秀丽隐杆线虫模型在食品安全研究中的应用

食品安全涉及民生,一直以来都是研究的热点。在食品安全研究中,需要通过动物实验评价其毒理等性质,然而因伦理、成本和实验周期等问题而受到一定限制。因秀丽隐杆线虫结构简单、试验周期短以及信号通路高度保守等特性而为食品安全快速评价提供了一个新选择。本文详细介绍了秀丽隐杆线虫的同源性、免疫防御机制的保守性以及在食品安全方面的应用研究,包括各种外界危害因子的毒性机理和线虫自身的免疫防御的调控机制等,并分析了秀丽隐杆线虫的应用前景,为秀丽隐杆线虫在食品安全评价中的应用提供一定的参考。     

塑化剂邻苯二甲酸二丁酯对秀丽隐杆线虫的氧化损伤作用研究

为了探讨塑化剂邻苯二甲酸二丁酯（DBP）对秀丽隐杆线虫的氧化损伤作用,将L2期秀丽隐杆线虫暴露于不同浓度DBP（32.5、131、522 mg/L）48 h后,检测秀丽隐杆线虫体内总超氧化物歧化酶（T-SOD）和过氧化氢酶（CAT）活力、谷胱甘肽（GSH）及丙二醛（MDA）含量的影响。实验结果表明,随着DBP浓度升高,线虫体内MDA含量升高。与对照组相比,522 mg/L DBP处理组秀丽隐杆线虫体内T-SOD和CAT酶活力、GSH含量均极显著降低（p<0.01）。结论:DBP对秀丽隐杆线虫产生氧化损伤作用。      

红鳘鱼胶对秀丽隐杆线虫的体内抗衰老作用

该实验以秀丽隐杆线虫（Caenorhabditis elegans）为模型,以红鳘鱼胶为原料,探究红鳘鱼胶（HMYJ）、即食花胶（JSYJ）及鱼胶复配物（YJFP）对秀丽隐杆线虫的寿命、运动能力、应激能力和体内抗氧化活性的影响。结果表明,与空白对照组相比,HMYJ、JSYJ及YJFP分别使线虫的寿命延长了9.09%、9.09%、27.03%;JSYJ和YJFP能促进线虫运动;HMYJ、JSYJ及YJFP均能抵抗紫外应激和热应激的损伤。在紫外应激条件下,YJFP、JSYJ、HMYJ使线虫存活率分别提高了33.33%、22.22%、11.11%;而在热应激条件下,YJFP、JSYJ、HMYJ使线虫存活率都增大了11.11%。此外,HMYJ、JSYJ及YJFP干预后,线虫体内过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化酶（GSH-Px）的活性显著提高（P<0.05）,丙二醛（MDA）的含量显著降低（P<0.05）,其中JSYJ样品组降低了43.20%,HMYJ样品组降低了30.80%,YJFP样品组降低了22.80%。综上,HMYJ、JSYJ及YJFP可通过延长线虫寿命,提升其运动能力,提高线虫抗应激损伤的能力及体内抗氧化酶的活性来减缓线虫衰老,该研究也为鱼胶的开发利用提供了理论基础。     

葡萄籽原花青素对秀丽隐杆线虫抗衰老的影响

以秀丽隐杆线虫作为模型,研究了葡萄籽原花青素(grape seed procyanidins,GSP)对线虫寿命、生殖能力和运动能力的影响,进行了热应激和氧化应激实验,探讨了原花青素影响线虫衰老的方式。结果表明:当原花青素浓度分别为100、200、300μg/mL时,与对照组相比,采用200μg/mL原花青素喂养秀丽隐杆线虫,线虫的平均寿命延长了25.7%(p<0.01),最大寿命延长了24.0%(p<0.01),线虫的运动能力增强,平均每天每分钟爬过的峰数延长了13.2%(p<0.05),可以作为喂养秀丽隐杆线虫的最佳剂量。与对照组相比,采用200μg/mL原花青素饲喂线虫,线虫的产卵高峰期延迟,但对产卵量总数和孵化率无显著影响;热应激胁迫中,线虫的平均生存时间显著延长了27.3%(p<0.01);氧化应激胁迫中,线虫的平均生存时间延长了11.2%(p<0.05)。结论:饲喂葡萄籽原花青素可以改善线虫的平均寿命,且主要是通过提高线虫的压力应激能力来延缓秀丽隐杆线虫的衰老。      

