遗传算法优化酶辅助提取刺玫果多糖工艺及其抗氧化活性研究

以刺玫果为原料,采用酶辅助水提法提取刺玫果多糖,以加酶量、酶解时间、料液比为考察因素,多糖提取率为评价指标,采用单因素试验和Box-Behnken响应面设计建立数学模型,应用遗传算法对模型进行优化,得到提取工艺最佳条件,并对刺玫果多糖进行抗氧化活性初步研究。结果表明：酶辅助法提取刺玫果多糖的最佳工艺条件为加酶量1.37%,酶解时间71min,料液比1∶30g/mL。Box-Behnken响应面法和遗传算法联用时,刺玫果多糖提取率高,为16.38%。刺玫果多糖具有显著的自由基清除作用,但与抗坏血酸对比,其对DPPH自由基、ABTS⁺自由基和羟自由基的清除率均略低。     

微波辅助提取猕猴桃果渣总黄酮及其抗氧化活性

以猕猴桃酿酒发酵后的果渣为原料,采用响应面法优化猕猴桃果渣总黄酮的微波辅助提取工艺,并测定其对DPPH·和ABTS+·的清除率,评价最佳工艺条件提取的总黄酮的抗氧化活性。结果表明,猕猴桃果渣总黄酮提取的最佳工艺条件为乙醇浓度50%、提取温度66℃、提取时间16 min,在此条件下,总黄酮得率为3.02%。猕猴桃果渣总黄酮提取物对DPPH·、ABTS+·具有不同程度的清除作用,当总黄酮提取物浓度为30.16 μg/mL时,对DPPH·清除率为83.08%,当总黄酮提取物浓度为12.08 μg/mL时,对ABTS+·清除率为97.36%,表明猕猴桃果渣总黄酮具有较好的抗氧化活性。     

两种技术联用优化刺玫果多酚提取工艺及体外抗氧化活性研究

目的优化刺玫果多酚的提取工艺并探讨其体外抗氧化活性。方法采用超声波辅助酶解法,通过正交试验考察纤维素酶用量、乙醇体积分数、酶解温度、超声时间对刺玫果多酚提取得率的影响;通过测定刺玫果多酚对DPPH、ABTS自由基的清除能力及总抗氧化活性来评价刺玫果多酚的体外抗氧化活性。结果影响刺玫果多酚提取率的因素顺序是超声时间>纤维素酶用量>酶解温度>乙醇体积分数,提取刺玫果多酚最佳的工艺条件为纤维素酶用量1.5%,乙醇体积分数为55%,酶解温度为50℃,超声时间为25min。3次重复实验,刺玫果多酚提取率为183.15mg/g;刺玫果多酚质量浓度为8.67mg/mL时,对DPPH自由基的清除率为89.70%,对ABTS自由基的清除率为90.85%,总抗氧化活性能力强。结论刺玫果多酚具有较好的抗氧化活性,在天然的抗氧化活性剂与自由基清除剂方面可以进一步开发与应用。     

刺玫果水层萃取物活性成分及其体外活性研究

采用紫外分光光度法,测定刺玫果水层萃取物中总黄酮、多酚、原花青素及花青素的含量,探究刺玫果水层萃取物的多种体外活性及其DPPH自由基清除能力的稳定性。结果表明,刺玫果水层萃取物对DPPH自由基、亚硝酸盐清除率的IC₅₀分别为0.005、0.155 mg/mL,对α-葡萄糖苷酶、酪氨酸酶、脲酶抑制率的IC₅₀分别为0.130、5.955、1.568 mg/mL,对牛磺胆酸钠、胆酸钠结合率的IC₅₀分别为2.155、2.216 mg/mL;刺玫果水层萃取物对DPPH自由基的清除率在pH10和温度为100 ℃的条件下明显下降,紫外光照射条件下清除率略微降低,其他条件下较为稳定。研究结果表明,刺玫果水层萃取物具有众多生理活性,为刺玫果的开发利用提供了数据基础。     

HPLC法同时测定刺玫果提取物中的黄酮类成分及其体外活性测定

采用HPLC法同时测定刺玫果提取物中4种黄酮类成分的含量,并采用UV法测定刺玫果提取物、4种黄酮类单体和单体复方配伍的体外活性。结果表明,刺玫果提取物中金丝桃苷、芦丁、槲皮素及木犀草素的含量分别为607.98,450.63,187.32,12.68μg/g。刺玫果提取物、4种黄酮类成分及其复方配伍均具有一定的体外抗氧化活性,且刺玫果提取物的活性强于黄酮类成分的复方配伍,但二者均弱于VC;刺玫果提取物、4种黄酮类成分及其复方配伍均具有清除亚硝酸盐、阻断亚硝胺合成及抑制α-糖苷酶的活性,且刺玫果提取物的活性强于阿卡波糖、黄酮类成分的复方配伍。     

