棉籽蛋白多肽的制备及对DPPH自由基的清除作用

以棉籽蛋白为底物,采用木瓜蛋白酶为水解酶进行水解,以DPPH清除率来测定其水解产物的抗氧化能力.结果表明:木瓜蛋白酶最适作用条件:pH值为8.0,酶与底物浓度比[E]/[S]为10%,温度为55℃.不同水解度(DH)的棉籽蛋白多肽清除DPPH自由基的能力不同,当水解度为3.81%时,DPPH自由基的清除率最高可达70.7%.     

应用电子自旋共振(ESR)法测定猪血浆蛋白水解物抗氧化活性的研究

将猪血浆蛋白(4% 浓度,W/W)用碱性蛋白酶水解0.5～5h。分别用FRAP 法和电子自旋共振(ESR)法测定水解物的还原能力和自由基清除能力。结果显示,水解物的还原能力随着水解度(DH)的增大而显著增强(p ＜ 0.05),并且水解物对DPPH 自由基、羟基自由基以及超氧自由基的清除能力随着水解时间的延长和蛋白浓度的增大而显著增强(p ＜ 0.05)。尽管未水解的猪血浆蛋白也有一定的抗氧化活性,但远远低于水解物的抗氧化活性(p ＜ 0.05)。此外,猪血浆蛋白碱性蛋白酶水解物的抗氧化活性和自由基清除能力与水解度(DH)和蛋白浓度密切相关。由于猪血浆蛋白水解物具有一定的抗氧化活性和自由基清除能力,所以可以作为一种有效的抗氧化剂而应用于食品工业中。     

大豆分离蛋白的谷氨酰胺酶水解及其产物抗氧化性的研究

利用谷氨酰胺酶(EC3.2.1.5)对大豆分离蛋白进行限制性脱酰胺和水解处理,以SDS-PAGE及排阻色谱分析评价产物的蛋白质降解情况,并制备具有较低脱酰胺度的脱酰胺大豆分离蛋白产物。在大豆分离蛋白浓度5%(w/v)、谷氨酰胺酶添加量400U/kg酪蛋白、37℃的条件下分别反应12、24、36h,制得脱酰胺度分别为3.5%、5.6%、6.6%,水解度分别为0.9%、2.7%、3.5%的脱酰胺大豆分离蛋白。评价这3种脱酰胺大豆分离蛋白产物对Fe2+的螯合能力以及DPPH自由基的清除能力,结果表明,脱酰胺大豆分离蛋白产物对Fe2+的螯合能力以及对DPPH自由基的清除能力高于大豆分离蛋白,并随着脱酰胺度的增加而提高。     

限制性酶解燕麦蛋白功能特性和抗氧化活性

利用碱性蛋白酶限制性酶解燕麦蛋白,研究了不同水解度(DH)酶解物的溶解性、乳化性、乳化稳定性及对DPPH自由基清除率。试验结果表明,限制性酶解后燕麦蛋白的功能性质有了很大提高。水解初期,随着DH增加,溶解性增大,当DH为15%, pH 8时,溶解度达到79.78%,比原料蛋白在此pH下的溶解性提高了163.91%。乳化性随DH增加而降低,当DH为5%, pH 8时,乳化性达到0.852,比原料蛋白在此pH下的乳化性提高了56.04%。乳化稳定性的变化规律与乳化活性相反,当DH为20%, pH 8时,乳化稳定性达到73.14%,比原料蛋白在此pH下的乳化性提高了59.76%。酶解物对DPPH自由基清除率随着DH增加而变大, DH 5%、DH 10%、DH 15%和DH 20%酶解物对DPPH自由基清除率的IC_(50)分别为6.274, 6.145, 6.050和5.640 mg·mL~(-1),而且浓度与清除率呈现出明显的剂量效应。     

花椒籽仁抗氧化肽水解用酶的筛选研究

采用Protamex、Alcalase2.4L、Flavourzyme500MG、Neutrase0.5L、木瓜蛋白酶5种酶制剂水解花椒籽仁蛋白制备抗氧化肽,以水解度(DH)、多肽含量和水解产物的总抗氧化能力(TAC)、DPPH自由基清除能力、在亚油酸体系中的抗氧化性为指标对水解过程进行了分析,结果表明,Alcalase2.4L蛋白酶是制备花椒籽仁抗氧化肽的最适水解酶,其水解物的水解度(DH)为20.42%,多肽含量为21.83mg/mL,总抗氧化能力(TAC)和DPPH自由基清除能力分别为0.44mmol/L、65.47%,此外在亚油酸体系中具有一定的抗氧化性。     