湘西香醋对秀丽隐杆线虫体内抗氧化作用

本研究对秀丽隐杆线虫分别饲喂配制白醋、酿造白醋、发酵1 a香醋以及湘西原香醋,通过测定其体内活性氧（reactive oxygen species,ROS）含量,谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、过氧化氢酶（catalase,CAT）活力以及细胞凋亡相关蛋白表达情况,对湘西香醋体内抗氧化作用进行评价。结果表明：湘西香醋具有明显抗氧化效果,与对照组相比,发酵1 a香醋组与湘西原香醋组秀丽隐杆线虫体内ROS含量明显降低（P＜0.01）,分别为对照组的24.03%、39.44%。3 种抗氧化酶活力明显升高（P＜0.01）,湘西原香醋组秀丽隐杆线虫体内GSH-Px、SOD、CAT活力分别为对照组的2、1.3、3 倍。发酵1 a香醋组与湘西原香醋组秀丽隐杆线虫体内凋亡蛋白CED-3表达量明显降低,分别为对照组的53.42%、73.39%,抗凋亡蛋白CED-9表达量显著升高,分别约为对照组的7 倍和6 倍（P＜0.01）。湘西香醋在秀丽隐杆线虫体内具有较强抗氧化作用。     

丙醇二酸降低秀丽隐杆线虫体内脂肪含量的研究

目的：探索丙醇二酸对秀丽隐杆线虫体内脂肪的影响及调节机制。方法：在NGM培养基中加入不同浓度丙醇二酸饲养线虫,油红O和尼罗红染色法展示线虫体内脂肪颗粒大小、数量和相对脂肪含量,测定线虫身体摆动频率、吞咽频率、48 h存活率、身宽、体长等指标。QPCR检测fat-1至fat-7、sbp-1和nhr-49基因相对表达量,荧光显微镜观察FAT-6:GFP、FAT-7:GFP荧光强度的变化。结果：10、50、100μg/mL丙醇二酸处理对线虫脂滴大小无影响,脂肪颗粒数量降至对照组的0.69、0.53、0.54倍,相对脂肪含量降至0.87、0.81、0.80倍。此外,身体摆动频率、吞咽频率、48 h后存活率和体长无显著差异,身宽分别降至53.11、57.01、56.03μm。FAT-6:GFP、FAT-7:GFP荧光强度无明显变化,nhr-49、sbp-1、fat-1、fat-5、fat-6、fat-7基因转录水平无明显变化,fat-2、fat-3、fat-4基因转录水平分别降至0.69、0.77、0.24倍。结论：丙醇二酸可降低秀丽隐杆线虫体内脂肪,但不影响运动、吞咽等行为。降脂的调控不依赖于...     

发酵大麦提取物抑制秀丽隐杆线虫的脂肪沉积

本论文研究植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum dy-1)发酵大麦提取物(LFBE)及其主要活性组分对秀丽隐杆线虫脂肪沉积的影响。在建立秀丽线虫肥胖模型的基础上,设计不同浓度提取物及主要活性组分作用于肥胖模型,通过油红O染色法分析秀丽线虫体内脂肪含量变化。结果表明,与模型组相比,LFBE能显著降低秀丽线虫脂肪沉积量,其中浓度为1600μg/mL时,脂肪含量降低了26%,其模型组体脂含量趋于正常组,而未发酵大麦提取物(RBE)则未见此效果;从LFBE中分离出的酚类化合物,总蛋白质,总糖均具有不同程度的减少脂肪沉积的作用,浓度为16μg/mL的酚类化合物、480μg/mL的蛋白质、480μg/mL的总糖,分别能使秀丽线虫脂肪沉积量下降39%、26%及12%。总之,LFBE能显著抑制秀丽线虫体内脂肪的积累,且其中酚类化合物降低脂肪沉积的效果尤为显著。     

