析试纸。同时用胶体金标记DON单克隆抗体,以DON-BSA为检测线建立胶体金免疫层析试纸;制备的磁荧光抗体探针具有很好的磁性、荧光特性及抗体反应性,基于该探针成功制备了DON磁荧光免疫层析试纸,该试纸回归方程为y=－0.562x＋0.921,R2=0.990,IC50为5.611 ng/mL,检出限为1.089 ng/mL;制备了DON胶体金免疫层析试纸,该试纸裸眼检测灵敏度为500 ng/mL;定量检测回归方程为y=－0.543x＋1.485,R2=0.991,IC50为65.16 ng/mL,检出限为11.94 ng/mL。DON磁荧光免疫层析试纸的灵敏度是胶体金免疫层析试纸的10.96 倍。本实验建立的磁荧光免疫层析试纸模式可以同时实现样品的富集及荧光信号检测,提高检测灵敏度,并成功用于DON的检测,为磁荧光纳米颗粒广泛应用于免疫层析领域提供参考。     

重组酶等温扩增试纸条快速检测阪崎克罗诺杆菌

将重组酶聚合酶等温扩增（recombinase polymerase amplification,RPA）与免疫层析试纸条（lateral flow strip,LF）相结合,建立一种阪崎克罗诺杆菌快速检测方法（RPA-LF）。将引物分别用生物素和地高辛修饰后进行RPA,产生生物素和地高辛标记的双链DNA产物,扩增产物与胶体金标记的地高辛抗体及试纸条上固定的链霉亲和素发生特异性结合,最终在试纸条上呈现肉眼可见的结果。灵敏度分析结果显示,该方法对纯培养目标菌的检测限为1.7×102 CFU/mL,特异性分析结果显示RPA-LF方法与其他常见病原菌无交叉反应。利用人工污染的食物样品评估RPA-LF检测效果,结果显示不同样品增菌4 h或6 h后,检测限达到1.7×100 CFU/g。利用20 种实际样品作为检测对象、利用国标方法作为对照,评估方法的检测效果,结果显示本研究所建立的方法与国家标准检测方法获得一致的检测结果。     

Development of an Ultrasensitive Immunochromatographic Assay (ICA) Strip for the Rapid Detection of Phenylethanolamine A in Urine and Pork Samples

In this study a one‐step immunochromatographic assay based on competitive format was developed for the rapid detection of phenylethanolamine A (PEAA) residues in urine and pork samples. A monoclonal antibody against PEAA was produced from BALB/c mice immunized with the PEAA‐BSA conjugate. The results of this qualitative test strip were to be interpreted visually. The visual detection limit (VDL) and threshold level of the optimized immunochromatographic assay for PEAA were 0.1 ng/mL and 0.5 ng/mL, respectively. Cross‐reactions with other β‐agonists were not significant inhibitions to the performance of the test strip assay. The results from the test strip were in a good agreement with those obtained using a high performance liquid chromatography‐tandem mass spectrometry (HPLC‐MS/MS) assay. The immunochromatographic assay developed here was a useful on‐site screening tool that is rapid to use, low in cost, and extremely convenient for the detection of PEAA in urine samples and pork samples.