水解度对麦胚清蛋白酶解物功能特性和抗氧化力影响

利用碱性蛋白酶限制性酶解麦胚清蛋白,研究不同水解度(degree of hydrolysis,DH)酶解物的溶解性、乳化性等功能特性,及对DPPH自由基和羟自由基清除等抗氧化能力。实验结果表明,水解后清蛋白酶解物的溶解性得到改善,DH越高溶解性越好。DH为8.34%时,等电点处的溶解度从未水解时的49.52%提高到74.09%。而乳化性和乳化稳定性随DH的增加而降低。当DH低于7.54%时,酶解物对DPPH自由基和对羟自由基的清除率随DH的提高而增强。浓度为100 mg/mL,DH为7.54%时的酶解物对DPPH自由基清除率达到59.68%。浓度为5 mg/mL时,DH为7.54%时的酶解物对羟自由基清除率达50.23%。      

水解度对麦胚清蛋白酶解物功能特性和抗氧化力影响

利用碱性蛋白酶限制性酶解麦胚清蛋白,研究不同水解度(degree of hydrolysis,DH)酶解物的溶解性、乳化性等功能特性,及对DPPH自由基和羟自由基清除等抗氧化能力。实验结果表明,水解后清蛋白酶解物的溶解性得到改善,DH越高溶解性越好。DH为8.34%时,等电点处的溶解度从未水解时的49.52%提高到74.09%。而乳化性和乳化稳定性随DH的增加而降低。当DH低于7.54%时,酶解物对DPPH自由基和对羟自由基的清除率随DH的提高而增强。浓度为100 mg/mL,DH为7.54%时的酶解物对DPPH自由基清除率达到59.68%。浓度为5 mg/mL时,DH为7.54%时的酶解物对羟自由基清除率达50.23%。     

酶底比对玉米蛋白水解物抗氧化活性的影响

为改善玉米蛋白的功能特性,开发其生理活性,采用复合蛋白酶(Protamex)和碱性蛋白酶(Alcalase)对高底物浓度1:10(m/v)玉米蛋白进行协同水解,研究酶底比对蛋白水解物的DPPH自由基清除率、·OH清除活性、Fe2+螯合能力、还原力、水解度(DH)和可溶性蛋白含量的影响。结果表明,在试验范围内,Protamex+Alcalase顺序协同水解玉米蛋白的最适酶底比为:2.0%+2.0%(w/w),此时玉米蛋白水解物的DPPH自由基清除率(82.01±0.62)%,·OH自由基的清除活性为(78.8±0.56)%,Fe2+螯合能力为(43.3±1.20)%,还原力为0.43±0.03,DH为(19.93±0.59)%,可溶性蛋白含量为(63.20±0.04)mg/m L;Alcalase+Protamex顺序协同水解玉米蛋白的最适酶底比为:0.5%+0.5%(w/w),此时玉米蛋白水解物的DPPH自由基清除率(84.99±0.20)%,·OH自由基的清除活性为(89.9±1.63)%,Fe2+螯合能力为(40.95±0.43)%,还原力为0.454±0.01,DH为(9.43±0.70)%,可溶性蛋白含量为(40.54±0.01)mg/m L。因此,酶底比显著影响了玉米蛋白水解物的抗氧化活性。     

纳豆发酵和体外模拟消化中活性物质含量及抗氧化活性的变化研究

本文研究了利用纳豆芽孢杆菌发酵纳豆过程中活性物质-总酚和异黄酮含量的变化,通过体外模拟消化实验,测定消化过程中总酚、异黄酮含量及抗氧化活性的变化规律。研究发现,由于发酵细菌及高温的作用,从干燥大豆到后熟24 h大豆,总酚含量提高了60.56%,异黄酮含量降低了63.30%。不同发酵阶段纳豆经过体外模拟消化处理,总酚的释放率为70.64%,异黄酮的残余率为21.79%。抗氧化活性测定采用了DPPH、ABTS和ORAC测定法。不同发酵阶段的纳豆经过体外模拟消化后,其DPPH自由基清除能力下降,ABTS和ORAC值有所提高;模拟胃消化阶段,后熟24 h大豆清除ABST自由基能力和ORAC值分别是干燥大豆的1.80和2.22倍;模拟肠消化阶段,后熟24 h大豆清除ABST自由基能力和ORAC值分别是干燥大豆的1.70和1.41倍。总体上来讲,经过发酵的纳豆抗氧化活性得到加强;在模拟消化过程中,胃消化阶段的纳豆具有更高的抗氧化活性。     