紫薯提取物对秀丽隐杆线虫寿命的影响

以秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans,C.elegans)作为模式生物研究紫薯提取物(purple sweet potato extract,PSPE)对寿命的影响及其可能的作用机制。将秀丽隐杆线虫分别培养在普通培养基及添加不同浓度(70、140、280μg/m L)PSPE的NGM培养基,研究PSPE对线虫寿命、体内脂褐素含量、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活力以及抗氧化相关基因表达水平的影响。结果显示,喂饲280μg/m L PSPE的线虫比空白组线虫平均寿命延长33%,脂褐素水平降低30%,体内SOD和CAT抗氧化酶活力分别提高了17.7%和47.5%。饲喂PSPE后线虫体内daf-16、ctl-1和sod-3基因m RNA水平均有不同程度的提高,其中280μg/m L PSPE组线虫体内daf-16基因转录水平提高23.2%,ctl-1基因转录水平提高37.4%,sod-3基因转录水平提高84.6%,而age-1基因转录水平呈下降的趋势,280μg/m L剂量组降低了26.4%。     

虾青素对秀丽隐杆线虫衰老的改善作用及机制研究

通过寿命实验、氧化应激、热应激实验研究虾青素（Astaxanthin）对秀丽隐杆线虫衰老和急性应激效应的改善作用并探究其作用机制。秀丽隐杆线虫分为对照组和虾青素处理组（0.8、1.2和1.6 mmol/L）,首先研究不同浓度虾青素对野生型线虫寿命的影响,通过平均与最大寿命确定作用的最佳剂量;选用最佳剂量的虾青素作用于野生型和突变株线虫,采用热应激和氧化应激实验研究其可能机制。结果表明:与对照组相比,采用1.2 mmol/L虾青素饲喂秀丽隐杆线虫,野生型线虫平均寿命延长了41.79%（p<0.01）,最大寿命延长了32.72%（p<0.01）。热应激及氧化应激实验中,采用1.2 mmol/L虾青素饲喂秀丽隐杆线虫,野生型线虫平均生存时间分别延长了22.54%和24.23%（p<0.01）。1.2 mmol/L虾青素可显著提高sir-2.1突变株线虫的存活时间,但对daf-2、daf-16和eat-2突变株线虫均无显著影响。综上所述,浓度为1.2 mmol/L的虾青素可显著延长野生型线虫的平均寿命和最大寿命,并显著延长其在氧化应激及热应激条件下的平均生存时间和最大生存时间。虾青素延长线虫寿命的功效可能是通过提高线虫的在热及氧化恶劣环境下的耐受能力而实现的,其作用机制可能与胰岛素信号通路及能量限制通路有关。      

以秀丽隐杆线虫作为人类疾病模型的研究进展

随着医学研究的快速发展,秀丽隐杆线虫 (Caenorhabditis elegans,简称C.elegans或秀丽线虫)作为一种模式生物越来越多地应用于人类疾病的研究中。本文综述该领域的研究进展。     

食品污染物苯并[a]芘致细胞损伤作用的研究

目的:对食品污染物苯并[a]芘所致细胞损伤作用进行研究。方法:用不同浓度的苯并[a]芘(1、5、10、50、100μmol/L)对肺腺癌细胞A549染毒24h,MTT法测定细胞存活率、单细胞琼脂糖凝胶电泳检测细胞DNA损伤,用溶剂二甲基亚砜处理细胞组作为未染毒细胞组。结果:苯并[a]芘染毒作用时,随染毒浓度的增加,A549细胞存活率呈下降趋势;A549细胞的DNA损伤程度也随染毒浓度增加而增加,与未染毒A549细胞相比,染毒A549细胞的Olive尾矩值均有明显增加(p<0.05)。结论:食品污染物苯并[a]芘致A549细胞明显的损伤作用。     

铁皮石斛多糖调控线虫寿命及抗氧化作用的研究

摘 要: 目的 基于秀丽隐杆线虫自然衰老模型, 探讨铁皮石斛多糖(Dendrobium candidum polysaccharides, DOP)抗衰老作用及其机制。方法 将秀丽隐杆线虫野生型N2随机分为对照组和铁皮石斛多糖组(低、中、高), 观察铁皮石斛多糖对线虫N2寿命、运动能力和咽泵能力的影响; 通过检测氧化应激、抗氧化酶试剂盒以及活性氧评估铁皮石斛多糖对N2线虫抗氧化能力的影响。基于skn-1基因缺陷型突变株(EU1)线虫及带有荧光标记的转基因线虫CL2166分析铁皮石斛多糖延长健康寿限的可能作用途径; 采用实时荧光定量聚合酶链反应技术测定铁皮石斛多糖作用下线虫抗氧化、胰岛素信号途径相关基因转录水平。结果 铁皮石斛多糖中剂量组(250 μg/mL)可显著延长线虫N2的寿命, 平均延寿率达12.73%, 可显著提高运动、咽泵、抗氧化应激能力; 显著提高过氧化氢酶(catalase, CAT)、超氧化物歧化酶(superoxide disumutase, SOD)活性和谷胱甘肽(glutathione, GSH)含量, 降低活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平和丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量; 铁皮石斛多糖干预处理对skn-1基因缺陷线虫的延寿效果缺失; 但能够增强CL2166线虫的荧光强度; 同时上调sod-5、sod-3、ctl-1、ctl-2、daf-16和skn-1基因的表达水平, 下调daf-2基因的表达水平。结论 铁皮石斛多糖可能通过激活Nrf2/SKN-1和DAF-16途径拮抗氧化应激从而延缓线虫衰老。     