超声强化提取山黄皮果总黄酮及其抗氧化活性的研究

采用超声强化提取山黄皮果中的总黄酮,通过正交实验方法确定山黄皮果总黄酮优化的提取工艺,并测定其对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基（DPPH.）和羟自由基（.OH）的清除效果。结果发现,在本实验条件下,超声强化提取山黄皮果总黄酮的优化提取工艺条件为提取温度70℃、液料比40:1（v/m）、乙醇浓度60%（v/v）、提取时间60min;在优化条件下,山黄皮果总黄酮得率为3.82%±0.02%;山黄皮果总黄酮对DPPH.和.OH均有较强的清除能力。研究可为山黄皮果开发利用提供参考。      

超声强化提取山黄皮果总黄酮及其抗氧化活性的研究

采用超声强化提取山黄皮果中的总黄酮,通过正交实验方法确定山黄皮果总黄酮优化的提取工艺,并测定其对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH.)和羟自由基(.OH)的清除效果。结果发现,在本实验条件下,超声强化提取山黄皮果总黄酮的优化提取工艺条件为提取温度70℃、液料比40:1(v/m)、乙醇浓度60%(v/v)、提取时间60min;在优化条件下,山黄皮果总黄酮得率为3.82%±0.02%;山黄皮果总黄酮对DPPH.和.OH均有较强的清除能力。研究可为山黄皮果开发利用提供参考。     

刺玫果黄酮及皂苷成分的抗氧化和抗衰老活性研究

本研究选用DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率、铁离子还原力和总还原力四种体外检测体系,发现刺玫果黄酮和皂苷成分具有较强的抗氧化能力,且呈一定的剂量依赖效应。各浓度的样品对ABTS自由基清除作用效果均优于Vc。其中30%乙醇洗脱的刺玫果皂苷成分,在200 μg/mL时的清除率已达到98.78%;800 μg/mL时,50%乙醇洗脱的刺玫果皂苷的DPPH自由基清除率达到了91.88%,非常接近Vc;黄酮和皂苷成分对铁离子的还原力均高于1.50,接近Vc的1.72;30%乙醇洗脱的皂苷成分,总还原力为2.07接近Vc的2.28;通过衰老模型下的HaCaT细胞修复实验,发现刺玫果的黄酮和皂苷成分具有较好的抗衰老活性,可以修复受损伤的细胞形态,并提高其存活率,且呈现出一定的剂量依赖性。800 μg/mL时,四个样品（30%乙醇洗脱的黄酮、50%乙醇洗脱的黄酮、30%乙醇洗脱的皂苷、50%乙醇洗脱的皂苷）的修复率分别为为371.94%、394.39%、392.35%、399.83%,均接近Vc的404.25%。     

石榴皮总黄酮提取工艺及其体外抗氧化活性研究

建立提取石榴皮总黄酮的工艺条件,并评价其体外抗氧化活性,为有效利用石榴皮资源提供科学依据。采用正交试验方法,以提取物得率为考察指标,对石榴皮总黄酮提取方法的影响因素进行探讨,并对石榴皮总黄酮提取工艺进行优化。分别采用清除DPPH自由基能力及铁离子还原能力对石榴皮总黄酮的抗氧化活性进行测定。石榴皮总黄酮的回流提取最佳工艺为:乙醇体积分数70%、料液比1∶20(g/m L)、提取温度80℃、提取时间2 h,在此条件下,石榴皮总黄酮的提取率达到22.56%。影响石榴皮总黄酮提取效果的主次因素为:乙醇体积分数提取温度料液比提取时间。石榴皮总黄酮对DPPH自由基的最大清除率为80.59%,其IC_(50)值为31.59 mg/L。     

青刺果总黄酮超声波辅助提取及其抗氧化活性

以青刺果油粕为原料,利用超声波辅助提取总黄酮,通过单因素试验探究各因素对青刺果总黄酮得率的影响及正交试验确定最佳工艺参数。并以V_C和BHT为对照,对其还原性及羟自由基·OH和超氧阴离子自由基O~(2-)·的清除能力进行测试。结果表明:最佳提取工艺条件为乙醇浓度60%,提取温度60℃,提取时间35 min,料液比1∶30(g/mL),此条件下总黄酮的得率为5.28%。按其工艺条件制备青刺果黄酮具有较强的体外抗氧化活性,其抗氧化能力低于V_C,与BHT相当。     

