变波长-梯度洗脱HPLC法同时测定杜仲的12种成分

建立了变波长-梯度洗脱高效液相色谱法（HPLC）同时测定杜仲中的12种成分含量。色谱条件为：HiQ Sil C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为0.2%甲酸(A)-乙腈(B)梯度洗脱,检测波长为208 nm、277 nm和240 nm,方法学考察结果良好。用此方法测定不同生长年限、不同部位的杜仲样品中的桃叶珊瑚苷、京尼平、京尼平苷、京尼平苷酸、原儿茶酸、松柏苷、紫丁香苷、绿原酸、咖啡酸、松脂醇二葡萄糖苷、丁香脂醇二葡萄糖苷和橄榄树脂素含量。此方法所用3个波长既使各成分信号最大化又可以使基线稳定,梯度洗脱可以保证杜仲中的12种成分在60 min内全部出峰并完全分离,为HPLC测定杜仲中多种成分提供参考,进一步为杜仲中的功能性成分的含量测定和杜仲的质量控制提供有力的方法和手段。     

全面杜仲叶化学成分研究进展

国内外已有很多对杜仲叶化学成分的研究,杜仲叶中含有多种化学成分,包括环烯醚萜类化合物、木脂素类化合物、黄酮类化合物、杜仲胶、苯丙素类化合物、酚类化合物、氨基酸、多糖类物质、维生素、脂肪酸以及其他;其中主要成分为芦丁、金丝桃苷、绿原酸、杜仲胶、桃叶珊瑚苷、槲皮素、京尼平苷酸、山奈酚等。本文对目前国内外杜仲叶环烯醚萜类、木脂素类、黄酮类、杜仲胶、苯丙素类、多糖类、氨基酸、维生素等化合物的提取纯化方法及其生物活性和机理的研究现状进行综述,以期为杜仲叶未来的研究开发提供参考。     

杜仲叶化学成分研究进展

国内外已有很多对杜仲叶化学成分的研究,杜仲叶中含有多种化学成分,包括环烯醚萜类化合物、木脂素类化合物、黄酮类化合物、杜仲胶、苯丙素类化合物、酚类化合物、氨基酸、多糖类物质、维生素、脂肪酸以及其他;其中主要成分为芦丁、金丝桃苷、绿原酸、杜仲胶、桃叶珊瑚苷、槲皮素、京尼平苷酸、山奈酚等。本文对目前国内外杜仲叶环烯醚萜类、木脂素类、黄酮类、杜仲胶、苯丙素类、多糖类、氨基酸、维生素等化合物的提取纯化方法及其生物活性和机理的研究现状进行综述,以期为杜仲叶未来的研究开发提供参考。     

HPLC测定不同品种石韦中绿原酸、芒果苷、咖啡酸、芦丁含量

目的用高效液相色谱法(HPLC)测定不同品种石韦中绿原酸、芒果苷、咖啡酸和芦丁含量。方法色谱柱为Venusil XBP C_(18)(L)柱(4.6 mm×150 mm,5μm),检测波长300 nm,柱温25℃,流动相为乙腈-0.2%磷酸溶液,流速1.0 mL/min,外标法定量。结果绿原酸、芒果苷、咖啡酸和芦丁分别在0.025~0.150mg/mL(r=0.9999),0.025~0.163 mg/mL(r=0.9991),0.025~0.150 mg/mL(r=0.9979),0.025~0.188 mg/mL(r=0.9986)范围内线性关系良好,不同品种石韦绿原酸、芒果苷、咖啡酸和芦丁的含量有明显差异。结论方法简便、准确,适用于石韦药材的含量测定。     