热处理对过氧自由基氧化米糠蛋白体外胰蛋白酶消化性质及消化产物抗氧化性的影响

选用不同浓度的2,2’-盐酸脒基丙烷(2,2’-azobis (2-amidinopropane) dihydrochloride,AAPH)在有氧条件下热降解生成的过氧自由基氧化米糠蛋白,再通过95℃水浴处理氧化米糠蛋白,研究热处理对过氧自由基氧化米糠蛋白体外胰蛋白酶消化性质及消化产物抗氧化性的影响。结果表明:随着AAPH浓度的增加,过氧自由基氧化米糠蛋白体外胰蛋白酶消化率、初始消化速率、消化产物分子质量分布在500～1 500 u的肽含量、消化产物清除ABTS~+·、·OH、O~-_2·能力和还原能力均先上升后下降,消化产物清除DPPH·能力和金属螯合能力先不变后下降;而热处理后,氧化米糠蛋白体外胰蛋白酶消化产物金属螯合能力先上升后下降,ABTS~+·清除能力和还原能力先不变后下降。同未热处理相比,热处理显著提高了相同氧化程度下米糠蛋白体外胰蛋白酶消化率、初始消化速率以及消化产物抗氧化性。表明过氧自由基氧化会改变米糠蛋白体外胰蛋白酶的消化性质,而热处理可以改善相同氧化程度下米糠蛋白体外胰蛋白酶的消化率和消化产物的抗氧化性。     

酶解法制备黄花菜汁工艺优化及抗氧化性分析

以黄花菜为原料,通过酶解工艺的优化,探究酶解前后所得黄花菜汁的抗氧化活性。本研究采用不同比例的纤维素酶和果胶酶进行酶解实验,以酶解黄花菜的出汁率为指标,通过响应面优化法确定最佳的黄花菜酶解工艺,并且利用高效液相色谱-三重四级杆质谱联用仪(High Performance Liquid Chromatography-triple Quadrupole Mass Spectrometry,HPLC-MS/MS)对样品中的多酚进行定性和定量分析,同时对样品的体外抗氧化活性进行测定。结果表明：按每100 g黄花菜汁(黄花菜与水料液比为1:1)计,酶解温度为50℃,酶解时间2 h,复合酶的添加总量为0.4%,其中纤维素酶:果胶酶=1:3时酶解效果较优,出汁率为78.54%。总酚含量提升1.3倍,DPPH自由基清除率提高了9.02%,ABTS+自由基清除率提高了6.15%,且总酚与DPPH自由基清除能力相关系数为0.929,与ABTS⁺自由基清除能力相关系数为0.968,说明黄花菜汁的体外抗氧化能力和总酚含量的变化密切相关。     

罗非鱼皮明胶酶解物及其模拟消化产物的抗氧化活性

以罗非鱼皮为原料提取罗非鱼皮明胶,选用风味蛋白酶和胰蛋白酶制备罗非鱼皮明胶酶解物,采用ABTS自由基、DPPH自由基、羟基自由基及亚油酸过氧化体系,初步评价罗非鱼皮明胶酶解物的抗氧化活性,再通过模拟体外胃肠道消化实验,结合分子质量分布测定,进一步考察罗非鱼皮明胶酶解物的抗氧化活性。结果显示,在酶解过程中,风味蛋白酶及胰蛋白酶酶解的水解度逐渐升高,在3 h时达到最高,分别达到5.8%和25.36%。在酶解60 min时其TCA可溶性肽得率最高,风味蛋白酶、胰蛋白酶酶解物分别达56.82%和54.44%。通过比较半抑制浓度（IC₅0）,确定了酶解60 min时风味蛋白酶酶解物的清除DPPH自由基及抑制亚油酸过氧化能力较胰蛋白酶酶解物强。模拟体外胃肠道消化后,酶解物羟基自由基清除活性均显著提高（p<0.05）,亚油酸脂质过氧化活性明显降低,消化前后样品分子量分布范围均主要集中于3000⁵000 Da,消化后风味蛋白酶及胰蛋白酶酶解物3000⁵000 Da组分的含量分别提高了45%及13%。以上研究结果表明,罗非鱼皮明胶酶解后制备的明胶水解物具有一定的抗氧化能力,具有潜在的开发价值。      

