基质异质性对硬毛粗盖孔菌固态发酵产漆酶的影响

固态基质是固态发酵的核心,为了探究其异质性对固态发酵效率的影响,以不同部位玉米秸秆（鞘、茎、髓、叶）为固态基质,以硬毛粗盖孔菌（Funalia trogii）发酵生产漆酶,测定固态基质化学组成与物理性质,考察固态基质理化性质与漆酶产量关系,进一步从细胞壁角度探讨固态基质与微生物相互作用。结果表明,以髓为固态基质时,菌丝茂密且漆酶产量最高（110.70 U/g）,鞘为固态基质时产量最低（26.40 U/g）;髓具有最高的还原糖得率（239.44 mg/g）和较低的灰分含量,而鞘具有最低的还原糖得率（154.29 mg/g）和最高的半纤维素含量（36.65%）;漆酶产量与木质素及还原糖得率呈显著正相关（P＜0.05）,与半纤维素及灰分呈显著负相关（P＜0.05）。研究显示,固态基质异质性是影响固态发酵效率的重要因素。     

硬毛粗盖孔菌预处理对玉米秸秆酶水解及组分变化的影响

以硬毛粗盖孔菌（Funalia trogii）为研究对象,比较其在不同预处理时间的产酶特征、预处理前后玉米秸秆酶解产糖量及其组分变化。结果表明,硬毛粗盖孔菌对木质素的降解以漆酶和锰过氧化物酶的协同作用为主导,漆酶和锰过氧化物酶活最高分别为341 IU/g和33 IU/g。经生物预处理14 d后的玉米秸秆酶解产糖量可达到350.74 mg/g秸秆,较原料提升184%。玉米秸秆组分的变化与其酶解增效密切相关,F. trogii预处理14 d后木质素和半纤维素含量分别降低了33.99%和36.61%,而纤维素仅降解8.77%,木质素和半纤维素的选择性降解,可显著降低玉米秸秆酶解抗性屏障,提升其酶解糖化效率。硬毛粗盖孔菌预处理玉米秸秆可实现木质纤维素的高效转化,缩短预处理时间,降低处理成本。     

毛云芝菌产漆酶液体培养条件的优化

探索了不同的培养条件下毛云芝菌产漆酶的情况,发现该菌漆酶属于组成型漆酶,其酶活力高,产酶周期短,酶的合成与菌体生长没有明显相关性;以漆酶的酶活为指标,采用正交试验设计方法对毛云芝菌液体培养的摇瓶生长条件进行了优化研究.结果表明:优化培养基的组成(质量分数)为麸皮3%,蛋白胨0.2%,牛肉膏0.3%,MgSO4·7H2O 0.05%, KH2PO4 0.3%; TE 6%(体积分数),VB1 20 mg/L;自来水,pH自然.该营养条件下的酶活为1 668 U/mL,约是优化前培养基酶活的16倍,为工业化生产提供了一定的理论依据.     

产漆酶培养基条件的优化

对白腐真菌发酵产漆酶的培养基组成进行优化试验。在单因素试验结果的基础上,进行三因素三水平的响应面分析,通过对试验数据回归分析,获得了二次多元回归方程,预测麸皮、酒石酸铵和吐温-80的优化值,并预测漆酶最高酶活。结果表明:当麸皮、酒石酸铵和吐温-80的优化值分别为11.04,0.10g/L和3.24 mL/L时,漆酶最高酶活可达34.25U/mL,验证实验漆酶实际酶活为36.67U/mL,与预测值十分接近,优化后酶活与比优化前提高了62.98%。     

黄多孔菌产漆酶最佳培养条件的优化

采用Plackett-Burman设计法,对影响黄多孔菌生产漆酶的9个因素进行了筛选。结果表明,影响该菌产生漆酶的主要营养因素为碳氮比、铜离子浓度和pH。在此基础上,采用响应面法对其中3个显著因子的最佳水平范围进行研究,利用统计软件Design-Expert进行二次回归分析得知, 碳氮比、铜离子浓度和pH分别为4:1、0.1 mmol/L和5.5时,漆酶产量从178 U/mL提高到446 U/mL。     