翻白草中7 种黄酮和有机酸的超声提取及含量测定

目的：建立高效液相色谱法分离测定翻白草中绿原酸、咖啡酸、金丝桃苷、槲皮素、柚皮素、山柰酚和芹菜素7 种成分的方法。方法：采用Phenomenex C18色谱柱（150 mm×4.6 mm,5 μm）分离7 种成分;流动相为甲醇和pH 3的乙酸溶液,梯度洗脱;流速1.0 mL/min,紫外检测波长350 nm,柱温40 ℃。结果：7 种成分在20 min内均达到基线分离,线性关系良好（r＞0.999 5）,平均回收率为84.61%～104.06%（相对标准偏差小于4.77%,n=3）。结论：翻白草中7 种活性成分的最佳提取条件为80%甲醇溶液、固液比1∶50（g/mL）、超声功率160 W、超声时间20 min。实际样品的测定结果表明,翻白草中7 种活性成分的含量为：绿原酸121.5 μg/g、咖啡酸60.5 μg/g、金丝桃苷127.2 μg/g、槲皮素108.6 μg/g、柚皮素294.0 μg/g、山柰酚61.1 μg/g和芹菜素114.0 μg/g。     

不同海拔杜仲叶功效成分分析及抗氧化活性研究

目的：研究不同海拔杜仲叶功能成分的差异性并评价其体外抗氧化活性，旨在选择适宜的种植区域，改善杜仲叶功效品质，满足其高质量发展需求。方法：针对灵宝、卢氏两地8个不同海拔杜仲叶中5种活性成分开展分析检测，并进一步评价其DPPH·自由基清除率及总还原能力。结果：不同海拔杜仲叶活性成分差异性较大，总黄酮含量介于18.56～174.76 mg/g之间，绿原酸含量介于1.71～28.22 mg/g之间，总多酚含量介于49.96～176.32 mg/g之间，京尼平苷酸含量介于0.174～5.95 mg/g之间，桃叶珊瑚苷含量介于0～24.88 mg/g，除桃叶珊瑚苷外其他活性成分均在610 m海拔处含量最高，桃叶珊瑚苷在931 m处最高。海拔610 m处杜仲叶DPPH·清除率和总还原能力均为最高，与抗氧化功能相关性较高的物质主要为总黄酮、绿原酸、总多酚，且均为正相关。结论：海拔高度对杜仲叶活性成分的合成和积累具有显著影响，综合考虑610 m海拔处的杜仲叶各活性成分含量和抗氧化活性相对较高，可以作为理想抗氧化原料开发使用。     

HPLC法同时测定甘薯叶中5种酚酸和异槲皮苷

咖啡酸、绿原酸、3,4-二咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、4,5-二咖啡酰奎宁酸和异槲皮苷是甘薯叶中的主要活性成分,本研究建立高效液相色谱（high performance liquid chromatography, HPLC）同时测定这6种成分的方法。通过对检测波长、色谱柱、洗脱溶剂、洗脱流速等参数优化得到的最佳分析条件为:ZORBAX SB-C₁₈（4.6 mm×250 mm,5 μm）为分析柱,以0.1%甲酸水溶液（A）和乙腈（B）为流动相,采用梯度洗脱:0～12 min,10%~25% B;12～18 min,25% B,流速0.8 mL/min,检测波长326 nm,柱温30 ℃。咖啡酸、绿原酸、3,4-二咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、4,5-二咖啡酰奎宁酸和异槲皮苷的线性范围分别为0.25~25.0、0.5~50.0、5.0~100.0、10.0~200.0、5.0~100.0和0.5~50.0 μg/mL。该方法分析时间短（18 min）,线性度（R2≥0.998）、稳定性（RSD≤1.97%）、精密度（RSD≤1.56%）和加标回收率（95.14%~103.22%）好。对江西10个不同产地甘薯叶目标成分分析发现,宜春丰城的甘薯叶具有最高的总酚含量。     