α-乳白蛋白对秀丽隐杆线虫寿命、繁殖力与活力的影响

为了分析α-乳白蛋白的生物功能作用,使用不同浓度的,提取自纯牛奶的α-乳白蛋白喂养秀丽隐杆线虫并观察其寿命、繁殖力与活力等。结果显示：α-乳白蛋白添加量为45 mg/L时,与对照组相比,线虫寿命延长到26.33±0.72 d（增幅59.40%,P<0.05）;平均运动速率达到149±0.82次/min（增幅19.20%, P<0.05）;平均弯曲度达到了17±1.63次/20s（增幅54.54%, P<0.05）。但当α-乳白蛋白添加量为30 mg/L时,平均产卵数相比对照组增加到236.33±12.23个（增幅53.25%,P<0.05）,并且如果继续增加α-乳白蛋白含量差异也不再显著。结论证明了α-乳白蛋白喂养对线虫寿命延长、繁殖能力提升、运动能力保持（减缓衰退）等具有一定的作用。将会进一步为通过秀丽隐杆线虫模型开展α-乳白蛋白的功能及机理研究提供方法和数据支持。     

姜黄素对秀丽隐杆线虫降脂及抗氧化保护作用

本文研究姜黄素对秀丽隐杆线虫的降脂及抗氧化作用。将L1期秀丽隐杆线虫暴露于不同浓度姜黄素（12.5、25、50和100μmol/L）48 h后,以油红O染色线虫肠道脂肪,检测线虫体内甘油三酯的含量变化,同时测定线虫体内总超氧化物歧化酶活力（T-SOD）和丙二醛（MDA）含量的变化。结果表明,与二甲基亚砜（DMSO）对照组相比,姜黄素浓度在25μmol/L以上显著降低线虫肠道脂肪（p<0.05）,姜黄素浓度在50μmol/L以上降低线虫肠道脂肪作用极显著（p<0.01）,随着姜黄素浓度升高,线虫肠道脂肪含量逐渐降低。姜黄素浓度在25μmol/L以上极显著降低线虫体内甘油三酯和MDA含量（p<0.01）。黄素浓度在50μmol/L以上极显著提高线虫体内T-SOD酶活力（p<0.01）。综上所述,姜黄素浓度在25μmol/L以上对线虫具有降脂及抗氧化保护作用。      

虾青素对秀丽隐杆线虫衰老的影响及其机制的初步研究

本文研究了虾青素对秀丽隐杆线虫衰老和正常生理功能的影响及其相关作用机制。试验设立对照组和虾青素组(0.08 m M、0.16 m M、0.40 m M、0.80 m M),观察N2野生型线虫的寿命及相关生理指标(生殖能力、吞咽频率和移动力),评价不同浓度虾青素对线虫衰老过程的影响,明确虾青素作用的最佳剂量;选用最佳剂量的虾青素处理N2野生型、daf-16基因缺陷型和age-1基因缺陷型线虫,分析其寿命长短,探讨虾青素在胰岛素信号通路上延缓线虫衰老的作用机理。结果表明,虾青素可显著延长线虫的寿命(P0.05),0.16 m M虾青素的作用效果最佳,线虫的平均寿命达到26.03 d,显著延长了31.68%;虾青素对线虫的生殖能力和吞咽频率没有显著影响,能显著增强10 d和15 d线虫的移动力。0.16 m M虾青素可显著提高age-1缺陷型线虫的寿命,对daf-16缺陷型线虫的寿命无显著影响。因此,虾青素可显著延长线虫寿命,其作用机制与胰岛素信号通路上的daf-16基因密切相关。