竹黄菌液态发酵产漆酶培养条件的优化

分离筛选到一株产漆酶的竹黄菌,采用单因子相互比较法,研究了该菌株的最适发酵产酶条件。确定了最适的碳源为2 g/dL可溶性淀粉、最适的氮源为0.8 g/dL的酵母膏,以及最适铜离子浓度为2.4 mmol/L,在自然pH 5.0,装液量为50 mL,30℃、200 r/min摇瓶振荡培养64 h下,产漆酶酶活水平达120 000 U/L,比优化前提高近17倍。该竹黄菌株与已报道的白腐真菌相比,具有发酵周期短且产漆酶酶活较高的优点。     

灵芝漆酶活性的测定及其产漆酶条件的优化

从测定漆酶活性的几种常用方法中,筛选出一种快速、稳定的灵芝漆酶测定方法:在基础培养基中加入0.04%愈创木酚,通过测定显色圈直径检测漆酶的活性;同时利用单因素分析和正交试验确定了灵芝的最适产漆酶条件:麦芽糖3%、酵母浸粉0.25%、pH值6.0、Cu2 0.5mmol/L,培养温度25℃.实验结果为灵芝的菌种选育及其漆酶的工业化生产提供了一定的参考.     

毛柄金钱菌产漆酶固体发酵条件及其酶液对稻草木素降解的研究

本论文以农作物稻草为主要原料，采用微生物固体发酵方式，考察了碳源、氮源、诱导剂对毛柄金钱菌合成潦酶的影响，并对提高培养物中的蛋白含量及毛柄金钱菌对稻草中木紊的降解进行了探讨。     

白腐菌预处理木屑产漆酶条件的优化及其糖化评价

对白腐菌固态发酵预处理木屑的工艺条件进行了优化,并对经过白腐菌预处理木屑的糖化效果进行了评价。结果表明,白腐菌固态发酵产漆酶的工艺条件为:1 kg木屑中需添加麦麸120 g,氮酒石酸铵60 g,料水比0.28,微量元素的用量为7 mL/L,培养时间为3 d,白腐菌产漆酶的酶活最高。在最佳工艺条件下,经白腐菌生物预处理的木屑的糖化率可以提高1倍,生物预处理木屑具有一定的应用前景。     

白腐菌Trametes versicolor产漆酶发酵条件的优化

对白腐菌Trametesversicolor产漆酶的发酵条件进行了研究,结果表明摇瓶培养产漆酶的最佳培养基组成为:可溶性淀粉2g/L,氯化铵1.2g/L,KH2PO42g/L,MgSO4·7H2O0.5g/L,CaCl2·2H2O0.1g/L,VB10.001g/L,Tween802g/L,微量元素混合液7mL/L,愈创木酚0.015mmol/L,CuSO4·5H2O60μmol/L,pH3.5;最佳发酵条件为:在250mL三角瓶装50mL培养基,接种量(Φ8mm)2块,25℃,150r/min振荡培养10d时,漆酶活力达到862U/L,约是优化前的4倍。     

降解木素白腐菌产漆酶的研究进展

综述了近年来国内外对于白腐菌产漆酶的研究进展,对液体和固体发酵提高漆酶产量的技术和方法进行了讨论和评述,并对今后的研究工作提出了展望。     

漆酶高产菌的筛选及产酶优化

采用愈创木酚初筛平板从干枯的木头中筛选得到一株产漆酶活力较高的菌株SYBC-L3(以下简称L3),在含有愈创木酚的PDA平板上生长时菌落周边出现明显的铁红色变色圈.通过对L3发酵产漆酶的单因素试验及L9(34)正交试验,确定了最适发酵条件,优化后的培养基为:麦芽糖 12 g/L, 豆粕 6 g/L,CuSO4 0.5 g/L,KH2PO4 1 g/L,Na2HPO4 0.2 g/L,MgSO4 ·7H2O 0.5 g/L,MnSO4 0.034 g/L, 愈创木酚0.8 mmol/L,吐温-80 0.5g/L;优化后的培养条件为:接种量10%(V/V),装液量80 mL/250 mL, 起始pH 4,转速200 r/min,温度30 ℃,以DMP为底物在第8天时酶活可达60 130 U/L,比优化前提高42倍.     