苦荞麸皮总黄酮体外抗氧化活性及体内解酒护肝作用

目的:研究苦荞麸皮总黄酮(Total Flavonoids from Tartary Buckwheat Bran,TFTB)的体外抗氧化活性及体内解酒护肝作用。方法:在体外抗氧化活性实验中,观察TFTB对超氧阴离子自由基(O₂^-·)、DPPH·及NO₂^-离子的清除效果。在解酒护肝实验中,将50只小鼠随机分为模型组、阳性药对照组(150 mg/kg·bw)、TFTB低、中、高剂量组(100、200、300 mg/kg·bw)。各组小鼠一次性灌胃溶媒或药物30 min后,再一次性灌胃38% vol浓香型白酒(0.20 mL/10 g),测定小鼠醉酒率、醉酒耐受时间、醉睡时间,以及血清中谷草转氨酶(Aspartate Aminotransferase,AST)和肝脏中丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)水平。结果:TFTB对超氧阴离子自由基(O₂^-·)、DPPH·及NO^2-离子均有一定的清除作用,其半抑制浓度(IC₅₀)分别为1.36、0.02、1.79 mg/mL。与醉酒模型组对比,TFTB高剂量组醉酒耐受时间显著延长(P<0.05),TFTB各组醉睡时间极显著缩短(P<0.01);血清中AST含量显著降低(P<0.05),肝组织中SOD活性极显著提高(P<0.01),MDA含量显著降低(P<0.05)。结论:TFTB表现出较强的体外抗氧化活性,具有一定的防醉解酒作用,且在一定程度上能缓解小鼠的酒精性肝损伤。     

柿叶总黄酮提取工艺优化及其抗氧化活性

目的:优化柿子叶总黄酮的回流提取工艺,并评价其抗氧化活性。方法:以总黄酮提取量为指标,根据单因素实验的结果,通过响应面法与正交法分别得出最佳的回流提取总黄酮的条件,确定最优工艺条件,并在最优工艺条件下,以V_C作为对照,通过柿子叶总黄酮对DPPH自由基、羟自由基等的清除作用来评价其抗氧化活性。结果:正交试验设计的最佳提取工艺为:乙醇浓度为40%,提取温度50 ℃,料液比为1:50 (g/mL)和提取时间为120 min,总黄酮提取量为18.11 mg/g。响应面法的最佳提取工艺为:乙醇浓度为50%,提取温度50 ℃,料液比为1:60 (g/mL)和提取时间为120 min,总黄酮提取量为18.21 mg/g。响应面法总黄酮提取量比正交试验法提高了0.55%。但从经济角度考虑,低乙醇浓度和低料液比能节约成本和能耗,而两者提取率几乎没有差别。因此,正交试验更适合柿叶总黄酮提取工艺。同时在正交试验法最佳工艺条件下,柿叶总黄酮对DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子的IC₅₀分别为8.0、18.0、76.0 μg/mL,体外抗氧化试验结果表明,柿叶总黄酮对DPPH自由基、OH自由基均具有较强的清除能力,明显高于抗坏血酸,而对超氧阴离子自由基具有一定的清除能力,但清除能力低于同浓度的抗坏血酸。结论:正交试验提取柿叶总黄酮工艺合理可行,经济节约,可适用于工业生产。提取物具有较强的抗氧化活性。     