红薯叶不同溶剂提取物抗氧化性及活性成分鉴定

研究不同极性溶剂对红薯叶中酚类化合物的提取以及提取物抗氧化性的影响,并鉴定提取物中的主要抗氧化成分组成。分别采用极性不同的7 种溶剂（蒸馏水、甲醇、无水乙醇、丙酮、正丁醇、乙酸乙酯和氯仿）从红薯叶中提取多酚,并评价提取物中总酚、总黄酮和花青素的含量,以及对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除能力和还原能力,最后运用高效液相色谱-串联质谱（high performance liquidchromatography tandem mass spectroscopy,HPLC-MS/MS）技术分析抗氧化活性最好的提取物中多酚的主要组成成分。结果表明：提取溶剂的极性对红薯叶中多酚类化合物的提取效率和提取物抗氧化活性有很大的影响,水提物具有最高的粗提物得率（（37.13±1.60）%）,而甲醇提取物中总酚含量（13.80 mg GAE/g）和总黄酮含量（（5.68±0.35）mg QE/g）最高,且具有最好的DPPH自由基清除能力（IC50为0.32 mg/mL）与还原能力（ρ0.5为0.95 mg/mL）。采用HPLC-MS/MS从红薯叶甲醇提取物中鉴定9 种、初步鉴定3 种酚类化合物,鉴定的化合物为咖啡酸、对羟基苯甲酸、1-咖啡酸奎宁酸、3-咖啡酸奎宁酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、3,4,5-三咖啡酰奎尼酸和金丝桃苷。     

高效液相色谱法同时测定沙枣果实中5种酚类化合物

建立了高效液相色谱法检测沙枣果实中绿原酸、咖啡酸、香豆酸、肉桂酸和阿魏酸等5种酚类物质的方法。样品用乙腈超声提取,色谱柱为HypersilODS100mm×4.6mm（i.d）,5μm柱;流动相为乙腈和磷酸缓冲液（0.6%）,梯度洗脱;流速为1mL/min;检测波长为323nm和280nm;进样量为10μL。5种组分在一定范围内有良好的线性关系,相关系数为0.991～0.997,平均回收率为93.3%～98.1%,相对标准偏差为3.1%～7.4%（n=6）。结果表明：沙枣果实中绿原酸、咖啡酸、香豆酸、阿魏酸和肉桂酸的含量分别为0.472、0.373、0.425、0.529、0.381mg/kg。     

贵州蓝莓蜜的成分分析及其抗氧化活性

以贵州蓝莓蜜为研究对象,对其理化指标、抗氧化活性、多酚成分进行研究。结果显示,贵州蓝莓蜜酸度值44.69 mmol/kg,总糖含量79.30%,葡萄糖含量(40.88%)高于果糖含量(38.41%);总酚酸和总黄酮含量分别为20.27～24.72 mg GAE/100 g和3.88～6.77mg RE/100 g,DPPH和ABTS自由基半抑制率分别为119.04～136.56 mg/mL和140.56～212.34 mg/mL;蓝莓蜜含15种多酚类物质(原儿茶酸、对羟基苯甲酸、香草酸、咖啡酸、对香豆酸、芦丁、阿魏酸、杨梅酮、木犀草素、桑色素、槲皮素、芹菜素、山奈酚、异鼠李素、高良姜素),其中,黄酮类物质含量最高为槲皮素,酚酸含量由高到低为:对羟基苯甲酸对香豆酸阿魏酸咖啡酸香草酸原儿茶酸。研究表明,蓝莓蜜酸度偏高、易结晶,结合槲皮素含量高的特点与酚酸含量高低规律,可作为蓝莓蜜鉴定与检测的参考指标。     

杜仲叶绿茶复合饮料的工艺优化

以汉中杜仲和绿茶为主要原料,研究杜仲叶绿茶复合饮料的工艺优化条件。结果表明:以水为提取溶剂,超声波辅助提取杜仲叶绿原酸的最佳工艺为低频超声、杜仲叶粉碎粒度80目、料液比1︰20、温度60℃、时间40 min;饮料调配配方为杜仲叶提取液10%、绿茶提取液30%、白砂糖4%、柠檬酸0.04%、蜂蜜0.1%。     

Phenolics in Aqueous Potato Peel Extract: Extraction, Identification and Degradation

Phenolics were extracted from potato peel waste using water or methanol. Phenolic acids in the extracts were quantified by HPLC. The greatest amounts of phenolic acids resulted when potato homogenate was refluxed with water for 30 min. yielding a total concentration of 48 mg/100g. Four phenolic acids (chlorogenic. gallic, protocatechuic, and caffeic) were characterized as major components. Aqueous extracts were stored 20 days and after 7 days at 25°C exposed to light, chlorogenic acid had degraded to caffeic acid.     