Antioxidant activities and functional properties of tea seed protein hydrolysates (Camellia oleifera Abel.) influenced by the degree of enzymatic hydrolysis

Antioxidant activities and functional properties of tea seed protein hydrolysates (TSPH) prepared using alcalase with different (10, 20, 30 and 40%) values of the degree of hydrolysis (DH) were investigated. The effect of hydrolysis time on antioxidant activity was also investigated. As the hydrolysis time was extended, the DPPH radical scavenging activity increased and finally reached a plateau, the copper chelating capacity decreased, and the superoxide radical scavenging and iron chelating activities increased initially, then subsequently slowed. The solubility, foaming properties, and emulsification properties of TSPH were affected by pH and DH. As the DH value increased, the DPPH radical scavenging activity and the reducing power increased and the copper chelating capacity decreased. TSPH at 20 and 30% DH values exhibited higher superoxide radical scavenging and stronger iron chelating activities respectively, than TSPH at other DH values. The DH value of TSPH affected the antioxidant activity and functional properties.     

胞壁蛋白酶（CEP）酶解对酪蛋白结构及功能特性的影响

通过纳米粒度分析、傅立叶红外光谱（FTIR）、乳化性、乳化稳定性、蛋白溶解性、抗氧化性及ACE抑制率的测定,分析探讨酪蛋白及其不同水解度（DH 2.4%、4.5%、7.1%、8.3%）的嗜酸乳杆菌胞壁蛋白酶（CEP）酶解产物的结构及功能特性。FTIR分析表明CEP酶解改变了酪蛋白各种构象所占的比例,酪蛋白二级结构发生了不同程度的变化;纳米粒度分析表明酪蛋白颗粒大小随水解的加深先减小后增大,其水解物颗粒在DH 4.5%时最小,乳化稳定性最大;酪蛋白的乳化性随水解的加深先增大后减小,DH 7.1%时增至最大,与其溶解性的变化趋势一致;此外酪蛋白的酶解物具有一定的ACE抑制活性及抗氧化性,且DPPH清除能力在一定范围内随水解度及浓度的增大而增大,当DH为8.3%,浓度为5mg/mL时,DPPH清除能力增大至35.00%。因此CEP酶解可有效改善酪蛋白的结构及功能特性,为乳源性功能多肽的开发提供理论依据。     

水解度对螺旋藻肽乳化性、起泡性及抗氧化性的影响

研究了水解度对螺旋藻肽乳化性、起泡性以及抗氧化能力的影响。结果表明,随着水解时间的延长,螺旋藻肽的水解度逐渐增大。水解过程中,螺旋藻肽的起泡性、DPPH自由基清除能力以及还原力均随着水解度的增加先增大后减小,羟基自由基清除能力随着水解的进行先减小后增大,达到最大后再减小。而泡沫稳定性、乳化性、乳化稳定性则随着水解度的增大逐渐减小。这说明,在螺旋藻肽的生产过程中,并不是水解度越大越好,而应根据对产品物化性质与抗氧化能力的要求,确认最佳水解度。      

超高压对乳清浓缩蛋白结构的影响及其体外模拟消化产物的功能性分析

本研究旨在对超高压处理作用于乳清浓缩蛋白后结构的影响进行验证,通过体外模拟消化探究其进入人体消化过程后功能性的变化.通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、圆二色谱、荧光光谱及紫外吸收光谱分析超高压对乳清浓缩蛋白结构的影响,再通过SDS-PAGE、粒度及Zeta电位分析其体外模拟消化后乳清浓缩蛋白分子变化,...     