楮果总黄酮体外抗氧化及对CCl4致脑损伤小鼠的保护作用

目的:探讨楮果总黄酮体外抗氧化活性及对四氯化碳（carbon tetrachloride,CCl₄）致脑氧化损伤小鼠的保护作用。方法:通过体外模拟建立过氧化氢（hydrogen peroxide,H₂O₂）诱导红细胞溶血、肝、脑匀浆脂质过氧化、Fe2+-Vc诱导肝线粒体肿胀的生物膜实验体系和体外总抗氧化能力实验,研究楮果总黄酮的体外抗氧化活性。同时,建立CCl₄诱导小鼠脑组织氧化损伤模型,将60只昆明小鼠分为空白组、模型组、阳性对照组（水飞蓟素,0.2 g/kg）和楮果总黄酮各剂量（0.15、0.3、0.6 g/kg）组,灌胃给药,隔天腹腔注射CCl₄花生油溶液（体积比1:1）2 mL/kg造模,持续14 d。通过测定氧化应激参数丙二醛（malondialdehyde,MDA）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、谷胱甘肽（glutathione,GSH）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-PX）和过氧化氢酶（catalase,CAT）水平并观察小鼠脑组织海马区病理学切片,评价观察楮果总黄酮在体内的抗氧化能力。结果:体外实验中,楮果总黄酮对小鼠红细胞溶血、肝、脑组织匀浆脂质过氧化和肝线粒体肿胀的抑制作用随浓度的增加而增强,其总抗氧化能力也随浓度的增大而增强。在CCl₄脑损伤模型中,楮果总黄酮可显著提高（P<0.05）小鼠脑组织SOD、GSH-PX、CAT活性和GSH水平,显著降低（P<0.05）MDA水平,且呈剂量依赖性,同时对小鼠海马神经元的病理学变化有改善作用。结论:楮果总黄酮具有较强体外抗氧化活性,并对CCl₄致小鼠脑组织氧化损伤表现出较好的保护作用,具有良好的体内抗氧化能力。     

桃胶多糖体内外抗氧化作用的研究

为了研究桃胶多糖体内外抗氧化的作用,实验采用体外测定桃胶多糖对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)、2,2'-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐阳离子自由基(ABTS⁺·)、羟基自由基(·OH)和超氧阴离子(O₂^-·)等的清除率及对铁的还原能力,体内通过建立D-半乳糖小鼠氧化损伤模型,给予不同剂量(2、4、6 g/kg)桃胶多糖灌胃,测定血清及肝脏中丙二醛(MDA)含量及总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果显示,桃胶多糖体外对DPPH·、ABTS⁺·、·OH和O₂^-·的半数抑制浓度(IC₅₀)分别为6.95、0.56、1.10、0.11 mg/mL,且对铁还原力随着浓度(0.02~0.14 mg/mL)的升高而增大;在体内实验中,与模型组相比,连续服用不同剂量(2、4、6 g/kg)的桃胶多糖能够显著或极显著降低小鼠血清及肝脏中MDA含量、提高T-AOC能力、增强SOD及GSH-Px的活性(P<0.05或P<0.01),同时剂量间存在一定的量效关系。研究结果表明桃胶多糖具有良好的体内外抗氧化活性,可进一步申报成为新型的食品资源,应用于制药与食品工业中抗氧化、抗衰老、降血糖等保健产品的开发。     

超声辅助酶法提取无籽刺梨果渣中黄酮的工艺优化及其抗氧化活性

研究超声辅助酶法提取无籽刺梨果渣中黄酮的提取工艺和体外抗氧化活性.在单因素实验基础上,采用响应面法(Box-Behnken)优化无籽刺梨果渣中黄酮的提取工艺,并以VC为对照,对优化工艺条件下制备的黄酮研究其对1,1-二苯基-2-苦肼基自由基(DPPH·)、羟基自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O-2·)的清除率及还原...     

佛手黄酮提取工艺优化及其体外抗氧化活性

本研究通过乙醇回流法提取佛手黄酮,在单因素实验的基础上,以得率为指标,通过响应面优化分析,优化佛手总黄酮的提取工艺,并对其体外抗氧化活性进行评价。结果表明:佛手黄酮最佳提取条件为:乙醇浓度73%,提取温度80℃,提取时间90 min,料液比1:31 g/mL。在此条件下黄酮得率为1.34%;佛手黄酮对DPPH和ABTS自由基均有一定的清除作用,且呈明显的剂量效应关系,其中DPPH自由基清除率的IC₅₀为0.8 mg/mL,ABTS自由基清除率的IC₅₀为0.07 mg/mL。ORAC(总抗氧化能力)为20.18 μmol TE/g。以上结果表明,佛手黄酮是一种良好的天然抗氧化剂。     

越橘提取物中花青素分析及其体外抗氧化活性

研究越橘提取物中花青素的组成与含量及其体外抗氧化活性。实验采用高效液相色谱与质谱联用法对越橘提取物中的花青素组成进行鉴定,并以矢车菊素-3-O-葡萄糖苷为标准品测定了花青素的含量。以V_C为对照,测定越橘提取物对DPPH自由基、ABTS自由基、羟基自由基的清除能力和还原力。结果表明,越橘提取物中含有14种花青素,包括飞燕草素、矢车菊素、矮牵牛素、芍药素和锦葵素类;越橘提取物中花青素的总含量为408.74 μg/mg,其中,矢车菊素类花青素含量最高,为159.93 μg/mg,占总含量的39.12%;体外抗氧化实验表明,越橘提取物的DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力和羟基自由基清除能力的IC₅₀分别为26.16、13.07、1.91 mg/mL,还原力在浓度为250 μg/mL时达到0.617。本研究为越橘的开发利用提供一定理论与数据基础。     