果汁中9种酚酸类化合物的RP-HPLC-PAD分析

研究了同时测定5种果汁中没食子酸、儿茶酸、绿原酸、原儿茶酸、咖啡酸、表儿茶酸、阿魏酸、莽草酸和丁香酸等9种生物活性酚酸的反相高效液相色谱-光电二极管阵列检测新方法。采用ZorbaxEclipseXDB-C18色谱柱(5μm,250mm×4.6mmi.d.),流动相为甲醇-0.5%乙酸,梯度洗脱,流速1.0mL/min,以保留时间和特征光谱对分离出的组分予以定性确证,用峰面积进行定量。9种组分的质量浓度与其峰面积在一定的范围内有良好的线性关系,相关系数为0.9987～0.9999。9种组分的平均回收率为86.5%～98.8%(相对标准偏差为3.1%～5.8%)。检测限为0.2～1.0mg/L。结果表明,该方法也适用于其他复杂体系中没食子酸等9种生物活性成分的分析。     

桑葚、甘蔗糖蜜多酚的成分鉴定及其复配物的抗氧化活性

为探索酚类提取物及其复配物的协同增效作用,以桑葚和甘蔗糖蜜多酚作为研究对象,分别测定其总酚、黄酮含量及酚类组成,基于单一提取物的总酚含量按一定配比制得复配物,评价抗氧化活性。结果表明,桑葚游离多酚（MFP）占桑葚总酚含量的90.3%,为677.62 mg没食子酸当量（Gallic Acid Equivalent,GAE）/100 g,黄酮含量为736.65 mg芦丁当量（Rutinum Equivalent,RE）/100 g,共检测出原儿茶酸、3,4-二羟基苯丙酸、咖啡酸、丁香酸、对香豆酸、阿魏酸、矢车菊素3-O-葡萄糖苷和芦丁8种多酚物质,其中矢车菊素3-O-葡萄糖苷含量占92.6%。甘蔗糖蜜多酚（SMP）总酚含量为339.69 mg GAE/100 g,总黄酮含量为314.61 mg RE/100 g,主要单体包括没食子酸、原儿茶酸、绿原酸、咖啡酸、丁香酸、对香豆酸、阿魏酸、芦丁和表儿茶素9种多酚物质。在0~10 mg/mL的浓度范围内SMP、MFP及其复配物具有良好的抗氧化活性且呈现量效关系。同时,两种复配物的抗氧化活性优于SMP和MFP,其中中效原理计算复配物DPPH自由基清除能力的0.25 IC50、0.5 IC50、0.75 IC50、1 IC50、1.25 IC50、1.5 IC50的联合作用指数CI分别为0.73、0.85、0.94、0.91、0.89和0.90,均小于1,表明桑葚和甘蔗糖蜜多酚复配物具有协同抗氧化作用。     

酶法辅助聚二乙醇-200提取杜仲叶中绿原酸的工艺

采用Box-Behnken中心组合实验和响应面分析法,在单因素试验基础上,以酶用量、料液比、pH和酶解时间为影响因素,绿原酸提取率为响应值,对酶法辅助聚乙二醇(PEG)-200提取杜仲叶绿原酸的工艺进行优化。结果表明,其最佳工艺为:酶用量0.8%、料液比1︰20(g/mL),pH 4.4,酶解时间1.6 h。在此工艺条件下杜仲叶绿原酸提取率可达3.15%。该工艺条件温和、易于控制、提取效率高,可为杜仲叶中绿原酸的进一步开发研究提供工艺参考。     

大孔吸附树脂对杜仲叶黄酮的富集纯化

应用大孔吸附树脂对杜仲叶超临界法提取液中的黄酮类物质进行富集和纯化,得到树脂富集杜仲叶黄酮的最优工艺条件。对4 种大孔吸附树脂NKA-2、X-5、D101、AB-8 的吸附和解吸能力进行比较的结果表明：AB-8 树脂的吸附率和解吸率都最高,最佳吸附洗脱工艺为上样液黄酮质量浓度193.92mg/mL、pH2、吸附流速2.6mL/min、洗脱流速1.6mL/min、解吸剂80%乙醇用量30mL。所得洗脱液中黄酮质量分数从纯化前的10.2%可增加到纯化后的42.6% 以上。     