一株海藻酸降解菌产酶条件的优化

褐藻酸分解菌是褐藻酸裂解酶的重要来源,具有明确的应用价值。通过以海藻酸钠为唯一碳源培养基筛选的方法,从采集自 长岛的腐烂海带组织中分离出1株高产褐藻酸裂解酶的新菌株B2,并对其进行了鉴定及培养条件优化。 通过综合形态学鉴定和分子 生物学鉴定确定该菌株属于副球属（Paracoccus）。 利用响应面试验设计优化了该菌株产酶条件,得到最佳发酵产酶条件为发酵温度 25 ℃,转速150 r/min,pH值为7.0,接种量8%,在此优化条件下,该菌株产褐藻酸裂解酶的酶活力为43.6 U/mol。     

纤维素降解芽孢菌的筛选及产酶条件优化

为筛选高效的纤维素降解芽孢菌,利用刚果红平板染色法初筛,纤维素酶活性（以滤纸酶活表示）为评价指标进行复筛,从腐木中分离筛选出2株高产纤维素酶菌株K1、K2;结合形态学观察、生理生化特征和16S rDNA基因序列同源性分析,分别鉴定为贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis）、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。对培养条件进行单因素优化和正交试验优化,初步确定菌株K1最佳产酶条件为培养时间3 d,培养温度34 ℃、初始pH值7.0、接种量5%、装液量40%,在此优化条件下滤纸酶活为98.4 U/mL,是优化前的2.1倍。菌株K2最佳产酶条件为培养时间2 d,培养温度34 ℃、初始pH值7.0、接种量6%、装液量为30%,在此优化条件下,滤纸酶活为86.7 U/mL,是优化前的1.8倍。     

纤维素降解菌株的筛选及其产酶条件优化

为了寻求快速有效降解沼气发酵有机质中的高分子化合物,本实验从腐殖质土壤中筛选到一株高效降解纤维素菌株,在以羧甲基纤维素钠为唯一碳源的液体培养基中培养,所产生的纤维素酶对玉米芯和滤纸均表现出较强降解能力。其次做了对菌株培养条件优化的实验,结果表明,菌株的最佳降解纤维素条件为反应温度30℃、发酵液接种量为1%、0.75%羧甲基纤维素钠为碳源、1.5%胰蛋白胨为氮源,优化菌株培养条件后,纤维素酶活力增加了2.8倍。     

鱼露产蛋白酶菌产酶条件优化

从鱼露中筛选出高产蛋白菌株,研究不同发酵条件对产蛋白酶菌所产蛋白酶的酶活力的影响,以得到蛋白酶菌产酶的最佳发酵工艺条件。采用酪蛋白溶解圈法,从鱼露中筛选出活性较大的蛋白酶菌,以酶活力为指标,通过单因素试验和正交试验,研究该菌产蛋白酶的最佳发酵工艺。研究结果表明,鱼露中产蛋白酶菌最佳产酶条件为:碳源为葡萄糖,碳源添加量为1%,氮源为牛肉膏,温度为37℃,p H值为8,蛋白酶的酶活为(36.6±2.1)U/m L。     

响应面法优化毛云芝菌产漆酶的培养条件研究

研究了影响毛云芝菌产漆酶的培养条件,通过单因素实验选取试验各因素的水平,根据Box-Benhnken试验设计原理,进行响应面回归分析,以漆酶酶活为响应值,确定了影响漆酶产量的各因素的水平,结合验证实验结果得到其最佳的培养条件为接种量8.2 %、装液量30.8%、摇床转速141 r/min.     

白腐菌Trametes hirsuta BYBF产漆酶发酵条件的优化

本实验对白腐菌Trametes hirsuta BYBF产漆酶的发酵条件进行了研究。结果表明,Trametes hirsuta BYBF的最佳培养条件为:培养基初始pH为6.0,培养温度为28℃,碳源为蔗糖,氮源为硝酸铵和酒石酸铵的组合,三角瓶装液量为200/500mL,振荡培养14天左右,酶活达到最大值,为1.37IU/mL。     

硬毛盖孔菌胞外多糖组分分析及其在卷烟烟气中的转移率

为开发新型天然菌物香料,利用Sepharose CL-6B凝胶柱对发酵产硬毛盖孔菌胞外多糖(EPS)进行了分离纯化,采用红外光谱(IR)分析了2种多糖组分的结构,并测定了其在卷烟烟气中的转移率。结果表明:2种硬毛盖孔菌EPS组分①和②在810,880和910 cm-1处有吸收峰,说明多糖①和②含有甘露糖结构,且具有α和β糖苷键;当EPS添加量在0.02%～0.10%之间时,其在卷烟烟气中的转移率从1.58%增至3.39%。