刺果番荔枝叶多酚提取工艺优化及其体外抗氧化活性

本试验选用原料为刺果番荔枝叶,使用乙醇溶剂提取其中的多酚类物质,分别比较乙醇体积分数、提取温度、液料比、提取时间4个要素对多酚提取量的影响,并采用响应面法中的Box-Benhnken中心组合试验确定最优提取工艺。采用DPPH自由基、羟自由基(·OH)法研究刺果番荔枝叶多酚抗氧化活性,比较在最优工艺条件下提取的刺果番荔枝叶多酚与抗坏血酸的清除能力。结果表明:乙醇体积分数55%、液料比50:1 (mL/g)、提取时间96 min、提取温度60 ℃时,多酚提取量最大,达到(20.37±0.34) mg/g。刺果番荔枝叶多酚对DPPH自由基、羟自由基(·OH)的半抑制浓度(IC₅₀)分别为133.33、264.65 μg/mL,样品在试验范围内的最大清除率分别为(51.34%±2.68%)、(52.50%±2.29%)。综上表明,刺果番荔枝叶多酚具有较好的抗氧化能力。     

山刺玫果多糖抗疲劳及抗氧自由基水平机制研究

目的:研究不同剂量山刺玫果多糖对小鼠抗运动性疲劳作用及抗氧自由基水平的影响。方法:将150只雄性昆明小鼠分为3个实验组,每组小鼠随机分为空白对照组(给予等体积生理盐水)、人参水煎液阳性组(0.135 g·mL^-1)、山刺玫果多糖高剂量组(100 mg·kg^-1)、中剂量组(50 mg·kg^-1)、低剂量组(25 mg·kg^-1),按照0.1 mL·10 g^-1剂量灌胃给药,通过测定小鼠力竭游泳时间、转棒时间,量化的比较了血乳酸(BLA)、肝糖原(LG)、肌糖原(MG)、血尿素氮(BUN)等的含量及肝脏与血清中总抗氧能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物歧化酶(GSH-Px)的活性、丙二醛(MDA)含量,综合评价了山刺玫果多糖的抗疲劳以及抗氧自由基的能力。结果:与空白组比较,山刺玫果多糖中剂量组和高剂量组的转棒时间显著延长(P<0.05);各剂量组的小鼠负重游泳时间均显著增加(P<0.05);中剂量组、高剂量组小鼠肌肉中MG及肝脏中LG含量均显著增加(P<0.05);高剂量组小鼠血清中BUN含量显著降低(P<0.05);中剂量组、高剂量组小鼠游泳后BLA浓度均显著降低(P<0.05);中剂量组及高剂量组小鼠肝脏中SOD活力显著提高(P<0.05),并且高剂量组小鼠血清中SOD活力显著提高(P<0.05);高剂量组小鼠肝脏中MDA含量显著降低(P<0.05),中剂量和高剂量组小鼠血清中MDA含量显著降低(P<0.05);中剂量、高剂量可使肝脏中T-AOC能力显著增加(P<0.05)。小鼠血清T-AOC活力测定结果中,低剂量组与中剂量组小鼠血清中T-AOC能力均显著增加(P<0.05);小鼠肝脏及血清GSH-Px活力测定结果中,高剂量组小鼠肝脏与血清中的GSH-Px的活力显著提高(P<0.05)。结论:山刺玫果多糖具有一定的抗疲劳和抗氧自由基作用。     

响应面法优化结香花总黄酮提取工艺及其抗氧化活性

采用响应面法优化结香花中总黄酮的提取工艺,评价其抗氧化活性。在单因素实验的基础上,以乙醇浓度、液料比、提取温度、提取时间为优化因素,总黄酮得率为评价指标,采用Box-Behnken法优化结香花总黄酮的提取工艺;利用DPPH和ABTS自由基清除实验检测结香花总黄酮的抗氧化能力。结果表明,结香花总黄酮的最佳提取工艺为乙醇浓度80%,液料比35:1,提取温度83℃,提取时间85 min,总黄酮得率22.76 mg·g^-1。最佳工艺条件下得到的提取物具有一定的清除自由基能力,且与总黄酮含量呈明显的浓度依赖性,体外清除DPPH自由基和ABTS自由基的IC₅₀值分别为0.75和0.98 mg·mL^-1。