50种植物源化合物对阪崎克罗诺肠杆菌的抑菌活性评价

阪崎克罗诺肠杆菌（Cronobacter sakazkaii）是一种食源性条件致病菌,它能够引起菌血症、坏死性小肠 结肠炎和新生儿脑膜炎等多种疾病。本研究选取50 种植物源化合物,检测其在含C. sakazkaii培养基中抑菌圈直径 及最小抑菌浓度（minimum inhibitory concentration,MIC）,旨在评价植物源化合物对C. sakazakii的抑菌作用并筛 查优选高效抑菌剂。结果表明：使C. sakazakii ATCC 29544培养基产生可见抑菌圈的植物源化合物有40 种,其中 7 种（香芹酚、百里醌、百里酚、肉桂醛、柠檬醛、原儿茶醛和原儿茶酸）的抑菌圈平均直径不小于13 mm;在本 研究选取的50 种植物源化合物中,百里酚和香芹酚对C. sakazakii有着最强的抑制作用,对9 株C. sakazkaii的MIC均 为0.1～0.2 mg/mL;百里醌、肉桂醛、柠檬醛和原儿茶醛对C. sakazkaii有良好的抑菌效果,对C. sakazkaii的MIC为 0.30～1.25 mg/mL;阿魏酸、绿原酸、丁香酸、硫辛酸、原儿茶酸、表儿茶素、咖啡酸、丹皮酚和菊苣酸的MIC为 2.50～5.00 mg/mL。以上结果表明,部分植物源化合物对C. sakazakii有良好的抑菌作用,有潜力作为天然抑菌剂应 用于食品加工、流通、贮藏过程中,从而发挥其控制C. sakazakii的作用。     

A Rapid High-Performance Liquid Chromatography Photodiode Array Detection Method to Determine Phenolic Compounds in Mung Bean (Vigna radiata L.)

A fast method was developed for simultaneous detection and quantification of 12 phenolic compounds in mung bean, using reversed phase high-performance liquid chromatography. The method was optimized for mobile phase combination, elution gradient, detection wavelength, and solvent extraction. All the phenolic compounds (gallic acid, neochlorogenic acid, catechin, chlorogenic acid, caffeic acid, p-coumaric acid, t-ferulic acid, vitexin, isovitexin, myricetin, quercetin, and kaempferol) were eluted for 18 min and recovered within a limit as per International Council for Harmonization guidelines. The method showed good linearity with correlation coefficient of 0.998. The limit of detection and quantification of all the compounds ranges from 0.27 ± 0.01 to 3.65 ± 0.3µg/mL and 0.91 ± 0.1 to 12.17 ± 0.9µg/mL, respectively. Vitexin (28.10 ± 0.20 to 29.60 ± 0.6 mg/100 g raw material) and isovitexin (34.09 ± 0.14 to 36.83 ± 0.82 mg/100 g raw material) were the major phenolic compounds along with other phenolic compounds found in mung beans.     

Total Polyphenols in Apples and Ciders; Correlation with Chlorogenic Acid

The chlorogenic and caffeic acid combined in apple juice cultivars and ciders correlated very well with total phenol content (P 0.001; r = 0.989; n = 22). The same correlation was found when analyzed strictly by cultivar (P 0.001; r = 0.986; n = 10). Analysis used automated Folin Ciocalteu (FC) colorimetry values for total phenols and reversed-phase HPLC (280 nm detection) for chlorogenic and caffeic acid before and after fermentation. Concentrations were between 8 and 1012 mg/L (as chlorogenic acid) in different cultivars. The total chlorogenic acid by HPLC represented only 6.2 to 10.7% of the total polyphenol (calculated as chlorogenic acid) by FC in the apple cultivars for all samples. Total peak areas correlated very well with total phenol content by FC (P 0.001; r = 0.994; n = 22).