鳄鱼骨双酶酶解产物的功能特性及其抗氧化活性

为了全面了解酶解时间、蛋白酶种类对鳄鱼骨蛋白酶解产物抗氧化性和功能特性的影响,采用木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶及双酶(先加入木瓜蛋白酶,后加入碱性蛋白酶)在各自最适条件下对其进行酶解,制备了不同水解度的酶解产物,并对其功能特性及抗氧化性进行分析。结果表明:随着酶解时间的延长,酶解产物的亚铁离子螯合能力和还原力均有所增强。在酶解0.25 h时,酶解产物具有较强的清除DPPH自由基的能力,随着酶解时间的延长,木瓜蛋白酶酶解产物清除DPPH自由基的能力不断下降,碱性蛋白酶先下降后上升,而双酶酶解产物则没有显著变化。在2～4 h内相同酶解时间下,与单酶酶解产物相比,双酶酶解产物具有较强的亚铁离子螯合能力、还原力及清除DPPH自由基的能力(P<0.05)。在酶解产物的功能性质方面,随着酶解时间的延长,双酶酶解产物较单一酶酶解产物具有更好的溶解性、热稳定性及乳化性。结果表明,双酶酶解较单一酶酶解得到的产物具有较强的抗氧化性。     

Antioxidant activities and functional properties of grass carp (Ctenopharyngodon idellus) protein hydrolysates

BACKGROUND: Grass carp, with an annual production exceeding 4 × 10⁶ t in China in 2009, has not been developed into a high‐value product. In this study the antioxidant activities and functional properties of grass carp protein hydrolysates prepared with Alcalase 2.4L (HA) and papain (HP) were investigated. The hydrolysate with strongest radical‐scavenging activity and reducing power was assessed further for changes in its antioxidant activity during simulated gastrointestinal digestion. RESULTS: As the degree of hydrolysis (DH) increased, the metal‐chelating activity of both HA and HP increased while their reducing power and 1,1‐diphenyl‐2‐picrylhydrazyl radical (DPPH^?)‐scavenging activity decreased (P < 0.05). At the same DH, HP possessed higher DPPH^?‐scavenging activity and reducing power than HA (P < 0.05). The metal‐chelating activity of HP with 10% DH was significantly increased after in vitro gastrointestinal metabolism (P < 0.05). Regarding their functional properties, all hydrolysates were more than 81% soluble over a wide range of pH (3–8). At the same DH, HP showed higher emulsion activity index but lower solubility and foaming capacity than HA. CONCLUSION: Grass carp protein hydrolysates showed high solubility over a wide pH range and could be used as natural antioxidants in food systems. Copyright © 2011 Society of Chemical Industry     

体外模拟消化对大米谷蛋白结构及水解产物生物活性的影响

通过体外模拟消化,研究不同消化时间下谷蛋白结构与抗氧化和血管紧张素转换酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)抑制活性的关系.利用内源荧光光谱和傅里叶变换红光谱测定谷蛋白水解过程结构变化.通过测定水解产物抗氧化能力和ACE抑制率表征酶解产物的活性,利用四极杆串联飞行时间质谱鉴定具有抗氧化...     

Combined effects of high-pressure and enzymatic treatments on the hydrolysis of chickpea protein isolates and antioxidant activity of the hydrolysates

A chickpea protein isolate (CPI) was pretreated before hydrolysis under a pressure that varied between 100 and 600MPa. The hydrolysis rate increased significantly with pressure above 300MPa. At 40min, the DH of the control was 15.3%, while the DH of the CPI treated at 300MPa was 18.5%, which reached 23.74% post treatment at 400MPa. The pretreatment of CPI above 300MPa enhanced the superoxide anion capturing rate of enzymatic hydrolysis. Pretreatment at 400MPa significantly reduced the hydrolysis time with the release of antioxidant peptides. While hydrolysis by Alcalase during treatment at high pressure (100-300MPa) significantly increased the degree of hydrolysis (DH), its maximum value peaked after hydrolysis at 200MPa for 30min. In addition, hydrolysates obtained at high pressure (100-300MPa) had a higher superoxide anion capturing rate. High-pressure treatment at 200MPa for 20min resulted in products with high antioxidative activity. The molecular-weight (MW) determination of the enzymatic hydrolysates indicated that hydrolysis at high pressure could significantly increase the amount of low-molecular-weight peptides.